重组人干扰素α-2b的梯度凝胶色谱柱复性和同步纯化

利用盐酸胍浓度梯度凝胶色谱柱复性法从大肠杆菌表达的重组人干扰素α-2b（rhIFNα-2b）包涵体的溶解液中复性rhIFNα-2b。通过考察线性盐酸胍梯度下盐酸胍终浓度、梯度长度、流速、复性液中还原型／氧化型谷胱甘肽比例等因素，探索了盐酸胍梯度凝胶色谱柱复性rhIFNα-2b的优化条件。结果表明，复性后rhIFNα-2b的蛋白收率是透析复性法的4．2倍，活性回收率为68．7％，比活力1.77×10^8IU／mg，纯度高于90％。     

聚乙二醇修饰重组人干扰素α-2b修饰产物的初步分析研究

目的 对聚乙二醇(PEG)修饰重组人干扰素α-2b(rhIFNa-2b)的修饰产物进行了初步分析研究。方法以单甲氧基聚乙二醇甲酸琥珀酰亚胺酯对rhIFNα-2b进行修饰,修饰产物以Superdex 75 Highload制备型凝胶色谱柱进行分离、纯化,SDS-PAGE鉴定各组分,采用Mariner电喷雾飞行时间质谱对单修饰IFNα-2b(Inono-PEG-IFNα-2b)进行分析。结果 分别获得了纯化的mono-PEG-IFNα-2b和多修饰IFNα-2b(poly-PEG-IFNα-2b)。ESI-TOF质谱也证明mono-PEG-IFNα-2b分子量比rhIFNα-2b多5 000左右;紫外光谱分析表明,PEG修饰产物的结构没有发生改变。结论获得了纯化的PEG修饰产物。     

聚乙二醇干扰素α2b质控方法探讨

目的：采用分子量为30KD的聚乙二醇（PEG）对干扰素α2b进行N端定点修饰获得聚乙二醇干扰素α2b（PEG—IFNα2b）．并建立PEG—IFNα2b的质控方法。方法：采用Wish细胞-VSV病毒系统,以细胞病变抑制法（CPE）测定PEG—IFNα2b的生物学活性,Lowry法测定蛋白含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子质量,高效液相凝胶过滤色谱法测定纯度,胰蛋白酶消化法测定肽图,紫外分光光度法测定紫外吸收光谱,地高辛（DIG）标记的核酸探针法测定外源性DNA残留量,ELISA法测定宿主茵菌体蛋白残留量。结果：聚乙二醇干扰素α2b的比活性为1．39×10^7IU·mg^-1蛋白,蛋白含量为420μg·ml,相对分子质量约为65000道尔顿,纯度超过99．0％,紫外最大吸收峰约在278nm波长处,外源性DNA残留量小于100pg／剂量,宿主菌菌体蛋白残留量为0．01027％。结论：该质控方法可用于聚乙二醇干扰素α2b的检定。     

重组人干扰素α-2b阴道泡腾胶囊联合微波治疗宫颈糜烂的临床分析

目的：探讨重组人干扰素α-2b阴道泡腾胶囊治疗宫颈糜烂的临床疗效。方法：选择年龄在20-48岁的宫颈糜烂患者273例．按宫颈糜烂面积及程度分类,用重组人干扰素α-2b阴道泡腾胶囊联合微波治疗与单纯微波治疗进行对照观察。结果：观察组213例患者中,轻度宫颈糜烂治愈率为97．0％,中度宫颈糜烂治愈率为96．5％,重度宫颈糜烂治愈率74．2％,总有效率达89．7％,仅1013％患者无效。结论：重组人干扰素α-2b阴道泡腾胶囊具有抗病毒作用,治疗宫颈糜烂有显著疗效,对预防宫颈癌起到了积极作用,值得临床推广使用。     

干扰素α-2b治疗病毒性角膜炎476例疗效观察

目的观察重组干扰素α-2b对病毒性角膜炎的临床疗效。方法476例（489只眼）患者除常规使用高滴度局部抗病毒药物,同时使用重组干扰素α-2b100万U皮下注射,隔日1次,评价其临床安全性和有效性。结果患者的总体治愈率为59．1％,由高到低依次为基质型、内皮型、上皮型、全角膜型;总体复发率为23．5％,由高到低依次为上皮型、全角膜型、内皮型、基质型。药物的不良反应发生率为10．7％。结论重组干扰素α-2b能提高病毒性角膜炎的治愈率,降低复发率;100万u的重组干扰素α-2b在眼科临床上应用具有较高的安全性。     

重组人α—2b干扰素治疗毛细支气管炎88例

目的：观察重组人α-2b干扰素治疗毛细支气管炎的疗效。方法：符合毛细支气管炎统一诊断标准的患174例,随机分为治疗组88例和对照组86例,对照组采用相似抗生素抗感染及平喘、解痉、止咳治疗,治疗组在对照组治疗的基础上肌肉注射100万Uα-2b干扰素,每日1次,连用3－5天。结果：治疗组有效率为96．6％（85／88）,对照组有效率为84．9％（73／86）,两组间有非常显性差异（P＜0．01）。结论：注射用重组人α-2b干扰素治疗毛细以气管炎有显疗效。     

重组入干扰素α-2b纳米粒小鼠体内药物动力学及组织分布

目的考察小鼠静脉注射重组人干扰素α-2b纳米粒后的体内药动学及组织分布。方法小鼠尾静脉注射给药后，采集不同时间血液、肝、肺和肾样品，经处理后，应用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定重组人干扰素α-2b的血浆及组织中浓度。结果重组人干扰素α-2b纳米粒及溶液注射给药，血浆药时数据经3p97药动学程序拟合，均符合一级消除动力学双隔室模型。给予重组人干扰素α-2b纳米粒小鼠体内消除半衰期（t1／2β=2．786h）是溶液剂消除半衰期的（t1／2β=0．599h）的4．7倍；血药浓度时间曲线下面积纳米粒组是溶液剂组的3．95倍，肝组织中药时曲线下面积纳米粒制剂是溶液剂组的3．8倍。与溶液剂组相比，纳米粒组在肺、肾中的药物分布也显著增加（P〈0．001）。结论纳米粒作为重组人干扰素α-2b的载体，能够显著延长重组人干扰索α-2b小鼠体内消除半衰期，增加其在肝、肺、肾组织中的分布。     

应用重组人干扰素α-2b凝胶降低尖锐湿疣复发率的疗效观察

目的探讨重组人干扰素α-2b凝胶降低尖锐湿疣复发率的疗效。方法选择60例尖锐湿疣患者随机分为两组,对照组应用单纯高频电灼法去除疣体,治疗组在对照组基础上加用重组人干扰素α-2b凝胶,连续观察12周。结果4周后两组的复发率比较差异无统计学意义（P〉0．05）;8周及12周后治疗组的复发率均明显低于对照组,两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。总复发率：12周后治疗组复发率为33．3％,对照组复发率为63．3％。治疗组复发率明显低于对照组（P〈0．05）。治疗组在整个治疗过程中未发生严重不良反应。结论重组人干扰素α-2b凝胶能显著降低尖锐湿疣的复发率,且安全性高。     

重组人干扰素α-2b引发再生障碍性贫血

1例41岁女性患者,因慢性乙型病毒性肝炎肝硬化入院,给予还原型谷胱甘肽1.2 g,1次/d静脉滴注;重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)500万U,1次/d肌内注射。用药1周后实验室检查:白细胞1.9×109/L,中性粒细胞0.48×109/L,血红蛋白118 g/L,红细胞3.7×1012/L,血小板81×109/L。停用rhIFNα-2b,继续使用其他药物,并加用重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子75μg,1次/d皮下注射。治疗第5天实验室复查:白细胞4.8×109/L,中性粒细胞3.12×109/L,血红蛋白118 g/L,红细胞3.8×1012/L,血小板61×109/L。再次给予rhIFNα-2b,剂量减为隔日1次。再次给药10 d后,患者持续发热,伴胸闷、呕吐。实验室检查:白细胞0.1×109/L,中性粒细胞未检出,血小板20×109/L,血红蛋白92 g/L,红细胞3.3×1012/L。立即停用rhIFNα-2b,给予对症治疗。根据临床症状和骨髓穿刺术检查结果,诊断为再生障碍性贫血。遂加用人免疫球蛋白和糖皮质激素治疗。第15天患者血小板3.0×109/L,血培养检出肺炎克雷伯菌。第17天患者突然出现呼吸困难,水肿、周身瘀点及瘀斑。第19天患者情况恶化,经抢救无效死亡。     

重组人干扰素α2b注射液治疗带状疱疹疗效观察

目的：探讨重组人干扰素α2b注射液治疗带状疱疹的临床应用。方法：重组人干扰素α2b注射液，肌肉注射，100万IU／次，隔日1次，连续用药2周。结果：治愈率为40．0％，总有效率为86．7％。结论：重组人干扰素α2b注射液治疗带状疱疹安全有效，可以缓解疼痛、瘙痒和灼烧感等主观不适，缩短病程，提高临床治愈率和有效率，是一种值得推荐的治疗带状疱疹的新药物。     

玉屏风颗粒联合重组人干扰素α-2b治疗多发性跖疣30例

目的：探讨玉屏风颗粒联合重组人干扰素α-2b治疗多发性跖疣的疗效。方法：随机选择60例多发性跖疣患者,治疗组30例以玉屏风颗粒联合重组人干扰素α-2b治疗;对照组以30例单用重组人干扰素α-2b治疗。两组均连续用药6周,比较两组疗效。结果：治疗组疗效优于对照组（P〈0.01）。结论：玉屏风颗粒联合重组人干扰素α-2b治疗多发性跖疣可提高治愈率。     

重组人干扰素α-2b原液的制备

目的优化重组人干扰素α-2b原液的发酵纯化方法,降低生产成本,提高产品的安全性。方法构建重组大肠杆菌,通过逐级扩大培养、发酵、纯化,收集菌体;菌体裂解后,进行变性、复性,通过不同的纯化方法,得到符合质量标准的重组人干扰素α-2b原液;通过对各步工艺的考察,优化重组人干扰素α-2b的发酵、纯化方法。结果制得的重组人干扰素α-2b菌种表达量高,原液纯度可达95.0%以上,生物学比活性高于1×108U.mg-1,符合《中华人民共和国药典》的质量要求,安全性强。结论此法可应用于重组人干扰素α-2b原液的生产。     

干扰素α-2b联合消肿止痛膏治疗流行性腮腺炎临床疗效观察

目的观察干扰素α-2b联合消肿止痛膏治疗流行性腮腺炎的临床疗效,为临床治疗提供依据。方法以100例流行性腮腺炎患儿为研究对象,按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组50例。观察组接受干扰素α-2b（100万IU）,肌内注射,连用5d,同时给予消肿止痛膏。对照组给予利巴韦林10mg·b^-1·d^-1溶于10％葡萄糖注射液中静脉滴注,1次／d,疗程为1周。两组患儿均接受维生素C、维生素B和氨基酸等支持治疗。比较两组退热时间、腮腺肿胀消失时间、有效率。结果对照组显效34例,有效6例,无效10例,总有效率80％;观察组显效36例,有效7例,无效7例,总有效率86％,两组总有效率差异无统计学意义（χ2=1．52,P〉0．05）。观察组患儿退热时间为（1．6．4-0．3）d、腮腺消肿时间为（3．9±0．5）d,短于对照组的（3．5±0．4）d、（6．4±0．4）d（t=4．42、4．23,均P〈0．05）。两组均无严重不良反应。结论采用干扰素α-2b联合消肿止痛膏治疗流行性腮腺炎具有较好疗效,不良反应少,适合临床推广使用。     

干扰素α-2b联合微波治疗宫颈糜烂合并人乳头状瘤病毒感染

目的探讨干扰素α-2b栓联合微波治疗宫颈糜烂合并人乳头状瘤病毒（HPV）感染的临床效果。方法选择宫颈糜烂合并HPV感染患者168例,随机分为治疗组与对照组。治疗组（84例）采用干扰素α-2b栓联合微波治疗,对照组（84例）采用单纯微波治疗,比较两种方法治疗后的的宫颈糜烂愈合程度和HPV转阴率。结果治疗组术后1个月、2个月治愈率分别为92．8％、97．6％,明显高于对照组的80．9％、85．7％（Χ^2=5．21,Χ^2=7．77,均P〈0．05）;术后3个月、6个月HPV转阴率治疗组分别为90．5％,92．9％,对照组为78．5％,82．1％,差异有统计学意义（Χ^2=4．62,Χ^2=4．48,均P〈0．05）。结论干扰素α-2b栓联合微波治疗宫颈糜烂合并HPV感染,方法简单,易操作,效果好,特别适合基层医院推广应用。     

LEEP术结合重组人干扰素α-2b凝胶治疗重度宫颈糜烂的有效性探究

目的：宫颈电圈环切术（LEEP术）结合重组人干扰素α-2b凝胶阴道用药用于临床治疗重度宫颈糜烂的效果观察。方法回顾性分析2013年3月-2014年3月我院收治的207例重度宫颈糜烂患者的临床资料,按不同治疗方案随机分为对照组（99例,行LEEP术治疗,术后常规用药）和观察组（108例,LEEP术后给予重组人干扰素α-2b凝胶阴道用药）,对两组患者疗效及宫颈糜烂创面改善情况进行综合比较。结果观察组治疗总有效率（90.74%）明显高于对照组（80.81%）（P〈0.05）;观察组创面愈合平均时间少于对照组（P〈0.01）,创面感染发生率更低（P〈0.05）。结论 LEEP术后给予重组人干扰素α-2b凝胶阴道用药能够显著提高治疗效果,能够促进术后宫颈糜烂创面愈合良好,值得临床推广应用。     

重组人干扰素α-2b栓治疗宫颈支原体耐药菌株感染疗效分析

目的研究重组人干扰素α-2b栓治疗宫颈支原体耐药菌株感染的临床效果。方法随机选取52例宫颈支原体培养耐药菌株感染患者,使用重组人干扰素α-2b栓为治疗组,另选52例宫颈支原体培养耐药菌株感染患者为对照组,将两组疗效进行比较。结果治疗组治疗3个月后转阴率为21．2％,有效率为65．4％;对照组转阴率为3．8％,有效率为30．8％,两组差异有统计学意义（P〈0．01）。结论重组人干扰素α-2b栓能部分杀灭支原体耐药菌株,改善耐药支原体耐药菌株对药物的敏感性。     

重组人干扰素α-2b治疗手足口病患儿的临床及病毒学效果观察

目的：以利巴韦林为对照,观察重组人干扰素α-2b治疗手足口病患儿的临床效果及其对不同手足口病病毒学亚型的疗效。方法：将151例手足口病患儿以随机抽样法分为干扰素组（76例）、利巴韦林组（75例）,干扰素组患儿给予肌内注射重组人干扰素α-2b50～200万IU,1日1次;利巴韦林组患儿给予静脉滴注利巴韦林10mg／kg,1日1次,观察2组的临床效果和病毒学效果。结果：干扰素组的临床有效率高于利巴韦林组（P=0．012）,干扰素组患儿的退热时间、疱疹消退时间和溃疡愈合时间等显著短于利巴韦林组（P〈0．05）;病毒学效果方面,干扰素组患儿用药48h即显示出抑制病毒复制的作用,与利巴韦林组比较,Ct值差异显著（P=0．025）,而且重干扰素α-2b对EV71型和高病毒滴度型手足口病患儿的疗效更加明显（P=0．001）。2组患儿均未出现不良反应。结论：肌内注射重组人干扰素α-2b治疗手足口病患儿,无论是临床效果还是病毒学效果均优于利巴韦林。     

电灼联合重组干扰素α-2b治疗尖锐湿疣临床分析

目的 探讨重组干扰素α-2b对抑制尖锐湿疣（CA）复发中的作用.方法 对75例确诊为CA的患者均采用电灼除疣,电灼后随机分为治疗组（40例,继以干扰素α-2b局部肌肉注射治疗）和对照组（35例,不用任何药物）,随访3个月.结果 治愈率治疗组为87.5%,对照组为48.6%,差异有显著性（P＜0.05）.结论 电灼联合重组干扰素α-2b可有效抑制尖锐湿疣复发.     

重组人干扰素α-2b滴鼻剂对小鼠免疫功能影响的研究

目的研究重组人干扰素α-2b(rhIFNα-2b)滴鼻剂对小鼠免疫功能的影响。方法应用比色法、ELISA双抗体夹心法,分别测定在高(10 000 u/只)、中(1 000 u/只)、低(100 u/只)3种剂量rhIFNα-2b滴鼻剂作用下,不同时间(10,20,30 d)小鼠脾脏NK细胞毒指数和唾液IgA含量的变化。结果与基质液组比较,10 d高剂量组、10,20,30 d中剂量组和20,30 d低剂量组的NK细胞毒指数均显著增加(P<0.05),20 d高剂量组增加极显著(P<0.01)。10,20,30 d各剂量组IgA含量均极显著增加(P<0.01),20 d高、中剂量组IgA含量最高,药理作用强于10,30 d组(P<0.05)。结论rhIFNα-2b滴鼻剂具有显著提高小鼠免疫功能的作用。     

重组人α-2t干扰素含片药效学试验

目的观察重组人α-2b干扰素（rhIFN α-2b）舍片对体外、体内的抗病毒作用，为临床用药提供药理学依据。方法采用体外和体内抗病毒试验。结果rhIFN α-2b含片浓度为400～250000IU／mL时，对单纯疱疹病毒（HSV-1、HSV2）和水痘-带状疱疹病毒有明显抑制作用，并在31．2—1000IU／mL浓度时，对乙型肝炎病毒也有明显抑制作用。小鼠抗流感病毒试验表明，口含rhIFN α-2b 500～50000IU／只，能明显降低动物死亡率，并延长存活时间。结论rhIFN α-2h含片对体内、体外病毒均有明显的抑制作用。