山茱萸环烯醚萜苷主要药理作用研究进展

山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)的干燥成熟果肉,别名蜀枣、鼠矢、鸡足、山英肉、实枣儿、枣皮、英肉等.临床常以除去种的成熟果实入药.其味酸、涩,微温,归肝、肾经,有补益肝肾、涩精固脱的功效,临床用于内热消渴、眩晕耳鸣、腰膝酸痛、阳痿遗精、遗尿、尿频、崩漏带下、大汗虚脱等.近年来研究发现,山茱萸的有效部位山茱萸环烯醚萜苷(CIG)具有广泛的生物学活性,能够抑制免疫作用、抗炎、抗血栓等,对糖尿病的多种并发症具有治疗作用,尤其对神经系统疾病有很好的治疗作用.     

山茱萸环烯醚萜苷以tau蛋白为靶点治疗阿尔茨海默病的研究

目的微管相关蛋白tau在阿尔茨海默病(AD)的发病机制中发挥重要的作用,并且得到了越来越多的关注。过表达P301L突变tau蛋白的rTg4510转基因小鼠具有明显的tau病理表现,广泛应用于AD的基础研究及药理研究中。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)为中药山茱萸的有效部位,在我室之前的研究中显示CIG在体外模型中可以降低tau蛋白的磷酸化。方法本研究应用rTg4510小鼠为AD病理模型,给予CIG药物处理3个月后进行行为学检测,之后分别灌注固定取材及新鲜取材。应用Western印迹等方法检测磷酸化tau蛋白、磷酸化调节酶、微管及突触相关蛋白的表达水平;应用免疫荧光等方法观察病理性tau蛋白、微管的形态、突触相关蛋白表达等;应用Serine/Threonine Phosphatase Assay检测磷酸酯酶PP2A的活性。结果CIG可以增加rTg4510小鼠在Morris水迷宫中的空间和工作记忆,改善在物体识别实验中的物体识别记忆,降低小鼠的过度活跃状态。同时CIG可以改善rTg4510小鼠的脑萎缩,降低海马区域的神经元的丢失;同时CIG可以增加rTg4510小鼠骨架相关蛋白的表达,改善细胞骨架形态;增加小鼠突触NMDA受体及突触相关蛋白的表达,增加突触的数量。其主要的机制为CIG降低了rTg4510小鼠脑内多个位点的磷酸化,降低了病理性tau蛋白的沉积;同时降低了磷酸化的可溶性tau蛋白,降低不可溶性tau蛋白。进一步探讨CIG降低磷酸化的机制,发现CIG可以增加主要的磷酸酯酶PP2A的甲基化修饰,并且可以调节PP2A甲基化调节酶LCMT-1/PME-1的比例。同时,CIG可以增加内源PP2A酶的激活因子PPP2R4的表达,并增加PP2A酶的活性。结论 CIG可以改善rTg4510转基因小鼠的认知能力,改善脑萎缩和神经元的丢失,保护细胞骨架形态和突触。其主要机制为CIG降低了tau蛋白的过度磷酸化及病理性tau蛋白的沉积。进一步研究发现CIG可能通过增加内源性PP2A激活剂PTPA的表达,进而直接或通过调节PP2A的修饰间接地增加PP2A活性。因此本研究提示CIG可能作为一个潜在的以PP2A激活为靶点的抗AD药物。     

山茱萸环烯醚萜苷对冈田酸拟阿尔茨海默病细胞模型的抗凋亡作用研究

目的:研究山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸(OA)拟阿尔茨海默病(AD)细胞模型中神经细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:CIG与人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞预孵育24h,再用OA10nmol与神经细胞共孵育6h,用TUNEL法观察凋亡细胞的变化,用蛋白免疫印记法观察凋亡因子B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和细胞凋亡蛋白酶(Caspase-3)的表达。结果:正常对照细胞铺展良好,未出现凋亡细胞;OA模型组凋亡细胞显著增多,Bax和Cas-pase-3的表达水平显著增高,Bcl-2的表达水平显著下降;CIG(100和200μg.mL-1)给药组凋亡细胞较OA模型组显著减少,Bax和Caspase-3表达水平显著降低,Bcl-2表达显著增高。结论:CIG能通过影响凋亡调节因子而抑制神经细胞凋亡,提示该药可能具有治疗AD的良好应用前景。     

山茱萸环烯醚萜苷对家兔、大鼠血小板聚集及出血时间的影响

目的：研究山茱萸环烯醚萜苷（CIG）对血小板聚集和出血时间的影响。方法：应用比浊法测定家兔（体外实验）及血瘀模型大鼠（体内实验）的血小板聚集率;断尾法观察大鼠出血时间。采用肾上腺素加冰水刺激法制备血瘀大鼠模型。结果：在体外实验中,CIG（0.75～3 mg/mL）能明显抑制二磷酸腺苷（ADP）或花生四烯酸（AA）诱导的家兔血小板聚集（P〈0.05,P〈0.01）,对血小板活化因子（PAF）诱导的血小板聚集无显著影响,但更大剂量（6～12 mg/mL）能抑制PAF诱导的血小板聚集（P〈0.01）。在体内实验中,CIG大剂量（180 mg/kg）灌胃给药能显著抑制ADP诱导的血瘀模型大鼠血小板聚集（P〈0.01）,延长正常大鼠的出血时间（P〈0.05）。结论：山茱萸环烯醚萜苷具有抗血小板聚集作用,大剂量能够延长出血时间。     

独一味环烯醚萜苷外用止血作用研究

目的 研究藏药独一味有效部位总环烯醚萜苷外用止血效果. 方法 采用小鼠断尾出血模型、兔腹主动脉出血模型、兔耳中动脉出血模型和大鼠肝脏组织损伤出血模型,比较淀粉、云南白药、独一味水提物和独一味总环烯醚萜苷的外用止血效果. 结果 独一味总环烯醚萜苷组断尾出血停止时间为(64.8±25.0) s,独一味水提物组为(97.2±44.0) s,云南白药组为(105.1±65.0) s,淀粉对照组为(124.8±43.2) s.总环烯醚萜苷组平均肝脏损伤出血停止时间为(93.8±39.5) s, 独一味水提物组为(101.1±25.9) s, 云南白药组为(74.0±26.3) s, 淀粉对照组为(152.8±47.1) s.独一味总环烯醚萜苷外用使兔腹主动脉、耳中动脉平均出血时间显著缩短,与淀粉对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而且优于同剂量的云南白药,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).独一味水提物与淀粉对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),但止血时间长于总环烯醚萜苷组. 结论 独一味总环烯醚萜苷外用对小鼠断尾、兔腹主动脉和耳中动脉以及大鼠肝脏止血效果明显,且优于水提物和云南白药.     

山茱萸环烯醚萜总苷对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的保护作用

在发达国家，糖尿病大血管病变如糖尿病心脏病变导致50％的糖尿病人死亡，美国糖尿病心脏病居致死原因的第5位。糖尿病血管病变已严重地威胁着人类的健康,寻找能阻止或控制糖尿病血管病变发生、发展的有效药物已成为世界医药学研究的重点之一。现代研究认为，血管内皮损伤在糖尿病血管病变中是一早期的关键过程，故本文从形态学的角度观察其对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的保护作用。     

素馨花环烯醚萜苷类化学成分研究

为研究木樨科植物素馨干燥花蕾的抗HBV活性化学成分,通过硅胶、聚酰胺、大孔树脂、SephadexLH-20、HPLC等色谱方法进行分离纯化,根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定化学结构,从素馨花70%乙醇提取物的抗HBV活性部位中分离得到6个环烯醚萜苷类化合物,分别鉴定为素馨花苷B(1)、6-O-甲基梓醇(2)、去乙酰车叶草酸(3)、桃叶珊瑚苷(4)、8-去羟基-山栀子苷(5)和马钱子苷(6)。化合物1为新化合物,化合物2～6为首次从本植物中分离得到。     

山茱萸环烯醚萜苷对糖尿病大鼠胸主动脉血管内皮的保护作用

<正> 在发达国家,糖尿病大血管病变如糖尿病心脏病变导致50％的糖尿病人死亡,美国糖尿病心脏病居致死原因的第5位。糖尿病血管病变已严重地威胁着人类的健康,寻找能阻止或控制糖尿病血管病变发生、发展的有效药物已成为世     

山茱萸环烯醚萜苷对APP/PS1/tau小鼠脑内阿尔茨海默病样病理变化的作用机制

目的阿尔茨海默病(AD)最典型的病理变化是β-淀粉样蛋白(Aβ)在脑部沉积形成的老年斑和过度磷酸化的tau蛋白聚集导致的神经纤维原缠结(NFT),同时伴随氧化应激、神经炎症、突触损伤、神经元变性或死亡等。本研究利用APP/PS1/tau三转基因(3x Tg)模型小鼠,观察山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对小鼠脑内多种病理变化的影响。方法 16月龄3x Tg模型小鼠每天灌胃给予CIG 100或200 mg·kg~(-1)至18月龄。采用刚果红染色法观察3x Tg小鼠海马中老年斑沉积;Western蛋白印迹法检测tau蛋白在Thr212和Thr217位点的磷酸化水平;免疫组化法观察小鼠海马中脑源性神经营养因子(BDNF)的表达和分布;实时荧光定量PCR法(q RT-PCR)检测小鼠BDNF转录水平;尼氏染色法观察小鼠海马中尼氏小体的变化。结果 18月龄模型组小鼠与对照组相比,Aβ淀粉样斑块沉积明显增加,而给予CIG 100或200 mg·kg~(-1)均能不同程度降低脑内斑块负荷。模型组小鼠tau蛋白在Thr217位点的磷酸化水平明显升高,而在Thr212位点的磷酸化水平无明显升高;CIG治疗组能明显拮抗tau蛋白在Thr217位点的过度磷酸化。模型组小鼠海马BDNF蛋白和m RNA的水平均降低,CIG能够明显恢复BDNF蛋白和m RNA表达;模型组小鼠海马内尼氏小体数量减少,染色变浅,排列散乱,CIG有增高尼氏体数量的趋势。结论 CIG能够减少Aβ在脑内的沉积和tau蛋白异常过度磷酸化,恢复BDNF在脑内的表达,并且保护神经元。     

正交试验优选山茱萸总环烯醚萜苷的提取、纯化工艺

目的优选山茱萸总环烯醚萜苷的提取、纯化工艺。方法以总苷含量为指标,选择料液比、乙醇浓度和提取温度为考察因素,采用L9(34)正交试验来优选提取工艺;选择洗脱剂浓度及用量为考察因素,采用单因素试验考察SP825型大孔吸附树脂的纯化工艺。结果山茱萸总环烯醚萜最佳提取工艺为料液比1∶25、乙醇浓度10%、提取温度95℃。纯化工艺为10%乙醇洗脱10 BV。结论优选的山茱萸总环烯醚萜苷提取工艺稳定可行,SP825型大孔吸附树脂可富集山茱萸总环烯醚萜苷。     

素馨花中一个新的环烯醚萜苷

为研究木犀科植物素馨花干燥花蕾的化学成分， 通过硅胶柱色谱、 Sephadex LH-20柱色谱、 HPLC和重结晶等方法进行分离纯化， 根据化合物的理化性质和波谱数据鉴定结构， 从素馨花干燥花蕾70%乙醇提取物中分离得到6个环烯醚萜苷类化合物， 分别鉴定为素馨花苷(I)、 jaspolyoside (II)、 8-epi-kingiside (III)、 10-羟基橄榄苦苷(IV)、 10-羟基女贞苷(V)、 oleoside-7,11-dimethyl ester (VI)。化合物I为新化合物，其余为首次从本植物中分离得到。     

酒龙胆中总多糖和总环烯醚萜苷保肝作用的研究

目的研究酒龙胆中总多糖和总环烯醚萜苷对四氯化碳(CCl4)所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法将50只大鼠随机分为空白组、模型组、总多糖组、总环烯醚萜苷组和阳性对照药联苯双酯组,给药7 d后,除空白组外,其余各组大鼠腹腔注射2.5%CCl_4植物油溶液(1.5 mL·kg~(-1)),复制急性肝损伤模型。测定各组大鼠血浆中丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-6(IL-6)以及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量以及HE染色法观察各组大鼠急性肝损伤程度。结果总多糖和总环烯醚萜苷均能使肝损伤大鼠体内SOD、GSH-Px、GSH的含量升高、MDA的含量降低,其中总多糖的升高或降低作用更优;总多糖可使肝损伤大鼠体内AST、ALT的含量下降,总环烯醚萜苷则几乎没有这些作用;总多糖和总环烯醚萜苷均能使肝损伤大鼠体内TNF-α、MCP-1、IL-6的含量降低,其中总环烯醚萜苷的降低作用更优。肝组织病理切片显示,总多糖和总环烯醚萜苷均一定程度减轻肝脏组织病理性改变,其中总多糖较总环烯醚萜苷作用更强。结论酒龙胆中总多糖、总环烯醚萜苷均对CCl4所致的大鼠急性肝损伤有一定保护作用,其中总多糖较总环烯醚萜苷作用更强。     

鸡矢藤环烯醚萜苷体外抗肿瘤活性研究

摘 要 目的：探讨并评价鸡矢藤环烯醚萜苷(IGPS)化学组成和体外抗肿瘤活性。方法: 采用超声提取和大孔树脂分离纯化的方法制备IGPS,并用LC MS方法鉴定分析其化学组成;利用四甲基偶氮唑蓝( MTT)法研究其对正常细胞小鼠成纤维细胞系NIH 3T3的毒性及人肺癌细胞系A549、SPC A 1,人结肠癌细胞系COLO205、HCT 116,人白血病细胞系HL 60、K562,人乳腺癌细胞系MCF7、BT 549,人胃腺瘤细胞系SGC7901,人子宫颈癌细胞系Hela的增殖抑制作用;用流式细胞术检测IGPS对SGC7901、Hela和HCT 116肿瘤细胞凋亡的影响。结果: 提取纯化的IGPS主要由鸡矢藤苷、鸡矢藤次苷、鸡矢藤苷酸和车叶草苷组成;与阴性对照组相比,IGPS浓度在500μg·ml^-1及以下时对正常细胞NIH 3T3无毒性作用;对SGC7901、Hela、HCT 116、COLO205、BT 549和MCF7细胞均有细胞增殖抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.05),而对人肺癌细胞系A549、SPC A 1和人白血病细胞系HL 60、K562无细胞增殖抑制作用;IGPS对SGC7901细胞抑制作用最强,IC50为156.6 μg·ml^-1;IGPS能够有效诱导SGC7901、Hela和HCT 116细胞的凋亡。结论: 鸡矢藤环烯醚萜苷对多种肿瘤细胞具有一定的体外抗肿瘤作用。     

醉鱼草中的环烯醚萜苷

目的研究醉鱼草(Buddleja lindeyana)的活性成分.方法应用多种色谱技术分离纯化,用IR,MS和NMR等谱学方法解析化合物结构.结果与结论从醉鱼草(Buddleja lindeyana)的全草分离到5个化合物,其中三个为环烯醚萜苷.它们的结构为:6-氧-阿魏酰筋骨草苷(1),赤式-6-氧-4＇-(3-甲氧基-4-羟基苯丙三醇-8")-阿魏酰筋骨草苷(2),苏式-6-氧-4＇-(3-甲氧基-4-羟基苯丙三醇-8")-阿魏酰筋骨草苷(3),二十四烷酸-α-单甘油脂(4),半乳糖醇(5).上述成分均为首次从醉鱼草中得到.且化合物1,2和3对神经细胞有保护作用.     

山茱萸环烯醚萜苷对蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸拟阿尔采末病细胞模型的作用

目的探讨中药山茱萸环烯醚萜苷(COIG)对蛋白磷酸酶2A和1(PP2A和PP1)抑制剂冈田酸(okadaicacid,OA)拟阿尔采末病细胞模型tau蛋白过度磷酸化水平和细胞微管的影响。方法COIG与人神经母细胞瘤细胞系SKNSH细胞预孵育24h,再用OA10nmol·L-1与SKNSH细胞共孵育6h,在显微镜下观测细胞形态变化,用Westernblot方法观察磷酸化和非磷酸化tau蛋白表达,用间接免疫荧光法观察神经细胞微管的变化。结果正常SKNSH细胞铺展良好,OA模型组细胞变圆,突起断裂;OA模型组tau蛋白ser199/202和ser404位点磷酸化水平较正常对照组明显增高,非磷酸化水平下降;OA模型组细胞微管平均面积较正常对照组明显减少。COIG(100和200mg·L-1)给药组细胞形态基本恢复正常,tau蛋白ser199/202和ser404位点磷酸化水平较OA模型组明显下降、非磷酸化水平升高,细胞微管平均面积比模型组明显增大。结论山茱萸环烯醚萜苷能够抑制神经细胞tau蛋白过度磷酸化,保护细胞微管结构,因此可能具有治疗AD的应用前景。     

山茱萸环烯醚帖苷的研究进展

山茱萸是山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉,目前已从中分离鉴定了10个环烯醚萜类化合物,包括马钱素、莫诺苷、獐牙菜苷、7-O-甲基莫诺苷、山茱萸裂苷、山茱萸新苷(双环烯醚萜苷)、7-脱氢马钱素、脱水莫诺苷元、7-O-乙基莫诺苷和7-O-丁基莫诺苷。山茱萸环烯醚帖苷具有广泛的生物学活性,能够抗炎、抗肿瘤等,并对神经系统和心血管系统有保护作用。其中莫诺苷能抑制过氧化氢诱导的神经细胞损伤,并对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定的神经保护作用。本文就山茱萸环烯醚帖苷莫诺苷对神经系统尤其缺血性脑损伤的药理学作用做一综述,为这种新型化学物质的药理学作用的深入研究提供思路。     

筋骨草中总环烯醚萜苷的提取动力学研究

目的研究筋骨草中总环烯醚萜苷提取过程的动力学机制。方法采用比色法,测定不同提取温度条件下筋骨草水提液中总环烯醚萜苷的含量。以Fick扩散定律为基础,建立其提取过程的动力学方程,并由此推算出提取的速率常数、活化能、半衰期等动力学函数值。结果所得的动力学模型能较好地描述筋骨草中总环烯醚萜苷提取的动态过程,其表观活化能为45.18 kJ.mol 1。结论筋骨草中总环烯醚萜苷提取过程的动力学符合一级动力学方程特征。     

山茱萸环烯醚萜苷通过介导胞外信号调节激酶信号通路对急性脑梗死小鼠的神经保护作用

目的 研究山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对急性脑梗死小鼠的神经保护作用,并探讨其可能机制.方法 将18只ICR小鼠采用随机数字表法分为对照组、模型组、实验组,每组6只.参考大脑中动脉栓塞法对小鼠进行造模,实验组小鼠腹腔注射150 mg/kg CIG,连续给药7 d,对比三组小鼠的神经损伤评分,并观察小鼠的脑梗死体积,使用TUNEL检测测定小鼠神经元的凋亡率,使用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测脑组织中磷酸化胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白及mRNA的表达情况.结果 与对照组相比,模型组小鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经元凋亡率、Bax mRNA及其蛋白和p-ERK1/2蛋白表达升高,Bcl-2 mRNA及其蛋白表达降低(P<0.05),其中神经元凋亡率(79.678±7.203)％、Bax mRNA(3.84±0.29)及其蛋白表达(1.01±0.07)、p-ERK1/2蛋白表达(0.90±0.08)高于对照组的(1.983±1.071)％、(1.04±0.09)、(0.21±0.07)、(0.41±0.08),Bcl-2 mRNA(1.00±0.07)及其蛋白表达(0.50±0.07)低于对照组的(3.86±0.32)、(1.29±0.08).与模型组相比,实验组小鼠神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经元凋亡率、Bax mRNA及其蛋白降低,Bcl-2 mRNA及其蛋白表达和p-ERK1/2蛋白表达升高(P<0.05),其中神经元凋亡率(49.171±10.914)％、Bax mRNA(2.04±0.23)及其蛋白表达(0.51±0.08)低于模型组,Bcl-2 mRNA(2.58±0.24)及其蛋白表达(0.93±0.34)、p-ERK1/2蛋白表达(1.52±0.09)高于模型组.结论 CIG可能是通过ERK信号通路发挥对急性脑梗死小鼠的神经保护作用.     

山茱萸环烯醚萜苷调节磷酸酯酶及tau蛋白病变改善rTg4510小鼠的病理表现

目的微管相关蛋白tau在阿尔茨海默病(AD)的发病机制中发挥重要的作用,并且得到了越来越多的关注。过表达P301L突变tau蛋白的r Tg4510转基因小鼠具有明显的tau病理表现,广泛应用于AD的基础研究及药理研究中。山茱萸环烯醚萜苷(CIG)为中药山茱萸的有效部位,在我室之前的研究中显示CIG在体外模型中可以降低tau蛋白的磷酸化。方法应用r Tg4510小鼠为AD病理模型,给予CIG药物处理3个月后进行行为学检测,之后分别灌注固定取材及新鲜取材。应用Western蛋白印迹等方法检测磷酸化tau蛋白、磷酸化调节酶、微管及突触相关蛋白的表达水平;应用免疫荧光等方法观察病理性tau蛋白、微管的形态、突触相关蛋白表达等;应用Serine/Threonine Phosphatase Assay检测磷酸酯酶PP2A的活性。结果 CIG可以增加r Tg4510小鼠在Morris水迷宫中的空间和工作记忆,改善在物体识别实验中的物体识别记忆,降低小鼠的过度活跃状态。同时CIG可以改善r Tg4510小鼠的脑萎缩,降低海马区域的神经元的丢失;同时CIG可以增加r Tg4510小鼠骨架相关蛋白的表达,改善细胞骨架形态;增加小鼠突触NMDA受体及突触相关蛋白的表达,增加突触的数量。其主要的机制为CIG降低了r Tg4510小鼠脑内多个位点的磷酸化,降低了病理性tau蛋白的沉积;同时降低了磷酸化的可溶性tau蛋白,降低不可溶性tau蛋白。进一步探讨CIG降低磷酸化的机制,发现CIG对于主要的磷酸激酶GSK-3β的作用不明显;而CIG可以增加主要的磷酸酯酶PP2A的甲基化修饰,并且可以调节PP2A甲基化调节酶LCMT-1/PME-1的比例。同时,CIG可以增加内源PP2A酶的激活因子PPP2R4的表达,并增加PP2A酶的活性。结论 CIG可以改善r Tg4510转基因小鼠的认知能力,改善脑萎缩和神经元的丢失,保护细胞骨架形态和突触。其主要机制为CIG降低了tau蛋白的过度磷酸化及病理性tau蛋白的沉积。进一步研究发现CIG可能通过增加内源性PP2A激活剂PTPA的表达,进而直接或通过调节PP2A的修饰间接地增加PP2A活性。因此本研究提示CIG可能作为一个潜在的以PP2A激活为靶点的抗AD药物。