p16、RASSF1A基因甲基化与中国人群肺癌发生 及被动吸烟关系的研究

目的探讨p16、RASSF1A基因甲基化与肺癌发生及被动吸烟的关系。方法采用Meta分析法研究p16、RASSF1A基因甲基化与中国人群肺癌发生与香烟烟雾暴露的关系;采用焦磷酸测序法检测被动吸烟对小鼠肺组织中p16、RASSF1A基因甲基化程度的影响。结果 (1) Meta分析结果显示,中国肺癌吸烟患者中p16基因甲基化频率显著高于肺癌不吸烟患者(OR=3.77,95%CI:1.88～7.58),差异具有统计学意义(P <0.05);RASSF1A基因甲基化频率显著高于肺癌不吸烟患者(OR=4.59,95%CI:1.39～15.15),差异具有统计学意义(P <0.05);(2)被动吸烟小鼠不同剂量组均未检测出p16和RASSF1A基因甲基化。结论中国人群肺癌患者中p16和RASSF1A基因甲基化高度相关,吸烟造成p16和RASSF1A基因甲基化与肺癌易感性相关;被动吸烟对小鼠p16、RASSF1A基因甲基化的程度未造成影响。     

肺癌患者p16基因启动子异常甲基化检测及临床意义

目的评价组织和血浆中p16基因启动子区甲基化对肺癌的诊断价值。方法用甲基化PCR的方法检测106例肺癌患者组织和血浆p16基因启动子区域甲基化,并评价其对肺癌的诊断价值。结果106例肺癌患者血浆及对应的肿瘤组织中,p16基因甲基化的检出率分别为36.8%(39/106)和41.5%(44/106),二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。血浆p16基因启动子异常甲基化阳性率在第2轮PCR扩增后显著增高(P<0.05)。结论血浆标本中p16基因甲基化作为一项肿瘤标志物为早期诊断肺癌提供了依据。     

非小细胞肺癌中p27kip1、p16蛋白的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中p27kip1、p16基因蛋白的表达及临床意义.方法采用免疫组化Envision法检测57例非小细胞肺癌(NSCLC)标本p27kip1、p16蛋白的表达.结果 (1)p27kip1、P16在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为43.86%、49.12%,在癌旁正常支气管上皮阳性率分别为92.0%、96.0%,其在肺癌和正常组织中表达的差异有显著意义(P<0.005);(2)p27kip1、p16阳性表达者生存期分别较p27kip1、p16阴性表达者延长(P<0.05),且与淋巴结转移呈负相关(P<0.025);(3)p27kip1与p16的表达显著正相关(P<0.05).结论 p27kip1、p16低表达与非小细胞肺癌的发生、进展密切相关,与生存期呈负相关,两者可作为综合判断患者预后的指标.     

非小细胞肺癌组织中p16的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系

目的 研究p16在人类非小细胞肺癌中的表达意义及与肿瘤细胞增殖的关系。方法应用免疫组织化学（S-P法）检测了80例非小细胞肺癌组织标本和40例肺良性病变组织中p16和细胞增殖核抗原（PCNA）的表达水平。结果（1）非小细胞肺癌组织中p16表达水平（57．5％）显著低于肺良性病变组织（90．0％）（P〈0．01）；（2）非小细胞肺癌组织中p16基因表达水平降低与肺癌组织学类型，细胞分化程度，患者P-TNM分期，是否有淋巴结转移存在相关性（P〈0．05）；（3）非小细胞肺癌组织中p16与PCNA表达呈负相关。结论p16基因表达下调与非小细胞肺癌细胞增殖有关，与肿瘤的发生、发展关系密切。     

应用原位杂交技术分析肺腺癌和肺鳞癌的遗传机制

目的 探讨肺腺癌及肺鳞癌细胞遗传物质的改变与临床特征的关系.方法 应用多重荧光原位杂交(M-FISH)和比较基因组杂交(CGH)技术,检测肺腺癌及肺鳞癌细胞株和肺癌组织中的DNA.结果 在160例肺癌标本基因组中,M-FISH显示5、6、11、12、17号染色体频繁参与染色体问的易位;CGH显示最常见的扩增区域是1q,2p,3q,5p,5q,7p,8q,11q,12q,14q,16p,17p,19p,20q,21q,22q,最常见的缺失区域是2q,3p,4p,5q,7q,8p,9p,13q,14q,17p.结论 M-HSH和CGH技术足研究肺癌基因组变化强有力的工具,该实验中发现的基因改变可能代表了与肺腺癌及肺鳞癌特有的候选基因.     

重楼皂苷Ⅰ基于miR-16-5p调控STAT3信号通路抑制肺癌细胞增殖和迁移

目的:探讨重楼皂苷Ⅰ(PPⅠ)通过调控miR-16-5p进而影响STAT3信号通路从而抑制肺癌进展的作用机制。方法:通过网络药理学筛选关键靶标和相关途径;CCK-8、细胞划痕实验、Transwell检测肺癌细胞在PPⅠ作用下增殖、迁移、侵袭能力的变化;通过Western blot测定相关蛋白的表达情况;将miR-16-5p mimic、miR-16-5p inhibitor的表达载体转染到肺癌A549细胞中,再次重复上述实验。结果:STAT3信号通路为PPⅠ和肺癌的关键信号通路,PPⅠ影响肺癌细胞增殖和转移,下调Bcl-2、Cyclin D1、MMP-2、Vimentin,以及上调p21、Bax、Cleave-Caspase-3、Cleave-Caspase-9的蛋白表达水平。PPⅠ干预后,肺癌细胞内miR-16-5p表达水平显著上升。过表达miR-16-5p增强了PPⅠ对A549细胞的影响;PPⅠ调控miR-16-5p可使p-STAT3的蛋白表达水平降低。结论:PPⅠ可能通过调控miR-16-5p和STAT3信号通路抑制人肺癌进展,为制定其治疗策略提供新的方案。     

白血病患者p16基因失活机制研究

目的了解白血病患者p16基因纯合性缺失、点突变及启动子区甲基化状态,探讨白血病发生中p16基因失活机制。方法采用聚合酶链反应、聚合酶链反应-单链构象多态性以及巢式甲基化特异性PCR法,对57例白血病患者进行p16基因纯合性缺失、点突变及启动子区甲基化状态研究。结果在受检的57例白血病患者中,共有6例发生p16基因纯合性缺失（10.53%）;无p16第1、2外显子缺失的51例白血病患者中均未见点突变发生;无p16基因第1、2外显子缺失、突变的51例白血病患者中共有16例发生p16基因甲基化（31.37%）,其中14例（27.45%）发生在急性白血病患者;57例白血病患者中共有22例发生p16基因失活（38.60%）。结论白血病发生过程中表观遗传学机制和遗传学机制相互作用,p16基因启动子区高甲基化可能是急性白血病发生中p16基因失活的主要机制。     

肺癌细胞株抑癌基因启动子甲基化与转录的关系

目的 通过测定3例非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株中7个抑癌基因启动子甲基化与mRNA转录之间的关系,探讨启动子甲基化在NSCLC发生中的作用.方法 应用甲基化特异性的多聚酶链反应(MSP)和RT-PCR分别检测甲基化状态和mRNA的转录水平.结果 肺癌细胞株A549发生甲基化的基因包括p16INK4a、RASSF1α、CDH1、MGMT和CDH13,而DAPK和RAR-β为去甲基化状态;SH-77发生甲基化的基因包括p16INK4a、RASSF1α、CDH1和MGMT,而DAPK、CDH13和RAR-β为去甲基化状态;SPC-A1发生甲基化的基因包括p16INK4a、CDH1、 CDH13和RAR-β,而RASSF1α、MGMT和DAPK为去甲基化状态.RASSF1α、MGMT和RAR-β等3个基因发生甲基化的细胞株其mRNA转录失活,而去甲基化状态的细胞株则存在转录活性.结论 NSCLC细胞株中抑癌基因经常发生启动子CpG岛的甲基化,并且甲基化可能与抑癌基因mRNA转录失活相关.     

丹参注射液对小鼠Lewis肺癌P53、P16表达的影响

目的观察丹参注射液对小鼠Lewis肺癌P53、P16表达的影响。方法建立Lewis肺癌小鼠模型,用免疫组织化学方法检测丹参注射液对Lewis肺癌组织P53、P16表达的影响。结果小鼠Lewsi肺癌细胞p53的表达在丹参注射液组的阳性率明显低于生理盐水组（P〈0.01）。p16的表达在丹参注射液组的阳性率明显高于生理盐水组（P〈0.01）。结论丹参注射液能有效抑制肿瘤细胞p53的表达,增强p16的表达。     

乳腺癌p16基因甲基化和蛋白表达的检测及其临床意义

目的:探讨p16基因在乳腺癌中甲基化状态、表达情况及其与临床的关系.方法:应用甲基化特异性的聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测48例乳腺癌中p16基因甲基化状态,应用免疫组化检测p16基因的蛋白表达情况.结果:p16基因在乳腺癌中甲基化率为27.1%(13/48),有淋巴结及远处转移的甲基化率(52.6%,10/19)高于无转移的甲基化率(10.3%,3/29)(P＜0.05);13例甲基化病例中P16蛋白失表达率(76.9%,10/13)高于非甲基化病例(8.6%,3/35)(P＜0.05).结论:p16基因高甲基化是乳腺癌中常见的分子生物学改变之一,p16基因高甲基化和乳腺癌浸润及转移有相关性;P16蛋白表达和其高甲基化呈负相关,甲基化是p16抑癌基因失活的主要方式之一.