大蒜新素对巨细胞病毒感染小鼠细胞因子TGF-β1的影响

目的 探讨大蒜新素对全身播散型小鼠巨细胞病毒（MCMV）感染模型鼠转化生长因子β1（TGF-β1）基因转录和蛋白表达的影响. 方法建立MCMV全身播散型感染BALB/c小鼠模型, 将60只模型鼠随机分为安慰药组和大蒜新素（25 mg•kg^-1•d^-1）治疗组, 并设60只同期模拟感染小鼠为对照, 随机分为模拟对照组和大蒜新素对照组, 每组30只. 于药物治疗后1, 3, 7, 14和28 d获取血清和脾细胞（体外培养刺激物为灭活MCMV抗原）. 用双抗体夹心ELISA法检测血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平;用逆转录 聚合酶链反应（RT-PCR）法检测脾细胞TGF-β1mRNA表达强度. 结果安慰药组在治疗后3 d血清TGF-β1水平即显著上升达高峰, 随后逐渐下降, 但至28 d仍明显高于模拟对照组;其脾细胞TGF-β1 mRNA和蛋白表达变化一致, 均在治疗后3 d明显增高, 7 d达高峰, 28 d回落到稍高于模拟对照组水平. 与安慰药组比较, 大蒜新素治疗组3 d后血清和脾细胞培养上清TGF-β1水平均有降低, 以治疗后3～7 d差异最为显著;而脾细胞TGF-β1mRNA表达与大蒜新素对照组相近. 结论MCMV在急性感染期可诱导免疫抑制因子TGF-β1基因转录和蛋白表达明显增高, 而大蒜新素治疗可完全阻遏病毒诱导的脾细胞TGF-β1基因转录, 并明显降低模型鼠血清和脾细胞TGF-β1表达水平.     

大蒜新素对人巨细胞病毒感染人胚肺成纤维细胞Caspase-3表达的影响

目的 观察大蒜新素对人巨细胞病毒（HCMV）感染的人胚肺成纤维细胞（HELs）Caspase-3表达的影响，从细胞凋亡角度探讨大蒜新素抗HCMV效应的部分作用机制。方法 用HCMV AD169毒株感染HELs，建立高感染复数（MOI）和低MOI感染细胞模型；设药物高、中、低剂量分别为9，6和3 μg·mL-1，采用蛋白印迹法检测病毒感染和（或）药物处理后72 h细胞Caspase-3的表达水平。结果 正常细胞仅见Caspase-3 P32表达；HCMV感染细胞P32表达显著增加，还出现活性片段P17条带，且高MOI组P17表达明显高于低MOI组；大蒜新素处理低MOI感染细胞P17表达呈上升趋势，P17/P32比值也明显增加；大蒜新素处理高MOI感染细胞P17表达下调，P17/P32比值也显著下降。结论 HCMV无论高或低MOI感染均可诱导细胞凋亡增多，且高MOI诱导作用更强。大蒜新素一方面使低MOI感染细胞凋亡增多，另一方面抑制高MOI感染细胞的凋亡。前者可能有利于细胞清除病毒，后者则可减少细胞损伤而发挥保护作用。大蒜新素对HCMV感染细胞凋亡的调控呈双向性。     

大蒜新素降低鼠巨细胞病毒播散性感染小鼠病毒DNA载量研究

目的用大蒜新素治疗鼠巨细胞病毒（murine cytomegalovirus, MCMV）播散性感染小鼠至慢性期,检测小鼠唾液腺、肝、脾和肾组织内MCMV DNA载量动态变化,在整体水平上观察大蒜新素抗MCMV的长期疗效。方法BALB/c幼鼠60只,腹腔接种MCMV Smith株建立MCMV播散性感染模型,随机分为大蒜新素治疗组和模拟治疗组各30只,接种病毒后24 h,两组分别腹腔注射大蒜新素25 mg•kg-1•d-1和0.9%氯化钠注射液0.2 mL,qd,共120 d。于治疗后1,3,7,14,28,45,60,75,90和120 d,每组随机选择小鼠3只,取唾液腺、肝、脾和肾组织,采用real time PCR法检测组织内MCMV DNA载量。结果模拟治疗组小鼠唾液腺内MCMV DNA载量最高,在治疗后14 d（感染后15 d）达高峰;肝、脾和肾内病毒DNA载量治疗后7 d达峰值;治疗28 d（感染29 d）后,各组织内病毒DNA载量明显减少,尤其是肝、脾和肾组织病毒DNA呈持续低水平（进入慢性期）。与模拟治疗组比较,大蒜新素治疗组治疗后7,14和28 d唾液腺、脾和肾内MCMV DNA 载量显著降低;治疗后7和14 d肝内病毒DNA载量明显降低。进入慢性期后,两组小鼠各脏器病毒DNA载量差异无显著性。结论大蒜新素长期治疗不能完全清除CMV,但在急性感染期（病毒增殖高峰期）能显著降低脏器内病毒DNA载量。     

大蒜新素对实验性急性脑缺血的保护作用

大蒜新素对实验性急性脑缺血的保护作用马晓红１刘天培（南京医科大学药理学教研室，南京２１００２９）大蒜新素（ａｌｉｔｒｉｄｉ，Ａｌ）为葱科植物大蒜中的有效成分，已发现其有降压，降血脂，抗动脉粥样硬化，抗血小板聚集及抗心肌缺血等作用［１，２］．临床上有关...     

大蒜新素对大鼠软脑膜微循环的作用

目的　观察大蒜新素 (allitridi,All)对大鼠软脑膜微循环的影响。方法　用颅骨开窗技术 ,运用微循环图像处理(MCIP)系统 ,实时记录测量大鼠软脑膜血管管径。结果　表面给药All1μmol·L-1～ 10 0 μmol·L-1可使软脑膜微动脉(pialarteriole,PA)扩张 5 %～ 2 8%。在四动脉结扎造成大鼠全脑缺血模型上 ,结扎两侧颈总动脉 2 0min后 ,表面给予All 1μmol·L-1～ 10 0 μmol·L-1可使PA扩张 12 %～ 5 4%。另外 ,缺血前 15min给予All 1 5 ,3 0 ,6 0mg·kg-1iv可改善四动脉结扎所致全脑缺血大鼠的软脑膜微循环 ,扩张软脑膜血管管径。结论　大蒜新素可改善因缺血造成的脑微循环障碍 ,减少因缺血引起的脑组织损伤作用。     

注射用双黄连对人巨细胞病毒感染致肝损伤模型小鼠的保护作用研究

目的:研究注射用双黄连对人巨细胞病毒(HCMV)感染致肝损伤模型小鼠的保护作用。方法:随机将小鼠分为正常对照组、感染模型组、更昔洛韦组和注射用双黄连(高、中、低剂量)组,除正常对照组外,其余各组均接种HCMV5d建立肝损伤模型,分别给予不同药物;10d后各组取眼眶血测定ALT、AST酶活性;颈椎脱臼处死小鼠,取肝脏评价其坏死程度并进行病理学观察。结果:正常对照组ALT、AST活性正常,肝脏未见异常改变;与正常对照组比较,感染模型组血清ALT、AST活性显著升高,肝脏的病理损伤明显;与感染模型组比较,注射用双黄连高、中剂量组肝脏ALT、AST活性显著降低,病理损伤明显减轻,而低剂量组血清ALT、AST活性与感染模型组比较无显著性差异;与感染模型组比较,更昔洛韦组ALT、AST活性显著降低;注射用双黄连高、中剂量组ALT、AST活性与更昔洛韦组比较无显著性差异。结论:注射用双黄连对HCMV感染致肝损伤模型小鼠具有保护作用。     

大蒜新素对脑缺血再灌注大鼠海马的保护作用

目的探讨大蒜新素对脑缺血再灌注海马组织的保护作用与钙转运的关系。方法采用4血管闭塞法制备大鼠全脑缺血再灌注模型,大蒜新素10,20和30mg.kg-1分2次于缺血前30min和再灌注后10min经尾静脉注入,每次注射总量的1/2。再灌注后24h取大鼠海马,甲苯胺蓝染色显微镜下观察海马组织学改变及存活神经元密度;定磷比色法测定Ca2+-转运ATP酶活性;原子吸收法测定钙含量。结果全脑缺血10min再灌注24h时,海马CA1区形态学改变明显,神经元密度明显降低;海马组织Ca2+-转运ATP酶活性降低;组织钙含量显著增加。静脉给予大蒜新素可使缺血再灌注海马组织形态学改变程度明显减轻,存活神经元密度增加,Ca2+-转运ATP酶活性增加,组织钙含量降低。结论大蒜新素对全脑缺血再灌注后海马组织具有明显的保护作用;增加Ca2+-转运ATP酶活性、减少组织钙含量可能是其保护作用的机制之一。     

人巨细胞病毒感染的核酸检测比较及对肝脏损伤的研究

目的：应用实时荧光定量聚合酶链反应（ FQ-PCR）检测疑似人巨细胞病毒（ HCMV）感染的患儿尿液、血液及对应母亲乳汁中HCMV DNA含量,探讨其在HCMV感染诊断中的价值及对肝脏损伤情况。方法应用FQ-PCR方法检测104例疑似HCMV感染患儿新鲜尿液上皮细胞、血液及其对应的母亲乳汁中的HCMV DNA拷贝数,并同时检测患儿血液中天冬氨酸转氨酶（ AST）、丙氨酸转氨酶（ ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）、总胆红素水平。结果尿液、血液标本阳性检出率分别为52．9％（55/104）,24．0％（25/104）,尿液阳性率明显高于血液阳性率,二者差异有统计学意义（P＜0．01）。乳汁标本阳性检出率为81．7％（85/104）,对应患儿血液和/或尿液阳性率为62．4％（53/85）,二者差异有统计学意义（P＜0．05）。且患儿HCMV拷贝数越高,肝脏损伤的可能性越大。结论婴儿尿液中HCMV DNA检测率明显高于血液的检出率,且拷贝数越高,肝功能损伤的可能性就越大。尿液HCMV DNA检测对于诊断婴儿HCMV感染和治疗监测具有重要的价值。肝功能的检测对判断HCMV感染严重程度有一定的参考价值。     

更昔洛韦治疗人巨细胞病毒感染的疗效分析

目的观察更昔洛韦治疗婴儿巨细胞病毒感染的不良反应发生率。方法对本院2010年2月～2011年12月应用更昔洛韦药物治疗婴儿巨细胞病毒感染的9例患儿临床状况进行分析,对患儿进行观察,总结发生不良反应的类型与概率等,分析影响因素。结果更昔洛韦治疗人巨细胞病毒感染,可能造成白细胞、血小板、血红蛋白下降,少数患儿出现消化道不良反应或皮疹、静脉炎等。结论正确认识更昔洛韦的不良反应,在治疗中应加强控制。     

中药"金叶败毒制剂"对人巨细胞病毒感染细胞病变及细胞周期蛋白表达影响的研究

目的研究中药金叶败毒制剂对人巨细胞病毒(HCMV)感染细胞细胞病变及细胞周期蛋白(Cyclins)表达的影响.方法中药金叶败毒制剂、西药更昔洛韦(药物对照组)与HCMV AD169毒株在体外感染的人胚肺成纤维上皮细胞(humanembryo lung fibrobla st,HEL)共同培养,于12小时及48小时分别用光镜、电镜观察致细胞病变(cytopathologiceffect s,CPE)及其超微结构的改变;用Western Blot检测金叶败毒制剂、更昔洛韦干预HCMV169感染组、HCMV1 69感染细胞、正常培养细胞中Cyclin D、E、A、B1的表达.结果 (1)培养12小时,仅病毒感染组在电镜下可观察到细胞肿胀,其余各组未见明显病变;(2)培养48小时,与HCMV169感染组相比,药物干预HCMV169感染HEL两组细胞中,光镜及电镜CPE程度较轻,正常组细胞无CPE;(3)细胞培养12及48小时,病毒组CyclinE、CyclinD的表达为最强,而中药及西药组次之,正常组未见表达,(P均＜0.05),但各组CyclinA、CyclinB均未见明显表达.结论在HEL细胞受HCMV1 69感染导致细胞病变过程中,Cyclins发生了导致细胞周期进程的改变,而中药金叶败毒制剂、西药更昔洛韦能改善HCMV169细胞感染细胞周期的进程,起到延缓CPE的作用.     

新型创面胶对小鼠感染创面治疗效果的研究

目的 探讨含5%三氯生的新型创面胶对小鼠细菌感染创面的治疗作用.方法 检测金黄色葡萄球菌发光强度与细菌菌落数.将18只小鼠制备金黄色葡萄球菌感染创面模型后随机分为创面胶组、新型创面胶组和对照组,每组6只.观察3组金黄色葡萄球菌感染后不同时间细菌发光强度的变化、愈合创面组织学、计算皮肤全层薄/厚比,并记录创面愈合时间.结果 细菌发光强度与菌落数呈高度正相关(r=0.995,P<0.001).新型创面胶组处理3 h后不同时间细菌发光强度低于创面胶组(P<0.05).创面胶组和新型创面胶组皮下炎性细胞明显较对照组密度高.新型创面胶组创面愈合后皮肤薄/厚比与创面胶组比较差异无统计学意义(P>0.05),但两组均大于对照组(P<0.05);新型创面胶组创面愈合时间短于创面胶组(P<0.05).结论 新型创面胶能明显抑制金黄色葡萄球菌感染创面细菌繁殖、减少瘢痕形成,促进创面愈合,但可增加机体局部炎性反应.     

MPTP诱导小鼠肝脏帕金森病样病理变化研究

目的 研究1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine,MPTP)诱导的帕金森病(Parkinson's disease,PD)小鼠模型中肝脏生理功能变化和病理改变.方法 将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组和模型组,皮下注...     

丹参多酚盐治疗多脏器功能不全的实验研究

目的:探讨丹参多酚盐体内治疗多脏器功能不全的作用。方法:健康大耳白兔24只,随机分为正常对照组、内毒素组、丹参多酚盐干预组,每组8只。内毒素组经耳缘静脉静推LPS(1ml/kg),12h后再由耳缘静脉注射一次LPS(1ml/kg),复制SIRS/MODS动物模型;对照组耳缘静脉静推等量生理盐水;丹参多酚盐干预组于0h,12h经耳缘静脉推注LPS(1ml/kg)并于第一次注入内毒素后6h,12h,18h静推丹参多酚盐(50mg/kg)。于24h时间点测定各组动物血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)、血小板活化因子(PAF)。光镜下观察各组动物脏器病理学变化。结果:丹参多酚盐干预组与内毒素组相比,IL-1、IL-6、PAF、TNF-α均较内毒素组有不同程度降低。丹参多酚盐干预组脏器损伤组织学改变较内毒素组明显减轻。结论:丹参多酚盐具有治疗多脏器功能不全的作用,为防治MODS提供了实验依据。     

Perchloroethylene: Effects on Body and Organ Weights and Plasma Butyrylcholinesterase Activity in Mice

Abstract: The effects of continuous and intermittent inhalation of perchloroethylene (PCE) on plasma butyrylcholinesterase (BuChE) activity, organ weights, liver morphology and motor activity in mice (strain NMRI) were tested. PCE exposure increased plasma BuChE activity in a time- and concentration dependent manner in both sexes. The increase was statistically significant at 37 p.p.m. in animals continuously exposed for 30 days. BuChE increased approximately 1.5 times in females and 2.5 times in males after 120 days exposure to 150 p.p.m. After rehabilitation of animals exposed for 30 days to 150 p.p.m., BuChE levels returned to normal. Liver weight also increased in a time and concentration dependent manner. Both sexes exhibited significant liver enlargement at 9 p.p.m. The increase was about 2.3 in females and 1.9 in males after continuous exposure to 150 p.p.m. for 120 days. After rehabilitation (120 days) of animals exposed to 150 p.p.m. for 30 days, a 10% increase still remained. A decrease in body weight gain was seen in both sexes after exposure to concentrations above 75 p.p.m. Female kidney weight was slightly increased. No clear effect on spleen weight could be detected. When the same time-weighted average concentration was used, intermittent exposure for 30 days had similar effects on liver weight and BuChE activity as continuous exposure, even when exposures lasted for only one hour per day. Liver cell morphology was changed after PCE exposure. The alterations could be observed already at 9 p.p.m. but disappeared after rehabilitation.     

Effects of Methylene Chloride on Body and Organ Weight and Plasma Butyrylcholinesterase Activity in Mice

Abstract: Exposure to methylene chloride produced a time and concentration related increase in liver weight. The effect was more prominent in female mice than in male. The activity of plasma butyrylcholinesterase (BuChE) increased even more than the liver weight at corresponding exposures, but only in the males. Fatty infiltration was noticeable after exposure to 75 p.p.m. and was more prominent in the females than in the males. Thirty to 60 days of continuous exposure were required to reach stable maxima. Intermittent exposure was less effective than continuous exposure in producing the effects. Most effects were fully reversible after exposure for both 30 and 90 days if the animals were transferred to a solvent-free environment. However, after exposure for 90 days, BuChE activity in the males did not return to normal within 30 days but after 90 and 120 days free from exposure only slight if any effects on BuChE activity remained.     

青藤碱对TNBS诱导的慢性小鼠结肠炎的治疗作用

摘 要 目的：评价青藤碱对2,4,6 三硝基苯磺酸（TNBS）灌肠引起的Th1细胞介导的小鼠实验性结肠炎的治疗作用,并探讨其作用机制。方法: 为评价青藤碱对结肠炎的治疗作用,将Balb/c 小鼠随机分为乙醇对照组,TNBS模型组,青藤碱低（50 mg·kg^-1）、中（100 mg·kg^-1）、高（200 mg·kg^-1）剂量组,每组10只。为观察青藤碱对TNBS结肠炎的治疗作用,第1剂TNBS给药后7 d开始灌胃给予青藤碱,持续给药21 d。第28天处死动物,观察结肠黏膜的损伤程度, 测定结肠髓过氧化物酶（MPO）活性,ELISA法分别测定结肠炎症细胞因子 （TNF-α、IL-17和IL-23）蛋白水平。结果: 与TNBS模型组比较,青藤碱中、高剂量组的体质量、大体损伤评分及组织学表现均显著改善（P<0.05）,MPO酶活性显著降低（P<0.05）,结肠黏膜中TNF-α 、IL-17和IL-23的蛋白水平均较TNBS组下降（P<0.05）。结论:青藤碱对TNBS诱导的慢性小鼠结肠炎具有治疗作用,作用机制与青藤碱对Th1炎症细胞因子的抑制有关。     

补肾生髓Ⅰ号对小鼠实验性再生障碍性贫血的治疗作用

目的 :研究补肾生髓Ⅰ号治疗再生障碍性贫血的可能机制。方法 :利用补肾生髓Ⅰ号治疗 60Co-γ射线照射后所致的再生障碍性贫血小鼠 ,并观察小鼠外周血细胞计数、骨髓有核细胞数、骨髓GM -CFU -c及小鼠IL -1、IL -2和IL -6活性的变化。结果 :补肾生髓Ⅰ号治疗后 ,再生障碍性贫血小鼠的外周血细胞计数、骨髓有核细胞数及骨髓GM -CFU -c显著增高 ,小鼠IL-1和IL-6活性明显增加 ,IL -6水平增高至接近正常 ,且与IL -1呈显著正相关 (r=0.904) ;治疗组IL -2水平虽有所下降但无统计学意义。结论 :补肾生髓Ⅰ号可通过提高外周血三系及骨髓有核细胞数 ,促进骨髓GM -CFU -c的形成 ,并通过调节免疫活性因子IL -1、IL -2和IL -6的活性 ,进而促进骨髓造血重建。