内皮素对大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钾通道的影响

目的观察内皮素(ET-1)对大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜电压门控钾通道(K_V)的作用。方法用全细胞膜片钳记录方法研究ET-1对膜电位(E_m)、膜电容(C_m)、电压门控钾电流(IK_V)的影响。结果ET-1可引起PASMCs去极化,并抑制IK_V,抑制IK_V时间明显早于其对E_m变化的影响,ET-1对IK_V的影响呈可逆性和浓度依赖性,在有钙的环境中,ET-1对IK_V峰电流的抑制率明显高于无钙时。结论ET-1可浓度依赖性的抑制IK_V,使常氧大鼠PASMCs去极化,且ET-1对IK_V的抑制作用早于对E_m的影响,这些作用不完全依赖于钙的参与,但钙可加强ET-1对IK_V的抑制作用。     

粉防己碱对肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的双重作用

目的：研究粉防己碱（Ｔｅｔ）对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾（Ｋｃａ）通道的影响。方法 内面朝外膜片箝单通道记录法,结果：Ｔｅｔ７．５和１５μｍｏｌ．Ｌ＾－１使Ｋｃａ的开放概率由０．２５１±０．０１２增加到０．３４０±０．０１３和０．４１５±０．０１１（Ｐ〈０．０１）,关闭时间由（６１±１５）ｍｓ缩短到（３３±１０）和（２８±１１）ｍｓ（Ｐ〈０．０１）Ｔｅｔ３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１使开放概率和开放时间     

内皮素对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞膜钾通道活性的影响

目的观察内皮素(ET-1)对慢性低氧大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)膜电压门控钾通道(K_V)活性的影响。方法将12只Wistar大鼠随机分为对照组和慢性低氧组，每组6只。用全细胞膜片钳记录方法研究ET-1对两组大鼠PASMCs膜电位(E_m)、膜电容(C_m)及电压门控钾电流(IK_V)的影响。结果ET-1可引起两组大鼠PASMCs去极化，且对两组大鼠IK_V均有明显的浓度依赖性抑制作用。在慢性低氧组，高浓度ET-1对IK_V的抑制作用强于对照组。结论低氧并未改变ET-1引起PASMCs去极化及浓度依赖性抑制IK_V的特性，且慢性低氧可能改变了PASMCs对ET-1的敏感性，内皮素和低氧对PASMCs IK_V的抑制作用有协同性。     

钩藤碱对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的影响

用膜片钳单通道记录法研究钩藤碱(Rhy)对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾通道(K_Ca)的影响.结果：Rhy 30, 45和60 μmol·L^-1缩短通道的开放时间, 但浓度依赖性增加K_Ca开放概率,Rhy 15, 30, 45和60 μmol·L^-1使开放概率由加药前的0.085±0.005分别增加到0.176±0.011, 0.315±0.009, 0.485±0.016和0.761±0.012(x±s, 均P<0.01).说明Rhy有增加肺动脉平滑肌细胞K_Ca开放作用.     

钾通道阻滞剂四乙基铵敏感性钾电流在肺高压大鼠肺动脉平滑肌细胞中的变化

目的研究大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)中电压依赖性钾通道(voltagedepending potassium channel,K_V)电流在肺高压(pulmonary hypertension,PH)中的变化,及钾通道阻滞剂四乙基铵(tetraethylammonium,TEA)对K_V电流的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录PASMCs的K_V电流,观察PH大鼠中K_V电流的变化,以及TEA对K_V的影响。结果野百合碱(monocrotaline,MCT)、慢性低氧(chronic hypoxia,CH)明显减小了大鼠PASMCs上记录到的K_V电流密度;TEA干预能够明显降低正常和PH大鼠PASMCs的K_V电流,并且TEA对K_V电流的抑制作用在PH大鼠中明显减小。结论在CH、MCT诱导的两种PH大鼠模型中,PASMCs的K_V开放程度被明显抑制,而且其对应的TEA敏感性K_V电流明显减小。     

粉防己碱对大鼠肺动脉平滑肌细胞小电导钙激活钾通道的作用

目的　研究粉防己碱 (Tet)对大鼠肺动脉平滑肌细胞小电导钙激活钾通道 (SKCa)的作用。方法　内面朝外膜片箝单通道记录法。结果　Tet 7 5 μmol·L-1对电导值为 10pS的SKCa无明显影响 ,15 μmol·L-1可增加SKCa开放的概率 ,改变通道的开放和关闭模式 ,30 μmol·L-1降低通道的开放概率 ,通道开放以短暂簇状为主。结论　Tet对肺动脉平滑肌SKCa的作用与Tet的浓度有关 ,合适浓度下可增加通道的开放 ,K+ 外流增多 ,与Tet降低肺动脉张力有关。     

葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道电流的影响

<正>葛根素是从豆科植物野葛或甘葛根的干燥根中提取的单体,其化学名为8-β-D-葡萄吡喃糖-4,7-二羟基异黄酮。据研究报道,葛根素具有多种药理学活性,包括降低血压[1]、舒张大鼠冠状动脉[2]、改善急性心肌缺血[3]、清除氧自由基[4]等,但关于葛根素对大鼠肾动脉的作用却未见报道。本实验主要研究葛根素对大鼠离体肾动脉的肌源性作用,葛根素对大鼠肾动脉血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BKCa)电流的作     

血管平滑肌的ATP敏感钾通道

ＡＴＰ敏感钾通道（ＫＡＴＰ）是一类较广泛分布的内向整流钾通道。在生理状态及某些病理条件下ＫＡＴＰ参与血管张力的调节。ＫＡＴＰ活性受多种因素的调控,胞内二磷酸核苷酸（ＮＤＰｓ）、钾通道开放剂（ＫＣＯｓ）等可激活通道,而ＡＴＰ和硫脲类药物则特异性抑制通道的开放。分子生物学研究证明ＫＡＴＰ由Ｋｉｒ６０和硫脲类受体（ＳＵＲ）共同组成,Ｋｉｒ６０构成Ｋ＋可穿透的通道核心,ＳＵＲ受体构成通道的调节单位。血管平滑肌中的ＫＡＴＰ是由Ｋｉｒ６１和ＳＵＲ２Ｂ组成的四聚体结构。但两种亚单位如何联结成有功能的多聚体还需进一步的证明。     

Kv42钾通道mRNA在大鼠血管平滑肌中的表达

自 8 0年代末Ｌｉｌｙ实验组和Ｐｏｎｇｓ实验组第一次发现ＳｈａｋｅｒＫｖ钾通道以来 ,目前已发现 9大类Ｋｖ钾通道。Ｋｖ4 2亚型可编码瞬间外向钾电流 (Ｉｔｏ) ,此电流是动作电位负极化早期外向电流的主要成分 ,主要调节静息膜兴奋性 ,减慢去极化速度 ,延缓动作电位的产生 ,且该通道亚型广泛存在于心脏和中枢神经系统中 ,Ｋｖ 4 2是否存在于血管平滑肌中目前国内外未见报道 ,因此有必要在血管平滑肌中进行研究。本文应用ＲＮａｓｅ保护实验 (ＲＮａｓｅＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＡｓｓａｙ ,ＲＰＡ)研究大鼠主动脉平滑肌中Ｋｖ 4 2钾通道的…     

不同钾通道阻滞剂对大鼠血管平滑肌的影响

目的：研究几种不同钾通道阻滞剂对血管平滑肌的影响。方法：大鼠离体胸主动脉条张力记录法。结果：BaCl₂,4-AP,CsCl和TEA均能浓度依赖的引起大鼠离体胸主动脉条收缩, 其中BaCl₂引起血管收缩的作用明显强于其它3种化合物,EC₅₀值为90　μmol.L^-1。而E-4031、索他洛尔和格列本脲对血管张力没有影响;此外E-4031、索他洛尔和4-AP还可抑制去甲肾上腺素引起的血管收缩。结论：E-4031、索他洛尔和格列本脲在正常治疗浓度下对血管平滑肌的张力影响不大;并提示不同的钾通道阻滞剂其组织选择性存在明显差异。     

埃他卡林对长期低氧大鼠肺动脉平滑肌KATP mRNA的影响

目的 :研究慢性低氧对大鼠肺动脉平滑肌ATP敏感钾通道 (KATP)mRNA表达的影响及新型KATP开放剂盐酸埃他卡林的作用。方法 :SD雄性大鼠 16只随机分成对照组、低氧组、低剂量治疗组 (盐酸埃他卡林 0 .75mg·kg-1·d-1,ig)、高剂量治疗组(盐酸埃他卡林 1.5mg·kg-1·d-1,ig)。将低氧组和治疗组大鼠放入常压低氧舱制备动物模型 ;采用RT PCR技术 ,分析各组肺动脉主干平滑肌KATP mR NA表达。结果 :低氧组SUR2mRNA水平显著低于正常组 ,高剂量治疗组SUR2显著高于低氧组 ,各组Kir 6 .1没有显著差异。结论 :慢性低氧抑制KATP 通道表达 ,而盐酸埃他卡林能提高表达 ,可从肺动脉高压发病机制上理解该药物治疗价值。     

盐酸埃他卡林对动脉平滑肌钾电流的影响

目的　探讨抗高血压新药盐酸埃他卡林对动脉平滑肌细胞钾电流的作用。方法　分离大鼠动脉平滑肌细胞 ,用膜片钳全细胞记录技术记录细胞钾电流 ,通过浴槽内给药 ,观察盐酸埃他卡林对钾电流的影响。结果　盐酸埃他卡林(0 1、1、10、10 0 μmol·L-1)均可明显引起正常血压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的[(118 6± 15 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =6 ]、[(10 3 9±5 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =5 ]、[(132 7± 2 3 9) % ,P <0 0 1vscontrol,n =6 ]、[(15 0 1± 2 5 1) % ,P <0 0 1vscontrol,n =7];盐酸埃他卡林 (1、10、10 0 μmol·L-1)均可引起肾性高血压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度分别增强为初始电流强度的 [(12 1 5± 4 2 ) % ,P <0 0 1vscon trol,n =7]、[(132 2± 6 7) % ,P <0 0 1vscontrol,n =8]、[(114 2± 7 7) % ,P <0 0 1vscontrol,n =8];盐酸埃他卡林 (10 μmol·L-1)可引起肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌外向钾电流I U曲线上移 ,盐酸埃他卡林作用后 5min内细胞外向钾电流强度为初始电流强度的 [(80 6± 10 1) % ,n =5 ],同时间对照     

西地那非通过上调电压依赖性钾通道抗低氧刺激的人肺动脉平滑肌细胞增殖

目的探讨西地那非抗低氧刺激的人肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)增殖的机制与电压依赖性钾通道(voltage-dependent potassium channels,Kv)及环鸟甘酸依赖性蛋白激酶(cGMP-dependent protein kinase,PKG)的关系。方法采用MTT法及细胞免疫荧光法等检测细胞增殖情况;应用膜片钳技术记录低氧刺激PASMCs前后及西地那非或KT-5823干预前后的Kv通道电流,运用Kv1.5抗体透析细胞后的Kv通道电流;应用siRNA干扰技术沉默Kv1.5基因。结果低氧下西地那非组的细胞增殖水平较低氧对照组明显降低;西地那非反转了低氧对细胞K +通道电流,尤其Kv1.5通道电流的降低作用;siRNA组的Kv1.5蛋白表达明显减低,沉默Kv1.5通道基因逆转了西地那非抗低氧刺激的细胞增殖作用;PKG抑制剂KT-5823阻断了西地那非抗低氧刺激的细胞增殖作用,并且反转了西地那非对低氧下的Kv通道电流的上调作用。 结论 西地那非可通过上调Kv通道亚型主要是Kv1.5通道,抑制低氧刺激的人PASMCs增殖,且可能与PKG有关。     

Dual effects of tetrandrine on calcium-activated potassium channels in pulmonary artery smooth muscle cells

目的：研究粉防己碱（Ｔｅｔ）对大鼠肺动脉平滑肌细胞钙激活钾（ＫＣａ）通道的影响．方法：内面朝外膜片箝单通道记录法．结果：Ｔｅｔ７５和１５μｍｏｌ·Ｌ－１使ＫＣａ的开放概率由０２５１±００１２增加到０３４０±００１３和０４１５±００１１（Ｐ＜００１）．关闭时间由（６１±１５）ｍｓ缩短到（３３±１０）和（２８±１１）ｍｓ（Ｐ＜００１）．Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ－１使开放概率和开放时间分别降低到（０１１４±０００８）和（１４７±００９）ｍｓ（Ｐ＜０．０１）．结论：Ｔｅｔ对大鼠肺动脉平滑肌细胞ＫＣａ通道有双重作用．     

四乙铵对正常及肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞外向钾电流作用的比较

以全细胞膜片钳制技术观察了正常及慢性常压低氧肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞外向钾电流，并进行了四乙铵(TEA)对两种动脉外向钾电流作用的量效关系比较. 结果表明：将细胞膜电位钳制在-50 mV，当指令电位大于-50 mV时，可以记录到电压依赖性的外向钾电流，且慢性常压低氧肺动脉高压时该电流较正常时为小；当指令电位为+70 mV，TEA 降低肺动脉高压大鼠外向钾电流的量效曲线较正常时右移.     

海兰地嗪对正常及肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞延迟整流钾电流作用的比较

The delayed rectifier potassium currents of normal and chronic normobaric hypoxic pulmonary hypertensive rats and the effect of hernandezine on them were observed. The results showed that when cell membrane potential was held at -50 mV and command potential was larger than -50 mV, potential and time-dependent delayed rectifier potassium currents were recorded, and the delayed rectifier potassium current of pulmonary hypertensive rats was smaller than that of normal rats. When command potential was +70 mV, the effect of hernandezine (0.1 mmol·L^-1) on the increased delayed rectifier potassium currents of pulmonary hypertensive rats (31±13%) was smaller than that of normal rats (59±13%).     

肺动脉高压模型大鼠肺动脉平滑肌细胞内钙的改变

目的分析肺动脉高压时肺动脉平滑肌细胞Ryanod-ine受体[Ca2+]i释放功能的改变。方法腹腔注射野百合碱建立大鼠肺动脉高压模型,原代培养肺动脉平滑肌细胞,Fura-2/AM负载培养细胞,荧光测钙技术测量Ryanodine受体激动剂对[Ca2+]i变化的影响。结果10nmol.L-1Ry-anodine使对照组[Ca2+]i平均增加(93.31±12.41)nmol.L-1,使PAH组[Ca2+]i平均增加(141.71±13.59)nmol.L-1。两组样本[Ca2+]i增加的数值差异有显著性(P<0.01);10mmol.L-1Caffine使对照组[Ca2+]i平均增加(149.02±13.02)nmol.L-1,使PAH大鼠PASMC的[Ca2+]i平均增加(191.2±21.26)nmol.L-1,两组样本[Ca2+]i数值的变化差异有显著性(P<0.01)。结论肺动脉高压大鼠原代培养的肺动脉平滑肌细胞对Ryanodine受体激动剂的敏感性增强,提示肺动脉高压时Ryanodine受体释放[Ca2+]i的功能发生了异常改变。     

丙泊酚抑制去甲肾上腺素诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞内游离钙浓度升高作用的机理

用荧光分光光度法及同位素放射免疫分析法检测丙泊酚(30-300 μmol·L^-1)影响大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMC)内游离钙离子浓度(［Ca²⁺］_i)与肌醇-1,4,5-三磷酸(IP₃)合成作用,以探讨丙泊酚舒张肺动脉平滑肌的作用机理.结果表明,与丙泊酚共同培养72 h,对PASMC ［Ca²⁺］_i 基础水平无明显影响,但可浓度依赖性抑制去甲肾上腺素(NE 3 μmol·L^-1)引起的［Ca²⁺］_i升高作用;当细胞外液无钙或存在钙通道阻滞剂维拉帕米(30 μmol·L^-1)时,丙泊酚抑制NE升高［Ca²⁺］_i作用被增强;丙泊酚还可浓度依赖性抑制NE促进 IP₃合成作用. 结果提示丙泊酚舒张血管平滑肌作用与抑制IP₃介导的细胞内钙释放密切相关.