HPLC法同时测定春血安胶囊中8种成分的含量

目的建立能同时测定春血安胶囊中毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B_1、肉桂酸、桂皮醛、泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B含量的HPLC法。方法采用Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-1 mL·L~(-1)磷酸,梯度洗脱;流速:0.8 mL·min~(-1);检测波长:330(检测毛蕊花糖苷和焦地黄苯乙醇苷B_1),280(检测肉桂酸和桂皮醛)和208 nm(检测泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B)。结果 8种成分分别在12.68～253.60,4.96～99.20,0.89～17.80,14.07～281.40,0.66～13.20,1.38～27.60,1.14～22.80,4.46～89.20μg·mL~(-1)范围内线性关系良好(r≥0.999 1);平均回收率分别为99.39%,98.55%,97.14%,100.01%,96.94%,98.78%,97.43%,99.20%;RSD值分别为0.91%,1.43%,1.21%,0.84%,1.18%,1.33%,1.05%,0.79%。结论该方法操作简便、重复性好,可用于春血安胶囊的质量控制。     

HPLC—ELSD法测定泽泻药材与饮片中2种有效成分的含量

目的：建立测定泽泻药材与饮片中24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B含量的HPLC—ELSD方法。方法：Alltima C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：甲醇-水（84：16）；流速：0．5mL·min^-1；蒸发光散射检测器漂移管温度为60℃，雾化气体流速为1．4L·min^-1。结果：24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B的线性范围分别为4．2～105μg·mL^-1（r=0．9980），4．6～115μg·mL^-1（r=0．9991），平均回收率分别为99．9％（RSD小于1．9％），100．7％（RSD小于1．0％）。结论：该方法简便、准确、重复性好，可作为测定泽泻药材与饮片中24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B的有效方法。     

泽泻有效成分在模拟人体胃肠道环境中的转化研究

目的:利用高效液相色谱法研究了在模拟人体胃肠道环境中泽泻调酯活性成分泽泻醇类化合物23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A的稳定性。方法:采用色谱柱:Lichrospher C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(80∶20),流速:0.8 mL.min-1,检测波长:210 nm,柱温:30℃。结果:23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A在模拟胃酸性条件下不稳定,易发生转化。23-乙酰泽泻醇B的主要转化产物为泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和一未知物。24-乙酰泽泻醇A的主要转化产物为泽泻醇A和一未知物。23-乙酰泽泻醇B、24-乙酰泽泻醇A在模拟体内肠道环境中稳定,不发生明显转化。结论:胃蛋白酶可能并非引起分解的主要因素。该结果可为中药泽泻剂型研究、泽泻醇类化合物的入血成分及调脂机制提供参考,并提示泽泻醇A可能也应作为中药泽泻的另一质量控制指标。     

高效液相色谱法同时测定胃特安片中4种成分含量

目的 建立同时测定胃特安片中辛弗林、橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B和23-乙酰泽泻醇C含量的高效液相色谱法。方法 色谱柱为Shimadzu Intersil ODS-3柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-含0.1%庚烷磺酸钠及0.1%冰醋酸的磷酸二氢钾溶液（梯度洗脱）,流速为1.0 mL/min,检测波长分别为275 nm（辛弗林）、283 nm（橙皮苷）、208 nm(23-乙酰泽泻醇B)和246 nm(23-乙酰泽泻醇C),柱温为室温,进样量为20μL。结果 辛弗林、橙皮苷、23-乙酰泽泻醇B、23-乙酰泽泻醇C的质量浓度分别在4.142～66.272μg/mL、4.584～73.352μg/mL、3.602～57.632μg/mL、2.208～35.328μg/mL范围内与峰面积线性关系良好（r≥0.999 6,n=6）;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于4.50%(n=6);平均加样回收率分别为100.55%,99.18%,98.91%,99.14%,RSD分别为2.82%,2.02%,1.64%,2.24%(n=6)。每片胃特安片分别含辛弗林、橙皮苷...     

高效液相色谱法测定五苓滴丸中23-乙酰泽泻醇B的含量

目的采用高效液相色谱(HPLC)法测定五苓滴丸中23-乙酰泽泻醇B的含量。方法色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水(70∶30);流速:1.0 mL/min;检测波长210 nm;柱温:30℃。结果 23-乙酰泽泻醇B在2.9~145.0μg/mL浓度范围内与峰面积具有良好的线性关系(r=0.999 9),平均加样回收率为97.86%,RSD=1.29%。结论 HPLC法简便、准确、专属性高,可用于五苓滴丸的质量控制。     

泽泻提取物三萜类成分含量测定研究

目的:建立紫外-可见分光光度法和高效液相色谱法测定泽泻提取物中三萜类成分含量。方法:采用紫外-可见分光光度法,以5%香草醛(用冰醋酸配制)-高氯酸显色,在555 nm波长处测定吸光度,计算泽泻提取物总三萜含量;应用高效液相色谱法同时测定泽泻提取物中12个三萜类成分,采用Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-5%甲醇水为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,检测波长208 nm。结果:紫外-可见分光光度法测定总三萜含量,以23-乙酰泽泻醇B计,质量浓度在5.9~15.6μg·m L-1范围内与吸光度值呈良好线性关系(r=0.999 1),平均加样回收率99.05%,RSD为2.3%;高效液相色谱法测定12个泽泻三萜类成分含量,在考察的浓度范围内,线性关系良好(r>0.999 0),回收率均在95.89%~99.33%范围内,RSD为2.0%~3.4%。泽泻提取物中12个三萜类成分的含量:泽泻醇A 5.71%~5.95%、泽泻醇B 3.47%~3.99%、泽泻醇C 2.53%~2.97%、泽泻醇G 3.07%~3.93%、泽泻醇L 3.65%~3.99%、23-乙酰泽泻醇A 2.39%~3.02%、23-乙酰泽泻醇B 10.56%~11.32%、23-乙酰泽泻醇C 9.44%~9.86%、16-羰基-23-乙酰泽泻醇A 0.63%~3.14%、16-羰基-24-乙酰泽泻醇A 1.08%~1.21%、11-去氧泽泻醇B 2.29%~2.85%、24-乙酰泽泻醇A 4.04%~5.02%。结论:经方法学验证,本文建立的紫外-可见分光光度法可以用于检测泽泻提取物中总三萜含量,高效液相色谱法可用于检测泽泻提取物中12个泽泻三萜类成分含量。     

基于高效液相色谱波长切换法对茵陈五苓糖浆中6种成分的质量控制研究

目的建立HPLC波长切换法同时测定茵陈五苓糖浆中滨蒿内酯、金丝桃苷、异槲皮苷、苍术素、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B含量。方法采用Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相,进行梯度洗脱;流速0.9 mL·min~(-1);检测波长:345 nm(滨蒿内酯、金丝桃苷、异槲皮苷和苍术素)、208 nm(24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B);柱温30℃。结果滨蒿内酯、金丝桃苷、异槲皮苷、苍术素、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B的线性范围分别为17.63~440.75μg·mL~(-1)(r=0.9993)、4.89~122.25μg·mL~(-1)(r=0.9998)、2.47~61.75μg·mL~(-1)(r=0.9996)、9.66~241.50μg·mL~(-1)(r=0.9991)、1.95~48.75μg·mL~(-1)(r=0.9999)、3.37~84.25μg·mL~(-1)(r=0.9995),平均加样回收率均大于95%,RSDs<2.2%。结论本实验建立的茵陈五苓糖浆的多成分测定方法可靠,重复性好,可用于茵陈五苓糖浆的质量控制。     

HPLC法测定参芪消渴颗粒中尿囊素、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、茯苓酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷

目的建立参芪消渴颗粒中尿囊素、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、茯苓酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷同时测定的方法。方法采用高效液相色谱法,使用依利特Hypersil ODS 2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;测定波长:0~14 min在224 nm波长下尿囊,14~20 min在208 nm波长下检测24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B,20~26 min在210 nm波长下检测茯苓酸,26~36 min在260 nm波长下检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷;体积流量:0.9 m L/min;柱温:30℃;进样量:10μL。结果 5个成分的线性范围分别为9.43~188.60μg/m L(r=0.999 4),3.75~75.00μg/m L(r=0.999 7),4.06~81.20μg/m L(r=0.999 9),4.82~96.40μg/m L(r=0.999 5),3.79~75.80μg/m L(r=0.999 8)。平均回收率分别为97.99%、99.34%、98.20%、96.57%、98.98%,RSD值分别为0.62%、1.14%、1.28%、0.79%、0.93%。结论所建方法简便、可靠、准确度高,可有效地控制参芪消渴颗粒的质量。     

反相高效液相色谱法测定泽泻提取物中23-乙酰泽泻醇B含量

目的 利用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定泽泻提取物中23-乙酰泽泻醇B含量.方法 利用RP-HPLC检测,选用Kromasil 100-5C18(250 mm×4.6 mm)色谱柱,以乙腈-水为流动相等梯度洗脱,流速1ml·min-1;检测波长208 nm.结果 23-乙酰泽泻醇B在进样量范围内与峰面积线性关系良好,仪器精密度和稳定性RSD均小于2％,平均回收率在99％～101％(n=3).测定了5批提取物中23-乙酰泽泻酐B,平均的含量为2.550 mg/g.结论 该方法快速、准确、重复性好,可对泽泻指标性成分23-乙酰泽泻醇B进行定量,从而控制提取物质量.     

HPLC法测定痛风定胶囊中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、杯苋甾酮、泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B

目的建立高效液相色谱法同时测定痛风定胶囊中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、杯苋甾酮、泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B。方法采用HPLC法,Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈–0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长:240nm(0～27min检测龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和杯苋甾酮)和208nm(27～55min检测泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B);体积流量:1.0 mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL。结果龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、杯苋甾酮、泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B分别在45.84～1 146.00、9.02～225.50、12.86～321.50、4.69～117.25、0.88～22.00、0.59～14.75、0.77～19.25、0.66～16.50、3.37～84.25μg/mL与峰面积线性关系良好(r≥0.999 1),平均加样回收率分别为100.03%、99.55%、99.78%、98.56%、97.98%、96.95%、98.21%、97.75%、100.06%,RSD值分别为0.61%、0.95%、0.71%、1.17%、1.63%、1.09%、1.73%、1.20%、0.84%。结论所建立的方法结果准确,操作便捷,重复性好,为全面评价痛风定胶囊的整体质量提供了参考依据。     

A UFLC/MS/MS method for simultaneous quantitation of alisol A and alisol B 23-acetate from Alisma orientale (Sam.) Juz. in rat plasma

A sensitive and reliable ultra fast liquid chromatography tandem mass spectrometry (UFLC-MS/MS) method has been developed and validated for simultaneous quantitation of alisol A and alisol B 23-acetate from Alisma orientale (Sam.) Juz. in rat plasma using diazepam as an internal standard (IS). The plasma samples were extracted by liquid–liquid extraction with methyl tert-butyl ether and separated on a Venusil MP C18 column (100 mm × 2.1 mm, 3.0 mm) (Venusil, China) using gradient elution with the mobile phase consisting of methanol and 0.1% acetic acid in water at a flow rate of 0.4 ml/min. The two analytes were monitored with positive electrospray ionization by multiple reaction monitoring mode (MRM). The lower limit of quantitation was 5.00 ng/ml for alisol A and 5.00 ng/ml for alisol B 23-acetate. The calibration curves were linear in the range of 5.00–2500 ng/ml for alisol A and 5–2500 ng/ml for alisol B 23-acetate. The mean extraction recoveries were above 63.8% for alisol A and 68.0% for alisol B 23-acetate from biological matrixes. Both intra-day and inter-day precision and accuracy of analytes were well within acceptance criteria (15%). The validated method was successfully applied to the pharmacokinetic study of alisol A and alisol B 23-acetate in rat plasma after oral administration of alcohol extract of Alismatis Rhizoma.     

泽泻药材的质量标准研究Ⅰ—泽泻中2种泽泻醇的HPLC测定法

采用高效液相色谱法以乙腈－水（６５：３５）为流动相，测定了１５种产地泽泻药材及１３种市售饮片中泽泻醇Ａ２４－乙酸酯、泽泻醇Ｂ２３－乙酸酯的含量，本法简便，灵敏，重现性好。     

Chemical modification of alisol B 23-acetate and their cytotoxic activity

The twelve-protostane analogues were synthesized from alisol B 23-acetate and assessed for their in vitro antitumor activity against six different human and murine tumor cell lines. Of the compounds synthesized, 23S-acetoxy-24R(25)-epoxy-11beta,23S-dihydroxyprotost-13(17)-en-3-hydroxyimine (12) exhibited significant cytotoxic activities against A549, SK-OV3, B16-F10, and HT1080 tumor cells with ED50 values of 10.0, 8.7, 5.2, and 3.1 microg/ml, respectively. Furthermore, 23S-acetoxy-13(17),24R(25)-diepoxy-11beta-hydroxyprotost-3-one (5), 13(17),24R(25)-diepoxy-11beta,23S-dihydroxyprotostan-3-one (6), 24R,25-epoxy-11beta,23S-dihydroxyprotost-13(17)-en-3-one (7), and 11beta,23S,24R,25-tetrahydroxyprotost-13(17)-en-3-one (9) showed moderate cytotoxic activities against B16-F10 and HT1080 tumor cells. These results mean that a hydroxyimino group at C-3 position in the protostane-type terpene enhances cytotoxic activity.     

基于HPLC-QAMS法的清肝降压胶囊中10个成分同时定量测定研究

目的:建立同时测定清肝降压胶囊中10个成分的高效液相色谱一测多评(HPLC-QAMS)方法,并验证其准确性和可行性。方法:采用Phenomsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃;检测波长:320 nm(检测2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)、250 nm(检测3'-羟基葛根素、葛根素和3'-甲氧基葛根素)、208 nm(检测泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A和23-乙酰泽泻醇B)和270 nm(检测隐丹参酮和丹参酮ⅡA)。以葛根素为内参物,建立其与其他9种成分的相对校正因子(RCF),并计算含量,实现一测多评;同时采用外标法(ESM)测定清肝降压胶囊中10个成分的含量,比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异。结果:10个成分的线性范围分别为8.136~162.7、7.488~149.8、30.54~610.9、14.11~282.2、0.3680~7.360、0.7040~14.08、0.4320~8.640、3.056~61.12、0.5120~10.24、0.8480~16.96μg·mL^-1,r为0.9992~0.9999;平均回收率分别为98.5%、98.0%、100.0%、100.0%、97.8%、98.5%、97.0%、99.1%、99.3%和100.1%,RSD为1.3%、1.1%、0.96%、0.64%、1.6%、1.5%、1.2%、0.83%、1.1%和0.72%;葛根素与2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、3'-羟基葛根素、3'-甲氧基葛根素、泽泻醇F、泽泻醇A、24-乙酰泽泻醇A、23-乙酰泽泻醇B、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的相对校正因子分别为1.1551、1.1262、1.2760、0.9643、0.8959、0.8593、1.3662、0.8399和0.9663;一测多评法计算值和外标法实测值之间无明显差异。结论:所建立的方法简便、准确,可用于清肝降压胶囊的质量评价研究。     

23-乙酰泽泻醇B对2型糖尿病小鼠血糖的影响

目的探讨23-乙酰泽泻醇B是否有治疗2型糖尿病的潜能。方法通过腹腔注射链脲佐菌素和烟酰胺建立2型糖尿病小鼠模型。灌胃罗格列酮或23-乙酰泽泻醇B 3周后,测定2型糖尿病小鼠血糖值,次日进行口服葡萄糖耐受试验(OGTT)。采用葡萄糖荧光示踪剂,测定23-乙酰泽泻醇B对葡萄糖吸收的影响。采用3T3-L1前脂肪细胞分化模型,测定其对分化的影响。结果分别每天灌胃阳性药罗格列酮10 mg·kg~(-1)、23-乙酰泽泻醇B(5、10、20 mg·kg~(-1)),连续灌胃给药3周后,降低了2型糖尿病小鼠血糖值,一定程度改善OGTT过程中胰岛素抵抗。在30 mmol·L~(-1)高糖条件下,23-乙酰泽泻醇B促进了脂肪细胞对胰岛素刺激的葡萄糖吸收;23-乙酰泽泻醇B(1、10μmol·L~(-1))促进3T3-L1前脂肪细胞的分化过程。结论 23-乙酰泽泻醇B降低2型糖尿病小鼠血糖,促进前脂肪细胞分化,促进脂肪细胞吸收葡萄糖,但作用机制仍需进一步探索。     

Effects of methanol extract of<Emphasis Type="Italic">alisma orientale</Emphasis> rhizome and its major component,alisol B 23-acetate,on hepatic drug metabolizing enzymes in rats treated with bromobenzene

In the course of screening for hepatoprotective agents from natural products, the effects of the methanol extract (ME) of the rhizome of Alisma orientale (Alismataceae) and its major component, alisol B 23-acetate (ALB) on hepatic lipid peroxidation and drug-metabolizing enzymes were evaluated in rats intoxicated with bromobenzene (BB). Pretreatment with ME and ALB had no effect on hepatic antioxidant enzymes such as glutathione reductase and a-glutamylcysteine synthetase. ME and ALB had also no effect on the reduction in glutathione content caused by BB. In contrast, ME recovered the BB-induced decrease in epoxide hydrolase and glutathione S-transferase, enzymes that remove toxic epoxides. ME also attenuated the BB-induced increase in aminopyrine N-demethylase and aniline hydroxylase, enzymes that produce toxic intermediates. This effect was greater than that seen with ascorbic acid, which was used as a positive control. ALB had similar effects on the activities of antioxidant enzymes to ME, and may be partly responsible for the effects of ME.