碲化镉量子点对血管平滑肌细胞的损伤作用

目的观察碲化镉量子点(CdTe QD)在体外对大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)的损伤作用。方法CdTe QD(0.01~100 mg·L~(-1))与原代培养的大鼠胸/腹主动脉平滑肌细胞共孵育24 h,MTT法检测CdTe QD对细胞存活的抑制;钙黄绿素乙酰甲酯(calcein-AM)荧光染色观察CdTe QD对VSMC细胞活性的影响;DCFH-DA和JC-1染色、流式细胞术检测CdTe QD作用后细胞内活性氧(ROS)含量和线粒体膜电位的变化;流式细胞术检测细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测BCL-2和BAX蛋白表达变化。结果 MTT结果显示,CdTe QD 0.01~100 mg·L~(-1)作用VSMC细胞24 h,细胞存活率降低(P<0.01),24 h IC_(50)值为25.60 mg·L~(-1)。Calcein-AM荧光检测发现,CdTe QD 0.1~25 mg·L~(-1)作用后,VSMC细胞活性下降。DCFH-DA染色结果显示,CdTe QD 0.1~25 mg·L~(-1)使细胞内ROS逐渐增加(P<0.05,P<0.01);JC-1染色结果表明,VSMC线粒体膜电位呈浓度依赖性降低(r=0.903,P<0.01)。Western蛋白印迹结果表明,CdTe QD诱导抗凋亡蛋白BCL-2表达显著降低(P<0.01),促凋亡蛋白BAX表达显著上升(P<0.01);流式细胞术FITC-AnnexinⅤ染色结果显示,CdTe QD 0.1~25 mg·L~(-1)作用24 h能显著促进VSMC细胞凋亡(P<0.05,P<0.01)。结论CdTe QD可诱导VSMC细胞凋亡,其机制可能与胞内ROS含量上升和线粒体介导的凋亡通路激活相关。     

银杏二萜内酯葡胺注射液通过激活Akt/Nrf2通路抑制缺糖缺氧诱导的SH-SY5Y细胞的氧化应激损伤

目的探讨银杏二萜内酯葡胺注射液(DGMI)抑制缺糖缺氧(OGD)诱导人源性神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)的氧化应激损伤及其机制。方法 SH-SY5Y细胞随机分为正常细胞对照组,OGD模型组,OGD 4 h+DGMI 25 mg·L~(-1)组,OGD 4 h+银杏叶提取物注射液(EGBLI)25 mg·L~(-1)组,OGD 4 h+银杏内酯注射液(LGBI)25 mg·L~(-1)组。药物作用6 h后,CCK-8法检测细胞存活,水溶性四唑盐1(WST-1)显色法法检测SOD活性,荧光探针法(DCFH-DA)检测ROS生成,Western蛋白印迹法检测细胞内血红素加氧酶(HO-1)、醌氧化还原酶(Nqo1)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、细胞内核因子E2相关因子2(Nrf2)、磷酸化Nrf2(p-Nrf2)的表达;OGD 4 h+DGMI 25 mg·L~(-1)组加入PI3K抑制剂LY294002(终浓度为0,12.5,25和50μmol·L~(-1)),检测1 h后Akt,p-Akt,Nrf2和p-Nrf2的蛋白表达。结果与正常细胞对照组相比,OGD模型组SH-SY5Y细胞存活和SOD活性降低(P<0.01),ROS含量升高(P<0.01),降低p-Akt,Nrf2,p-Nrf2,HO-1和Nqo1的表达(P<0.01);与OGD模型组相比,OGD 4 h+药物组作用6 h,细胞存活率和SOD活性显著提高(P<0.01),ROS含量降低(P<0.05,P<0.01),p-Akt,Nrf2,p-Nrf2,HO-1和Nqo1蛋白表达水平提高(P<0.01),且DGMI 25 mg·L~(-1)效果优于EGBLI 25 mg·L~(-1)和LGBI 25 mg·L~(-1)(P<0.05,P<0.01);相较DGMI组,DGMI和LY294002作用1 h后p-Akt和p-Nrf2的表达被显著抑制(P<0.01),抑制效果呈浓度依赖性。结论 DGMI 25 mg·L~(-1)对OGD诱导的SH-SY5Y细胞具有抗氧化保护作用,其机制可能与激活Akt/Nrf2通路有关。     

芫花素对模式生物秀丽隐杆线虫的毒性作用

目的应用模式生物秀丽隐杆线虫研究中药芫花的主要成分之一芫花素的毒性作用及机制。方法分别以芫花素0.1,1,10和100μmol·L~(-1)处理野生型或转基因型秀丽隐杆线虫(简称线虫)24,48和72 h,显微镜下观察野生型线虫头部摆动次数、身体弯曲次数、存活天数、后代数目、平均排泄循环长度和咽泵行为,并观察转基因型线虫γ-氨基丁酸(GABA)能神经元荧光强度,计数神经元数目。结果 (1)野生型线虫:与正常对照组比较,芫花素处理24 h后,芫花素1~100μmol·L~(-1)组线虫头部摆动和身体弯曲次数显著减少(P<0.05,P<0.01);48 h后,芫花素0.1μmol·L~(-1)组身体弯曲次数显著减少(P<0.05),1~100μmol·L~(-1)组头部摆动和身体弯曲次数显著减少(P<0.01),100μmol·L~(-1)组平均排泄循环长度显著增加(P<0.05)且咽泵行为显著减少(P<0.01);72 h后,芫花素0.1~100μmol·L~(-1)组头部摆动和身体弯曲次数均显著减少(P<0.05,P<0.01),平均排泄循环长度显著增加(P<0.05,P<0.01),咽泵行为显著减少(P<0.05,P<0.01)。(2)转基因型线虫:与正常对照组比较,芫花素处理24 h后,芫花素1~100μmol·L~(-1)组转基因型线虫GABA能神经元荧光强度显著降低(P<0.05,P<0.01);48 h后,芫花素1~100μmol·L~(-1)组GABA能神经元荧光强度显著降低(P<0.05,P<0.01)且VD神经元数目显著减少(P<0.01);72 h后,芫花素0.1~100μmol·L~(-1)组GABA能神经元荧光强度显著降低(P<0.05,P<0.01),1~100μmol·L~(-1)组AVL神经元数目显著减少(P<0.05,P<0.01),10和100μmol·L~(-1)组VD神经元数目显著减少(P<0.05,P<0.01)。结论芫花素对秀丽隐杆线虫具有一定的毒性作用,主要表现为运动行为抑制,其毒性机制可能与GABA能神经元损伤有关。     

吗啡和曲马多用于小儿术后镇痛的效果观察

目的:比较吗啡和曲马多用于小儿术后镇痛的效果及不良反应。方法:50例手术患儿分成两组:吗啡组(n=25),1.0mg·kg~(-1)的吗啡用0.9%N.S稀释至100ml,即10μg·mg~(-1)·ml~(-1);曲马多组(n=25)15mg·kg~1的曲马多用0.9%N.S稀释至100ml,即0.15mg·kg~(-1)·ml~(-1),静脉连续注入法(CIA)经静脉给药2ml.h~(-1)速度给药,记录镇痛效果及副反应。结果:两组患儿在术后镇痛效果上无明显差异(P>0.05),恶心,呕吐及呼吸抑制的发生上无显著差异(P>0.05),皮肤瘙痒及尿潴留有显著差异(P<0.05),而总的副反应发生上则有极明显的差异(P<0.01)。结论:吗啡和曲马多均有效抑制小儿术后疼痛,而且曲马多副反应小,更适于小儿术后镇痛。     

黄连素或联苯双酯及其与环孢素合用对小鼠小肠运动的影响

目的:研究黄连素(berberine,Ber)或联苯双酯(bifendate,BFD)分别与环孢素(Cyclosporin A,CsA)合用对小鼠小肠运动的影响。方法:采用小鼠炭末推进法研究药物对小鼠小肠运动的影响。结果:与溶媒(CMCⅠ)组比较,Ber(300 mg·kg~(-1))组和Ber CsA(300 mg·kg~(-1) 20 mg·kg~(-1))组炭末推进率显著减少(P<0.01,P<0.05);与CsA(20 mg·kg~(-1))组比较,Ber CsA(200 mg·kg~(-1) 20 mg·kg~(-1))组和Ber CsA(300 mg·kg~(-1) 20 mg·kg~(-1))组炭末推进率显著减少(P<0.01)。与溶媒(CMCⅡ)组比较,CsA(10 mg·kg~(-1))组和BFD(100 mg·kg~(-1))组炭末推进率显著增加(P<0.05);与CsA(10 mg·kg~(-1))组比较,BFD(100 mg·kg~(-1))组炭末推进率有显著增加(P<0.05),而BFD CsA(100 mg·kg~(-1) 10 mg·kg~(-1))组推进率没有显著差异。结论:Ber单用及其与CsA合用,对小鼠的小肠运动有极显著的抑制作用,BFD单用有显著促进小鼠小肠运动的作用,而BFD与CsA合用,未显示对小鼠的小肠运动有影响。     

柴胡皂苷-b2对HepG2细胞迁移及血管生成相关蛋白表达的影响

目的研究柴胡皂苷b2(SS-b2)对HepG2细胞迁移的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法用MTT法检测SS-b2对HepG2细胞存活的影响,并根据结果将细胞分为细胞对照组、SS-b2治疗组(15,30和60 mg·L~(-1))和阳性对照组〔多柔比星(DOX)2 mg·L~(-1)〕;利用划痕实验观察SS-b2对HepG2细胞迁移的影响;采用Western印迹法检测HepG2细胞中血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9的表达和细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)的磷酸化水平。结果 SS-b2 15,30和60 mg·L~(-1)处理HepG2细胞48 h后,划痕愈合率分别为74.71%,72.50%和66.82%,随着SS-b2浓度的增加,划痕愈合率明显减小。与细胞对照组相比,SS-b2 30和60 mg·L~(-1)组的划痕愈合率显著降低(P<0.05);SS-b2 15,30和60 mg·L~(-1)可显著降低HepG2细胞中VEGF和HIF-1α的表达(P<0.05,P<0.01),而SS-b2 60 mg·L~(-1)可显著降低MMP-2和MMP-9蛋白的表达以及ERK1/2的磷酸化(P<0.05,P<0.01);阳性对照组可显著降低上述4种蛋白的表达以及ERK1/2的磷酸化(P<0.05,P<0.01)。与阳性对照组相比,SS-b2 60 mg·L~(-1)下调VEGF和MMP-2的表达更显著(P<0.05,P<0.01),SS-b2 15,30和60 mg·L~(-1)对HIF-1α的表达与阳性对照组无显著性差异,对MMP-9蛋白表达的下调不如阳性对照组效果显著(P<0.01),SS-b2 60 mg·L~(-1)与阳性对照组的ERK1/2磷酸化程度无显著性差异。结论 SS-b2可以抑制HepG2细胞的迁移,该作用可能与其抑制血管生成通路相关蛋白的表达有关。     

鹅去氧胆酸抗脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症反应作用及机制

目的研究鹅去氧胆酸(CDCA)抗脂多糖(LPS)诱导的BV2小胶质细胞炎症反应的作用及其机制。方法 BV2细胞与CDCA 25～100μmol·L~(-1)预孵育2 h,加LPS 200 mg·L~(-1)继续培养22 h,采用Griess试剂法检测一氧化氮(NO)含量;Western印迹法检测细胞内环氧合酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平;RT-PCR法检测细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、IL~(-1)β和G蛋白偶联受体5(TGR5)mRNA表达水平。BV2细胞与CDCA 25～100μmol·L~(-1)预孵育2 h,加入LPS 200 mg·L~(-1)继续培养1 h,Western印迹法检测NF-κB、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)磷酸化水平;细胞免疫荧光法观察NF-κB入核情况。结果与正常对照组相比,模型组培养基中NO含量显著增加(P<0.01);COX-2和iNOS蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01);TNF-α,IL-6和IL~(-1)βmRNA表达显著上调(P<0.01);TGR5 mRNA表达显著下调(P<0.01);并且NF-κB,IκBα和AKT磷酸化水平显著增加(P<0.05,P<0.01),NF-κB入核增多。与模型组相比,CDCA显著减少培养基中NO含量(P<0.01),降低COX-2和iNOS蛋白表达水平(P<0.05,P<0.01);显著下调TNF-α,IL-6和IL~(-1)βmRNA表达(P<0.01);显著上调TGR5 mRNA表达(P<0.01)。与模型组相比,CDCA显著降低NF-κB,IκBα和AKT磷酸化水平(P<0.05,P<0.01),并观察到NF-κB核转位减少现象。结论 CDCA可显著抑制LPS诱导BV2细胞炎症反应,其作用机制可能与激活TGR5、抑制Akt/NF-κB信号通路相关。     

微量泵注射阿托品治疗急性有机磷中毒的临床观察

目的:探讨微量泵持续静脉注射阿托品治疗急性有机磷中毒患者的疗效。方法将62例患者分为传统组30例和微量泵组32例,分别采用传统间断静脉注射法和微量泵持续静脉注射法。结果两组痊愈率比较差异有显著性(P<0.05),微量泵组不良反应发生率显著低于传统组(P<0.01)。结论应用微量泵持续静脉注射阿托品治疗有急性机磷中毒安全有效,可明显减少不良反应。     

健康老年肾对头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)药代动力学的影响

目的观察随年龄增长所致的肾功能减退对头孢哌酮(CFZ,第3代头孢类抗生素)/舒巴坦(SBT,β内酰胺酶抑制剂)药代动力学的影响。方法44名健康成年与老年受试者,每12h静脉给予CFZ/SBT各1g,共7次,采集末次给药后不同时间的血样,用HPLC方法测定血药浓度;肌酐清除率(Ccr)用Cockcroftand Gault法计算。结果老年男性和成年男性Ccr分别为(65.3±7.7),(106.0±21.6)mL·min-1(P<0.01);稳态时,CFZ:AUC分别为(256.3±72.0),(182.3±49.6)mg·h·L-1(P<0.01);Cmax分别为(102.0±15.3),(89.4±10.7)μg·mL-1(P<0.05);t1/2分别为(2.2±0.6),(1.5±0.5)h(P<0.01);CLT分别为(4.2±1.2),(5.8±1.2)L·h-1(P<0.01),Ccr与CLT、AUC、t1/2相关(γ分别为0.52、-0.40、-0.27,均P<0.01)。稳态时,SBT:AUC分别为(81.8±28.4),(33.7±6.7)mg·h·L-1(P<0.01);Cmax分别为(54.7±19.9),(28.0±4.8)μg·mL-1(P<0.01);t1/2分别为(1.4±0.4),(1.1±0.5)h(P>0.05);CLT分别为(13.7±4.9),(30.6±5.2)L·h-1(P<0.01),Ccr与CLT、AUC、t1/2相关(γ分别为0.52、-0.44、-0.47,均P<0.01)。两药的CLT比值:SBT/CFZ分别为(3.43±1.42),(5.52±1.52)(P<0.01)。说明老年人对CFZ/SBT清除下降,以SBT为显著。结论老年的肾功能轻度减退,可造成CFZ/SBT药代动力学改变,SBT更明显。     

卡维地洛与氢氯噻嗪对原发性高血压患者血管活性物质的影响

目的探讨氢氯噻嗪、卡维地洛单用或联用对轻中度原发性高血压患者血压和血浆肾上腺髓质素(AM)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及丙二醛(MDA)水平的影响。方法107例新发现的或不规则服降压药但已停药2 wk以上的轻中度原发性高血压患者随机分为3组,分别服用氢氯噻嗪(12.5～25 mg·d~(-1))、卡维地洛(25～50 mg·d~(-1))、卡维地洛和氢氯噻嗪(分别为12.5 mg·d~(-1)和12.5～25 mg·d~(-1),分别测量治疗前和治疗8 wk后血压和AM、AngⅡ及MDA浓度。结果氢氯噻嗪组、卡维地洛组和卡维地洛/氢氯噻嗪组血浆AM浓度治疗前后分别为(60.41±17.13)ng·L~(-1)vs(51.70±20.35)ng·L~(-1)(P<0.05);(65.41±18.62)ng·L~(-1)vs(49.39±18.55)ng·L~(-1)(P<0.01);(62.08±21.50)ng·L~(-1)vs(47.97±18.71)ng·L~(-1)(P<0.01)。卡维地洛组和卡维地洛/氢氯噻嗪组治疗后较治疗前血浆AngⅡ水平下降(35.51±32.31)ng·L~(-1)vs(18.21±14.61)mg·L~(-1)(P<0.01);(30.81±31.02)ng·L~(-1)vs(17.71±12.85)ng·L~(-1)(P<0.05);同时血浆MDA水平也下降分别为(10.19±3.23)mmol·L~(-1) vs(6.98±2.88)mmol·L~(-1)(P<0.01);(9.79±2.71)mmol·L~(-1)vs(6.61±2.74)mmol·L~(-1)(P<0.01);而氢氯噻嗪组治疗前后血浆AngⅡ、MDA浓度变化差异无统计学意义。结论低剂量氢氯噻嗪和卡维地洛联合应用安全性好,降压效果明确,具有降低血浆AM浓度的作用,起到了协同降压的作用。