高效液相色谱法测定血浆中咪达唑仑浓度

目的 :建立测定血浆中咪达唑仑浓度的反相高效液相色谱法。方法 :以地西泮为内标 ,采用C18柱及保护柱 ;流动相为甲醇 -水 (6 0∶4 0 ,V/V) ,含乙腈 1%、二乙胺 0 1%、磷酸 0 0 5 % ;流速为 0 6mL·min-1;提取液为乙醚 ;采用紫外检测 ,检测波长为 2 2 5nm。结果 :咪达唑仑与内标分离良好 ,保留时间分别为 (11 2 1± 0 5 8)min和 (9 4 1± 0 39)min ;咪达唑仑在 0 1～ 2 0 μg·mL-1范围内线性良好 ,回归方程为Y =9× 10 -4X - 9 17× 10 -2 ,r=0 9998;日内及日间变异均 <6 % ;最低检测浓度 0 0 5 μg·mL-1。结论 :本方法适用于咪达唑仑的药动学和药效学研究     

咪达唑仑片在中国朝鲜族和汉族健康人体内的药代动力学

目的研究咪达唑仑片(镇静催眠药)在中国朝鲜族和汉族健康人体内的药代动力学。方法9名朝鲜族和10名汉族健康受试者,单剂量口服咪达唑仑片15mg,用高效液相色谱法测定血浆中咪达唑仑的浓度,用DASVer2.0.1软件计算药代动力学参数。结果咪达唑仑片在朝鲜族和汉族健康受试者的主要药代动力学参数:tmax分别为(0.63±0.72),(1.52±0.74)h,Cmax分别为(189.03±82.05),(103.11±26.37)μg.L-1,t1/2(3.82±2.33),(2.96±0.77)h,AUC0-12(369.75±85.47),(368.95±103.63)μg.h.L-1,AUC0-∞(403.29±124.28),(397.29±124.06)μg.h.L-1。结论朝鲜族和汉族健康受试者单剂量口服咪达唑仑片后的药代动力学参数存在较大的个体差异,平均血药浓度-时间曲线存在双峰现象,2组间tmax、Cmax的差异有统计学意义(P<0.05)。     

反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法采用Hypersil-C18反相色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,水（pH=7.3,内含三乙胺0.15%,磷酸0.05%）-乙腈（46∶54）为流动相;流速为1.0mL.min-1;柱温为30℃;样品经碱化提取分离后用流动相溶解;采用紫外检测,检测波长为223nm。结果本方法测定咪达唑仑血药浓度在50～2000ng.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,咪达唑仑的保留时间为9.60min,其低、中、高（200、500、2000ng.mL-1）浓度的提取回收率分别为92.11%、90.25%、93.27%,方法回收率分别为96.81%、101.97%、101.58%,日内、日间RSD均〈5.0%。咪达唑仑血浆样品预处理室温放置10h及咪达唑仑标准贮备液于4℃下15d稳定。结论本法简单,准确,快速,稳定,灵敏度高,可满足咪达唑仑血药浓度的检测及临床药代动力学研究要求。     

HPLC法同时测定大鼠血浆中氯唑沙宗和咪达唑仑的浓度

目的:建立同时测定大鼠血浆中CYP450探针药物氯唑沙宗(CYP2E1)和咪达唑仑(CYP3A4)浓度的高效液相色谱法.方法:色谱柱为Incrtsil-C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-20 mmol· L·1乙酸铵-乙酸(45∶55∶0.1,v/v);流速为1mL·min-1;紫外检测波长(λ)为210nm;柱温为40℃.结果:氯唑沙宗和咪达唑仑均在0.05～30 μg· mL-1的范围内线性关系良好,最低检测限均为0.05μg· mL-1,低、中、高三个浓度的回收率分别为96.47％±4.35％、112.56％+4.05％、112.64％±4.28％;85.68％±2.81％、93.53％+3,70％、110.67％+5.54％.结论:本方法操作简便,灵敏度高,快速可靠,可同时用于血浆中CYP450亚型酶的探针药物氯唑沙宗和咪达唑仑的浓度的测定.     

微透析与LC-MS~n联用测定脑组织中咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑及其脑内药代特征的研究

目的建立灵敏、快速、准确的LC-MSn方法测定咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑及其在大鼠脑内的药代动力学过程。方法 SD大鼠股静脉注射CYP3A探针药物咪达唑仑(剂量5 mg·kg-1)。采用微透析技术,在2μl·min-1流速下收集脑微透析液样品2.4 h,收集时间间隔为8 min。以LC-MSn法在线检测微透析样品。选用Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相为2 mmol·L-1乙酸铵水溶液和乙腈,梯度方式洗脱。采用电喷雾电离源(ESI),扫描方式为多反应离子监测模式(MRM),咪达唑仑m/z:326.1/291.1;1'-羟基咪达唑仑m/z:342.1/324.1;内标地西泮m/z:285.1/154.0。结果咪达唑仑和1'-羟基咪达唑仑的线性范围分别为0.78¹00和0.195100和0.195¹2.5μg·L-1,最低定量下限0.2μg·L-1,批内、批间RSD均<7%,RE值在-1.3412.5μg·L-1,最低定量下限0.2μg·L-1,批内、批间RSD均<7%,RE值在-1.34^-8%范围内。结论此检测方法快速、灵敏,可用于脑微透析液中咪达唑仑/1'-羟基咪达唑仑的含量测定,结合微透析技术有助于深入进行脑代谢的相关研究。     

马来酸咪达唑仑片在汉族健康人体内的药动学研究

目的:研究马来酸咪达唑仑片在汉族健康人体内的药动学。方法:10名汉族健康受试者口服马来酸咪达唑仑片15mg后,用高效液相色谱法测定咪达唑仑血药浓度,用DAS2.0药动学软件拟合药动学参数。结果:受试者单剂量口服马来酸咪达唑仑片后的主要药动学参数分别为Cma(x103.11±26.37)ng·mL-1、tma(x1.52±0.75)h、t1/(22.96±0.77)h、Vz/F(170.08±50.97)L、CL/F(41.05±12.33)L·h-1、AUC0～1(2368.80±103.37)ng·h·mL-1、AUC0～∞(397.29±124.06)ng·h·mL-1。部分受试者的药-时曲线存在双峰现象。结论:咪达唑仑片的药动学参数个体差异较大,临床应用时应注意个体化给药。     

咪达唑仑滴鼻液的制备及质量控制

目的:制备咪达唑仑滴鼻液并建立其质量控制方法。方法:将咪达唑仑用生理盐水稀释至全量制备滴鼻液;采用反相高效液相色谱法测定咪达唑仑的含量,色谱柱为Shimadzu ODS C18,流动相为甲醇-乙腈-0.05mo·lL-1乙酸铵-三乙胺=50∶6∶44∶0.2(V/V/V/V),流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃,紫外检测波长为254nm。结果:所制滴鼻液外观澄明;咪达唑仑检测浓度线性范围为1～100μg·mL-1(r=0.9998),平均回收率为100.68%,日内和日间RSD分别为1.54%、2.89%(n=5)。结论:制剂处方及制备方法简单,质量控制方法准确、可靠。     

新型钙离子拮抗剂DY-9836在大鼠体内的药动学

目的建立测定大鼠血浆中新型钙离子拮抗剂DY-9836浓度的高效液相色谱-荧光检测(HPLCFl)法,研究DY-9836在大鼠体内的药动学。方法以维拉帕米为内标,色谱柱:Extend C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:乙酸钠(pH=6.5)-乙腈(50∶50,V/V);流速:1 mL·min-1;柱温:35℃;λex=304 nm,λem=335 nm。大鼠灌胃后,测定血浆中DY-9836的浓度,采用WinNonLin 5.2软件计算药动学参数。结果 DY-9836的血药浓度线性范围为0.327～4.083μg·mL-1;方法回收率分别为93.35%～98.08%;DY-9836在大鼠体内的主要药动学参数:Ke为(0.05±0.01)h-1、t1/2为(14.20±0.92)h、tmax为(1.25±0.42)h、ρmax为(2.98±0.56)μg·mL-1、AUC0-t为(37.74±2.00)μg·h·mL-1、AUC0-∞为(41.71±1.90)μg·h·mL-1、CL为(480.3±22.0)mL·h-1·kg-1、MRT0-t为(19.30±0.60)h。结论本实验所建立的测定血浆中DY-9836的HPLC-Fl方法简便、快速、灵敏、准确、可靠。     

HPLC法测定人血浆中咪达唑仑的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血浆中咪达唑仑浓度的方法。方法:以安定为内标,色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18,流动相为0.02mol·L-1NaH2PO4水溶液(pH7.6,内含0.02%三乙胺)-乙腈(52∶48),流速为1.0mL.min-1,检测波长为223nm,灵敏度为0.001AUFS,进样量为50μL,柱温为40℃。结果:咪达唑仑血浆浓度在10~1 600ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 1),最低检测限为1ng·mL-1;日内、日间RSD≤7.25%。结论:本方法简便、灵敏、准确、快速,检测范围广,可用于咪达唑仑的血药浓度监测及临床药动学研究。     

HPLC法测定大鼠血浆中咪达唑仑的含量及其在药物相互作用研究中的应用

目的:建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中咪达唑仑含量,并应用于佐米曲坦对大鼠肝细胞中 CYP3A 的诱导作用的研究。方法:采用色谱柱为 Diamonsil~(TM)(钻石)C_(18)(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L~(-1)磷酸二氢钾缓冲液(pH 5.0)(58:42),流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长为220 nm。咪达唑仑(10 mg·kg~(-1))作为经典 CYP3A 探针底物对3组不同诱导后的大鼠(佐米曲坦样品组、地塞米松阳性对照组或空白对照组)静注给药,测定咪达唑仑的清除率等参数来研究CYP3A 活性的变化。结果:咪达唑仑在0.3～375 μmol·L~(-1)浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9997,n=5),检测限为0.0018 μmol·L~(-1),平均回收率为97.9%。经佐米曲坦诱导的雄性大鼠组中咪达唑仑 AUC_(0-t)和 T_(1/2)与雄性空白大鼠组中咪达唑仑 AUC_(0-t)和 T_(1/2)比,显著降低,清除率增加,与地塞米松组中咪达唑仑的动力学参数相近;而经佐米曲坦诱导的雌性大鼠的动力学参数与空白雌性组比没有明显的变化。结论:本文建立的大鼠血浆中咪达唑仑测定方法稳定、准确、简便,能使咪达唑仑作为探针药物很好地运用于佐米曲坦对大鼠肝中 CYP3A 诱导作用研究中。另外佐米曲坦对大鼠肝中 CYP3A 具有性别差异的诱导作用。