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相似文献
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1.
王燕  张姣  王会峰  王宁菊 《天津医药》2018,46(3):225-229
目的 观察慢病毒介导的 shRNA 沉默肝再生磷酸酶-3(PRL-3)基因对结肠癌 SW480 细胞增殖、侵袭、凋亡的影响。方法 实验分组为空白对照组、阴性对照组、转染组。将携带 PRL-3 shRNA 的慢病毒载体转染结肠癌SW480 细胞,建立稳定沉默 PRL-3 的细胞株,real-time PCR 检测转染后 PRL-3 mRNA 的相对表达水平。采用 MTT法、平板克隆形成实验检测转染后细胞增殖能力;采用 Transwell 侵袭实验、侵袭小室法检测转染后细胞迁移及侵袭能力;采用流式细胞术检测转染后细胞凋亡率变化。结果 稳定沉默 PRL-3 的细胞株构建成功,转染组 PRL-3mRNA 的相对表达水平低于空白对照组、阴性对照组(P<0.05),空白对照组、阴性对照组比较差异无统计学意义。PRL-3 shRNA 转染 SW480 细胞 72 h 后,转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞增殖能力受到抑制,转染 120 h时最明显(P<0.05)。转染组克隆形成能力较空白对照组、阴性对照组下降(P<0.05)。转染组与空白对照组、阴性对照组比较,细胞迁移、侵袭能力下降,凋亡率增加(P<0.05)。结论 结肠癌 SW480 细胞转染 PRL-3 shRNA 可减少 PRL-3 的表达,有效抑制 SW480 细胞增殖,促进其凋亡,PRL-3 可能成为治疗结肠癌的靶基因。  相似文献   

2.
《中国药房》2014,(33):3096-3099
目的:探讨沉默Bmi-1基因对人小细胞肺癌细胞H1963增殖与侵袭的抑制作用。方法:用小分子干扰RNA(siRNA)沉默Bmi-1基因,以100 nmol/L特异性Bmi-1的siRNA转染H1963细胞为试验组,以未转染细胞为空白对照组,以转染阴性序列Neg-siRNA细胞为阴性对照组。采用蛋白质印迹法检测siRNA对Bmi-1的基因沉默效果;经MTT法、流式细胞术、Transwell侵袭试验分别检测各组细胞的增殖活性、周期分布及侵袭能力,再用蛋白质印迹法检测各组细胞中抑癌基因P16、P14和上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)的蛋白表达情况。结果:与空白对照组和阴性对照组比较,试验组细胞中Bmi-1蛋白的表达明显降低(P<0.05);与阴性对照组比较,试验组细胞的增殖抑制率明显升高(P<0.05),主要表现为G0/G1期细胞比例明显增加、S和G2/M期细胞比例明显减少(P<0.05);侵袭细胞数明显减少(P<0.01);细胞中N-cadherin、Vimentin、MMP-2蛋白表达明显减弱(P<0.05),而P16、P14、E-cadherin、TIMP-1蛋白表达明显增强(P<0.05)。结论:沉默Bmi-1基因可通过阻滞细胞G1/S期转化及影响侵袭相关蛋白的表达来显著抑制H1963细胞的增殖和侵袭能力。  相似文献   

3.
目的 观察沉默血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因后对表达VEGFR-2受体的U87细胞生物学行为的影响.方法 合成VEGFR-2小干扰RNA(siRNA),转染人U87细胞,通过适时定量PCR检测筛选出最有效VEGFR-2 siRNA后,进行Western blot验证.转染的U87细胞,通过流式细胞术检测评价细胞凋亡,Transwell实验评价侵袭能力和MTT检测细胞增殖能力.结果 成功筛选出有效VEGFR-2 siRNA,体外研究,将其稳定转染人U87细胞.与空白对照组、阴性对照组相比,U87细胞表现出增殖能力和侵袭能力均下降,但未见明显细胞凋亡改变.结论 抑制U87细胞自身表达的VEGFR-2可有效地抑制其生长,降低侵袭能力.  相似文献   

4.
目的:利用针对 Lipocalin-2的小干扰 RNA(siRNA),观察 Lipocalin-2基因沉默对人肺癌 A549细胞MMP-9表达及侵袭、迁移能力的影响。方法采用 Real-time PCR 和 Western blot 检测 Lipocalin-2在3种肺癌细胞株(A549、NCI-H661、NCI-H446)及正常人支气管上皮细胞(HBE)的表达情况。设计并构建靶向 Lipocalin-2的 siRNA 转染 A549细胞,采用 Real-time PCR 和 Western blot 检测转染效率及 Lipocalin-2基因沉默对 MMP-9 mRNA 和蛋白表达的影响。Transwell 小室检测细胞侵袭能力。细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果 Lipocalin-2 mRNA 和蛋白在肺癌A549、NCI-H661、NCI-H446细胞株中的表达水平均显著高于 HBE 细胞,差异有统计学意义( P <0.05)。siRNA-Li-pocalin-2转染组 Lipocalin-2 mRNA 和蛋白表达水平与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义( P <0.05);siRNA-Lipocalin-2转染组 MMP-9 mRNA 和蛋白表达水平与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义( P <0.05);siRNA-Lipocalin-2转染组穿膜细胞数、平均迁移距离与阴性对照组和空载体对照组比较,差异有统计学意义( P <0.05)。结论 Lipocalin-2基因沉默通过下调 MMP-9表达降低了人肺癌 A549细胞的侵袭和迁移能力。  相似文献   

5.
目的探究小干扰RNA对人卵巢癌细胞株CXCR4基因表达和侵袭力的影响。方法利用单细胞克隆技术从人卵巢癌细胞系SW626中分离培养细胞株CXCR4,并设计合成针对CXCR4基因的小干扰RNA,在脂质体介导下,重组表达质粒转染人卵巢癌细胞株,利用RT-PCR方法对CXCR4基因表达进行检查,观察转染后细胞株的侵袭能力。实验细胞分为不做处理的空白对照组、转染空病毒载体的阴性对照组、siRNA组。结果 siRNA组的CXCR4 CXCR4 mRNA水平、蛋白表达率、穿膜细胞数均明显低于空白对照组和阴性对照组(P<0.05),而空白对照组与阴性对照组之间无明显差异(P>0.05)。结论小干扰RNA可有效抑制人卵巢癌细胞株CXCR4基因表达和侵袭力。  相似文献   

6.
目的 观察肝癌缺失基因1(DLC-1)对HT-29细胞侵袭能力的影响.方法 用脂质体法将重组质粒pcDNA3.1-DLC-1转染HT-29细胞;应用Rho激酶(ROCK)特异性抑制剂Y27632处理HT-29细胞;Western blot检测p-MLC蛋白表达;Transwell小室实验检测细胞侵袭能力.结果 野生型HT-29细胞DLC-1基因表达呈阴性,经转染获得DLC-1稳定表达细胞系;与对照组及空载组HT-29细胞相比,转染组和ROCK抑制剂组p-MLC蛋白表达均下调,细胞侵袭能力受到抑制(P<0.05).结论 转染DLC-1基因可能通过抑制ROCK活性,从而抑制HT-29细胞的侵袭能力.  相似文献   

7.
目的 观察靶向沉默线粒体单链DNA结合蛋白(SSBP1)基因对肝癌HepG2细胞增殖、侵袭转移的影响.方法 设计并构建靶向SSBP1 基因的特异性siRNA,采用脂质体介导瞬时转染肝癌HepG2细胞,细胞分3组:对照组、空白转染组、转染组.Real time-PCR和Western-blot检测靶向干扰后SSBP1 mRNA和蛋白表达变化.CCK-8法检测细胞增殖.流式细胞仪检测细胞周期、凋亡率及线粒体膜电位.划痕实验及Transwell 侵袭实验检测细胞侵袭转移能力.Western-blot检测增殖、侵袭转移相关基因蛋白表达状况.结果 SSBP1 siRNA能够显著抑制SSBP1 mRNA和蛋白表达.与对照组和空白转染组比较,转染SSBP1 siRNA后HepG2细胞增殖能力、G2期和S期细胞比例、线粒体膜电位明显降低,G1期细胞比例、细胞凋亡率明显升高(P<0.05);同时细胞增殖相关基因PCNA、凋亡抑制基因Bcl-2、转移相关基因MMP-9蛋白表达显著下调,凋亡诱导基因Bax蛋白表达显著上调(P<0.05).结论 靶向沉默SSBP1基因能够通过线粒体途径抑制肝癌HepG2细胞增殖、侵袭转移,并诱导其凋亡.  相似文献   

8.
目的 探讨富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体6(LGR6)对人结肠癌SW480细胞增殖和侵袭的作用及机制.方法 在结肠癌细胞株SW480细胞中构建低表达LGR6的实验组、阴性对照组和空白对照组,用实时荧光定量核酸扩增检测(qPCR)和蛋白质印迹法(Western Blot)验证LGR6 mRNA和蛋白的表达水平.用MTT法检测细胞增殖活性,用Transwell小室法检测细胞的侵袭能力,用Western Blot检测Wnt/β-连环蛋白(βcatenin)信号通路相关蛋白表达水平.结果 实验组、阴性对照组和空白对照组LGR6 mRNA表达水平分别为(0.42±0.08)、(1.12±0.08)、(1.13±0.31),转染LGR6 siRNA的SW480细胞LGR6 mRNA和蛋白表达水平显著降低(均P<0.05);转染后24、48、72 h时实验组细胞增殖活性[(0.24±0.04)、(0.27±0.06)、(0.45±0.08)、(0.63±0.09)]显著低于阴性对照组[(0.22±0.03)、(0.40±0.05)、(0.92±0.07)、(1.32±0.11)]和空白对照组[(0.26±0.04)、(0.42±0.07)、(0.94±0.09)、(1.21±0.12),均P<0.05].下调LGR6表达可促进结肠癌细胞Bax和Cleaved caspase 3蛋白的表达,并抑制结肠癌细胞βcatenin和c-Myc蛋白的表达(均P<0.05).结论 下调LGR6可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制结肠癌SW480细胞的增殖和侵袭,并促进结肠癌SW480细胞的凋亡.  相似文献   

9.
目的 探讨结肠癌转移相关基因1 (MACC1)在食管癌细胞株Eca-109中的作用及其可能机制.方法 体外培养Eca-109细胞,并分为MACC1 shRNA转染重组质粒组(A组)、转染空质粒阴性对照组(B组)和Eca-109细胞空白组(C组).采用RT-PCR和Western blot法分别检测MACC1、c-MET mRNA和蛋白表达,Transwell和划痕实验分别观察转染前后Eca-109细胞侵袭和迁移能力的变化.结果 与B、C组相比,A组MACC1、c-MET mRNA和蛋白表达下调,Eca-109细胞侵袭和迁移能力降低(P<0.05).结论 下调MACC1表达能明显抑制食管癌细胞的侵袭和转移能力,可能是通过调节下游基因c-MET表达实现的.  相似文献   

10.
目的 探讨瞬时感受器电位离子通道蛋白V亚族2(TRPV2)基因沉默对前列腺癌PC-3细胞增殖、细胞周期和侵袭能力的影响.方法 构建针对TRPV2基因的小分子干扰RNA(siRNA)序列,在脂质体的介导下转染PC-3细胞;用RT-PCR测定TRPV2 mRNA的表达;MTT法测定siRNA对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞技术测定siRNA对PC-3细胞周期的影响;Tran-swell侵袭实验测定siRNA对PC-3细胞侵袭能力的影响.结果 TRPV2 mRNA在激素非依赖PC-3细胞和DU145细胞中转录表达.而在激素依赖LNCaP细胞中未转录表达.靶向TRPV2的siRNA(siRNA-TRPV2)能有效地阻断PC-3细胞TRPV2基因在mRNA水平上的表达(P<0.01),且随着转染时间的延长而减少,转染72 h后TRPV2 mRNA的表达减少至对照组的15%.siRNA转染组穿过Matrigel膜的细胞数为(46.0±6.7),显著少于阴性对照组(92.0±9.4)和空白对照组(109.0±8.1)(P<0.01).结论 TRPV2在激素非依赖前列腺癌细胞PC-3和DU145中转录表达.针对TRPV2的siRNA在体外能有效地抑制PC-3细胞株的TRPV2 mRNA的转录,能显著抑制细胞的侵袭能力,但对细胞增殖和细胞周期没有显著影响.  相似文献   

11.
摘要:目的 检测靶向沉默细胞角蛋白18(CK18)基因对人乳腺癌BT549细胞增殖、凋亡、侵袭运动的影响,并探 讨其潜在的分子机制。方法 建立 CK18 稳定沉默的 BT549 细胞株,分为 3 组,以 CK18(CK18-sh21、CK18-sh22、 CK18-sh23及CK18-sh24)靶向沉默的细胞为实验组CK18-shRNA,加入空载体的为阴性对照(sh-Con)组,未处理为 空白对照(Wt)组。采用蛋白印迹法(Western blot)对细胞系进行CK18表达鉴定。采用CCK-8法、平板克隆形成法检 测 CK18 表达缺失对细胞增殖能力的影响;通过流式细胞技术(PE–Annexin V 双染法)检测 CK18 基因沉默后对 BT549细胞凋亡的影响;通过PI-FACS 法检测沉默CK18对BT549细胞周期的影响;采用划痕试验、Transwell法检测 CK18沉默对细胞运动及侵袭能力的影响;采用Western blot检测与侵袭转移相关的分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)和 波形蛋白(vimentin)表达情况。结果 建立了CK18沉默的BT549细胞系,CK18的表达被显著抑制,CK18-sh23组相 对sh-Con组抑制率最高,可达73%。与Wt组、sh-Con组相比,CK18-shRNA细胞增殖能力在24 h、48 h和72 h降低, 克隆形成能力下降,细胞运动、侵袭能力下降,细胞凋亡率和G2期细胞比例均增加(P<0.05)。与sh-Con组和Wt组 比较,CK18表达降低能促进E-cadherin表达,抑制vimentin表达(P<0.05)。结论 CK18基因沉默能有效抑制人乳 腺癌BT549细胞的增殖、运动、侵袭,诱导细胞的凋亡,并阻滞细胞周期;CK18还可能通过诱导EMT发生参与乳腺癌 BT549细胞的侵袭转移过程。  相似文献   

12.
左书浩  焦庆芳  焦保华 《河北医药》2012,34(16):2405-2408
目的探讨RNAi沉默PRDXⅢ基因表达诱导U251胶质瘤细胞凋亡。方法设计合成针对PRDXⅢ的siRNA,脂质体介导转染人U251多形胶质母细胞瘤细胞,RT-PCR法检测转染后24 h PRDXⅢmRNA的表达水平,Western-blotting检测转染后48 h PRDXⅢ蛋白的表达水平,筛选出有效的干扰序列;流式细胞仪、DNAladder、PI染色检测转染后48 hU251细胞的凋亡状况,MTT检测转染后48 h U251细胞的生长抑制率。结果 RT-PCR、Western Blotting检测显示空白对照组、空载体组和无关序列组PRDXⅢmRNA表达无明显变化,干扰序列1、3使PRDXⅢmRNA的表达明显降低。DNA ladder显示干扰组出现明显梯形电泳条带,空白对照组、空载体组和无关序列组细胞未见明显梯形电泳条带。PI染色结果显示空白对照组,空载体组和无关序列组细胞未见明显凋亡,而干扰组细胞核的染色质高度浓染,部分细胞核裂解为碎块,符合凋亡形态学的改变。FCM检测结果显示干扰组细胞凋亡率明显高于空白对照组、空载体组、无关序列组(P〈0.01)。MTT检测干扰组对U251细胞生长的抑制率为44.4%,明显减慢了细胞生长(P〈0.01)。结论 RNAi技术成功地抑制了U251细胞中PRDXⅢ基因的表达,并诱导U251细胞凋亡,表明PRDXⅢ基因与胶质瘤的凋亡有关,PRDXⅢ基因有可能成为胶质瘤基因治疗的靶基因。  相似文献   

13.
目的 观察下调跨膜蛋白97(TMEM97)对卵巢癌细胞SKOV3增殖和凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法 将卵巢癌细胞SKOV3分为转染组(si-TMEM97组)、阴性对照组(siNC组)和空白对照组(Control组)。采用实时荧光定量PCR(qPCR)及Western blot法分别在mRNA和蛋白表达水平评估转染siRNA-TMEM97后TMEM97的沉默效果;分别在转染后采用CCK-8法、PI染色法、Annexin V-FITC/PI染色法和流式细胞术检测下调TMEM97对细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响,并检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白质(Bax)及P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)通路相关蛋白(P38/MAPK、p-P38/MAPK)的表达变化。结果 si-TMEM97组细胞的增殖能力相比Control组和siNC组降低,而早期凋亡率增高(均P<0.01)。si-TMEM97组细胞Bcl-2的蛋白相对表达量较Control组和siNC组降低,而Bax、p-P38/MAPK的蛋白相对表达量较Control组和siNC组增高(均P<0.05)。结论 下调TMEM97的表达使卵巢癌细胞SKOV3增殖减少,凋亡增加,这可能与调节凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax表达及P38/MAPK信号通路的激活有关。  相似文献   

14.
目的:通过干扰高转移潜能肝癌细胞( MHCC97?H)中的骨桥蛋白( OPN)、肿瘤增殖性因子肿瘤生长因子β1( TGFβ1)基因,使之减少OPN、TGFβ1表达,观察MHCC97?H转移能力的变化情况。方法对MHCC97?H细胞行OPN、TGFβ1基因干扰,qPCR法检测干扰效果。 MHCC97?H细胞迁移细胞学实验采用transwells法。肺转移动物模型制作方法:裸鼠尾静脉注射各组细胞,含细胞数5×106个/只,隔天连续注射3次,2周后观察肺脏组织。离体肺脏组织标本制作,DAPI 染核处理10 min,甘油PBS 封片,置于荧光显微镜下观察。免疫荧光法检测裸鼠动物模型整合素αvβ3表达。结果经基因干扰后MHCC97?H表达OPN和TGFβ1明显降低( P<0.05)。细胞学实验显示与对照组比较,经OPN和TGFβ?1干扰组MHCC97?H细胞迁移数量明显减少( P<0.01)。动物模型实验显示与对照组比较,OPN和TGFβ1干扰组肺组织中肝癌细胞较少,定量分析显示OPN和TGFβ1干扰组肺脏组织中肝癌细胞IOD值明显低于对照组( P<0.05)。 OPN和TGFβ1干扰组与对照组比较整合素αvβ3表达IOD值差异无统计学意义( P>0.05)。结论经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97?H细胞肺转移能力有明显的下降,尤其是TGFβ1基因干扰组下降更加明显,但经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97?H细胞表达整合素αvβ3能力无变化,整合素αvβ3介导参与了OPN和TGFβ1共同作用肝癌转移行为的变化。  相似文献   

15.
目的 研究肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默(即基因不表达或表达量极低)对Survivin表达的影响.方法 应用siRNA技术对肝细胞癌细胞株HepG2细胞中甲胎蛋白基因的表达进行下调,应用ELISA法(即酶联免疫吸附测定法)对转染前后上清液甲胎蛋白的浓度进行测定,应用MTT比色法对转染前后细胞存活和生长情况进行检测,应用流式细胞术对细胞凋亡率进行分析,应用逆转录PCR技术对转染前后细胞Survivin mRNA水平进行检测.结果 与转染前相比,转染后研究组的上清液中甲胎蛋白的浓度均发生逐渐降低,且转染48 h后,观察组的下降更为明显.观察组的吸光度明显逐渐下降,肝癌细胞生长活性减弱了45.23%;HepG2细胞的凋亡率增至36.8%,较转染前升高了24.4%,HepG2细胞中Survivin mRNA表达下降了74.32%.对于上述情况,空白组和对照组均未见明显的变化.结论 肝细胞癌细胞株HepG2细胞甲胎蛋白基因沉默可抑制Survivin mRNA表达,从而降低肝癌细胞的生长活性以及增加细胞的凋亡率.  相似文献   

16.
目的探讨姜黄素调控微小RNA-199a-3p(miR-199a-3p)的表达对前列腺癌C4-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法(1)将体外培养的前列腺癌C4-2细胞分为4组:空白组(无药物干预)和低、中、高3个剂量实验组(20,40,80μmol·L^-1姜黄素干预),选取对C4-2细胞的增殖抑制最明显姜黄素浓度用于以下实验。(2)将体外培养的前列腺癌C4-2细胞分为3组:空白对照组(仅加入脂质体)、第1转染组和第2转染组,第1转染组、第2转染组分别转染阴性对照物与miR-199a-3p抑制物后再加入姜黄素40μmol·L^-1处理。用溴化噻唑蓝四氮唑法检测细胞增殖水平,以Transwell法检测细胞迁移和侵袭水平,以实时荧光定量-PCR法检测miR-199a-3p基因表达(2﹣△△Ct值),以蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、Wnt/β-catenin通路β-catenin、Cyclin D1和c-Myc蛋白表达(灰度值的比值)。结果(1)空白组和低、中、高3个剂量实验组干预72 h的细胞增殖率分别为(1.76±0.31)%,(1.52±0.27)%,(0.78±0.16)%和(0.95±0.19)%,低、中、高3个剂量实验组与空白组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中40μmol·L^-1姜黄素对C4-2细胞的增殖抑制最明显,故选用该浓度做后续实验。空白组和中剂量实验组的细胞迁移数目分别为(165.48±27.83)和(68.42±16.67)个;这2组的细胞增殖数目分别为(104.62±21.64)和(43.58±10.91)个;这2组的miR-199a-3p基因表达量分别为1.03±0.12和3.91±0.29,中剂量实验组与空白组比较,以上指标的差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)空白对照组、第1转染组和第2转染组在转染72 h的细胞增殖率分别为(0.95±0.19)%,(0.95±0.27)%和(1.66±0.41)%;这3组的细胞迁移数目分别为(62.45±12.11),(71.52±15.12)和(138.46±39.49)个;这3组的细胞侵袭数目分别为(34.49±8.43),(39.34±9.46)和(81.49±24.16)个;这3组的MMP-2表达分别为0.46±0.11,0.45±0.13和0.76±0.17;这3组的MMP-9表达分别为0.36±0.11,0.38±0.12和0.59±0.15;这3组的β-catenin表达分别为0.53±0.13,0.49±0.16和0.71±0.17;这3组的Cyclin D1表达分别为0.26±0.09,0.29±0.11和0.69±0.15;这3组的c-Myc表达分别为0.21±0.06,0.22±0.07和0.56±0.12。以上指标:第2转染组与空白对照组比较,或第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论姜黄素可上调miR-199a-3p基因的表达,从而抑制前列腺癌C4-2细胞的增殖、迁移和侵袭。  相似文献   

17.
目的 筛选有效沉默KLF4基因表达的siRNA,观察KLF4基因沉默对人肝星状细胞HSC-LX2生物学行为的影响.方法 设计并化学合成针对人KLF4基因的3对siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3),转染人肝星状细胞HSC-LX2,以转染非特异siRNA作为阴性对照.采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)和Western blot方法分析KLF4 mRNA和蛋白的表达情况,筛选出沉默KLF4效果最好的1个siRNA,将其转染入HSC-LX2后,用MTT法检测KLF4沉默对HSC-LX2增殖的影响.采用ELISA法检测细胞培养上清中的转化生长因子1(transforming growth factor,TGF-1)、白介素1(interleukin-1,IL-1)和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达情况.结果 Real-time RT-PCR和western blot均显示siRNA3沉默效果最好.故后续试验均采用siRNA3沉默KLF4的表达.MTT实验结果 显示,在转染siRNA3,12 h、24 h和48 h后,细胞活力出现明显下降.ELISA结果 显示,转染siRNA3,48 h以后,TGF-β1、TNF-α、IL-1β表达量也明显降低.结论 siRNA3可有效沉默KLF4基因表达,KLF4基因沉默可以抑制HSC-LX2的增殖,影响其生物学行为,使细胞中的促进胶原表达的三种细胞因子TGF-1、TNF-α以及IL-1表达量下降.  相似文献   

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