HPLC法测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度

目的 建立人血清中万古霉素和去甲万古霉素的HPLC测定方法,便于指导临床血药浓度的监测.方法 色谱柱为symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm);流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈(85∶10∶5);流速为1.0mL·min-1;检测波长为236nm,柱温为35℃,采用乙腈-6%高氯酸=1∶6的沉淀剂处理后进样,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 万古霉素和去甲万古霉素的保留时间分别为6.065min和4.958min;标准曲线回归方程分别为Y=28.34X+0.33,r=0.9998(n=3),Y=91.41X-0.24,r=0.9992(n=3),线性关系良好;方法回收率均＞95%,绝对回收率均＞95%,日内RSD均＜4.0%.结论 本测定方法快速、准确、简便,为万古霉素和去甲万古霉素的临床常规血药浓度监测提供依据.     

HPLC法测定人血清中去甲万古霉素浓度及临床应用

目的：建立人血清中去甲万古霉素浓度的HPLC测定方法及临床应用。方法：色谱柱为Waters C18柱（150mm×4．6mm,5μm）;流动相为磷酸二氢钾缓冲液-甲醇-乙腈（86：10：4）;流速1mL·min^-1;检测波长236nm;以万古霉素为内标,采用硫酸锌直接沉淀蛋白后进样．结果：去甲万古霉素血清浓度与峰面积线性关系良好,Y=0．0348C-0．0418,r=0．9998;线性范围2．0～100．0mg·L^-1;日内RSD小于5．6％;日间RSD小于6．3％;去甲万古霉素高、中、低浓度的平均方法回收率分别为101．36％、97．63％、99．57％;平均提取回收率分别为89．84％、88．82％、88．68％。该方法适于ICU患者接受治疗时去甲万古霉素的血药浓度监测。结论：方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度监测及人体药动晕研究。     

HPLC法测定人血清中去甲万古霉素浓度

目的建立人血清中去甲万古霉素浓度的高效液相色谱测定方法及临床应用。方法以万古霉素为内标,采用10%高氯酸溶液直接沉淀蛋白后进样。色谱柱为SHIMADZUVP-ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(92∶8),流速1 mL.min-1,柱温40℃,检测波长236 nm。结果去甲万古霉素血清浓度Y与内标峰面积比X进行线性回归,回归方程为Y=32.544 56X-3.147 39,r=0.999 3;线性范围2.5-80.0μg.mL-1;日内RSD小于3.0%;日间RSD小于5.7%;去甲万古霉素低、中、高浓度的平均方法回收率分别为97.36%、99.51%、101.17%;平均提取回收率分别为86.82%、89.84%、92.68%。结论方法操作简便快速,回收率稳定,适于临床血药浓度监测及人体药动学研究,尤其适于ICU或NICU患者接受去甲万古霉素治疗时的血药浓度监测。     

HPLC法快速测定万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度

目的建立快速测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC法。方法以Hypersil BDS-C₁₈（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱为分析柱,流动相:磷酸二氢钾缓冲液（pH 3.2）-甲醇（86:14,V/V）,流速1 mL·min^-1,检测波长236nm,柱温35℃,进样量20μL,万古霉素和去甲万古霉素互为内标;血清样品经10%三氯醋酸沉淀蛋白离心后进行色谱分析。结果本法万古霉素和去甲万古霉素均在2～100 mg·L^-1间线性关系良好,两者平均回收率均为95%～105%,日内及日间RSD均<5%。结论本法操作简便、快速、准确,适用于临床血药浓度测定及人体药动学研究。     

HPLC法测定人血清中万古霉素及去甲万古霉素浓度及临床应用

目的建立同时测定血清中万古霉素及去甲万古霉素浓度的高效液相色谱法.方法：采用Diamonsil C18 色谱柱（250mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：乙腈-磷酸二氢钾缓冲液（pH = 3.2）（7.5∶92.5）;流速：1 mL·min-1;检测波长：236 nm;柱温：30 ℃;进样量：25 μL;二极管阵列检测.内标法定量,万古霉素与去甲万古霉素互为内标.结果：去甲万古霉素低、中、高3 个浓度（3.125、25.000、50.000 μg·mL-1）的方法回收率分别为98.5%、102.2%、103.1%,万古霉素低、中、高3 个浓度（3.125、25.000、50.000 μg·mL-1）的方法回收率分别为96.2%、100.8%、103.5%,日内精密度RSD 小于3.24%,日间精密度RSD 小于6.12%.结论：本方法准确度高,灵敏度好,操作简便,符合万古霉素及去甲万古霉素血药浓度监测和药代动力学研究的要求.     

HPLC测定人血清中利福平的浓度

目的　建立测定血清中利福平浓度的高效液相色谱法 ,并应用于临床。方法　采用Nova -pakC18色谱柱 (4 μm ,15 0nm× 3.9mm) ,以甲醇 - 0 .0 2mol·L-1醋酸钠 (6 2∶4 0 )为流动相 ,紫外检测波长 334nm ,测定口服利福平 4d以上的患者血清中利福平的浓度。结果　血清中利福平在 0 .5～ 16 .0 μg·ml-1范围内浓度与峰面积线性关系良好 (r=0 .9992 ) ,平均回收率为99 .4 3% ,日内、日间RSD <5 .0 %。结论　所用方法准确、灵敏 ,用血量少 ,适用于治疗药物监测 ,为临床用药提供数据参考     

UPLC法测定人血清中去甲万古霉素的浓度

目的:建立测定人血清中去甲万古霉素浓度的方法。方法:血样采用乙腈-6%高氯酸(1∶5)处理后,采用超高效液相色谱法(UPLC)进样测定、色谱柱为BEHC18,流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸氢二钾缓冲液(pH3.2),进行梯度洗脱,检测波长为236nm,柱温为35℃,流速为0.25ml/min,内标为万古霉素。结果:去甲万古霉素的保留时间为4.16min,其血药浓度在2～100μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9997);日内、日间RSD均<2%;方法回收率为98.06%～99.82%。结论:该方法方便、准确、灵敏,适用于去甲万古霉素的临床血药浓度监测。     

HPLC法同时快速测定万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度

目的:建立同时快速测定血清万古霉素和去甲万古霉素浓度的HPLC-UV法。方法:采用6%高氯酸沉淀血清样本。流动相为50 mM KH2PO4缓冲液∶乙腈(90∶10,pH=2.5),色谱柱为Phenomenex C18柱(150×4.6 mm,5μm),检测波长为236 nm。结果:本测定方法下,去甲万古霉素在0.8～80μg.mL-1,万古霉素在0.9～92μg.mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),准确度分别为97.79%～104.82%和96.49%～110.75%,日内、日间精密度均小于8%。结论:本法快速简便、取血量少、灵敏度高,准确度及精密度好,适用于万古霉素和去甲万古霉素的血药浓度监测及药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定人血清中盐酸去甲万古霉素含量

目的建立反相高效液相色谱方法测定人血清中盐酸去甲万古霉素含量,并用于临床患者血药浓度监测,为个体化给药提供依据,减少不良反应发生。方法采用Synergi4μ Fusion-RP80A（250×4.6mm,4μm）色谱柱;磷酸二氢钾缓冲盐（0.02%三乙胺,用磷酸调pH=3.10）-乙腈（93：7,V/V）为流动相;流速为1.0mL.min-1;紫外检测波长：210nm;柱温：30℃;进样量：30μL。结果盐酸去甲万古霉素血清浓度与峰面积在2.0～20.0μg.mL-1范围内线性关系良好,其回归方程为：Y=30187X-3485.3,r=0.9993;低、中、高浓度的平均相对回收率分别为96.61%,95.79%,101.09%;日内精密度分别为6.21%,6.35%,10.74%,日间精密度分别为10.19%,5.89%,6.09%。结论该方法简便、快速,灵敏度高,重复性好,回收率稳定,可用于临床盐酸去甲万古霉素人体血药浓度监测及相关研究应用。     

LC-MS/MS法同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度

目的建立一种简单、快速的同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素质量浓度的LC-MS/MS方法。方法以利奈唑胺为内标,血浆经高氯酸沉淀蛋白,加入2倍量水,离心,上清液用二氯甲烷萃取后进样分析;色谱柱为Hypersil GOLD aQ,1mL·L-1甲酸水溶液-甲醇梯度洗脱,流速为0.3mL·min-1;离子源为可加热电喷雾离子源,正离子检测,扫描方式为选择反应监测(SRM),万古霉素、去甲万古霉素和利奈唑胺的检测离子对分别为m/z725.7→144.2,m/z718.3→144.2和m/z338.3→296.0。结果各样品分析时间均为8min,血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度在0.01～10μg·mL-1范围内线性关系良好,最低定量限均为10ng·mL-1,两药测定的日内和日间精密度RSD值小于15%,日内和日间相对误差在±15%以内。万古霉素和去甲万古霉素的提取回收率分别为74.16%～76.79%和73.01%～81.11%,基质效应分别为98.86%～108.69%和95.97%～109.64%。万古霉素和去甲万古霉素血浆样品在冻融、室温下保存24h和-80℃保存1个月的条件下稳定。结论建立的LC-MS/MS分析方法简便、快速、灵敏、准确,可同时测定人血浆中万古霉素和去甲万古霉素的质量浓度,并用于临床血药质量浓度的监测。     

固相萃取-HPLC测定人血清万古霉素、去甲万古霉素浓度及其与荧光偏振免疫法测定结果的比较

目的建立固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定人血清中万古霉素和去甲万古霉素浓度,并与荧光偏振免疫法(FPIA)测定结果进行相关性分析。方法血清样品经C18固相萃取小柱净化后进样。色谱柱为Hyper Sil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05 mol·L?1磷酸二氢钾-乙腈(91︰9),柱温25℃,流速1 m L·min?1,检测波长236 nm,进样量30μL;28例患者的血浆分别用SPE-HPLC和FPIA测定,考察2种方法的相关程度。结果万古霉素、去甲万古霉素的标准曲线范围分别为0.4~80 mg·L?1和1~50 mg·L?1,回收率分别为87.2%和89.8%,日内、日间精密度均<7%;SPE-HPLC和FPIA 2种方法的测定值差异无统计学意义。结论 SPE-HPLC法快速简便,准确,灵敏度高,适用于万古霉素和去甲万古霉素血药浓度检测;2种测定方法有良好的相关性。     

高效液相色谱法测定万古霉素的血药浓度

目的建立测定血清万古霉素质量浓度的高效液相色谱法．．方法以HypersilC,s柱（250mm×4．6mill,10μm）为色谱柱,流动相为乙腈一磷酸二氢钾缓冲液（10：90）,流速为0．8mL／min,检测波长为236nm,以10％硫酸锌（ZnSO4）为沉淀血清蛋白,离心后取上清液直接进样测定。结果万古霉素的低、中、高（1．50,30．82,150．45mg／L）3种质量浓度的平均相对回收率分别为99．33％,98．94％和99．70％,日内及日间精密度的RSD均小于5％（n=5）;分析方法的最低检测质量浓度为0．5mg／L;线性范围为2．o～150mg／L,回归方程为C=0．06108A＋0．0003845,r=0．9999。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,适用于血清万古霉素血药浓度的监测和药物代谢动力学研究。     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

改良固相萃取高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度

目的：建立高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法：以HypersilC18柱（4．6mmx200mm,10μm）为色谱柱,流动相为乙腈一磷酸二氢钾缓冲液（9：91）,流速为0．8mL／min,检测波长236nm。血清样品采用固相萃取柱,以含20％乙腈的磷酸二氢钾溶液为洗脱剂,收集洗脱液直接进样测定。结果：万古霉素血清样品线性范围为0．8～120mg／L,低、中、高3种不同浓度（4．33、19．40、77．60mg／L）回收率分别为100．23％、102．11％、95．68％,日内、日间RSD均小于5％。结论：该方法准确性好、灵敏度高、操作简便,可满足临床万古霉素血药浓度检测的需要。     

HPLC测定人脑脊液中的万古霉素和去甲万古霉素

目的 采用HPLC法测定人脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的含量.方法 采用Diamonsil C18柱(150 mm ×46 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH3) (20∶80),流速1.0 mL· min-1,柱温30℃,检测波长236 nm,万古霉素和去甲万古霉素互为内标.结果 脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的线性范围分别为0.0977～97.68(r2=0.9995)、0.104～104μg·mL-1 (r2 =0.9996),检测限分别为0.0484、0.0524μg·mL-1;方法回收率分别为99.8％ ～ 109.0％、99.6～107.0％,绝对回收率为95.6％ ～ 100.0％、95.9％ ～ 99.6％,批内、批间RSD均≤4.0％;室温下放置8h、冻融循环3次和冰冻21d的稳定性均良好.结论 所用方法简便准确,适宜于临床脑脊液中万古霉素和去甲万古霉素的分析.     

高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度的分析与研究

目的 探讨万古霉素采用高效液相色谱法测定血药浓度效果.方法 HT6K 本次实验应用外标法定量,经5%高氯酸处理万古霉素血浆样品,应用高效液相色谱法对血药浓度测定.结果 血浆中万古霉素在1.56~100.00mg·L-1浓度范围时,具良好的线性关系,为0.33mg·L-1检测限,1.56mg·L-1定量限.为97.25%平均回收率,RSD为1.16%.高、中、低浓度RSD日内均值为1.31%,RSD日间均值为1.66%.结论 万古霉素采用高效液相色谱法对血药浓度测定,具取样量少、准确、快速、灵敏等优点,有较高应用价值.     

HPLC法测定人血清中头孢噻利的浓度

目的:建立并优化一种简单、快速、高灵敏和高选择性测定人体血清中头孢噻利浓度的方法。方法:以万古霉素为内标,血清样品用20%硫酸锌沉淀蛋白后取上层水相直接进样,以高效液相色谱(HPLC)法测定,色谱柱为AgilentTC-C18(2)和填充相同材料的预柱AgilentTC-C18柱,流动相为乙腈-0.05 mg/L磷酸二氢钾(10∶90),流速为1.0 ml/min,紫外检测波长为254 nm。结果:头孢噻利血药浓度在1²00 mg/L范围内线性关系良好(r=0.999 8);平均方法回收率、平均提取回收率分别为99.67%和76.17%,日内、日间RSD均小于9%。结论:本法简便、快速、准确可靠、灵敏度高,适合临床常规血药浓度的监测和实验课题的研究。     

HPLC法测定人血清中甲砜霉素浓度

目的:建立测定人血清中甲砜霉素浓度的RP-HPLC法.方法:以Hypersil ODS C18(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水(25:75),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为225 nm,柱温35℃,血清样品以乙酸乙酯为提取剂.结果:甲砜霉素在0.05～20.00mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 2),高、中、低3个浓度的平均回收率分别为98.05%,100.10%,100.30%;最低检测浓度为0.01 mg·L-1.结论:该方法精密、准确,可用于甲砜霉素的药动学研究.