红霉素抑制人工关节磨屑诱导的外周血单核细胞NF-κB的活化

目的 探索红霉素(EM)对人工关节磨屑诱导的外周血单核细胞抑制性κB(IκBa)降解、核因子κB(NFκB)活化的影响.方法 采集30例人体外周血,分离单核细胞(MO),每例标本分成6组,A组:仅MO;B组:M0 超高分子聚乙烯微粒(UHMWPE);C组:MO UHMWPE 帕米磷酸钠(10μg/ml);D组:MO UHMWPE EM(5μg/ml);E组:MO UHMWPE EM(10μg/ml);F组:MO UHMWPE EM(25μg/ml).培养48 h后,采用Western印迹法检测IκBa蛋白降解情况,电泳迁移率分析检测NF-κB活性的变化.结果 A、C、D、E、F组NF-κB出活性明显低于B组(P<0.01),同时与A、C、D、E、F组相比较,B组IκBa蛋白降解明显增强.结论 EM能有效地抑制由于UHMWPE刺激MO所致的IκBa降解和NF-κB活化.EM的效果与帕米磷酸钠相似,能防治人工关节置换术后由微粒诱导的NF-κB活化引发的骨溶解,有望成为将来防治人工关节无菌性松动的一种很有潜力的药物.     

红霉素抑制人工关节磨屑诱导的骨溶解

目的 探讨红霉素（EM）防治人工关节松动的可能性。方法 采集30例人体外周血，分离单核细胞（MO）。每例标本分成6组。A组：仅MO；B组：MO＋超高分子聚乙烯微粒（UHMWPE）；C组：MO＋UHMWPE＋帕米磷酸钠（10μg／ml）；D组：MO＋UHMWPE＋EM（5pμ／ml）；E组：MO＋UHMWPE＋EM（10μg／ml）；F组：MO＋UHMWPE＋EM（25μ／ml）。培养48h后，放免法测定上清中肿瘤坏死因子（TNF）含量。结果 A、C、D、E、F组的TNF含量明显低于B组。结论 EM能有效地抑制由于UHMWPE刺激MO而分泌的TNF的量。EM的效果与帕米磷酸钠相似，能防治人工关节置换术后由微粒诱导的炎症性因子引发的骨溶解，有望成为将来防治人工关节无菌性松动的一种很有潜力的药物。     

女贞子提取物对破骨细胞分化及成骨细胞增殖的影响

目的:探讨女贞子提取物对破骨细胞分化及成骨细胞增殖的影响。方法:以1α,25-二羟基维生素D3诱导兔原代骨髓细胞获取破骨细胞,经女贞子醇提物和水煎物低、中、高剂量(均为2、20、200 mg/L)处理后,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)活性测定法检测各组细胞裂解液中TRACP活性及细胞中TRACP阳性细胞数,采用甲苯胺蓝染色法检测各组细胞骨吸收陷窝数量及骨陷窝面积百分率。以L-抗坏血酸、β-甘油磷酸钠、地塞米松诱导小鼠颅顶前成骨细胞亚克隆14细胞获取成骨细胞,采用MTT法检测各组细胞的相对增殖率,采用碱性磷酸酶(APK)活性测定法检测各组细胞中APK活性。结果:经不同剂量女贞子提取物处理后,TRACP阳性细胞数、骨吸收陷窝数量及其面积均有不同程度的改变,其中女贞子醇提物各剂量组和水煎物高剂量组TRACP活性及阳性细胞数、骨吸收陷窝数量及面积百分率,以及女贞子水煎物中剂量组TRACP活性及阳性细胞数、骨陷窝面积百分率均显著降低或减少,而水煎物低剂量组细胞的骨吸收陷窝数量显著增多(P<0.05或P<0.01);女贞子提取物低、中剂量组细胞的相对增殖率以及提取物各剂量组细胞的APK活性均显著升高,而女贞子提取物高剂量组细胞的相对增殖率均显著降低(P<0.01)。结论:女贞子提取物可抑制破骨细胞的TRACP活性,改变破骨细胞的骨吸收功能和成骨细胞的增殖行为,并增加成骨细胞的APK活性。     

阿仑磷酸钠对体外破骨细胞性骨吸收影响的研究

目的　研究阿仑磷酸钠片对体外破骨细胞性骨吸收的影响。方法　采用破骨细胞体外培养法、显微摄片、显微光密度仪扫描及计算机图象分析技术。结果　Alen(0 5、5、5 0 μmol·L-1)使体外破骨细胞性骨吸收陷窝数呈剂量依赖性减少、吸收陷窝表面积明显减少。结论　Alen通过抑制破骨细胞的活性 ,而直接抑制破骨细胞性骨吸收作用 ,对骨质疏松可能有一定的治疗作用     

补肾方骨青颗粒对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响

目的 探讨补肾方骨青颗粒对破骨细胞分化及骨吸收功能的影响.方法 体外诱导破骨前体细胞系RAW264.7向破骨细胞分化,通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察破骨细胞数目,图像分析计算骨吸收陷窝面积,荧光定量RT-PCR检测骨青颗粒对破骨细胞骨吸收功能标志性基因水平.结果 与对照组相比,骨青颗粒可显著抑制TRAP染色阳性细胞的产生,减少破骨细胞骨吸收陷窝的面积,明显降低破骨细胞骨吸收功能标志性基因[组织蛋白酶K(Ctsk)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)]mRNA的表达.结论 骨青颗粒可显著抑制破骨细胞的分化及骨吸收功能.     

不同浓度破骨细胞分化因子和1,25-(OH)_2D_3体外诱导大鼠破骨样细胞形成的研究

目的研究破骨细胞分化因子和1,25-(OH)2D3共同作用对大鼠破骨样细胞体外形成的影响。方法采用大鼠脾细胞和骨细胞联合培养,实验组分别加入不同浓度的破骨细胞分化因子和1,25-(OH)2D3进行诱导,并利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝检测等方法对破骨样细胞进行鉴定,对TRAP(+)的细胞进行计数和统计学分析。统计学方法采用单因素方差分析,组间比较用SNK检验。结果各实验组细胞均有TRAP(+)多核破骨细胞出现,并在牙本质磨片上形成吸收陷窝,破骨细胞分化因子和1,25-(OH)2D3共同作用的双因子诱导TRAP(+)多核破骨细胞形成的数量要大于使用单因子诱导,且因子浓度越大,诱导效果越好。结论破骨细胞分化因子和1,25-(OH)2D3共同作用及高浓度的因子诱导可有效诱导体外破骨样细胞的形成。     

淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响

目的研究淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响,评价淫羊藿苷对骨质疏松的预防及治疗作用。方法采用1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞以及原代分离的乳兔成熟破骨细胞与骨片共培养的方法,考察淫羊藿苷对破骨细胞的分化及骨吸收功能的影响。结果浓度为100、50μmol.L-1的淫羊藿苷明显抑制1,25-(OH)2D3诱导兔骨髓单核细胞形成破骨细胞样细胞的数目,当其浓度为100、50、10μmol.L-1时,明显抑制破骨细胞的骨吸收功能,具体表现在吸收陷窝数目及表面积均明显减少。结论淫羊藿苷不仅可以明显抑制破骨细胞的分化,同时具有抑制破骨细胞的骨吸收功能的作用,提示淫羊藿苷具有改善骨吸收功能亢进的潜力。     

NF-κB抑制剂PDTC抑制UHMWPE磨损颗粒诱导产生破骨细胞的研究

目的:探讨核因子-κB(NF-κB)抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)对高分子质量聚乙烯(UHMWPE)磨损颗粒诱导的假体周围组织破骨细胞分化成熟的影响。方法:昆明小鼠24只,分别构建颅骨模型,随机分成3组。阳性对照组模型内注入UHMWPE颗粒悬液,腹腔注射生理盐水;实验组模型内注入UHMWPE颗粒悬液,腹腔注射PDTC;阴性对照组模型内注入生理盐水,腹腔注射PDTC;14d后处死动物,免疫组织化学抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)特异性染色检测小鼠颅骨中破骨细胞的数量。结果:阳性对照组、实验组、阴性对照组破骨细胞计数分别为(12.8500±3.5484)个、(7.2000±2.6897)个和(3.7250±1.4617)个,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:PDTC能够抑制UHMWPE颗粒诱导的小鼠颅骨模型中破骨细胞的分化成熟,对假体无菌性松动有一定的防治作用。     

淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞的形成、分化和骨吸收功能

目的 研究淫羊藿苷和仙茅苷配伍抑制破骨细胞形成、分化和骨吸收的相互作用关系.方法 用1,25-(0H)2Vitamin D3和地塞米松;或人巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导骨髓单核细胞使其分化为破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色进行阳性破骨细胞鉴定;磷酸苯二钠法测定抗酒石酸酸性磷酸酶活性;将破骨细胞和骨片共同培养,以计算机图像分析测定骨吸收陷窝的面积;以Hoechst 33258和罗丹明-鬼笔环肽染色,激光共聚焦显微镜观察破骨细胞肌动蛋白环(F-actin Ring)的形态;用Western-blot分析细胞骨架相关蛋白的表达.结果 淫羊藿苷和仙茅苷在1×10-6mol/L浓度下可协同抑制破骨细胞的形成、降低抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,减少破骨细胞在骨片上形成的骨吸收陷窝面积,抑制破骨细胞骨架F-actin环的构建及其调控因子Rho GTPases和灶性黏附激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达.结论 淫羊藿苷和仙茅苷协同抑制破骨细胞性的骨吸收,为药对淫羊藿仙茅的配伍提供了实验依据.     

骨新康对大鼠成骨细胞及破骨细胞活性的研究

目的:观察骨新康对新生大鼠成骨细胞及破骨细胞活性影响。方法:SD大鼠灌胃给药3 d取得含药血清。分离成骨细胞及破骨细胞体外培养,MTT法检细胞活性,AKP检测成骨细胞分化程度,用骨吸收陷窝数量评价破骨细胞活性。结果:与对照组相比,含骨新康血清剂量依赖性地促进成骨细胞增殖;与生理盐水组相比,10%,20%骨新康组含药血清显著促进成骨细胞分泌碱性磷酸酶(P<0.01),抑制骨陷窝的生成。结论:骨新康通过促进成骨细胞的增殖和分化,抑制破骨细胞的活性,对临床骨质疏松的防治具有积极意义。