庆大霉素诱导LLC-PK1细胞凋亡与p27Kip1表达关系的研究

目的　观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用 ;研究细胞周期调节蛋白 p2 7Kip1蛋白和mRNA表达在凋亡过程中的变化 ;并探讨细胞凋亡与p2 7Kip1之间的关系。方法　对体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株 (LLC PK1细胞 )予以不同浓度的庆大霉素溶液分别作用 2 4～ 96h ,以MTT法测定庆大霉素对LLC PK1细胞增殖的抑制率 ,抽提细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡条带 ,流式细胞术测定细胞凋亡率和细胞增殖动力学 ,WesternBlot法检测细胞内p2 7Kip1的蛋白表达 ,RT PCR法检测细胞p2 7Kip1mRNA表达的变化。结果　庆大霉素对LLC PK1细胞增殖有抑制作用 ,具诱导LLC PK1细胞凋亡的作用 ,凋亡率呈药物浓度和作用时间依赖性 ;庆大霉素致细胞周期停滞于G1期。p2 7Kip1蛋白在细胞内的表达随着干预的庆大霉素浓度增加而逐渐上调 ,蛋白水平与凋亡率之间呈正相关 ,其mRNA表达趋势与其蛋白表达一致。结论　庆大霉素诱导的LLC PK1细胞凋亡与细胞周期蛋白p2 7Kip1表达密切相关。     

非小细胞肺癌中p27kip1、p16蛋白的表达及临床意义

目的探讨非小细胞肺癌中p27kip1、p16基因蛋白的表达及临床意义.方法采用免疫组化Envision法检测57例非小细胞肺癌(NSCLC)标本p27kip1、p16蛋白的表达.结果 (1)p27kip1、P16在非小细胞肺癌中阳性表达率分别为43.86%、49.12%,在癌旁正常支气管上皮阳性率分别为92.0%、96.0%,其在肺癌和正常组织中表达的差异有显著意义(P<0.005);(2)p27kip1、p16阳性表达者生存期分别较p27kip1、p16阴性表达者延长(P<0.05),且与淋巴结转移呈负相关(P<0.025);(3)p27kip1与p16的表达显著正相关(P<0.05).结论 p27kip1、p16低表达与非小细胞肺癌的发生、进展密切相关,与生存期呈负相关,两者可作为综合判断患者预后的指标.     

p27^kip1及CyclinD1在肝细胞癌中的表达及意义

目的研究p27kipl和CyclinD1蛋白表达在肝细胞肝癌(HCC)中发生、发展中的作用.方法免疫组化S-P法检测40例HCC、15例肝硬化组织和5例正常肝组织石蜡标本p27kipl和CyclinD1蛋白表达.结果 p27kipl蛋白在HCC、肝硬化、正常肝组织表达阳性率分别为32.5%(13/40)、60%(9/15)、80%(4/5),p27kipl蛋白在HCC中表达与肝硬化和正常肝组织中表达比较有显著性差异(P＜0.05),p27kipl表达且与HCC的组织学分级、类型、淋巴结转移和生存期有统计学差异;CyclinD1蛋白在HCC、肝硬化、正常肝组织表达阳性率分别为57.5%(23/40)、46.67%(7/40)、40%(2/5),CyclinD1蛋白在HCC中表达与肝硬化和正常肝组织中表达比较无显著差异(P＞0.05),CyclinD1表达仅与HCC的组织学分级有统计学差异;p27kipl和 CyclinD1蛋白表达两者之间无相关性.结论 p27kipl和CyclinD1与HCC的发生、发展有着密切联系,两者独立地起作用;p27kipl蛋白在判断患者病情预后方面有较重要的价值.     

结肠腺癌组织p27kip1表达水平及与临床病理因素的关系

目的 观察结肠腺癌组织p27kip1表达水平,探索其与肿瘤分化程度等临床病理因素间的关系.方法 HE和免疫组化染色,常规观察与图像分析结合测量结肠腺癌等组织p27kip1阳性细胞体积密度、阳性细胞比率,分析其与肿瘤分化程度等因素间关系.结果 结肠腺癌组织癌细胞体积密度与对照肠粘膜上皮间无明显差别,但其p27kip1阳性表达率明显低于对照肠粘膜和结肠腺瘤组织,与邻癌粘膜组织差异无显著性.结肠腺癌p27kip1表达水平与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移相关,与患者性别、年龄、肿瘤大小无关.结论 结肠腺癌组织p27kip1表达水平降低,且与肿瘤恶性程度、侵袭能力、淋巴结转移有关,可作为判定结肠癌恶性程度及预后的一个指标.     

幽门螺杆菌对胃上皮细胞凋亡及p27^kip1表达的影响

凋亡是一种基因调控的程序性细胞死亡,正常情况下它与增殖一起维持人体细胞总数的相对恒定。细胞周期调控点是将细胞增殖和凋亡连在一起的枢纽,是控制细胞增殖与凋亡的双向开关。p27^kip1（p^27-kinase inhibition protein 1）基因是Polyka等于1994年发现的新的CKI基因．具有限制性调节细胞周期进程的作用.     

Bag-1、Bcl-2在宫颈癌中的表达及临床意义

目的:探讨Bcl-2蛋白和Bag-1蛋白在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达变化以及与宫颈癌临床病理特征之间的关系和临床意义。方法:采用免疫组织化学S-P法,分别检测子宫肌瘤经手术切除的15例正常宫颈组织、45例宫颈癌组织标本中Bcl-2和Bag-1蛋白的表达。结果:Bag-1蛋白在正常宫颈组织和宫颈癌组织阳性表达率分别为7%、78%(P<0.05),Bcl-2蛋白在正常宫颈组织和宫颈癌组织阳性表达率分别为14%、69%(P<0.05)。在宫颈癌组织中,Bag-1表达与淋巴结转移有关(P<0.05),Bcl-2的表达与临床病理特征无关(P>0.05)。宫颈癌中Bag-1蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈正相关。结论:Bag-1、Bcl-2蛋白过表达对宫颈癌的发生、发展均起重要作用,Bag-1表达水平与宫颈癌的转移有关,可作为预测宫颈癌转移潜能的新的生物学指标。Bcl-2与Bag-1之间的抗凋亡作用呈正相关,两者在肿瘤发生、发展中的抗凋亡作用相互增强。     

小鼠p27~(kip1)真核表达载体的构建及其对单个核细胞周期的影响

目的构建小鼠p27kip1真核表达载体,探讨其对单个核细胞生长情况和细胞周期的影响,为进一步研究p27kip1在疾病防治中的作用奠定基础。方法将小鼠p27kip1基因克隆至pcDNA3.0真核表达载体上,并经脂质体介导转染至小鼠单个核细胞中,应用MTT法和流式细胞仪分析转染细胞生长情况和细胞周期。结果经酶切分析和测序鉴定,成功构建了小鼠pcDNA3.0/p27kip1重组质粒;经pcDNA3.0/p27kip1转染的单个核细胞中p27蛋白表达增多,其生长增殖不仅受到明显抑制,而且处于G1/G0期的细胞明显增加,处于S期的细胞明显减少。结论构建的pcDNA3.0/p27kip1真核表达载体能够在单个核细胞中表达,且高表达的pcD-NA3.0/p27kip1可以通过抑制细胞周期的方式抑制单个核细胞的生长。     

p27、JAB1在肝细胞肝癌的表达及意义

目的 研究细胞调控蛋白p27及其相关分子JAB1在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及意义.方法 选取60例HCC及癌旁组织,10例肝血管瘤旁肝组织病例,采用免疫组化检测p27及JAB1的表达.结果 p27主要在癌旁高表达,而JAB1蛋白在大部分HCA3组织中的表达高于对应癌旁组织.JAB1在HCC中表达高于癌旁和血管瘤旁肝组织.p27在正常组织和癌旁组织的表达高于HCC组织.结论 JAB1蛋白表达与p27呈负相关;JAB1可能是通过作用于p27,使其表达及代谢发生异常,导致细胞周期失控参与了HCA:的发生和发展.     

胃癌癌组织中p27与cyclinD1的表达及临床意义

目的 分析cyclinD1(细胞周期蛋白D1)、p27在胃癌组织中的表达及意义.方法 选取我院收治的胃癌患者58例,取患者的胃癌组织、癌旁组织、与肿瘤边缘相距＞5 cm部位的正常组织分别作为胃癌组织组、癌旁组织组和对照组,研究cyclinD1与p27在胃癌组织、癌旁组织、正常黏膜组织中的表达情况.结果 p27、cyclinD1阳性表达与浸润程度、淋巴结转移以及TNM分期有关(P＜0.05);p27阳性表达率:胃癌组织组、癌旁组织组、对照组分别为18.97％、29.31％、60.34％,胃癌组织组明显低于其他两组,组间差异均有统计学意义(P＜0.01);cyclinD1阳性表达率:胃癌组织组、癌旁组织组、对照组分别为58.62％、17.24％、22.41％,胃癌组高于其他两组,组间比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 通过对cyclinD1、p27表达的联合检测,有利于对胃癌生物学行为进行评估,为该病的诊断与治疗提供依据.     

CyclinD1、p73和 p27在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：考察 cyclinD1、p73和 p27在结直肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取60例结直肠癌患者肿瘤组织和30例正常组织中 cyclinD1、p73和 p27的表达水平及与临床指标的相关性。结果 cyclinD1蛋白在结直肠癌组织中的表达率为68.3℅（41/60）显著高于正常组织中的23.3℅（7/30）（ P ﹤0.05）,其阳性率与侵润深度、淋巴转移和 dukes 分期相关（ P ﹤0.01）。p73蛋白在结直肠癌组织中的表达率为58.3℅（35/60）显著高于正常组织中的3.3℅（1/30）（ P ﹤0.01）,其阳性率与分化程度、淋巴转移和 dukes 分期相关（ P ﹤0.05）。p27蛋白在结直肠癌组织中表达率为53.3℅（32/60）,显著低于正常组织中的80.0℅（24/30）（ P ﹤0.05）,其阳性率与分化程度、淋巴转移和 dukes 分期相关（ P ﹤0.01）。结论 cyclinD1、p73和 p27蛋白在结直肠癌组织中的表达具有特异性,对三者进行检测有助于预后判断。