阿尔茨海默病模型小鼠脑组织生物标记物代谢组学分析

目的研究阿尔茨海默病(alzheimer's disease,AD)小鼠脑组织UPLC-MS/MS代谢物谱的变化,确定AD相关的生物标记物。方法小鼠单侧海马注射β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)建立AD模型,采用Morris水迷宫试验和免疫组织化学法分别检测各组小鼠学习记忆能力和脑组织的病理学变化,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术分析测定正常组、AD模型组小鼠脑组织匀浆的代谢物谱图,数据导入masslynx软件进行主成分分析(principal component analysis,PCA)来检测脑组织中代谢产物的变化。结果经PCA分析,得分图显示正常对照组和AD模型组明显分离。确定十六碳神经鞘氨醇、二氢神经鞘氨醇、4-羟神经鞘氨醇、溶血磷脂酰胆碱C 20∶4、溶血磷脂酰胆碱C18∶3、溶血磷脂酰胆碱C 16∶0、溶血磷脂酰胆碱C 13∶0、次黄嘌呤、神经酰胺N 40∶1共9个潜在的生物标志物。与正常对照组相比,AD小鼠脑组织中鞘氨醇、溶血磷脂酰胆碱的含量明显降低(P<0.05);次黄嘌呤,神经酰胺N40∶1含量明显升高(P<0.05)。结论 AD模型小鼠脑组织的代谢物谱发生了明显改变,为AD的早期诊断和治疗提供科学依据。     

参附汤抗阿霉素心肌病小鼠血清代谢组学研究

目的 应用血清代谢组学技术,研究参附汤对阿霉素心脏毒性的逆转作用,探讨其作用机制.方法 建立阿霉素致心肌病BALB/c小鼠模型,给予相应的干预,测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷化酶-同功酶MB(CK-MB);超声心动图测定射血分数(EF)和缩短分数(FS).采集小鼠血清进行气相色谱-质谱(GC-MS)分析,所得数据...     

基于代谢组学研究对乙酰氨基酚片对中国健康成人胆汁酸谱的影响

目的:研究健康成人多次口服对乙酰氨基酚片后胆汁酸代谢的变化。方法:招募10名健康受试者,收集受试者口服对乙酰氨基酚前后的血清标本,分为给药前组(PD),第5次给药后组(FD)及第8次给药后组(ED),采用高效液相串联质谱(LC-MS/MS)的方法,定量检测血清胆汁酸谱,并结合代谢组学的主成分分析(PCA),正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),研究多次口服对乙酰氨基酚后健康成人胆汁酸代谢谱的变化,检测各组肝功能生化指标,观察在给药前后肝功能生化指标的变化。结果:在给药前和给药后人血清的胆汁酸谱发生了变化,牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA),甘氨胆酸(GCA),甘氨鹅脱氧胆酸(GCDCA),牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)的浓度与给药前的基线相比显著升高(P<0.05),肝功能生化指标无明显的变化。采用代谢组学的方法筛选出的差异代谢物GCA,GCDCA为口服对乙酰氨基酚后胆汁酸改变最敏感的指标。结论:GCA和GCDCA或可作为对乙酰氨基酚致早期肝损伤的潜在生物标志物。     

基于GC-MS技术的金钱草干预结晶肾损伤小鼠血清代谢组学研究

目的 利用血清代谢组学方法监测结晶肾损伤相关的代谢变化,评价金钱草提取物治疗结晶肾损伤的作用。方法 将21只野生型C57BL/6小鼠随机分为3组：空白对照组、结晶肾损伤模型组和金钱草干预组。采用乙醛酸盐诱导小鼠结晶肾损伤模型,给予6 d相应的治疗后,取小鼠血清进行气相色谱-质谱联用仪分析,结合模式识别筛选模型组和对照组之间的差异代谢物,并以此评价金钱草的治疗作用。结果 血清代谢组学分析鉴定了14种结晶肾损伤相关的生物标志物,包括嘌呤代谢物、氨基酸代谢物、脂肪酸代谢物等,同时数据显示金钱草提取物对结晶肾损伤有改善作用。结论 金钱草提取物能够通过调节失衡的嘌呤代谢、氨基酸代谢、糖代谢等途径而发挥预防和治疗结晶肾损伤作用。     

癌症患者血清代谢组学的HPLC和LC-MS研究

目的 本实验采用HPLC法和LC-MS技术检测了健康人和肿瘤患者人血清样品中的代谢产物,鉴定了与肿瘤生长相关的代谢物,以阐明癌症患者血清代谢组学规律.方法 HPLC条件:色谱柱为Phenomenex Luna(150mm×4.6mm,5μm),流动相为水-75％甲醇(0.1％醋酸铵水溶液);检测波长为215nm,进样量为l0μL;质谱条件为电喷雾离子检测器(ESI)负离子模式下检测;毛细管电压为2.74kV;锥孔电压为25.52V;离子源温度为100℃;得到保留时间和峰面积,数据经SIMCA-P+软件进行正交-偏最小二乘投影判别分析(OPLS-DA),表达出与肿瘤相关的差异代谢物;利用LC-MS对相关代谢物进行鉴定.结果 检测精密度RSD在0.04％～0.61％之间,健康人血清和肿瘤人血清中代谢规律得到明显区分;5种相关代谢组分得到提取和鉴定,分别为苏氨酸,色氨酸,甘油二酯,磷酰胆碱和硬脂酸.结论 肿瘤患者和健康人血清代谢规律有明显差异,鉴定出的化合物与肿瘤生长代谢密切相关,可为肿瘤疾病生物标记物的研究提供相关基础依据.     

青蒿素对ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的探讨青蒿素对ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化以及炎症因子的影响。方法将20只ApoE-/-基因敲除小鼠分为青蒿素组和PBS处理组,每组10只,经高脂喂养8周,与对照组小鼠(C57BL/6J标准饮食小鼠,10只)比较,通过血管大体油红O染色评价斑块面积;HE染色观察病变形态及血浆中炎症因子的变化。结果与对照组比较,PBS处理组及青蒿素组均可见动脉硬化斑块,炎症因子水平升高。青蒿素组的动脉硬化程度及炎症因子水平均明显低于PBS处理组。结论青蒿素可以改善ApoE-/-基因敲除小鼠动脉粥样硬化进展。     

藤黄酸作用后小鼠血清代谢组学研究

目的研究藤黄酸对小鼠血清代谢稳态的影响,发掘其体内效应分子。方法 11只雌性小鼠随机分为两组,分别尾静脉注射藤黄酸(10 mg·kg^-1)和空白溶液。整合运用液相色谱-质谱(LC/MS)和气相色谱-质谱(GC/MS)技术全面表征各组小鼠血清代谢指纹谱,利用偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)和(非)参数检验进行模式识别和统计分析,筛选、鉴定差异代谢物,聚焦相关代谢通路。结果与对照组比较,藤黄酸组小鼠血清中苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸等14个物质含量显著上升,PC、LysoPE等7个物质含量显著下降,涉及氨基酸代谢、脂肪酸代谢、三羧酸循环等通路。结论藤黄酸能显著影响机体的氨基酸代谢、磷脂代谢以及能量代谢,提示其发挥体内作用可能与之有关。该研究结果可为深入揭示藤黄酸的作用机制提供一定参考。     

北京地区大气急性重度污染暴露大鼠血清代谢组学研究

目的 基于高效液相色谱/质谱技术探讨北京大气重度污染暴露大鼠血清代谢组学的变化,寻找可能的早期生物学标志物和受影响的代谢通路,为有效防控大气污染对人体造成的损害提供新的理论依据.方法 将16只Wistar大鼠随机分为2组,即正常对照组和大气污染组.2016年12月17日～21日连续5d北京急性大气污染预警期间,正常对照...     

甲基苯丙胺滥用人员尿液代谢组学初探

目的:应用代谢组学的研究方法,对已经证实的甲基苯丙胺(MA)滥用人员尿液进行分析,筛选潜在的相关生物标志物。方法:运用高效液相色谱联合离子阱-飞行时间质谱(LC/MS-IT-TOF)对20名甲基苯丙胺滥用者与20名正常人的尿液进行检测。结果:多变量统计分析结果表明,甲基苯丙胺滥用者和正常人聚类明显,在尿液中共发现20种可能的生物标志物。结论:甲基苯丙胺滥用人员和正常人员在尿液代谢水平上具有明显差异,这为发现甲基苯丙胺滥用判定的潜在标志物提供了依据。     

薄层扫描法测定益气通脉口服液中黄芪甲苷含量的研究

目的 :测定益气通脉口服液中黄芪甲苷的含量。方法 :采用薄层扫描法。结果 :黄芪甲苷的点样量在1μg～5μg 范围内 ,与吸收度积分值呈良好的线性关系 ,平均回收率为99 33 % ,RSD为1 03 %。结论 :该方法可靠 ,数据准确 ,操作简便、易行。     

胆淤方对胆汁淤积小鼠胆汁酸代谢的影响

目的 探讨胆淤方对1,4-二氢-2,4,6-三甲基-3,5-吡啶二甲酸二乙酯（DDC）诱导胆汁淤积小鼠血清胆汁酸代谢的影响。方法 40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为4组：对照（N）组、DDC模型（M）组、奥贝胆酸（O）组、胆淤方（D）组,每组10只。N组小鼠用普通饲料喂养,M、O和D组小鼠用DDC饲料喂养,连续6周。造模第3周开始药物干预,O组ig予奥贝胆酸溶液（0.03 g·kg^-1）,D组ig予胆淤方药液（33 g·kg^-1）,M组和N组予相同体积的双蒸水。干预4周,收集小鼠血清和肝组织,试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、总胆红素（TBIL）和总胆汁酸（TBA）水平,HE染色观察肝组织炎症反应,CK19染色观察细胆管增生反应,天狼腥红染色观察纤维化,采用液质联用技术检测血清胆汁酸谱。结果 O组和D组ALT、AST、ALP、TBA、TBIL水平均较M组显著下降（P＜0.05）;D组ALT、AST水平较O组显著下降（P＜0.05）。D组小鼠肝组织炎症反应、纤维化及细胆管增生较M组减轻。D组血清初级胆汁酸胆酸（CA）和ω-鼠胆酸（ω-MCA）水平均较M组显著下降（P＜0.001）;D组血清次级胆汁酸甘氨胆酸（GCA）、牛磺胆酸（TCA）、牛磺熊去氧胆酸（TUDCA）、牛磺鹅去氧胆酸（TCDCA）、牛磺去氧胆酸（TDCA）、牛磺猪去氧胆酸（THDCA）较M组显著下降（P＜0.05、0.01、0.001）,O组的CA、ω-MCA、TCDCA、GCA和TCA水平较M组显著下降（P＜0.001）,D组血清TUDCA水平较O组下降更加显著（P＜0.05）。热图分析显示13种胆汁酸可将M与N组、O与M组、D与M组、D与O组血清胆汁酸谱两两区分。结论 胆淤方可改善肝内炎症反应,具有广泛的降胆汁酸作用。     

阿利吉仑单用及联用阿托伐他汀对动脉粥样硬化小鼠炎症因子的影响

目的:考察阿利吉仑单用或与阿托伐他汀联用对动脉粥样硬化小鼠炎症因子的影响。方法:将12周龄apoE^-/-雄性小鼠给予高脂饮食,随机分为6组(n=8),包括模型对照组,肼屈嗪组、阿利吉仑低剂量组、阿利吉仑高剂量组、阿托伐他汀组、阿利吉仑与阿托伐他汀联合用药组,均治疗12周。采用酶联免疫吸附的方法(ELISA)测定血浆中白介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的水平;光学显微镜下测定动脉粥样硬化病变区与总主动脉面积。结果:与模型对照组相比,阿利吉仑单独用药对炎症因子MCP-1的影响无显著性差异。阿利吉仑单独或者联合阿托伐他汀用药能够显著降低炎症介质IL-6、CRP的血浆水平(P<0.05),且阿利吉仑高、低剂量组之间对CRP和IL-6水平的影响亦有差异;阿利吉仑联用阿托伐他汀与阿托伐他汀组对MCP-1、IL-6、CRP水平的影响均无显著性差异(P>0.05)。组织病理学结果显示:单用阿利吉仑或联合应用阿托伐他汀都有不同程度的降低动脉粥样硬化面积,与模型对照组相比均有显著性差异,且单用阿利吉仑组、阿托伐他汀组均与联合用药组有显著性差异(P<0.05)。结论:阿利吉仑对动脉粥样硬化小鼠体内炎症因子水平有一定影响,并显示出一定的剂量依赖性,同时与阿托伐他汀合用有一定的联合治疗作用。     

益气养阴活血方对糖尿病肾病大鼠NFAT2/COX-2的影响

目的:探讨益气养阴活血方对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏保护作用及其机制。方法:50只雄性SD大鼠随机分为正常组8只、造模组42只。除正常组外,造模组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导建立DN大鼠模型,造模成功的32只DN大鼠随机分为模型组、缬沙坦组、益气养阴活血方低剂量组及益气养阴活血方高剂量组,每组8只。灌胃6周后全自动生化分析仪检测各组大鼠血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、空腹血糖(FBG)、24 h尿蛋白总量(24 h-UTP);Western blot及荧光定量PCR分别检测肾脏NFAT2、COX-2相关蛋白及其mRNA表达;苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠肾脏病理变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠肾小球、肾小管病理损伤较重,血清Scr、BUN、FBG、24 h-UTP、肾组织NFAT2、COX-2相关蛋白及其mRNA表达水平均升高(P＜0.01);与模型组比较,益气养阴活血方干预组大鼠肾脏病理明显改善,血清Scr、BUN、FBG、24 h-UTP、肾组织NFAT2、COX-2相关蛋白及其mRNA表达水平均降低(P＜0.01,P＜0.05)。结论:益气养阴活血方可能通过下调NFAT2/COX-2信号通路而减轻肾脏病理损害,保护肾功能,降低尿蛋白。     

益气活血中药治疗放射性肺损伤的效果观察

目的 探讨益气活血中药治疗放射性肺损伤的临床效果.方法 将84例在我院接受三维适形放疗发生放射性肺损伤的患者随机分为对照组(40例)和治疗组(44例).对照组给予抗生素及激素等相应药物治疗,治疗组给予益气活血中药.结果 治疗组有效率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 益气活血中药对放射性肺损伤有良好的治...     

基于液质联用技术的代谢组学生物样本——血液及尿液的收集和处理

代谢组学是定性及定量描述内源性代谢物变化的科学,正广泛应用于疾病诊断和预后过程中。血液和尿液是代谢组学研究中常用的生物样本,但因其代谢物繁多、成分复杂,亟须使用灵敏度高、特异性强的分离分析技术。液相色谱-质谱联用（liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS）技术分析速度快、分离效率高,非常适用于代谢组学等方面的研究。生物样本的采集、处理过程是实验中最关键的一步,直接决定着实验结果的准确性,因此生物样本预处理过程的标准化显得尤为重要。本文综述了常用的生物流体—血液和尿液的收集、处理及储存方法,以期为有关代谢组学研究提供参考。     

基于UPLC-MS技术的紫草素干预结肠癌移植瘤小鼠血清代谢组学研究

研究萘醌类化合物紫草素(shikonin)体外抗肿瘤活性与对SW620结肠癌移植瘤小鼠的抗肿瘤作用及其机制。采用MTT法测定紫草素对4种结直肠癌细胞的半数抑制浓度(IC₅₀);建立人结肠癌SW620裸鼠异体移植瘤模型,通过测定肿瘤体积、抑瘤率观察紫草素在体内的抗肿瘤活性并利用代谢组学技术结合多元统计对小鼠血清进行分析,探讨紫草素抗肿瘤作用机制。结果显示,紫草素能够显著抑制4种结肠癌细胞的增殖,同时在体内具有较高的抗肿瘤活性,在低、高剂量条件下抑瘤率分别达38.35%和42.16%。代谢组学分析共鉴定出包括色氨酸、缬氨酸和甲硫氨酸在内的38个差异代谢物,通路富集发现其主要通过调节SW620结肠癌移植瘤小鼠体内紊乱的氨基酸代谢发挥抗肿瘤作用,其中对色氨酸代谢通路的影响最为显著。本研究表明紫草素能够通过调节氨基酸代谢发挥抗结肠癌作用,为紫草素的进一步开发及临床应用提供理论依据。     

基于HPLC指纹图谱及定量测定的益气逐瘀利水方质量评价研究

目的：建立益气逐瘀利水方的HPLC指纹图谱,并测定4种成分含量,为益气逐瘀利水方产业化开发的质量控制提供参考。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C₁₈色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 mL·min^-1,柱温30 ℃,检测波长245 nm,建立10批益气逐瘀利水方指纹图谱。采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件（2012年版）进行相似度评价,结合聚类分析（CA）、主成分分析（PCA）及正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）模式识别技术进行质量评价,同时进行含量测定。结果：10批益气逐瘀利水方标准汤剂指纹图谱相似度均大于0.995,标定出共有峰24个,指认其中的4个共有峰（14号峰毛蕊异黄酮葡萄糖苷、15号峰阿魏酸、17号峰汉防己乙素、19号峰粉防己碱）,CA、PCA及OPLS-DA将10批样品分成2类。定量分析方法学考察结果良好,10批样品中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、汉防己乙素、粉防己碱的定量结果分别为43.98~64.18、107.32~167.95、122.63~175.21、391.62~582.02 μg·g^-1。结论：所建立的益气逐瘀利水方指纹图谱及定量测定方法稳定性好、重复性高,可更加全面系统地评价益气逐瘀利水方的质量。     

解毒祛瘀滋阴药对MRL／lpr小鼠外周血淋巴细胞凋亡及线粒体跨膜电位的影响

目的探讨解毒祛瘀滋阴中药对MRL／lpr小鼠外周血淋巴细胞凋亡及其线粒体跨膜电位的影响。方法80只MRL／lpr小鼠随机分为：模型组：20只,灌胃0．9％氯化钠注射液;中药组：20只,灌胃解毒祛瘀滋肾中药煎剂;西药组：20只,灌胃强的松混悬液;中西药组：20只,中西药分别灌胃;正常组：昆明小鼠选用20只,0．9％氯化钠注射液灌胃,均每日1次,每次0．5ml。连续饲养用药12周后取血,以梯度离心法分离提纯外周血淋巴细胞（PBLC）,培养48h,流式细胞仪检测凋亡率及其线粒体跨膜电位水平。结果正常组、中药组、西药组和中西药组PBLC0和48h凋亡率高于模型组,差异有显著性（P〈0．05,P〈0．01）。0小时西药组、正常组与中西药组的凋亡率无明显差异（P〉0．05）,但中药组和模型组与中西药组比较,差异有显著性（P〈0．05）;48h西药组与中西药组的凋亡率有明显差异（P〈0．05）,中药组和模型组与中西药组比较,差异有显著性（P〈0．01）;正常组、中药组、西药组和中西药组PBLC线粒体跨膜电位水平水平均明显低于模型组,差异有显著性（P〈0．05和P〈0．01）;西药组与中西药组低于正常组,模型组高于正常组,且比较均差异有显著性（P〈0．05和P〈0．01）;中药组与正常组之间差异无显著性（P〉0．05）;西药组与中西药组之间差异无显著性（P〉0．05）。结论解毒祛瘀滋阴药能增加MRL／Ipr小鼠的PBLC凋亡率并下调其线粒体跨膜电位水平。     

通脉活络康颗粒作用机理研究现状

本文通过对文献的研究,总结了通脉活络康颗粒在调节脂质代谢、抗血栓及调节PGI2/TXA2平衡,改善血液流变性,保护血管内皮细胞等方面的作用机理,为其进一步地研究及临床应用提供线索和依据。