反相高效液相色谱法测定曲马多及其代谢产物O-去甲基曲马多人血药及尿药浓度

目的 建立血浆和尿液中曲马多(镇痛药)及其代谢产物O-去甲基曲马多的反相高效液相色谱分析方法.方法 用zorbax SB-C_(18)色谱柱,0.05 mol·L~(-1)KH_2PO_4(用磷酸调节pH至4.0)-乙腈(90:10)为流动相,流量1.0 mL·min~(-1);荧光检测波长E_x=216 nm,E_m=308 nm.结果 血浆中,曲马多、O-去甲基曲马多的线性范围分别为12.5～800.0、5～320 ng·mL~(-1),低、中、高3种浓度绝对回收率均大于86%,相对回收率为93%～105%,日内和日间RSD分别小于9%和8%.尿液中,曲马多、O-去甲基曲马多线性范围分别为12.5～4 000、5～1 280 ng·mL~(-1),低、中、高3种浓度绝对回收率均大于80%,相对回收率为91%～107%,日内和日间RSD均小于9%.在血浆和尿液中均稳定,差异均在±10%以内.结论 本方法准确可靠、专一性好、操作简便.     

高效液相色谱荧光检测法测定人血浆中帕珠沙星浓度

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中帕珠沙星浓度.方法色谱条件Lichospher C18柱,以甲醇-0.5%三氟醋酸(4060,v/v)为流动相,激发波长335 nm,发射波长450 nm.用10%高氯酸沉淀血浆蛋白,离心后取上清液进样.结果血药浓度测定的线性范围为0.024～19.58 mg·L-1(r=0.999 7).最低检测限为30pg.绝对回收率在84.82%～92.69%,相对回收率在100.7%～104.8%.日内、日间RSD均小于10%.结论本方法准确可靠、操作简便,适用于帕珠沙星药动学研究.     

高效液相色谱法测定人血浆中氟罗沙星浓度

目的建立测定人血浆中氟罗沙星浓度的高效液相色谱法.方法血浆样品用三氟醋酸沉淀后离心,取上清液直接进样.色谱柱为ZORBAX C18柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-水(0.05% 磷酸和0.05%三乙胺)(20∶80), 流速为1.0 mL·min-1,检测波长为286 nm,柱温为室温.结果本方法线性范围49.875～7 980 ng·mL-1,r＝0.999 54, 最小检出浓度为 49.875 ng·mL-1.绝对回收率均在70%以上, 相对回收率在98%～102%,日内、日间RSD均<15%.结论本方法简便、灵敏、准确,可用于氟罗沙星血药浓度检测和药物动力学研究.     

高效液相色谱法测定人体血浆及尿液中多西环素的药物浓度

目的:建市人体血浆及尿液中多西环素药物浓度的高效液相色谱分析方法。方法:美他环素作为内标,待测血浆和尿液分别以高氯酸和甲醇沉淀蛋白,离心后取上清液进行高效液相色谱紫外检测,色谱柱为 Kromasil C_(18)柱(5μm,4.6mm×250mm);流动相为乙腈-水(30:70,含5 mmol·L~(-1)的柠檬酸),流速1.0 mL·min~(-1),检测波长350 nm。结果:本测定方法血浆和尿液的线性范围分别为O.1～6.13 mg·L~(-1)和0.085～13.62 mg·L~(-1),相关系数分别为0.9995和0.9991,血浆及尿液的相对回收率分别为95.2%～101.4%,95.6%～105.5%;日内日间 RSD 均小于10%,最低检测限分别为0.026 mg·L~(-1)及0.034mg·L~(-1)。结论:高效液相色谱法测定血浆与尿液中药物浓度简单、快速、可靠,可用于多西环素的药代动力学及生物利用度研究。     

高效液相外标法测定人血浆中缬沙坦、氢氯噻嗪浓度

目的建立测定血浆中缬沙坦、氢氯噻嗪浓度的高效液相外标法。方法采用RP-HPLC法测定血浆中的缬沙坦和氢氯噻嗪,分别用沉淀法和萃取法去除蛋白,荧光检测器和紫外检测器测定,外标法定量。结果缬沙坦的线性范围为0.05～8.00 mg/L(r=0.9999),相对回收率为89.7%～99.7%(n=5),绝对回收率为78.9%～90.7%(n=5),日内精密度RSD为1.1%～3.2%,日间精密度RSD为1.5%～3.9%;氢氯噻嗪的线性范围为2.5～300μg/L(r=0.9995),相对回收率为91.5%～98.4%(n=5),绝对回收率为78.2%～91.5%(n=5);日内精密度RSD为2.1%～7.4%,日间精密度RSD为2.4%～7.7%。结论高效液相外标法具有特异性强、快速、准确的优点,可用于血浆中缬沙坦、氢氯噻嗪的快速测定及人体药动学研究。     

RP-HPLC测定人尿液中的甲磺酸帕珠沙星

目的建立测定人尿液中甲磺酸帕珠沙星浓度的方法。方法采用HPLC法,取待测尿样加入内标适量,用蒸馏水稀释后离心,取上清液进样测定。结果将帕珠沙星峰面积和内标诺氟沙星峰面积比值对浓度进行回归,得回归方程。线性范围为10 n.gm l-1~50μg.m l-1(r=0.9992,n=10)。相对回收率98.08%~102.70%,日内、日间RSD分别小于1.5%和3.5%。结论所建方法准确可靠,操作简便,适用于尿药浓度的测定。     

人血清中甲磺酸帕珠沙星的RP-HPLC测定方法研究

目的 建立血清中甲磺酸帕珠沙星浓度的反相高效液相色谱分析方法。方法 取待测血清，加入内标甲醇溶液适量。加入甲醇沉淀蛋白，离心后取上清液进样测定。结果 将帕珠沙星峰面积（A）和内标诺氟沙星峰面积的比值（Y）对浓度（C）进行回归．得回归方程。线性范围为10-50000ng／ml（r=0．9996，n=10）。低、中、高三种浓度的绝对回收率均大于80％，相对回收率在96％．104％，日内、日间RSD分别小于3．2％和3．7％。结论 本法具有灵敏、准确、测定成本低、操作简便等优点，适用于临床药动学及常规血药浓度监测。     

衍生化HPLC柱切换法测定人血浆中卡托普利浓度的方法研究

目的 :建立高效液相色谱柱前衍生化结合柱切换技术测定血浆中卡托普利浓度的方法。方法 :血浆中卡托普利与对溴苯甲酰甲基溴发生衍生化反应后 ,分别加入等体积的丙酮和水 ,离心后取上清液进样 ,以HPLC柱切换进行分离测定。结果 :线性范围为 2 0～ 10 0 0ng·mL-1,净化回收率为 94 7%～ 96 2 % ,方法回收率为 98 1%～ 10 3 8% ,日内和日间检测RSD分别小于 2 8%和 4 2 %。结论 :方法简便灵敏 ,为卡托普利人体药代动力学研究及临床药物监测提供了方法     

反相高效液相色谱法测定人血浆及尿液中甲磺酸帕珠沙星浓度

目的:建立血浆及尿液中甲磺酸帕珠沙星浓度的反相高效液相色谱分析方法。方法:用甲醇沉淀血浆蛋白,离心后取上清液进行色谱分析;尿样稀释后离心取上清液进样。分析柱为DiamonsilC18,流动相为乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾(含1%四丁基溴化铵)(8∶92,V/V),流速为1.4ml/min,激发波长320nm,发射波长400nm。结果:甲磺酸帕珠沙星在血浆和尿液中的检测浓度线性范围均为31.25～10000ng/ml(r=0.9999);在血浆、尿液中的相对回收率分别为97.77%～99.87%、98.31%～100.82%,RSD<1.0%～3.0%。结论:本方法准确可靠、操作简便,适用于甲磺酸帕珠沙星的临床药动学及常规血药浓度监测。     

兔感染性模型组织液中左氧氟沙星浓度HPLC测定

目的建立兔组织感染性模型组织液中左氧氟沙星药物浓度的高效液相色谱分析方法。方法以加替沙星为内标,室温下兔组织液样品15%高氯酸沉淀蛋白后,离心后取上清液进样测定。色谱柱为ZORBAXSB-C18(150mm×4.6mm,5μm)。流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾∶乙腈∶三乙胺(82∶18∶0.3,V/V/V),pH4.5,流速1ml/min,荧光检测激发波长298nm,发射波长458nm。结果线性范围0.025～3.0μg/ml(r=0.9999)。低、中、高浓度的绝对回收率均大于76%,相对回收率在97%～104%,日内、日间RSD分别小于2%和4%。最低检测浓度为0.025μg/ml,最低检测限为2ng/ml,S/N>3。本方法准确可靠,操作简便,适用于体内生物样品测定。     

Nachweis einiger Heilmittel in der Kniegelenksynovialflüssigkeit

Zusammenfassung Mittels Gaschromatographie und Dünschichtchromatographie wiesen die Autoren 11 Substanzen nach, welche durch Injektion oder nach Verabreichung per os in die Kniegelenksynovialflüssigkeit eindrangen. In ihrer Aufstellung konnten sie eine direkte Beziehung zwischen Struktur sowie chemischphysikalischen Eigenschaften der Substanz und ihrer Fähigkeit, aus dem Blut in die Kniegelenksynovialflüssigkeit einzudringen, nicht nachweisen, außer der Tatsache, daß Substanzen mit starker Affinität zu Eiweißstoffen erst in höheren Dosen nachweisbar waren.     

Emerging drugs for epilepsy

Epilepsy affects ≤ 1% of the world's population. Antiepileptic drugs (AEDs) are the mainstay of treatment, although more than a third of patients are not rendered seizure free with existing medications. Uncontrolled epilepsy is associated with increased mortality and physical injuries, and a range of psychosocial morbidities, posing a substantial economic burden on individuals and society. Limitations of the present AEDs include suboptimal efficacy and their association with a host of adverse reactions. Continued efforts are being made in drug development to overcome these shortcomings employing a range of strategies, including modification of the structure of existing drugs, targeting novel molecular substrates and non-mechanism-based drug screening of compounds in traditional and newer animal models. This article reviews the need for new treatments and discusses some of the emerging compounds that have entered clinical development. The ultimate goal is to develop novel agents that can prevent the occurrence of seizures and the progression of epilepsy in at risk individuals.     

盐酸达泊西汀中甲磺酸甲酯、甲磺酸乙酯及甲磺酸异丙酯的顶空毛细管GC-ECD法测定

建立了衍生化顶空毛细管气相色谱-电子捕获检测器(ECD)法测定盐酸达泊西汀中的甲磺酸甲酯(MMS)、甲磺酸乙酯(EMS)和甲磺酸异丙酯(IMS).应用碘化钠衍生技术,使用PW-5毛细管柱,载气为氮气,ECD检测,程序升温.MMS、EMS和IMS分别在0.03～0.30、0.05～0.50和0.05～0.50 μg/ml浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为63.5％、100.3％和96.2％,最低检测限分别为0.30、0.50和0.50 ng/ml.     

血管内皮生长因子的异常与子(癎)前期发病的关系

目的:研究血浆可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)浓度和胎盘组织血管内皮生长因子(VEGF)、胎盘生长因子(PLGF)及其血管内皮生长因子受体1(VEGFR1,Flt-1)、可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1,sFlt-1)mRNA的表达与子前期的关系.方法:采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测45例子前期患者和45例健康产妇血清sICAM-1的浓度,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测胎盘组织中VEGF、PLGF、Flt-1、sFlt-1 mRNA的表达.结果:(1)子前期组sICAM-1水平为(218.45±29.93) μg/L,显著高于对照组的(168.84±19.39) μg/L(P < 0.01).(2)子前期患者胎盘组织VEGF、PLGF、Flt-1、sFlt-1 mRNA的相对表达量显著高于对照组(均P < 0.01).(3)血清sICAM-1浓度与胎盘组织中sFlt-1mRNA的相对表达量呈正相关(r = 0.90,P < 0.01).结论:子前期患者血清sICAM-1浓度升高,其胎盘组织VEGF、PLGF、Flt-1、sFlt-1 mRNA的相对表达量也升高.胎盘组织sFlt-1mRNA的高表达与子前期内皮损伤等有密切关系.     

Antiparasitic protozoan vaccines

Parasitic infections caused by pathogenic protozoa affect over 1 billion people worldwide and impose a substantial health and economic burden, particularly on inter-tropical less-developed countries where they are more prevalent. Despite encouraging progress in vaccine development, chemotherapy remains the single most effective, efficient and inexpensive means to control most parasitic infections [1]. However, day to day parasites are becoming increasingly resistant to drugs currently in use, such as Plasmodium towards chloroquine, lending to the start of a promising future for vaccines. Patent applications regarding vaccines for the prevention, control and diagnosis of parasitic protozoan infections are reviewed for the period December 1996 - October 2000. However, vaccines for some of the protozoan infections do not appear in the literature in the period reviewed; only, vaccines against malaria, leishmaniasis, trypanosomiasis, cryptosporidiosis, pneumocystosis, eimeriosis, toxoplasmosis and neosporosis, as well as Babesia microti infections have been found.     

Binding affinity in drug design: experimental and computational techniques

ABSTRACT

Introduction: In pharmaceutical design where future drugs are developed by targeting a specific chosen protein, the evaluation of ligand affinity is crucial. For this very purpose are a multitude of diverse methods which are continuously being improved, which, in turn, makes it difficult to choose which techniques to use in practice.

Areas covered: In this review, the authors discuss both experimental and computational approaches for affinity evaluation. Basic principles, general limitations and advantages, as well as main areas of application in drug discovery, are overviewed for some of the most popular ligand binding assays. The authors further provide a guide to affinity predictions, collectively covering several techniques that are used in the first stages of rational drug design.

Expert opinion: All affinity estimation methods have limitations and advantages that partially overlap and complement one another. Some of the suggested best practices include cross-verification of data using at least two different techniques and careful data interpretation.