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目的:建立高灵敏度的检测乳糖中痕量残留蛋白的含量。方法:采用离子选择性凯氏定氮法对乳糖中残留蛋白的含量进行测定。结果:离子选择性凯氏定氮法有较高的灵敏度(其最低检出限在0.06μg·mL-1,而传统的凯氏定氮法最低检出限大多在毫克水平),且在0.2~100μg·mL-1范围内氨气敏电极测定的毫伏数与蛋白质中的氮含量有较好的线性关系;高、中、低3个浓度水平的平均回收率分别为99.9%,99.3%,99.0%;精密度考察RSD为1.4%。结论:离子选择性凯氏定氮法检测限低,简便、快捷,适用于乳糖中痕量蛋白的测定。 相似文献
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第4批蛋白含量测定国家标准品的制备和标定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立蛋白含量测定用国家标准品。方法:按2005年版中国药典三部、WHO 和 ICH 标准品有关要求,对标准品进行制备、分装、冻干、质量检测并开展协作标定。结果:批号为2002/04的蛋白含量测定标准品经检测,外观、无菌实验合格。pH 为7.5,水分含量为0.7%。蛋白含量经过6家单位共计39次的凯氏定氮法协作标定后,确定其含量为21.24 mg·支~(-1),标准差为0.694 mg·支~(-1),总体 RSD 为1.06%。采用 Lowry 法对第3批蛋白含量测定国家标准品与该批蛋白标准品进行比较后,结果表明两者无显著差异。结论:该批蛋白含量测定标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准用于 Lowry 法蛋白含量测定,特定为第4批蛋白含量测定国家标准品。 相似文献
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Lowry法测定人凝血因子Ⅷ蛋白含量 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:对Lowry法应用于人凝血因子Ⅷ蛋白含量测定中的可行性进行研究。方法:考察S公司人凝血因子Ⅷ原液及成品,比较凯氏定氮法与Lowry法对蛋白测定结果产生的差异,及不同浓度保护剂对Lowry法的影响。结果:甘露醇对蛋白含量测定有明显正干扰,甘氨酸有负干扰;对样品进行预稀释,辅料在低浓度范围内,当甘露醇浓度为0.1%和甘氨酸浓度为0.3%时,可减少辅料的干扰作用。结论:适当稀释样品可减少保护剂的干扰,用Lowry法测定人凝血因子Ⅷ蛋白含量,简单快速准确可行。 相似文献
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福林酚法测定脑蛋白水解物溶液中的多肽含量 总被引:8,自引:0,他引:8
目的改进脑蛋白水解物的多肽检测法。方法用福林酚法测多肽与凯氏定氮法进行比较。结果福林酚法测得的多肽值与总氮结果一致,且方法更稳定。结论福林酚法可在脑蛋白水解物溶液多肽含量的检测时代替凯氏定氮法进行控制。 相似文献
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<正> 冻干血浆蛋白含量测定国家卫生部颁发的《生物制品规程》是采用凯氏定氮法,但该法操作比较复杂,也较费时,对于多批量冻干血浆的蛋白含量测定更是比较困难。日本《生物制品最低要求》采用双缩脲比色法。为此,我们用此法进行了多次试验,发现该法操作简便,快速,通过与凯氏定氮法的测定结果比较,无显著性差异。在双缩脲法中,二点法比直线回 相似文献
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目的: 对荧光染色法测定重组酵母乙肝疫苗原液中残留DNA的影响因素进行探索分析,以了解该方法对本疫苗残留DNA检定的适用性。方法: 参照探针杂交法对乙肝疫苗原液残留DNA的测定结果,对乙肝疫苗原液中可能存在Tween-20、PEG、蛋白等物质对荧光染色法测定残留DNA含量的影响进行分析,对该方法的线性范围、用于乙肝疫苗原液残留DNA检定的准确性和重复性进行了研究,并对不同来源DNA标准存在的差异进行比较。结果: 荧光法测定酵母乙肝疫苗残留DNA线性范围为2.5 ng.mL-1~80 ng.mL-1;发现Tween-20、PEG等对残留DNA检测影响较小,加标回收率均在80%-120%之间;而蛋白质对检测影响较大,经酚-三氯甲烷抽提后可有效去除蛋白质干扰,回收率达到90%左右,CV小于10%;同时发现不同来源的DNA标准品存在荧光标记效率的差异。 结论: 乙肝疫苗原液经处理去除蛋白干扰后可采用荧光染色法进行残留DNA含量的测定,但应注意使用与疫苗表达系统相同宿主来源的DNA标准品。 相似文献
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胡国华 《中国生化药物杂志》1997,18(4):204-205
在酸性介质中用旋光度测定法测定盐酸精氨酸注射液的含量,检测浓度为0.025g/ml,回收率为100.5%(n=9),CV为1.2%。该法与凯氏定氮法比较,准确、简便、快速,结果基本一致。 相似文献
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乙醛酸显色法测定血清球蛋白的蛋白含量临床上有所报道,但用于测定血液制品中的蛋白含量却未见报道。本文通过以半微量凯氏定氮法为标准,用乙醛酸显色法测定蛋白含量,重点考察了肌注免疫球蛋白的蛋白含量测定的线性、重复性和回收率,并与双缩脲法、双波长法及紫外分光光度法进行了比较。 相似文献
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目的:考察注射用乳糖酸阿奇霉素与盐酸氨溴索注射液的配伍稳定性.方法:观察注射用乳糖酸阿奇霉素与盐酸氨溴索注射液配伍后于室温避光放置24h内的外观、pH及不溶性微粒的变化,并采用高效液相色谱法测定配伍液中阿奇霉素、氨溴索的含量.结果:室温、避光条件下,注射用乳糖酸阿奇霉素、盐酸氨溴索注射液加入5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液中,在24h内配伍液的外观、pH均无明显变化,微粒数目不断减少,含量测定结果显示氨溴索在以5%葡萄糖为溶媒的配伍液和以0.9%氯化钠为溶媒的配伍液中,24h内含量无明显变化;阿奇霉素以5%葡萄糖为溶媒的配伍液中24h内含量无明显变化,但在以0.9%氯化钠为溶媒的配伍液中16 h后含量有所下降.结论:最终浓度分别为4.31,1.03或小于4.31,1.03 mg·ml-1的乳糖酸阿奇霉素和盐酸氨溴索以5%葡萄糖为溶媒的配伍液在24 h内使用较安全,以0.9%氯化钠为溶媒的配伍液建议在8h内使用. 相似文献
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目的 建立ELISA法检测疫苗中残留卵清蛋白的含量。方法 将进口纯化兔抗卵清蛋白抗体作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记兔抗卵清蛋白抗体作为酶标抗体,以系列含量的卵清蛋白溶液为标准,采用ELISA双抗体夹心法,对供试品中残留卵清蛋白进行定量测定。结果 最佳线性范围为1.25~20ng/ml,相关系数r≥0.99;定量限度为1.25ng/ml;准确性试验回收率为89.2%~103.6%;精密性试验内和试验间变异系数分别为5.6%~6.7%和4.2%~9.4%。与马血清、羊血清、人血清白蛋白、牛血清白蛋白、流行性感冒病毒裂解疫苗基质液及其他无残留卵清蛋白的疫苗均无交叉反应。结论 本方法特异性强、灵敏度高,准确性、重复性和稳定性好,可用于疫苗中残留卵清蛋白的定量检测。 相似文献
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<正> 冻干血浆蛋白含量测定卫生部颁发的《生物制品规程》采用凯氏定氮法。该法操作繁琐、费时;对于为多批量和快速测定血浆中的蛋白含量不方便。本文根据文献报道,蛋白质的稀溶液在215nm和225nm吸收度之差值,与其浓度在一定范围内符合Beer定律。参考文献的方法,设计了紫外分光光度法,发现该 相似文献
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胸腺肽制剂蛋白含量三种测定方法的质疑 总被引:1,自引:0,他引:1
胸腺肽蛋白含量测定现有三种方法,即半微量凯氏定氮法、Follin法和紫外法,本文就此三种方法做了比较实验,结果表明同一批号三种方法测定结果存在着很大的差异。定氮法比Follin法约高2~3倍。紫外法比Follin法约高1~2倍。 相似文献
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目的 比较奥拉西坦注射液2种不同的含量测定方法.方法 分别采用凯氏定氮法和HPLC法测定奥拉西坦注射液的含量.结果 凯氏定氮法测定的平均回收率为99.6%,RSD为0.3%;HPLC法测定的平均回收率为99.4%.RSD为0.3%,奥拉西坦在0.02084~0.18756 nag·mL-1与峰面积呈良好线性关系,r=0.99996.结论 2种测定方法的测定结果无明显差异;凯氏定氮测定法方法简便、成本低,但专属性相对较差,可用于常规检查;HPLC法专属性强、灵敏度高、重复性好,为更好的控制样品的质量,可将HPLC法订入质量标准. 相似文献
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奥拉西坦胶囊含量测定方法研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的建立奥拉西坦含量测定方法。方法分别采用凯氏定氮法和HPLC法测定奥拉西坦胶囊中奥拉西坦的含量。结果凯氏定氮法测定的平均回收率为99.6%,重现性良好,RSD为0.3%;HPLC法测定的平均回收率为99.88%,精密度好,RSD为0.20%,奥拉西坦在0.099~1.998mg/mL与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999。结论采用凯氏定氮法和HPLC法测定奥拉西坦胶囊中奥拉西坦的含量,测定结果显示无明显差异,但两种方法比较HPLC法专属性强,灵敏度高,重现性好,可更好地控制样品的质量,将HPLC法订入质量标准。 相似文献