具有标记靶作用的固相免疫电镜快速诊断法(SPA—GIEM)

应用金黄色葡萄球菌(Staphglococcal)表面富含具有与人和某些动物IgG的Fc片段结合能力的蛋白质抗原成分——葡萄球菌A蛋白(Staphglococeal protein A简称SpA)的特性,以葡萄球菌为载体,用抗血清致敏后吸附病毒,用于电子显微镜中病毒检测。电镜下,当菌体充分吸附病毒后,即可形成具有花环样的特殊结构,故将本方法定名为SpA—G IEM(Staphglococcal protein A—Gayland Immune electron Miuoscopg)。     

用单克隆抗体免疫磁珠测定技术快速灵敏地检测沙门氏菌(O:6,7)

作者使用了鼠抗沙门氏C_1血清群脂多糖(LPS)(O:6,7)的特异性单克隆抗体:MASC-1,IgG2b(MC1);MASC-3,IgM(MC3);MASC-9,IgG_3(MC9),经50%硫酸铵沉淀粗提后,随后用A-亲和层析或凝胶过滤层析法纯化,纯化后的抗体用~(125)I或辣根过氧化物酶标记。     

用固相免疫酶底物珠法(DASS)检测五种人群血清弓形体抗体

弓形体病(Toxoplasmosis)是龚地弓形体引起的人畜共患的传染病。国内有关人体弓形体病的报告不多,而血清流行病学报告也只见于福建、台湾、广西、北京和天津等地。一年来,我们首次用固相免疫酶底物珠法(DASS)对五种人群268份血清标本进行了弓形体抗体检测,结果报告如下: 材料与方法 1.血清来源及选择:黑龙江省卫生学校学员、哈尔滨医科大学附属第二医院献血员(市郊农民)、哈尔滨市香坊区屠     

用蚀斑试验和免疫过氧化物酶技术测定SV_(40)病毒

文章叙述了用七天内形成蚀斑的方法测定猴病毒40(SV_(40))感染力,和用敏感而经济的间接免疫过氧化物酶技术作T抗原测定的程序。两法所用病毒为SV_(40)的小蚀斑变异株的纯化材料VA_(45-54),所用细胞WT_2是非洲绿猴肾CV_(-1)细胞系的TC7的次代克隆。过氧化物酶技术如下:在微量板上长成单层的     

用聚乙二醇和Ⅰ~(125)标记的A蛋白快速测定含IgG的循环免疫复合物

[Stevens WJ et al:Immunol Letters3(1):1,1981(英文)] 本文报告了用市售制剂快速测定含IgG的循环免疫复合物(CIC)的方法。其操作过程主要为:将血清用PBS(pH7.4)1:1稀释,取100μl与等量的5％的PEG(分子量6,000,溶于PBS中)混合,放4℃1小时,3,000g 4℃沉淀1小时,去上清,加0.5ml 2.5％的PEG(溶于0.1％吐温20 PBS中)混悬,再3,000g     

用市售酶免疫测定法检测丁型肝炎抗原、抗丁型肝炎病毒(HDV)抗体和IgM抗-HDV的比较

HDV的血清学标志主要有HDV抗原(HDAg)、抗-HDV和IgM抗-HDV。作者用5家公司生产的酶免疫测定法(EIA)试剂盒检测82份HBsAg阳性血清标本,其中55份以前证实有HDV感染,42份含有HDAg,13份含有抗-HDV或/和IgM抗-HDV,27份无任何HDV标志。用6个厂家的抗-HDV试剂盒测定81份血清标本,52份HBsAg阳性,其中36份含有抗-HDV,仅1份HDAg阳性;8份抗-HBs阳性,21份无HBV标志。用3种IgM抗-HDV试剂盒测定83份血清标本,56份HBsAg阳性,其中37份含有IgM抗-HDV。所有含HDV标志的血清标本均用其他方法如血清阳转试验和中和试验等确证。结果表明,Wellcome、Pasteur和Noctech     

B7-1人-鼠嵌合抗体对小鼠慢性移植物抗宿主病(cGVHD)狼疮样肾炎的免疫干预效应

目的探讨在诱导c GVHD小鼠狼疮样肾炎模型并通过各项指标鉴定其造模成功的基础上,运用自行研制的B7-1人-鼠嵌合抗体阻断B7/CD28共刺激信号通路对小鼠狼疮样肾炎模型病理损伤的逆转效应。方法将6~8周龄雌性(C57BL/6×BALB/c)BCF1小鼠随机分为4组,模型组于0、3、7和11 d经眼眶静脉注射100μL雌性亲代BALB/c小鼠脾脏细胞107/只。抗体干预组在造模后第1、3、5、8、15、30及60天分别经眼眶静脉注射100μL B7-1人-鼠嵌合抗体(克隆号2B11)200μg/只,环磷酰胺(CTX)干预组在末次注射淋巴细胞后第1、3、5、8、15天分别腹腔注射100μL CTX 2.5 mg/只。按照上述时间点分析小鼠抗ds DNA抗体、ANA及尿蛋白含量,12周时处死小鼠观察肾脏组织HE染色、免疫复合物(IC)沉积等情况。结果模型组100%小鼠出现蛋白尿,尿蛋白含量为++~++++,抗体干预组12周时仅有30%的小鼠出现蛋白尿,尿蛋白含量为+~++;12周时与模型组相比,抗体干预组小鼠血清抗ds DNA抗体阳性率由50%降至0;抗体干预组ANA阳性率由90%降至40%,且荧光面积与荧光亮度均下降;HE染色镜下观察,抗体干预组肾小球囊腔大小较为均一,炎性细胞浸润减少;直接免疫荧光法可见抗体干预组肾小球血管襻IC沉积减少。结论 B7-1人-鼠嵌合抗体可通过阻断或削弱B7/CD28共刺激信号通路,减少自身抗体和IC生成,逆转狼疮肾炎的病理损伤,提示该自行研制的B7-1人-鼠嵌合抗体对狼疮肾炎具有潜在的防治作用。     

传染性胃肠炎(TGE)Nouzilly弱毒株诱导TGE乳源性免疫:被动保护仔猪和用ELISA检测血清和乳汁中抗体

猪传染性胃肠炎(TGE)所引起的猪急性、高度接触传染性的病毒性肠炎,被认为是新生仔猪死亡的主要原因,经TGE病毒有毒株自然感染或人工口服感染妊娠母猪,其乳源免疫对仔猪具有高度的保护力,而用细胞培养减毒的TGE毒株免疫母猪,乳源免疫性欠佳。有一株TGE变异的弱毒Nouzilly株(N株),抗酸度和胃酶消化,用于血清学阴性怀孕的母猪口服免疫,免疫后乳源性免疫应答赋予哺乳仔猪有抗强毒攻击的良好保护     

上市后安全性数据管理:快速报告的定义和标准人用药品注册技术要求国际协调会议(ICH)三方协调指导原则(E2D)

2003年11月12日,ICH指导委员会在ICH程序的第四步建议三方采用本原则. 按照ICH程序,ICH专家工作组制定了本指南,并已提交给各国管理当局征求意见.在ICH程序的第四步,ICH指导委员会建议欧盟、日本和美国的管理当局采用本终稿.     

用激光微解剖/压力弹射器和纳流LC/MS/MS鉴定尸体检查中人体大脑组织中的蛋白质(5989-0895EN)

大多数神经退化紊乱症，例如帕金森综合症和Alzheimer’s疾病的分子机理至今仍不清楚，虽然已经对整个组织的匀浆样品进行了大量的蛋白质表达分析。这些样品并不能提供任     

合成乙型肝炎疫苗:用与破伤风类毒素偶联的铝剂吸附合成二聚肽(139-146-Aba)免疫家兔产生抗-HBs/a

对乙型肝炎病毒(HBV)感染或接种HBsAg的免疫应答可诱导人体产生了HBsAg各个血清型共同的a决定簇特异性抗体。为了制备抗HBV感染的合成疫苗,需要一种与a决定簇最相似的免疫原性肽。     

液相色谱-三重四级杆质谱联用法检测人类辅助生殖技术用液中N(2)-L-丙酰胺-L-谷氨酰胺含量

目的：建立采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液中N（2）-L-丙酰胺-L-谷氨酰胺指标成分的方法,分析不同用途培养液中N（2）-L-丙酰胺-L-谷氨酰胺的含量。方法：采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱联用法,使用SUPELCO Discovery HS F5-3色谱柱（150 mm×2.1 mm,3 μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液,梯度洗脱,流速0.35 mL·min^-1,柱温40℃;质谱采用电喷雾离子源,负离子模式扫描,扫描方式为多反应监测。结果与结论：N（2）-L-丙酰胺-L-谷氨酰胺在1.276~12.76μg·mL^-1浓度范围内线性关系良好;平均加样回收率在100.5%~103.0%,相对标准偏差小于1.98%。说明采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液灵敏、快速、准确、专属性强,可为体外生殖培养液的质量标准研究提供依据。