Calpain抑制剂ALLN对H2O2诱导的661W细胞损害的影响

目的探讨ALLN(N-acetyl-leu-leu-norleucinal)在过氧化氢(H_2O_2)对661W光感受器细胞的毒性损害过程中的可能影响。方法 MTT法测定H_2O_2对661W细胞活性的影响;Western blot法检测在H_2O_2作用661W光感受器细胞中不同时间点Calpain 1和Calpain 2的蛋白水平。结果 MTT结果表明,H_2O_2作用于661W细胞24 h后,661W细胞数明显下降;100μmol·L^-1的H_2O_2作用于661W细胞12、18、24 h,Calpain 1和Calpain 2的蛋白水平随H_2O_2作用时间的延长而增加;MTT法测定661W细胞活性,发现ALLN+H_2O_2组细胞活性明显比单纯H_2O_2组高;MTT法检测不同浓度ALLN组(25、50、100、200μmol·L^-1)的细胞活性,结果显示ALLN组细胞活力与空白对照组无明显差别。结论Calpain抑制剂ALLN可减轻H_2O_2对661W细胞的毒性损害作用,为光感受器细胞氧化损伤及保护提供了实验依据。     

基于Nrf2/HO-1信号通路探讨虾青素对创伤性脑损伤模型大鼠氧化应激和炎症反应的影响

目的 探讨虾青素对创伤性脑损伤（TBI）大鼠氧化应激和炎症反应的影响。方法 将雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、虾青素低剂量组（20 mg/kg）、虾青素高剂量组（40 mg/kg）、虾青素+ML385组[虾青素40 mg/kg+核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385 30 mg/kg],每组14只。除假手术组外,其余各组大鼠按改良的Feeney自由落体撞击法复制TBI大鼠模型。各药物组大鼠灌胃或腹腔注射相应药液,假手术组和模型组大鼠灌胃等体积生理盐水。分别于药物干预后第1、3、7天对各组大鼠的神经功能进行评分;于药物干预后第7天,观察各组大鼠脑组织形态学变化并进行炎症浸润评分,观察其脑组织神经细胞超微结构,检测脑组织中氧化应激指标[超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）]、炎症反应指标[肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、诱导型一氧化氮合酶]含量和Nrf2、血红素加氧酶1(HO-1)、NAD(P)H醌氧化还原酶1(NQO1)蛋白及mRNA的表达情况。结果 与假手术组比较...     

虾青素对过氧化氢诱导胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响

目的观察虾青素通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶/活性氧(ROS)信号通路对过氧化氢(H2O2)诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo的影响。方法实验分为空白组、模型组和实验组,每组8个复孔;实验组HTR-8/SVneo细胞预先以10 nmol·L^-1虾青素处理24 h,之后实验组和模型组细胞均以250μmol·L-1H2O2作用24 h;空白组未进行任何药物干预。以噻唑蓝(MTT)法检测各组HTR-8/SVneo细胞增殖情况,以DCF-DA荧光染色检测各组HTR-8/SVneo细胞内ROS水平,检测各组HTR-8/SVneo细胞培养上清中乳酸(LDH)及氧化应激指标含量,以蛋白质印迹法检测各组细胞NADPH氧化酶4(NOX4)、p22phox蛋白表达情况。结果干预后24 h,空白组、模型组及实验组HTR-8/SVneo细胞内ROS荧光强度值分别为2.76±0.43,34.15±2.34,15.61±1.85,LDH分别为(756.24±31.05),(1785.46±34.69),(1235.26±26.75)U·L^-1,超氧化物歧化酶(SOD)分别为(23.56±2.24),(10.04±2.02),(15.16±3.08)U·mg^-1,丙二醛(MDA)分别为(0.46±0.14),(0.96±0.21),(0.68±0.13)U·mg^-1,Nox4蛋白相对表达量分别为0.32±0.04,0.89±0.06,0.64±0.03,p22phox蛋白相对表达量分别为0.15±0.03,0.75±0.04,0.49±0.02,模型组分别与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论虾青素对H2O2诱导人胎盘滋养细胞HTR-8/SVneo氧化应激损伤具有保护作用,可能与干扰NADPH氧化酶/ROS信号通路活性有关。     

虾青素调控AMPK-SIRT1通路对七氟醚诱导HT22神经细胞损伤的影响

目的研究虾青素对七氟醚诱导的海马神经元HT22细胞活力和细胞凋亡的作用与机制。方法体外培养HT22细胞分为对照组、七氟醚组、七氟醚+虾青素(1.25、2.50、5.00μmol/L)组;七氟醚组给予4%七氟醚刺激细胞6 h;七氟醚+虾青素组七氟醚刺激细胞前给予不同浓度的虾青素处理2 h。采用MTT实验检测各组HT22细胞存活率,DCFH-DA荧光探针和硫代巴比妥酸法分别检测各组细胞内的活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量,流式细胞术和TUNEL检测各组细胞凋亡,Western blotting检测各组细胞中CyclinD1、Cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2、AMPK、p-AMPK、SIRT1蛋白的表达。结果与对照组比较,七氟醚组HT22细胞存活率显著下降和细胞凋亡率显著增加(P0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-AMPK和SIRT1蛋白表达减少(P0.05),Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达增加(P0.05),ROS活性和MDA含量降低(P0.05)。与模型组比较,七氟醚+虾青素HT22细胞Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达下调(P0.05),CyclinD1、Bcl-2、p-AMPK和SIRT1蛋白表达上调(P0.05),ROS活性和MDA含量降低(P0.05),且呈剂量相关性。结论虾青素对七氟醚诱导的HT22细胞凋亡和氧化应激损伤具有保护作用,其机制可能与调控AMPK-SIRT1通路有关。     

地塞米松对嘌呤霉素损伤足细胞nephrin mRNA表达的影响及意义

目的 观察嘌呤霉素(PAN)和地塞米松(DEX)干预后足细胞形态及nephrin mRNA表达变化,探讨DEX保护PAN诱导体外培养足细胞损伤的作用机制.方法 将体外培养的小鼠肾小球足细胞分为三组,分别为对照组、PAN组和DEX组.对照组加入等体积RPMI-1640培养液培养;PAN组加入PAN(终浓度50 mg/L);DEX组同时加入PAN(终浓度50 mg/L)和DEX(终浓度1 mmol/L).培养8h、24 h和48 h后,相差显微镜下观察足细胞形态变化;用图像处理软件分析各组细胞胞体面积的差异.采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测培养24h、48 h时足细胞nephrin mRNA表达.结果 对照组足细胞形态正常,细胞胞体较大,可见树枝样突起及细胞间形成相互连接;PAN诱导足细胞损伤8h、24 h和48 h时,足细胞面积均较对照组明显缩小,分别为对照组的75％、46％和27％(P＜0.01),足细胞足突及细胞间连接消失.DEX组在干预8h、24 h和48 h时,足细胞胞体面积均明显大于PAN组(P＜0.01),部分足细胞可见足突及细胞间连接.PAN组足细胞培养24 h和48 h时,nephrin mRNA表达较对照组明显下降(P＜ 0.01);DEX组干预后24h及48 h,足细胞nephrin mRNA表达均较PAN组显著升高(P＜ 0.01).结论 DEX对PAN诱导足细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与上调足细胞分子nephrin mRNA表达有关.     

虾青素对人肺癌 A549 细胞裸鼠移植瘤放疗敏感性的影响

目的 探讨虾青素对人肺癌 A549 细胞裸鼠移植瘤放射治疗敏感性的影响。 方法 20 只 BALB/c Nude 裸鼠随机均分为 4 组： 对照组（小鼠灌胃 10%DMSO 的超纯水）, 虾青素组（小鼠灌胃 10%DMSO 的虾青素悬液, 剂量为 50 mg/kg, 每隔 1 d 给药 1 次, 共给药 7 次）, 照射组（小鼠灌胃 10%DMSO 的超纯水, 肿瘤生长部位使用加速器局部照射, 5 Gy/次, 总剂量 15 Gy）及联合组（同时进行虾青素灌胃和局部照射处理）。 肿瘤最短直径达到 5 mm 以上开始实验, 每隔 1 d 测量移植瘤长短直径计算肿瘤体积并绘制移植瘤生长曲线, 末次给药后第 2 天处死小鼠, 取肿瘤块称质量并将其制成石蜡切片。 免疫组化方法检测石蜡切片内肿瘤细胞增殖抗原 Ki-67、磷酸化 STAT3（p-STAT3）表达及细胞凋亡（Tunnel 染色）情况。 结果 与对照组比较, 虾青素组、照射组及联合组瘤体生长速度减慢（P < 0.05）, 以联合组瘤体生长速度最慢。 对照组、虾青素组、照射组和联合组瘤体质量、Ki-67、p-STAT3 表达水平均依次降低, 抑瘤率、细胞凋亡率均依次升高, 组间多重比较差异均有统计学意义（P < 0.05）。 结论 虾青素能够通过抑制 p-STAT3 表达增加肺癌 A549 细胞裸鼠移植瘤的放疗敏感性。     

虾青素/天然DNA/壳聚糖纳米粒对紫外诱导的小鼠皮肤光老化的改善作用

目的 探究虾青素/天然DNA/壳聚糖纳米粒（Ast/DC）对紫外诱导的小鼠皮肤光老化的改善作用。方法 分子自组装结合溶剂蒸发法制备Ast/DC。紫外照射脱毛小鼠30 d模拟皮肤光老化,研究Ast/DC对小鼠皮肤表观形态、组织纤维结构以及皮肤中超氧化物歧化酶（SOD）等抗氧化因子表达水平等的影响;并用Franz扩散池模拟透皮吸收过程研究纳米载体对虾青素的经皮递送效果。结果 将平均粒径为266 nm、Zeta电位为32.7 mV的Ast/DC（虾青素有效剂量为1.5 μg?cm-2?d-1）涂抹于紫外照射小鼠的背部,可维持其皮肤正常形态和结构,在角质层厚度、胶原纤维和弹性纤维结构等方面与未经紫外照射小鼠相比无明显差异;并且皮肤组织中的谷胱甘肽（GSH）、SOD和过氧化氢酶（CAT）表达水平较光老化小鼠分别显著提高31.4%、25.1%和41.7%（P＜0.05）。当虾青素有效涂抹剂量低至0.33 μg?cm-2?d-1时,Ast/DC仍能显著提高皮肤组织中的抗氧化因子表达水平,且优于游离虾青素;相较于光老化模型小鼠,低剂量Ast/DC组小鼠和虾青素油（Ast/oil）组小鼠中GSH含量分别提高26.4%和15.1%。同时,Ast/DC的24 h累积透皮吸收量比游离虾青素提高20.7%。结论Ast/DC能有效保护小鼠皮肤,抵御紫外照射引起的皮肤光老化。     

虾青素对过氧化氢所致HepG2细胞线粒体氧化损伤及生存能力下降的保护作用

目的探讨虾青素对H_2O_2导致的HepG2细胞线粒体氧化损伤及生存能力下降的保护作用。方法采用H_2O_2损伤HepG2细胞,测定细胞内Ca~(2+)浓度及线粒体膜电位、胞浆中细胞色素c(Cyt-c)的阳性表达率变化考察了虾青素对活性氧所致线粒体氧化损伤的保护作用;测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)释放率考察了虾青素对活性氧所致细胞生存能力下降的保护作用。结果虾青素(1.0×10~(-7)、1.0×10~(-6)、1.0×10~(-5)mol·L~(-1))能明显抑制H_2O_2导致的细胞内Ca~(2+)浓度升高、线粒体膜电位降低、Cyt-c的释放增加;以及细胞存活率下降、LDH释放率增加。结论虾青素对H_2O_2所致细胞线粒体氧化损伤及细胞生存能力下降具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

虾青素可能通过H~+传递功能保护NaN_3损伤的人胎肝L-02细胞

观察虾青素(astaxanthin)对呼吸链复合体Ⅳ抑制剂叠氮钠(NaN3)损伤的人胎肝L-02细胞保护作用,并初步探讨其作用机制。100 mmol·L-1 NaN3用于构建肝损伤细胞模型,通过测定不同浓度虾青素(0.01、0.10、1.00及10.00 nmol·L-1)对损伤细胞存活率(MTT检测)、细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平(DCFH-DA检测)、细胞凋亡率(Annexin V-FITC/PI双染法)以及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)水平(JC-1法)的影响,发现虾青素能抑制损伤细胞晚期凋亡;对细胞存活率和MMP的保护作用呈现先增加后降低的非剂量依赖性关系,其中0.10 nmol·L-1虾青素表现为较强的保护作用;实验浓度范围内的虾青素并不能显著降低细胞内ROS水平(P>0.05)。为进一步探讨虾青素对损伤细胞的保护作用,人工制备平面双层磷脂膜(planar bilayer lipid membrane,BLM)模拟线粒体膜,测定不同浓度虾青素(0.1%、2.0%、10.0%)对H+的传递能力。结果...     

重组人血管内皮抑素心脏毒性作用的靶标及作用机制研究

目的探讨重组人血管内皮抑素（恩度）心脏毒性作用的靶标及作用机制。方法以H9c2心肌细胞为观察对象,进行以下实验：（1）将H9c2细胞分为对照组（不给予药物干预）和恩度100、200、400μ/ml组（加入相应浓度药物培养24、48h）,用流式细胞术检测各组各时点细胞凋亡率;（2）将H9c2细胞分为对照组和恩度400μg/ml干预24h实验组,用透射电镜观察细胞超微结构改变;（3）将H9c2细胞分为对照组和恩度100、200、400μ/ml组（加入相应浓度药物培养18h）,应用JC-1荧光探针检测细胞线粒体膜电位;（4）将H9c2细胞分为对照组和恩度400μg／ml干预24h实验组,用细胞免疫化学方法观察细胞色素C（Cyt-C）释放情况;（5）将H9c2细胞分为对照组和恩度100、200、400μml组（加入相应浓度药物培养24h）,用化学发光法检测各组细胞的ADP／ATP比值。结果（1）恩度200μg／ml组在药物干预24h、恩度400斗g／ml组在药物干预24、48h后,细胞凋亡率均明显高于对照组[24h：（16．34±3．72）％、（27．03±3．91）％比（6．99±1．72）％;48h：（24．89-4-4．77）％比（6．44±1．81）％,均P〈0．01];恩度200μg／ml组药物干预24h后的细胞凋亡率高于药物干预48h[（16．34＋3．72％）比（11．34±3．09）％,P〈0．01]。（2）对照组细胞超微结构正常;恩度400μg/ml干预24h实验组细胞核固缩碎裂、染色质块聚,细胞内空泡增多,内质网扩张,线粒体肿胀,出现凋亡小体。（3）与对照组相比,不同剂量恩度干预组细胞线粒体跨膜电位去极化程度随恩度浓度增加而下降。（4）对照组细胞Cyt-C主要分布于线粒体,恩度400μg/ml干预24h实验组细胞Cyt-C从线粒体释放至胞质。（5）恩度200、400μg/ml组细胞的ADP／ATP比值明显高于对照组（1．14±0．11、1．31±0．18比0．98±0．09,均P〈0．01）。结论心肌细胞线粒体可能是恩度心脏毒性作用的靶标,经线粒体依赖性途径诱导的心肌细胞凋亡是恩度致心肌损伤的机制之一。     

国产冻干人凝血酶原复合物质量标准的研究

目的通过对国产人凝血酶原复合物 (PCC)质量的研究 ,建立与国际接规的质量标准。方法用人凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ (FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ )浓制剂国家标准品 ,采用一期法测定国内用不同原料制备的PCC中FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ的效价 ;用正常人血浆作标准 ,用凝固法检测PCC的总效价及PCC中的肝素。结果用血浆作原料提纯制备的PCC ,FⅣ的效价能达到 1 0IU/ml以上 ,FⅦ效价最低 ;用组分Ⅲ作原料 ,FⅣ活性损失很大 ,只有 2 / 7批次能达到 1 0IU/ml;而FⅦ效价最高。无论用何种原料 ,FⅡ和FⅩ活性均能保持在一定水平。结论从血浆中直接提纯制备PCC ,能有效地保持FⅣ活性 ,各项指标易达到国外同品种的质量标准     

骨折愈合的影响因素概述

骨折愈合是复杂而连续的修复过程,受诸多环境因素的影响。如果这些因素发生变化会延迟骨折愈合,甚至导致骨不连。影响骨折愈合的因素有很多,大致可分为自身因素、物理因素、化学因素和生物因素。本文以生物因素为主阐述在骨折愈合过程中各类影响因素的作用。     

夫妻双方因素对孕妇子痫前期发生发展的影响

目的 探索夫、妻两方面因素对子痫前期发生发展的影响,为孕妇子痫前期的预防提供理论依据.方法 选择两家三甲医院子痫前期孕妇及其配偶和正常孕妇及其配偶人群,共计1721对,采用自制调查问卷法,对调查结果进行logistic回归分析.结果 妻子方面,年龄、孕前体质量指数、孕前高血压、孕妇父母高血压、家庭居住地、教育水平、孕期产检次数是子痫前期发生的独立影响因素.居住大城市、孕妇有较高教育水平、孕期较多产检次数是子痫前期发生的保护因素.丈夫方面,受教育水平越高,孕妇罹患子痫前期的风险降低,吸烟则增加孕妇罹患子痫前期的风险.结论 夫、妻两个方面因素对孕妇子痫前期的发生发展产生着重要的影响.     

Modulation of toxicity by dietary and environmental factors

Both epidemiological and experimental evidence indicate that environmental factors may modulate chemical toxicity. Of these, dietary factors have been most thoroughly studied and shown to modulate a number of toxic processes including carcinogenesis. Total energy intake and specific nutrients (protein and specific amino acids, vitamins, and minerals) have been shown to be active in this regard as have a number of non-nutritive dietary factors, most notably phenolic and sulphur-containing compounds, and indoles.The mechanisms by which dietary factors might influence toxicity include effects on bioavailability, phase I or phase II metabolism, scavenging of reactive metabolites, induction of DNA repair processes, inhibition of cell proliferation, induction of differentiation or apoptosis and effects on the immune system. These factors are discussed with emphasis on dietary exposure to modulating factors.     

A scoping review of evaluations of and recommendations for default uncertainty factors in human health risk assessment

Uncertainty factors (UFs) are used to account for uncertainties and variability when setting exposure limits or guidance values. Starting from a proposal of a single UF of 100 to extrapolate from an animal NOAEL to a human acceptable exposure, the aspects of uncertainty and number of UFs have diversified and today there are several risk assessment guidelines that contain schemes of default UFs of varying complexity. In the present work, we scoped the scientific literature on default UFs to map developments regarding recommendations and evaluations of these. We identified 91 publications making recommendations for one or several UFs and 55 publications evaluating UFs without making explicit recommendations about numerical values; these were published between 1954 and 2021. The 2000s was the decade with the largest number of publications, interspecies differences and intraspecies variability being the most frequent topics. The academic sector has been the most active (76 out of 146 publications). Authors from the private sector more often presented UF recommendations, but differences between sectors regarding size of recommendations were not statistically significant. The empirical underpinning of the reviewed recommendations ranges from four to 462 chemicals, that is, relatively low numbers compared with the range of chemicals these default UFs are expected to cover. The recommended UFs have remained remarkably constant, with merely a slight decrease over time. Although chemical specific UFs are preferable, the widespread use of default UFs warrants further attention regarding their empirical and normative basis.     

Inhibitors of propagation of coagulation (factors VIII, IX and XI): a review of current therapeutic practice

The management of patients with congenital haemophilia who develop alloantibodies against factors of the propagation phase of blood coagulation, commonly known as inhibitors, is the most important challenge facing haemophilia caregivers at present, as this complication not only compromises the efficacy of replacement therapy but also consumes an enormous amount of economic resources. Development of inhibitors further complicates the clinical course of severe haemophilia, with a prevalence of up to 30% in patients with haemophilia A (factor VIII deficiency) and up to 5% in those with haemophilia B (factor IX deficiency) and haemophilia C (factor XI deficiency). While the short-term goal of treatment of patients who develop alloantibodies is the control of bleeding, the eradication of the inhibitor is the main long-term goal. The management of severe bleeding episodes and the eradication of the autoantibody are also the mainstays of treatment of patients with acquired haemophilia, a rare but life-threatening haemorrhagic condition characterized by the development of inhibitory autoantibodies against coagulation factor VIII. The most recent options available for treating patients with congenital haemophilia complicated by inhibitors and acquired haemophilia because of autoantibodies against factor VIII are summarized in this review article.     

一种简便、快速检测淋巴细胞增殖的方法

目的 :建立转移因子 (TF)等免疫增强制剂体外生物活性简便、快速的检测方法。方法 :利用溴化四唑蓝法测定TF等促进小鼠脾淋巴细胞的增殖活性。结果 :TF、胸腺因子、胎盘因子三者均能明显地促进淋巴细胞增殖 ,平均增殖率为 6 3 .5 1%、77.6 5 %、86 .6 1%。结论 :此法稳定可靠 ,易于掌握、普及。     

Slug和SRF在食管癌中的表达及临床意义

目的研究锌指转录因子Slug和血清反应因子(SRF)在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法收集2010年9月至2013年9月食管鳞癌手术根治标本120例,术前均未行放疗、化疗,术后常规取食管鳞癌组织包埋制备蜡块;另取距离肿瘤5 cm的食管组织60例做正常对照。按食管鳞癌诊治规范分析相关资料。所有组织蜡块常规切片三张,一份行常规HE染色,常规病理观察;另两份采用免疫组化法(SABC)检测Slug和SRF蛋白的表达水平,分析其与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等临床生物学行为的关系。结果 Slug蛋白在食管鳞癌组中的阳性表达率显著高于正常食管黏膜组,差异有统计学意义(P>0.05);SRF蛋白在食管鳞癌组中的阳性表达率显著高于正常食管黏膜组,差异有统计学意义(P<0.05);Slug在食管鳞癌组织中的蛋白表达与肿瘤大小、分化程度、浸润深度以及淋巴结转移差异无统计学意义(P>0.05);SRF在食管鳞癌中的蛋白表达与肿瘤大小、分化程度和是否淋巴结转移无关,差异无统计学意义(P>0.05)。浸润深度中,浆膜+浆膜外组表达阳性率显著高于黏膜+肌层组(P<0.05)。结论 Slug、SRF在食管鳞癌中高表达,并与浸润深度相关,可能参与了食管鳞癌的发生、发展,并在食管鳞癌的侵袭中起到重要的调节作用。     

郑州市某社区居民糖尿病危险因素分析

目的探讨郑州市某社区居民2型糖尿病的危险因素。方法采用整群随机抽样方法抽取600名居民,进行问卷调查,单因素分析采用卡方检验,对有意义的因素进行多因素非条件Logistic回归分析。结果该社区居民糖尿病的患病率为12.5%,男女患病率分别为11.58%、13.82%,年龄偏大(OR=2.915)、血脂异常(OR=2.582)、高血压(OR=1.201)可增加2型糖尿病的危险,适度饮酒(OR=0.967)会减少2型糖尿病发生的危险。结论年龄偏大、血脂异常和高血压是该社区居民糖尿病的危险因素,适当饮酒是保护因素。