不同来源藤梨根中总黄酮含量的比较

目的为充分利用和开发藤梨根资源提供科学依据。方法以芦丁为对照品,用分光光度法测定藤梨根中总黄酮的含量。结果样品1中总黄酮的含量为6.99%,样品2中总黄酮的含量为8.96%,样品3中总黄酮的含量为1.27%。结论栽培藤梨根中总黄酮的含量大于野生品,在根中的总黄酮含量远大于地上茎中的含量,市场上藤梨根的地上茎与根同等入药之现状值得进一步商榷。     

基于网络药理学的黄瑞香抗胃癌作用机制探讨及实验验证

目的 采用网络药理学方法预测黄瑞香发挥抗胃癌作用的潜在机制,并通过体外细胞实验进行初步验证。方法 利用中药系统药理学数据库和分析平台（TCMSP）筛选黄瑞香的有效成分,通过Swiss Target Prediction数据库和PharmMapper数据库筛选获得黄瑞香活性成分的相关靶点。通过GeneCards及DisGeNET数据库检索获得胃癌疾病相关靶点。利用Cytoscape软件构建黄瑞香活性成分-靶点网络;通过STRING、Metascape数据库对成分和胃癌疾病交集靶点进行蛋白质相互作用（PPI）网络和基因本体（GO）注释及京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。采用MTT实验考察黄瑞香异戊烯基黄酮成分构树黄酮醇F（broussoflavonol F）、daphnegiravone D、daphgiflavone C体外对胃癌MGC803细胞生长的影响,采用实时荧光定量PCR方法检测这3种异戊烯基黄酮类化合物作用48h后胃癌MGC803细胞表皮生长因子受体（EGFR）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和蛋白激酶B（Akt）基因的表达。结果 筛选得到黄瑞香70个活性成分,黄瑞香作用于胃癌的42个相关靶点,其中表皮生长因子受体（EGFR）、鼠肉瘤病毒癌基因同源物B1（BRAF）、Ⅰ类磷脂酰肌醇-3激酶催化亚基α（PIK3CA）、酪氨酸激酶（MET）以及丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）等为核心靶点。KEGG富集分析发现黄瑞香作用于胃癌主要富集在癌症、PI3K/Akt以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）等通路中。活性测试结果发现,异戊烯基黄酮成分构树黄酮醇F、daphnegiravone D、daphgiflavone C对胃癌MGC803细胞生长具有较好的抑制作用。同时,与对照组比较,构树黄酮醇F、daphnegiravone D、daphgiflavone C可显著抑制胃癌MGC803细胞EGFR、PI3K和Akt基因的表达（P＜0.05、0.01、0.001）。结论 黄瑞香可能以异戊烯基黄酮为主要的抗胃癌活性成分,以EGFR、BRAF、PIKC3A、MET等蛋白为核心作用靶点,主要经I3K/Akt以及MAPK等相关信号通路发挥治疗胃癌的作用。     

基于网络药理学和生物信息学探讨夏天无治疗胃癌的机制

目的 探讨夏天无治疗胃癌的主要作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库（TCMSP）和GeneCards数据库筛选夏天无治疗胃癌的潜在作用靶点及对应的有效成分;利用Cytoscape 3.7.2软件构建药理网络;将作用靶点导入通过STRING数据库和Cytoscape 3.7.2软件进行蛋白-蛋白互作可视化分析,进一步筛选关键基因;关键基因分别通过DAVID在线平台和GEPIA 2数据库进行富集（GO和KEGG）分析和胃癌预后分析。结果 夏天无治疗胃癌的有效成分有6种,对应65个靶点与胃癌相关,其中关键靶点45个,它们涉及的信号通路包括钙信号通路、神经活性配体-受体相互作用等;45个关键靶点中有8个靶基因（ADRA1A、ADRA1B、AR、ESR1、F7、OPRD1、PTGS2、RXRA）与胃癌预后相关（P <0.05）。结论 本研究通过网络药理学探索出夏天无治疗胃癌的潜在有效成分和靶点以及其作用机制,为夏天无中药的抗癌新作用提供理论依据。     

HPLC法测定藤梨根中异秦皮苷的含量

目的:建立测定藤梨根中异秦皮苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18,流动相为乙腈-1%乙酸溶液(8∶92,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为350 nm,柱温为25℃。结果:异秦皮苷质量浓度在9.9~156.4μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<1.6%;平均回收率为97.60%,RSD为0.61%(n=6)。结论:该方法简单、准确、专属性强,可作为藤梨根药材的质量控制方法。     

两种藤梨根制剂促凋亡作用的实验研究

目的研究两种藤梨根制剂促进人食管癌Eca-109细胞凋亡的机制及差异。方法采用MTT比色法检测藤梨根正丁醇药液及乙酸乙酯药液在不同浓度(1μg/mL、10μg/mL、100μg/mL等)及不同时间(24h、48h、72h等)对Eca-109细胞生长的抑制作用;采用TUNEL法检测其对癌细胞生长的诱导凋亡效应;采用免疫组化SP法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及caspase的表达。结果藤梨根正丁醇药液对人食管癌Eca-109细胞的生长抑制作用,随着药物浓度的升高和作用时间的延长而增强,其生长抑制率可达87.2%。两种藤梨根制剂对瘤细胞有明显的凋亡效应,而在对照组未见有明显凋亡现象。瘤细胞作用24h、48h、72h后分别与对照组比较,用药组Bax蛋白表达明显增强(P<0.01);同时伴有Bcl-2表达减弱,72h后最明显,差异有显著意义(P<0.01)。藤梨根正丁醇药液促进caspase-3、caspase-9表达明显增强,而对caspase-8表达影响较小。藤梨根乙酸乙酯药液作用于肿瘤细胞时也可观察到类似的效应,且正丁醇药液对肿瘤细胞生长的抑制率高于乙酸乙酯药液。结论藤梨根可通过下调Bcl-2表达,激活caspase-9、caspase-3诱导Eca-109细胞凋亡。     

藤梨根乙醇提取物联合CIK细胞对胃癌细胞SGC-7901杀伤作用的研究

目的观察抗肿瘤中药藤梨根的乙醇提取物与CIK细胞在体外联合对胃癌细胞SGC-7901的杀伤作用。方法运用倒置显微镜观察体外培养的胃癌细胞SGC-7901在分别加入不同浓度的藤梨根醇提物以及不同效靶比的CIK细胞24、48 h后的形态变化;采用MTT法检测藤梨根醇提物、CIK细胞以及两者联合作用后的胃癌细胞SGC-7901的增殖抑制率。结果当1 mg/ml的藤梨根醇提物与效靶比为20：1的CIK细胞相联合24 h,杀伤效率高于单用藤梨根醇提物及CIK细胞（P〈0.05）。结论藤梨根醇提物与CIK细胞在一定条件下联合,具有协同杀伤胃癌细胞的作用。     

基于网络药理学探讨高良姜治疗胃溃疡的活性成分及作用机制

目的:探讨高良姜治疗胃溃疡的活性成分及作用机制。方法:采用网络药理学方法,通过中药系统药理学分析平台、中药综合数据库检索[口服生物利用度(OB)≥30%和类药性(DL)≥0.18]和文献挖掘,筛选出高良姜的活性成分和作用靶点;另在TTD、CTD、OMIM、PubMed、DrugBank、DisGeNet数据库中获取胃溃疡的相关靶点,使用Venny 2.1软件筛选高良姜活性成分与胃溃疡的共同靶点;借助STRING数据库获得共同靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)关系,使用Cytoscape 3.7.1软件构建PPI网络并分析;采用ClusterProfiler R功能包对共同靶点进行基因本体(GO)功能和KEGG通路富集分析;使用Cytoscape 3.7.1软件构建"活性成分-靶点-通路"网络并分析。结果:经筛选得到高良姜活性成分19个,活性成分作用靶点和胃溃疡相关靶点分别有209、195个,两者共同靶点35个。共同靶点PPI网络的平均节点度值为18、平均介数为16.9,关键靶点共有11个,分别为PTGS2、VEGFA、IL6、IL1B、CCL2、MYC、MMP9、EGFR、HIF1A、...     

大孔吸附树脂纯化藤梨根中总黄酮工艺优选

目的 筛选大孔吸附树脂纯化藤梨根中总黄酮的工艺条件. 方法 通过动态吸附和解吸的方法,以总黄酮的吸附率、解吸率为评价指标确定树脂型号; 通过最佳上样量、上样速度、水洗用量、乙醇洗脱流速、乙醇解析浓度选择、乙醇解析用量等的筛选实验,确定纯化工艺条件. 结果 AB-8型大孔吸附树脂分离纯化藤梨根中总黄酮效果最好,其吸附率为84.76%,解析率为95.51%. 其最佳工艺条件为:30 mL藤梨根提取液以3 BV.h^-1的流速通过树脂柱,先用水8 BV洗涤,洗脱流速为4 BV.h^-1,再用70%乙醇4 BV解析,洗脱流速为3 BV.h^-1. 结论 AB-8型大孔树脂在所确定的优化工艺条件下,可较好地吸附分离藤梨根中总黄酮.     

基于网络药理学的爵床抗肿瘤活性成分及作用机制研究

目的 运用网络药理学方法探讨爵床抗肿瘤的物质基础和分子机制.方法 基于文献检索构建中药爵床化学成分数据库,采用人体肠道吸收(Human intestinal absorption,HIA)、Caco-2细胞渗透性以及血浆蛋白结合(Plasma protein binding,PPB)评估筛选活性成分;通过GeneCar...     

基于网络药理学及分子对接筛选治疗糖尿病足中药成分及相关机制研究

目的 基于国家专利数据库联合网络药理学及分子对接方法,筛选治疗糖尿病足有效的中药成分,探索相关机制。方法 挖掘国家专利数据库,运用IBMSPSS Modeler 18获得抗糖尿病足核心中药,从TCMSP、TCMID数据库获得核心中药的主要化学成分,通过GeneCard、TTD、OMIM、DisGeNET、DrugBank数据库查找与糖尿病足治疗相关的蛋白靶点,通过VENNY软件获取核心中药与糖尿病足的交集靶点,后对其进行GO、KEGG及PPI蛋白互作分析。借助Cytoscape软件拓扑分析后筛选出潜在的核心成分以及可能的核心靶点,最后利用Auto dock、PyMol进行对接分子能计算及可视化作图。结果 筛选出潜在治疗糖尿病足核心成分5个及核心靶点6个;分子拟合计算结果显示核心靶点与核心成分稳定结合进而可通过相关信号通路发挥抗糖尿病足作用。结论 槲皮素、木犀草素、山奈酚、黄芩素和β-谷甾醇等可能通过参与TNF、HIF-1等信号通路作用于AKT1、MAPK1、TNF、CASP3、TP53、PTGS2等靶点,发挥抗糖尿病足的作用。     

基于网络药理学的清肺合剂抗肺癌作用机制研究

目的 采用网络药理学方法阐明清肺合剂\     

基于网络药理学的芹菜子活性成分抗肝纤维化作用机制研究

目的 构建芹菜子活性成分-作用靶点网络和蛋白相互作用网络,对靶点涉及的功能和通路进行分析,初步探讨芹菜子抗肝纤维化的作用机制。方法 通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）、文献挖掘和笔者所在实验室已有研究获取芹菜子主要活性成分,SwissTargetPrediction平台和BATMAN-TCM数据库获取成分靶点,利用GeneCards和OMIM数据库预测和筛选肝纤维化相关的作用靶点。采用Cytoscape软件构建活性成分-作用靶点网络,String数据库和Cytoscape软件绘制蛋白相互作用网络。采用生物学信息注释数据库（DAVID）对靶点进行基因本体（GO）分类富集分析及京都基因与基因组百科全书（KEGG）代谢通路富集分析,结合相关文献分析芹菜子抗肝纤维化的作用机制。结果 筛选得到芹菜子17个活性成分,涉及69个作用靶点。网络分析结果表明,芹菜子主要涉及胶原蛋白分解代谢、炎症反应和胆固醇合成等生物过程,通过调节TGF-β1、NF-κB和PI3K/AKT等信号通路来发挥抗肝纤维化作用。结论 本研究体现了芹菜子多成分-多靶点-多途径的作用特点,其所作用的多条信号通路均存在直接或间接关联性,为进一步研究提供了新思路和新方法。     

藤梨根在恶性肿瘤中的研究进展

藤梨根是一味常见的且具有多种功效的中药。据研究证明藤梨根具有抗肿瘤功效,现被广泛应用于各种肿瘤的治疗中。本文结合藤梨根提取物及成分对抗各种恶性肿瘤研究及机制探讨方面展开综述,为临床利用藤梨根防治肿瘤提供新的研究基础。     

基于UHPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定藤梨根的化学成分

目的:快速鉴定藤梨根的化学成分,为该药材后续的物质基础和质量控制等研究提供参考。方法:运用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)进行藤梨根的化学成分检测。色谱柱为Waters XSelect HSS T3,流动相为0.1%甲酸乙腈溶液-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),柱温为40℃,流速为0.3 mL/min,进样量为3μL;采用电喷雾离子源,以负离子模式采集数据,扫描范围为m/z 50～1 500,干燥气温度为350℃,雾化气压力为45 psi,毛细管电压为3 500 V,鞘气温度为350℃。根据准分子离子和二级碎片离子信息,结合相关文献以及对照品的保留时间和质谱裂解规律对检出的化学成分进行结构鉴定。结果与结论:共鉴定出58个化学成分,包括16个五环三萜类化合物(如羟基积雪草酸、积雪草酸、山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸、熊果酸等)、12个黄酮类化合物(如芦丁、槲皮苷、木犀草苷、紫云英苷等)、17个有机酸类化合物(如隐绿原酸、绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C等)等,有9个化合物(如原花青素B₁、B₂,木犀草...     

基于网络药理学的续断-补骨脂药对治疗骨关节炎作用机制研究

目的 基于网络药理学研究续断-补骨脂药对治疗骨关节炎的分子作用机制。方法 采用中药系统药理学分析平台（TCMSP）等数据库寻找与续断-补骨脂药对相关的所有化学成分以及靶点;利用OMIM数据库、DrugBank数据库以及GeneCards数据库查找与骨关节炎相关的靶点。通过Cytoscpae 3.7.1软件构建续断-补骨脂药对主要化学成分-潜在靶点网络。将续断、补骨脂以及续断-补骨脂药对治疗的潜在靶点与疾病靶点在相互作用基因/蛋白搜索工具平台STRING V10.5分别构建其蛋白-蛋白相互作用（PPI）网络。应用网络拓扑参数筛选出药物治疗疾病的关键靶点,并采用R中的Clusterprolifer对关键靶点进行Gene Ontology （GO）分析和KEGG通路富集分析。结果 选择口服利用度≥ 30%作为化合物分子的筛选条件,并通过文献挖掘进行补充,共筛选出续断-补骨脂药对的20个潜在活性成分和473个潜在靶点;通过度、介质中心度、接近度等网络拓扑特征参数评价筛选出与续断-补骨脂药对治疗骨关节炎相互作用的关键靶点19个,GO分析包含121条富集结果,其中生物过程67条,分子功能45条,细胞组件9条;得到KEGG富集通路89条。结论 续断-补骨脂药对与单味药材相比,具有更多成分,更多途径,更多靶点协同作用的特点,为后续从续断-补骨脂药对中开发出治疗骨关节炎的新药提供依据。     

基于网络药理学研究保肾排毒汤治疗脓毒症合并急性肾损伤的治疗机制

目的 应用网络药理学的方法,研究保肾排毒汤治疗脓毒症及其并发症急性肾损伤的药效成分、作用靶点及作用通路,从而揭示其潜在的治疗机制。方法 利用中药相关权威数据库（TCMSP、TCMID、TCM-Mesh）并结合ADME参数和参考文献,对保肾排毒汤中的有效成分进行筛选,并通过SwissTargetPrediction和STITCH数据库预测得到成分相关靶点。通过TTD、Drugbank、OMIM、DisGeNET得到脓毒症及急性肾损伤相关靶点。成分靶点与疾病靶点取交集后得到药效成分治疗疾病的潜在靶点。应用STRING数据库构建靶点间的蛋白互作网络,通过Cytoscape软件对网络进行拓扑属性分析和功能模块分析。采用Cytoscape软件的ClueGO插件分析这些靶点富集的基因功能和代谢通路。最后构建保肾排毒汤成分-靶点-通路网络图。结果 从保肾排毒汤中筛选出56个活性成分,以及与脓毒症合并急性肾损伤相关的81个靶点。靶点间的蛋白互作网络筛选出了5个核心靶点ALB、TP53、VEGFA、PTGS2、EGFR、CASP3。基因功能和代谢通路分析表明这些靶点参与了对细菌来源的分子反应、炎症反应的调节、活性氧代谢过程、对异物和机械刺激的反应、凋亡过程、对血管和血管内皮细胞的正调控、中性粒细胞介导对细菌的杀伤作用,脂质代谢等生物过程,并参与到了多条病毒感染通路、多条涉及炎症反应和内皮血管的信号传导通路。而建立的成分-靶点-通路的共表达网络体现了保肾排毒汤多成分、多靶点、多通路的协同作用机制。结论 保肾排毒汤具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点,可通过其中的活性成分调控多个疾病相关靶点参与到抵抗病毒感染、抑制炎症反应、保护血管内皮、抗氧化应激、调节脂质代谢等相关通路发挥对脓毒症急性肾损伤的治疗作用的。     

基于分子对接法和网络药理学揭示小柴胡汤防治新型冠状病毒肺炎的活性成分及作用机制

目的 探索小柴胡汤防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的活性成分及作用机制,为小柴胡汤在COVID-19防治中的应用提供参考.方法 通过TCMSP数据库检索小柴胡汤的化学成分,将各化学成分与ACE2、MPro和PLP进行分子对接,预测其在抑制新型病毒感染和复制方面的活性;采用TCMSP和CTD数据库检索小柴胡汤化学...     

基于网络药理学的康艾注射液抗非小细胞肺癌作用机制分析

目的:采用网络药理学方法探讨康艾注射液抗非小细胞肺癌作用机制.方法:依托中药系统药理学分析平台(TCMSP)检索康艾注射液中3味中药化学成分和相关作用靶点.将靶点上传到UniProtKB软件,得到的基因与人类基因组注释数据库(Genecards)对映.运用Cytoscape3.7.0软件构建化合物-靶点网络,借助STR...     

基于网络药理学和分子对接探讨甘露消毒丹治疗肺炎支原体肺炎的机制

目的 通过网络药理学和分子对接的研究方法预测甘露消毒丹治疗肺炎支原体肺炎（mycoplasmal pneumoniae pneumonia,MPP）的分子作用机制。方法 通过TCMSP和BATMAN-TCM筛选甘露消毒丹中的药物活性成分和靶点,并与通过GeneCards和CTD数据库获得MPP的疾病靶点做交集获得关键靶点,运用STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白互作网络;利用R软件对有效靶点进行GO分析及KEGG相关通路的富集分析;通过Mestro对成分靶点进行分子对接验证。结果 筛选出甘露消毒丹有效活性成分142个,获得143个甘露消毒丹治疗MPP潜在作用靶点。其中10个核心靶点,20条显著富集信号通路。分子对接结果发现槲皮素、β-谷固醇、木犀草素等10个化学成分与核心靶点及肺炎支原体产生的社区获得性呼吸窘迫综合征毒素和细胞受体膜联蛋白A2的亲和力较高。结论 本研究初步揭示了甘露消毒丹治疗MPP的潜在靶点、涉及的生物过程及信号通路,提示其具有多成分、多靶点、多通路的特点,为进一步研究奠定了基础。     

基于指纹图谱及网络药理学探究胃宁散抗胃溃疡药效关联物质及作用机制

目的 根据指纹图谱及网络药理学探讨胃宁散(Weining San,WNS)抗胃溃疡(gastric ulcer,GU)的药效关联物质及作用机制。方法 采用HPLC建立12批WNS指纹图谱,并进行方法学考察,结合对照品指认特征峰,筛选药效关联物质,进行网络药理学分析。利用TCMIP、Swiss Target Prediction数据库检索成分靶点;利用OMIM、Gene Cards和Drugbank数据库检索GU疾病靶点,取成分与疾病的交集靶点,采用String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用网络图,并进行拓扑学参数分析;采用Cytoscape 3.8.2软件构建“成分-疾病-靶点”网络图;采用Metascape网站对交集靶点进行GO和KEGG富集分析。随后采用灌胃无水乙醇的方式建立酒精性GU小鼠模型,对网络药理学预测的结果进行验证。结果 HPLC指纹图谱方法学考察的精密度、稳定性、重复性均良好。经对照品比对及综合分析,确定三七皂苷R₁、人参皂苷Rg₁、1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯、人参皂苷Rb₁...