缢蛏多糖的提取、分离和结构分析

目的从缢蛏中提取和分离纯化多糖,对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法依次采用100℃热水提和碱提方法从缢蛏中提取粗多糖,采用Q Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱层析和Sephacryl S-300凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对其总糖、蛋白含量,相对分子质量和单糖组成进行分析。对多糖纯化组分采用甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱(IR)和核磁共振波谱(NMR)进行化学结构解析。结果从缢蛏中经热水提粗多糖(YC-S)和碱提粗多糖(YC-J)均为葡聚糖,进一步分离纯化得到了4种水溶性多糖组分。对其中1种热水提多糖纯化组分YC-S2采用高效液相凝胶色谱法测得其相对分子质量为482kD,且色谱峰单一对称,表明其具有较高的纯度。结构分析表明,YC-S2是1种以α-(1→4)Glc为主链,含有少量的β-(1→3,4)和β-(1→4)分支的D-吡喃型葡聚糖。结论从缢蛏中提取分离得到了4种多糖组分,并初步确定了1种水溶性葡聚糖的结构,为缢蛏多糖结构和活性的深入研究提供了基础。     

北极海洋真菌Aspergillus jensenii胞外多糖的结构及抗氧化活性研究

目的 对北极海洋真菌Aspergillus jensenii胞外多糖的结构及抗氧化活性进行研究。方法 采用醇沉法提取、强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对胞外多糖进行分离纯化;运用PMP柱前衍生高效液相色谱、高效凝胶渗透色谱、气相色谱-质谱和核磁共振波谱对多糖结构进行分析;通过测定ABTS自由基、DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力评价多糖抗氧化活性。结果 分离得到1种多糖AJ1-1,其主要由甘露糖和少量半乳糖组成,糖链是以→2)-α-D-Manp-(1→和→6)-α-D-Manp-(1→为主,分支位于→2)-α-D-Manp-(1→的C-6位和→6)-α-D-Manp-(1→的C-2位,支链由Galf和Manp组成;AJ1-1具有较强的清除自由基能力（特别是对ABTS自由基、DPPH自由基和羟基自由基）。结论 首次从北极海洋真菌Aspergillus jensenii发酵液中分离得到含有呋喃型半乳糖分支的新颖半乳甘露聚糖,其是1种潜在的抗氧化多糖。     

紫贻贝多糖的提取、分离和基本理化性质分析

目的从紫贻贝(Mytilus edulis Linnaeus)中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质进行分析,为贻贝多糖的结构和活性研究提供依据。方法依次采用冷水,木瓜蛋白酶和胰蛋白酶联合酶解的方法提取贻贝粗多糖,并对粗多糖的总糖、蛋白、糖醛酸、糖胺聚糖和硫酸根含量进行分析。分别采用Sephacryl S-300凝胶柱层析和QSepharose 4 Fast Flow阴离子交换柱层析对粗多糖进行分离和纯化,并对纯化后的组分进行单糖组成、纯度及相对分子质量分析。结果从紫贻贝中经提取和分离共得到了8种水溶性多糖组分,其中水提组分LTS1-A单糖组成较简单,只含Glc。其余各组分单糖组成相对复杂,主要含有Man、GlcN、Gal和Fuc。采用高效凝胶渗透色谱法对各多糖组分进行分析都呈现较为均一的色谱峰,表明具有较好的纯度,各组分相对分子质量范围约为3.0~40 kD。结论采用水提和酶提方法得到了具有不同理化性质的多糖,经两步层析分离能够得到纯度较高的多糖组分,为下一步紫贻贝多糖结构和活性的深入研究提供了依据。     

海洋真菌Cladosporium Sphaerospermum胞外多糖CS4-1结构特征和抗氧化活性

目的 对海洋真菌Cladosporium Sphaerospermum产生的胞外多糖CS4-1结构特征和抗氧化活性进行研究。方法 利用乙醇沉淀法、强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对菌株所产胞外多糖进行分离纯化,运用PMP柱前衍生高效液相色谱法、高效凝胶渗透色谱法、气质联用色谱和化学方法分析多糖的结构特征,通过测定DPPH自由基、羟基自由基、ABTS自由基和超氧阴离子自由基清除活性以及还原能力评价多糖的抗氧化活性。结果 从海洋真菌Cladosporium Sphaerospermum发酵液中分离纯化得到胞外多糖CS4-1,其分子量为21.49 kDa;CS4-1含有甘露糖和半乳糖;糖链主要由Manp-(1→、→2)-Galp-(1→和→6)-Manp-(1→构成;CS4-1具有较好的抗氧化活性,在测定的5种活性指标中,清除超氧阴离子自由基的能力最强。结论 首次从海洋真菌Cladosporium Sphaerospermum分离得到抗氧化活性较好的多糖CS4-1,它是结构新颖的胞外多糖。     

绿藻硫酸多糖UCS2的结构及抗凝血活性研究

目的 对绿藻多糖UCS2的结构特征和抗凝血活性进行研究。方法 通过冷水提取、强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱,从绿藻花石莼中提取分离得到硫酸多糖UCS2;采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）、高效液相色谱、红外光谱和气质联用色谱对多糖UCS2的结构进行表征;通过活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间、凝血酶原时间对多糖UCS2体外抗凝血活性进行研究。结果 绿藻多糖UCS2分子量为39.55kDa,硫酸根和糖醛酸含量分别为19.74%和18.66%;UCS2主要由鼠李糖组成,含有少量葡糖醛酸和木糖。糖链中含有→3,4)-α-L-Rhap-(1→, →4)-α-L-Rhap-(1→, →4)-β-D-Xylp-(1→和→4)-β-D-GlcAp-(1→,硫酸基位于→4)-α-L-Rhap-(1→的C-3位。多糖UCS2对APTT有显著延长作用,具有较高的抗凝活性。结论 绿藻多糖UCS2是1种抗凝活性的葡萄糖醛酸-木糖-鼠李糖型硫酸多糖。     

太平洋牡蛎多糖的提取、分离和结构分析

目的　从太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)肉中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法　将牡蛎鲜肉制成丙酮粉,依次采用室温水,60 ℃热水和稀碱提取牡蛎粗多糖,对其总糖含量、蛋白含量和单糖组成进行分析。采用DEAE Sepharose FF阴离子交换和Sephacryl S-400凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对获得的纯化组分采用红外光谱 (IR)、甲基化、气质联用 (GC-MS)、电喷雾质谱 (ESI-MS) 和核磁共振波谱 (NMR) 等方法进行化学结构分析。结果　从牡蛎肉中提取得到了3种牡蛎粗多糖,单糖组成都只含有葡萄糖 (Glc)。对粗多糖进一步分离,得到了5种多糖纯化组分。对水溶性多糖纯化组分 MC-11 的结构进行了分析,表明其是以 →4)-α-D-Glc-(1→ 为主链,含有 →3,4)- β-D-Glc-(1→和 →2,4)- β-D-Glc-(1→ 分支的 D-吡喃型葡聚糖,相对分子质量为1299 kDa。结论　从太平洋牡蛎肉中分离纯化得到了5种多糖组分,并采用多种方法确定了1种纯化组分 MC-11 的结构,为牡蛎多糖结构与活性关系的深入研究提供了基础。     

裂壶藻(Schizochytrium limacinum)多糖的提取分离及其结构特性

目的从裂壶藻(Schizochytrium limacinum)中提取分离多糖并对其进行结构特性分析。方法采用热水提取并结合Q-Sepharose Fast Flow强阴离子交换柱分离,从中获得2种多糖组分(SLW1和SLW2)。运用高效液相色谱法(HPLC)、高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、甲基化和核磁共振碳谱(13 C-NMR)法分别对其单糖组成、相对分子质量及结构特性进行了分析。结果 2种多糖均以Gal为主(>75%),且含有少量的Glc、Man和GlcN;相对分子质量分别为39.8kD和103.8kD;FTIR显示它们均属于硫酸多糖,其硫酸酯基主要位于半乳糖残基的C6位。结论结构分析表明:SLW2中含有→6)Galf(1→、→5)Galf(1→、→3,4)Galp(1→、→3)Galp(1→以及→4,6)Galp(1→等多种连接方式。     

绿藻硫酸多糖SHW及其低分子量片段的结构及抗凝活性研究*

目的 对绿藻多糖SHW及其低分子量片段的结构及抗凝活性进行研究。方法 通过热水提取、强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱,从绿藻硬毛藻中提取分离得到硫酸多糖SHW;通过可控酸解方法制备SHW低分子量片段;采用高效凝胶渗透色谱、高效液相色谱、红外光谱及甲基化方法对多糖结构进行表征;通过活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、凝血酶原时间研究多糖SHW及其低分子量片段体外抗凝血活性。结果 多糖SHW及其低分子量片段主要由阿拉伯糖组成,含有少量半乳糖和氨基葡萄糖;糖链中阿拉伯糖主要以→4)-Arap-(1→和→3,4)Arap-(1→的形式存在,半乳糖以→4)-Galp-(1→存在形式,硫酸根主要位于→4)-Arap-(1→的C-3位。SHW及其低分子量片段A1～A6的分子量分别为492 kDa、200 kDa、170kDa、100kDa、26kDa、14kDa 和10 kDa。SHW 具有较高的抗凝血活性,且其抗凝活性随着其分子量的减少而降低。结论 海藻多糖SHW是一种具有抗凝活性的新颖硫酸多糖,其抗凝活性与分子量密切相关。     

扁玉螺多糖的提取、分离和结构分析

目的从扁玉螺(Neverita didyma)中提取和分离纯化多糖,并对其基本理化性质和结构组成进行分析。方法依次采用水提和碱提方法从扁玉螺中提取粗多糖,采用DEAE Sepharose FF阴离子交换和Sephacryl S-300凝胶柱层析对粗多糖进行分离纯化,并对其总糖、蛋白、氨基糖、糖醛酸和硫酸根含量,相对分子质量和单糖组成进行分析。对多糖纯化组分采用甲基化、气质联用(GC-MS)、红外光谱(IR)、电喷雾质谱(ESI-MS)和核磁共振波谱(NMR)对其化学结构进行分析。结果扁玉螺水提粗多糖(BYL-S)中不含有糖醛酸和硫酸基,其单糖组成只含Glc,进一步分离得到了4种水溶性多糖组分。碱提粗多糖(BYL-J)单糖组成相对复杂,除含有Glc外,还含有Man、GlcN、GalN、Gal和Fuc,其摩尔比为Glc∶Man∶GlcN∶GalN∶Gal∶Fuc=78.9∶1.7∶3.4∶2.2∶5.2∶5.6,进一步分离得到了3种多糖组分。对水提多糖纯化组分BYL-S2的结构分析表明其是以α-(1→4)为主链,含有少量β-(1→3,4)和β-(1→3)分支的D-吡喃型葡聚糖。结论从扁玉螺中提取分离得到了7种多糖组分,并确定了一种水溶性葡聚糖的结构,为扁玉螺多糖结构和活性的深入研究提供了基础。     

海藻多糖UH3的结构特征、抗凝和溶栓活性研究

目的 对海藻多糖UH3的结构特征、抗凝血和溶栓活性进行研究。方法 通过热水提取法，从海藻中提取硫酸多糖，采用强阴离子交换色谱和凝胶渗透色谱对多糖进行分离纯化；采用高效液相色谱、高效凝胶渗透色谱（HPGPC）、红外光谱及甲基化方法对多糖的结构进行表征；通过活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TT）、凝血酶原时间（PT）及血凝块溶解法研究多糖体外抗凝血和溶栓活性。结果 多糖UH3在HPGPC色谱图上呈单一对称峰，分子量为50.3 kDa，硫酸根和糖醛酸含量分别为12.27和12.85%；UH3主要由鼠李糖组成，含有少量葡萄糖醛酸和木糖；UH3糖链中鼠李糖主要以→4)-Rhap-(1→、 →3,4)-Rhap-(1→及少量的T-Rhap形式存在，木糖以→4)-Xylp-(1→和T-Xylp存在形式，糖醛酸以→4)-GlcAp-(1→和T-GlcAp形式存在；硫酸根主要位于→4)-Rhap-(1→的C-3位。多糖UH3对APTT和TT有显著延长作用，并能明显提高溶栓率。结论 海藻多糖UH3是一种结构新颖的具有抗凝和溶栓活性的硫酸多糖。     

板蓝根多糖A的分离纯化及结构研究

目的:提取分离板蓝根中均一分子量多糖成分,并对其结构进行研究。方法:从板蓝根中提取水溶性粗多糖,经柱色谱分离纯化得到板蓝根多糖A。采用高效凝胶色谱法检测纯度及相对分子量。经UV、IR、NMR和高碘酸氧化、Smith降解法研究各多糖的化学结构。结果:板蓝根多糖A的相对分子量为11700,主要单糖组成为阿拉伯糖和半乳糖,糖苷键构型以α为主,连接方式以1→3键连接为主,并同时存在1→2和(或)1→4的连接方式。结论:板蓝根多糖A的纯度均在96%以上,是一个新化合物。     

过山枫多糖的体外抗补体活性研究

目的:研究过山枫多糖的体外抗补体活性。方法:采用水提醇沉法提取、分离过山枫多糖;通过苯酚-硫酸法测定其多糖含量;红外光谱确定其多糖结构;将过山枫多糖分别与补体溶血试验中的各要素混合,作用一段时间后再加入其他组分,观测体系的溶血情况,探讨其对补体经典途径激活的作用。结果:分离获得桔红色过山枫多糖,其多糖含量为58.3%。红外光谱显示过山枫多糖主要由α-吡喃糖构成,含有α-D-Glcp。在经典激活途径中,过山枫多糖与补体预先混合能降低体系的溶血,其半数溶血浓度(CH50)为302μg.mL-1,低于肝素的CH50值699μg.mL-1。结论:过山枫多糖具有抗补体活性。     

纤维素酶辅助提取桦褐孔菌多糖的研究

目的优化桦褐孔菌提取工艺,提高桦褐孔菌多糖得率。方法首先对桦褐孔菌多糖提取的主要影响因素纤维素酶用量、酶解温度、溶剂倍量、酶解时间、pH值进行单因素条件筛选。然后采用正交设计法对影响纤维素酶辅助提取多糖的条件进行优化。结果最佳提取条件为:料液比1:40、酶解时间60 min、酶解温度50℃、加酶量0.15 g、酶解pH=5.0。结论纤维素酶对桦褐孔菌多糖进行辅助提取,相比传统的热水浸提,能够显著提高桦褐孔菌多糖的提取率,比水浸提高29.07%,是一种较为有效的提高多糖得率的方法。     

贻贝多糖的工业化制备工艺研究

目的 建立适于工业放大的贻贝多糖提取工艺。方法 以厚壳贻贝为对象,对贻贝多糖制备过程中原料筛选、浸提条件、除蛋白质、醇沉等技术环节进行改进和优化。最后利用改进的工艺进行了贻贝多糖的中试制备。结果 厚壳贻贝多糖为白色粉末,多糖平均得率为贻贝干重的14.1%。MP-A为厚壳贻贝多糖的主要成分,占比约为89.42%,相对分子质量为1,268.15 kD。结论 建立了流程简单、绿色环保、易于放大的贻贝多糖工业化制备工艺,能获得纯度90%左右的贻贝多糖样品。     

大半边莲多糖的提取与含量测定

目的:研究大半边莲多糖提取工艺.方法:多糖含量测定采用蒽酮-硫酸法;多糖提取采用水提醇沉法,以大半边莲多糖提取得率为指标进行正交试验设计,考察对大半边莲多糖提取得率的影响因素.结果:多糖含量测定的线性回归方程为A=35.602C+0.030 2(r=0.999 4),线性范围为0.002 6～0.015 4 mg·ml-1.多糖提取的最佳工艺为加入8倍量的水,70℃提取2次,每次1h.结论:为大半边莲提供了稳定可行的多糖提取工艺,多糖含量测定方法准确可靠.     

星点设计响应面法优选牛樟叶水提物提取工艺

目的优化牛樟叶水提物的提取工艺。方法以打粉粒径、浸渍时间、水浴温度、料液比为考察因素,以提取液中多糖含量为评价指标,在单因素试验基础上采用Box-Behnken星点设计响应面法优化牛樟叶多糖的提取工艺。结果牛樟叶多糖最佳提取工艺为药材过60目筛,料液比为1∶40(m/V),水浴温度为90℃,浸渍时间为75.61min。结论优化后的提取工艺方法简单,重复性和可预测性均较好。     

贻贝提取物的抗氧化活性研究

目的：对海洋软体动物贻贝的抗氧化活性进行体外研究。方法贻贝匀浆后分别用正己烷、乙酸乙酯、氯仿、正丁醇、水进行提取,并对提取物进行抗氧化试验,同时与没食子酸和抗坏血酸两种合成抗氧化剂进行对照。结果试验结果表明乙酸乙酯提取物具有较高的抗氧化活性,在浓度为10～80μg·mL －1范围内,随着浓度的增加其抗氧化能力与没食子酸和抗坏血酸接近。结论贻贝提取物具有显著的抗氧化活性,抗氧化活性与提取物的浓度之间具有很好的相关性。     

麦冬多糖MDG-1的分离纯化和结构分析

目的分离纯化麦冬多糖抗心肌缺血的活性部位，得到相对分子质量均一的组分MDG-1，并进行结构分析。方法水提醇沉得麦冬粗多糖，超滤后经DEAE Sepharose FF柱和Sephadex G25柱色谱纯化后得MDG-1。经完全酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、¹H NMR及¹³C NMR等研究分析MDG-1的化学结构。结果和结论 MDG-1为β-D-果聚糖，易溶于水，数均分子量(M_n)为3 400，重均分子量(M_w)为4 800，峰尖分子量(M_p)为5 000，以2→1连接的呋喃型果糖为主，平均每2.8个主链残基上有一个Fruf(2→6)Fruf(2→分支)。该多糖还含有微量葡萄糖(果糖∶葡萄糖=35∶1)，可能连接在多糖的还原端。     

桑叶多糖PMP11的分离纯化及结构初探

目的:从桑叶中分离纯化获得均一多糖PMP11,并研究其组成及初步结构。方法:桑叶经热水提取乙醇分级沉淀、脱蛋白、脱色、DEAE-52纤维素和Sephadex G-100柱层析,得到一个均一多糖组分PMP11;采用GC、HPLC、IR、NMR、Smith降解和糖醛酸的还原等方法分析其组成和初步结构。结果:PMP11主要由鼠李糖、半乳糖醛酸和葡糖醛酸组成,其摩尔比为鼠李糖∶半乳糖醛酸∶葡糖醛酸=2.27∶1.59∶1;PMP11的主链主要是以β-1→2糖苷键及β-1→3糖苷键连接的鼠李糖,侧链主要是以β-1→2糖苷键及β-1→4糖苷键连接的葡糖醛酸和半乳糖醛酸。结论:本试验首次分析桑叶多糖PMP11的初步结构,可为桑叶多糖的进一步研究提供依据。     

不同提取方式对金线莲多糖含量及DPPH自由基清除活性的影响

目的考察不同提取方式对金线莲多糖含量、结构及抗氧化活性的影响。方法采用热水回流提取法、超声提取法和酶法分别提取金线莲多糖,苯酚硫酸法测定多糖含量,刚果红实验检测三螺旋结构,采用DPPH自由基清除实验评价其抗氧化活性。结果不同提取方式对多糖的产率和DPPH清除活性均有影响,其中超声提取和酶解提取得到的多糖DPPH自由基清除活性优于热水回流提取所得金线莲多糖;提取所得金线莲多糖不含三螺旋结构。结论综合考虑提取效率、抗氧化活性和工艺成本,超声提取为最优方法。