灯盏花素葡萄糖注射液对犬长期毒性试验的研究

目的:观察犬连续静脉注射灯盏花素葡萄糖注射液(Scutellarin glucose injection,Scu)的长期毒性反应,为临床试验研究提供安全性参考。方法:分别设空白对照及灯盏花素葡萄糖注射液高、中、低(21mg/kg、10.5mg/Kg、5.25mg/Kg)3个剂量组,高剂量相当于拟临床人用量的70倍,静脉注射(容量为1ml/Kg),1次/日,连续3个月。末次给药后24小时活杀4只犬,停药后两周再活杀2只犬,分别测定各组犬的血液学、血液生化学等指标,同时测定主要脏器系数,系统尸检和镜检。结果:在用药期间,中剂量组血清GPT值升高,中、高剂量组血Cr值升高,低、中、高剂量组血BUN值升高(P<0.05),提示有一定程度的肝、肾功能损害,但停药两周后能恢复正常。在给药过程中,动物饮食、活动、排泄均未见明显异常,无一动物死亡。停药后各组动物在饮食、活动、排泄、精神状态等方面均未见明显差异;脏器系数、血液学检测结果均在正常范围;病理组织切片无特异性改变。停药后无迟缓性毒性发生。结论:灯盏花素葡萄糖注射液在给药期间对犬肝、肾功能有一定程度的损伤,但停药后又能恢复正常。     

灯盏花素对胰岛素抵抗大鼠肝脏的保护作用

目的探讨灯盏花素对胰岛素抵抗(IR)大鼠肝脏的保护作用。方法采用高脂高糖饲料饲养12周建立IR大鼠模型,成模后随机均分为灯盏花素高剂量组(HD组)、灯盏花素低剂量组(LD组)、模型组(MO组),各组以相应的药物干预2周。另设正常组(NO组),普通饲料喂养,不给药物干预。通过测定大鼠血清空腹胰岛素(FINS)和空腹血糖值(FBG)来计算胰岛素敏感指数(ISI);检测肝脏组织中丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)的活性以观察药物对大鼠肝脏氧化和抗氧化的作用;运用苏木精-伊红(HE)染色制片检测大鼠肝脏组织病理学改变;油红O染色法观察肝脏组织脂肪沉积和脂肪浸润。结果与NO组相比,MO组大鼠ISI明显降低(P<0.01);肝脏中MDA含量明显升高,SOD活性明显下降(P<0.01);HE形态显示,与NO组相比,MO组大鼠肝细胞明显脂肪变性,经过灯盏花素治疗后,与MO组相比,HD组及LD组大鼠肝细胞脂肪变性明显好转;油红O染色结果显示,MO组大鼠肝脏组织脂肪沉积明显,强度大(P<0.01);与MO组相比,HD组和LD组大鼠肝脏脂肪沉积明显好转,HD组大鼠SOD活性较MO组明显升高(P<0.01),MDA的含量较MO组明显下降(P<0.01)。结论灯盏花素可改善IR,对IR大鼠肝脏具有保护作用,其机制可能与改善IR和抗氧化有关。     

HPLC法测定灯盏花素片中灯盏花乙素的含量

目的:建立灯盏花素片中灯盏花乙素的含量测定方法;方法:采用高效液相色谱法,使用C18柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(30:70:1),检测波长335nm;结果:该制剂中灯盏花乙素在0.2～4.0μg范围内线性良好,平均回收率为100.21%,RSD为1.48%;结论:该方法简便、快速、准确,可用于灯盏花素片的含量测定和质量控制.     

灯盏花素注射液对大鼠肺纤维化干预效果研究

目的:探讨灯盏花素注射液对博来霉素引起肺纤维化SD大鼠肺组织氧自由基和显微结构的影响.方法:40只SD大鼠经气管内灌注博莱霉素诱导肺纤维化,随后腹腔注射灯盏花素注射液10 mg/kg,另一组注射醋酸地塞米松注射液.注药后于7,28 d各处死一半.通过HE染色和透射电镜检查肺组织,并测定肺组织HYP、SOD和MDA来评价干预效果.结果:灯盏花素注射液组与地塞米松注射液组结果相似,与博莱霉素组相比,肺组织SOD升高,MDA下降,光镜和电镜结果提示肺纤维化程度减轻.结论:灯盏花素注射液能减轻大鼠肺纤维化,部分机制与抗氧化有关.     

HPLC法测定灯盏花素片中灯盏花乙素的含量

目的建立灯盏花素片中灯盏花乙素的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,使用C18柱,流动相为甲醇-水-冰醋酸(30∶70∶1),检测波长335nm。结果该制剂中灯盏花乙素在0.0624～0.312μg范围内线性良好,平均回收率为99.92%,RSD为0.24%。结论该方法简便、快速、准确,可用于灯盏花素片的含量测定和质量控制。     

灯盏花素对糖尿病大鼠肝脏保护作用的实验研究

目的　探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肝脏保护作用。方法　建立STZ诱导的糖尿病模型 ,随机分 4组 :对照组、模型组、灯盏花素给药组、维生素E给药组 ,每组 10只 ,观察8wk。应用分光光度法检测肝组织MDA含量及SOD、CAT与GSH PX活性 ;HE染色对肝组织作病理检查 ;油红O染色观察肝组织脂肪浸润 ;肝组织ED1(单核 巨噬细胞表面标志 )免疫组织化学采用SABC技术。结果　灯盏花素给药组对糖尿病大鼠血糖、体重无明显影响 ,维生素E给药组可降低血糖 ,延缓体重下降。HE染色模型组部分肝细胞脂肪变性 ;各给药组对肝细胞保护效果较好。模型组肝细胞油红O染色评分为 2 11± 0 82 ,对照组为 0 35± 0 15 ,相比差异有显著性 (P <0 0 1) ;灯盏花素给药组评分为 0 75± 0 6 6 ,维生素E给药组评分为 1 13± 0 78,与模型组相比差异均有显著性 (P均 <0 0 1)。模型组肝组织MDA含量明显升高 ,SOD、CAT、GSH PX活性明显降低 ,各给药组均可降低肝组织MDA含量 ,提高SOD、CAT与GSH PX活性。免疫组织化学显示各给药组均能抑制糖尿病肝组织单核 巨噬细胞浸润的增加。结论　灯盏花素对糖尿病大鼠肝脏保护作用机制部分与抑制肝内脂肪浸润、氧化应激及巨噬细胞浸润有关。     

灯盏花素的研究进展

灯盏花素及其制剂在心脑血管疾病治疗领域展现了良好的疗效,本文综述了近年来灯盏花素在药理学、药动学、制剂、制备、结构改造及临床应用等方面的最新研究进展。     

灯盏花素分散片的制剂工艺研究

目的 考察处方中组分对灯盏花素分散片制剂的影响。方法 以崩解时限为指标,采用正交设计试验,对灯盏花素分散片处方进行筛选。结果 按优化处方制备的灯盏花素分散片．可在3分钟内完全崩解。结论 优化处方的灯盏花素分散片其体外溶出度明显优于普通片。     

灯盏花素注射液稳定性研究

目的研究灯盏花素注射液的化学稳定性,为保证药效提供依据.方法采用初均速法,分别在40,50,60,70,80,90℃(±1℃)下,恒温加热不同时间,用紫外分光光度计测定灯盏花素注射液各样品的吸收度.结果相关系数r为0.9904,说明lgVo与1/T的线性关系良好,符合一级动力学公式.结论灯盏花素注射液的热解反应活化能为88.93kJ*mol-1,以Arrhenius指数规律推算τ20℃0.9贮存期约6.5a,τ25℃0.9贮存期约3.5a.     

灯盏花素脂质体对大鼠脑缺血再损伤的保护作用

目的 观察灯盏花素脂质体对脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用。方法 采用线栓法构造大鼠大脑动脉脑缺血再灌注损伤模型，观察大鼠神经功能障碍情况并进行评分，测定再灌注后缺血侧脑梗死范围及脑组织中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性及丙二醛的含量。结果 灯盏花素脂质体能显著减少脑缺血再灌注损伤大鼠的脑梗死面积和减轻神经功能障碍，并抑制缺血脑组织中丙二醛的含量。提高脑组织中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。结论 灯盏花素脂质体对大鼠大脑缺血再灌注损伤有明显保护作用，具有良好的新药开发前景。     

普伐他汀对灯盏乙素小鼠肝脏转运的作用及机制初探

从整体动物及细胞水平考察灯盏乙素在小鼠肝脏中的摄取转运,研究其可能的跨膜转运机制。应用高效液相色谱法测定比较不同剂量普伐他汀预处理组小鼠及空白组小鼠间灯盏乙素的血药浓度、肝脏药物浓度等药动学性质的改变;使用高效液相色谱法测定比较空白组肝细胞、oatp2高表达组肝细胞以及普伐他汀处理的oatp2高表达组肝细胞对灯盏乙素的摄取情况。结果发现,普伐他汀灌胃能影响灯盏乙素的药动学特征,灯盏乙素的血浆清除率CL降低,而AUC增加;PCN诱导组肝细胞对灯盏乙素的摄取较空白组增加,在同时加入普伐他汀时,小鼠肝细胞对灯盏乙素的摄取减少。目前的研究认为普伐他汀和灯盏乙素之间可能存在潜在的药物相互作用,可能是通过相互竞争oatp2介导的转运通路而发生,这种通路存在于肝脏对灯盏乙素的摄取中。     

灯盏花素在正常和模型大鼠中的药代动力学及代谢物研究

目的研究灯盏花素在正常和角叉菜胶致血栓形成大鼠中的药代动力学，并对其血浆样品中主要代谢物进行初步鉴定。方法RP-HPLC法测定静注36 mg·kg^-1灯盏花素后正常和模型大鼠不同时间血浆样品中灯盏乙素浓度，3P97软件拟合房室模型，计算药动学参数；HPLC-PDA(光电二极管阵列)、LC-MS/MS技术分析鉴定血浆样品中的主要色谱峰。结果血浆中灯盏乙素在0.625～80.0 μg·mL^-1(r=0.999 5)线性关系良好，最低定量浓度：0.312 μg·mL^-1；正常和角叉菜胶致血栓形成状态下，灯盏乙素药时曲线均呈现二室开放模型。血浆样品中4个主要色谱峰的可能结构分别为4′，5-二羟基黄酮-7-氧-β-D-葡糖醛酸甲酯苷(M1)、灯盏乙素(M2)、7-甲氧基-4′，5-二羟基-黄酮(M3)和7-甲氧基-4′,5,6-三羟基-黄酮(M4)。结论正常和模型大鼠体内灯盏乙素的药动学参数有显著性差异；灯盏乙素在大鼠血浆样品中的代谢主要是脱羟基和甲基化途径。     

Effect of scutellarin on the metabolism and pharmacokinetics of clopidogrel in rats

Erigeron breviscapus (Vant.) Hand‐Mazz, a traditional Chinese medicine, is often co‐prescribed with clopidogrel for the treatment of ischemic vascular diseases. Scutellarin is the representative bioactive flavonoid isolated from this herb. The aim of this study was to explore the effect of scutellarin on the metabolism and pharmacokinetics of clopidogrel. The in vitro studies using rat liver microsomes showed that scutellarin significantly inhibited the metabolism of clopidogrel. The IC₅₀ value was 2.1 µm . Ten male rats were employed to investigate the effect of scutellarin on the pharmacokinetics of clopidogrel in vivo. After pretreatment with scutellarin, there were significant increases in the AUC_0–∞ (from 0.9 ± 0.4 to 1.7 ± 0.6 ng/ml h; p <0.05) and C_max (from 0.4 ± 0.1 to 0.9 ± 0.1 ng/ml; p <0.05) of clopidogrel. The pharmacokinetic data for clopidogrel active metabolite showed significant decreases in AUC_0–∞ (18.2 ± 5.6 to 11.4 ± 3.7 ng/ml h; p <0.05) and C_max (from 8.2 ± 1.2 to 4.3 ± 0.3 ng/ml; p <0.05) after pretreatment with scutellarin. Collectively, the metabolism and pharmacokinetics of clopidogrel were significantly affected by scutellarin. This study indicated that potential herb–drug interaction between scutellarin and clopidogrel should be taken into consideration in clinical use. Copyright © 2014 John Wiley & Sons, Ltd.     

灯盏花乙素对脑缺血再灌注损伤大鼠肝功能的影响

目的:观察灯盏花乙素对脑缺血再灌损伤大鼠肝功能的影响。方法:大鼠灌胃给药7日后,阻塞大脑中动脉诱导脑缺血再灌损伤,检测大鼠血清和/或肝组织中的一氧化氮、黄嘌呤氧化酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶、丙二醛、抗氧化酶、及细胞色素P-450活性(水平)。结果:灯盏花乙素明显降低(P<0.01)血清中升高的黄嘌呤氧化酶、丙氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶及肝细织中的丙二醛(P<0.05),升高血清(P<0.01)和肝组织(P<0.05)中降低的一氧化氮并可诱导超氧化物歧化酶(P<0.05)和谷胱甘肽过氧化物酶(P<0.01),除明显降低(P<0.01) CYP3A的活性外,大鼠脑缺血再灌损伤对肝CYP1A1、CYP1A2、CYP2E1的活性没有影响,灯盏花乙素不影响脑缺血再灌损伤大鼠肝CYP的活性。结论:大鼠脑缺血再灌可诱发肝细胞损伤,灯盏花乙素具有保护作用,其作用机制与抗氧化有关。     

低分子肝素钙对不同剂量灯盏花素注射剂在大鼠体内药动学特征的影响

目的研究低分子肝素钙对不同剂量灯盏花素注射剂在大鼠体内药动学特征的影响。方法实验设单独用药组和联合用药组,其中单独用药组大鼠予灯盏花素注射剂50、25、12.5 mg·k^-1,经快速静脉注射;联合用药组大鼠皮下注射低分子肝素钙注射剂0.5 mL（2 000 U）后,快速静脉注射灯盏花素注射剂50、25、12.5 mg·kg^-1。采用HPLC法测定大鼠血浆中灯盏花素的浓度,用3P97数据处理软件计算药动学参数。应用超滤法对灯盏花素与大鼠血浆的蛋白结合率进行测定。结果灯盏花素单独给药及与低分子肝素钙联合给药后,灯盏花素在大鼠体内过程均符合二室模型。单独给药后,灯盏花素在给药剂量范围内大鼠体内消除过程呈现线性消除过程,与大鼠的血浆蛋白结合率不随剂量而变化（P>0.05）,平均值为94.46%。而与低分子肝素钙联合应用后,灯盏花素在给药剂量范围内大鼠体内呈现非线性动力学特征,与大鼠的血浆蛋白结合率随剂量增加保持恒定（P>0.05）,平均值下降至89.93%。结论本研究建立的测定大鼠血浆中灯盏花素浓度的HPLC法专属性强,精密度与回收率高,稳定性良好。首次探明低分子肝素钙对灯盏花素体内药动学的影响,为临床上两者合用设计合理的给药方案奠定了研究基础。     

pH调节剂对野黄芩苷大鼠相对生物利用度的影响

目的研究pH调节剂对大鼠灌胃灯盏花素（主要活性成分为野黄芩苷）后生物利用度的影响。方法采用HPLC-UV法测定大鼠血浆中野黄芩苷的浓度。大鼠按以下3种方案灌胃灯盏花素40mg·kg-1（以野黄芩苷计）：（A）不加pH调节剂的灯盏花素混悬剂;（B）预灌pH6．2碳酸氢钠-柠檬酸缓冲液后,给予不加pH调节剂的灯盏花素混悬剂;（C）灯盏花素混悬剂以碳酸氢钠-柠檬酸缓冲液调节pH值至6．2后,灌胃。结果以方案A为参比,方案B和C的相对生物利用度分别为183．1％与162．4％。方案B和C间的AuG0→1差异无统计学意义。以方案A给药时吸收存在1～2h的时滞,而以方案B和C给药时药物吸收迅速。溶解度-pH曲线表明,野黄芩苷在酸性条件下难溶,随着pH值升高,其溶解度增大。结论pH值是影响野黄芩苷口服吸收的一个重要因素,预灌或共服pH调节剂以提高胃液的pH值,可以增加野黄芩苷在胃肠道上段的溶解度,从而增加吸收的速率与程度,使时滞明显缩短、生物利用度显著提高。     

冰片对灯盏花素在大鼠体内药动学的影响

目的:观察冰片对灯盏花素在大鼠体内药动学的影响。方法:建立高效液相色谱(HPLC)方法测定大鼠血浆中灯盏乙素的浓度。大鼠尾静脉注射灯盏花素注射液(灯盏乙素24 mg.kg-1)及灯盏花素冰片注射液(灯盏乙素24 mg.kg-1 冰片0.96 mg.kg-1),用HPLC法测定大鼠给药后不同时间血浆灯盏乙素的浓度,BAPP数据处理软件计算药动学参数。结果:灯盏乙素在0.05~60μg.mL-1范围内线性良好(r=0.999 4)。灯盏花素与冰片配伍给药可使灯盏花素中灯盏乙素的药动学参数t1/2α,t1/2β和t1/2γ较单独给药时明显减小[t1/2α:(1.87±0.14)vs(3.46±0.45),P<0.01;t1/2β:(11.18±2.07)vs(14.74±2.89),P<0.05;t1/2γ:(53.31±8.21)vs(161.16±15.48),P<0.01],而K12较单独给药时明显增大[(0.120±0.042)vs(0.039±0.037),P<0.05]。结论:冰片可加快灯盏花素在大鼠体内的分布与消除。     

野黄芩苷及其衍生物的脑靶向神经保护作用

目的 研究野黄芩苷及其衍生物的神经保护作用和脑靶向性.方法 利用体外大鼠大脑皮层神经细胞存活影响实验测定野黄芩苷及其衍生物的脑神经保护的活性,建立原代脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞共培养的体外血脑屏障模型来评价三者的脑靶向性.结果 野黄芩苷及其衍生物均具有脑神经保护作用,野黄芩苷乙酯透过体外血脑屏障的能力强于野黄芩苷及其苷元.结论 野黄芩苷乙酯能通过血脑屏障,具有脑靶向性.     

灯盏乙素对大鼠瑞舒伐他汀血浆浓度及组织分布的影响

目的考察大鼠体内灯盏乙素对瑞舒伐他汀血浆浓度和组织分布的影响。方法按照体重将大鼠随机分成4组,每组18只:对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组。实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组分别灌胃10,50,200 mg·kg-1灯盏乙素,同时均灌胃瑞舒伐他汀5 mg·kg^-1;对照组灌胃等体积0.2%CMC-Na水溶液。分别于给药后1,2,6 h摘眼球取血,取血后立即处死大鼠,取出心、肝、肺、肾、脑组织处理,HPLC-MS测定血浆及组织的瑞舒伐他汀含量。结果所建立的瑞舒伐他汀血浆及组织样本HPLC-MS法符合要求。对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组大鼠的血浆瑞舒伐他汀浓度在1 h分别为(170.38±40.77),(218.09±59.52),(278.64±76.26),(297.48±95.37)ng·m L^-1;在2 h分别为(237.26±70.31),(293.76±89.04),(410.27±102.13),(461.49±121.73)ng·m L^-1;在6 h分别为(131.58±40.52),(166.21±48.52),(236.78±73.40)和(251.33±82.94)ng·m L^-1,各实验组大鼠瑞舒伐他汀血浆浓度高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组大鼠的瑞舒伐他汀均主要聚集于肝,对照组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组和实验Ⅲ组在大鼠肝的瑞舒伐他汀浓度在1 h分别为(2098.57±735.10),(1905.91±703.16),(1406.39±435.86),(1217.08±318.65)ng·m L^-1;这4组在2 h分别为(3204.19±893.53),(2863.87±836.12),(2114.28±598.31),(1973.15±512.64)ng·m L^-1;这4组在6 h分别为(1681.71±513.29),(1603.14±517.86),(1120.08±298.75),(1057.91±267.66)ng·m L^-1,实验Ⅱ组和实验Ⅲ组在肝的瑞舒伐他汀浓度低于对照组;实验组Ⅲ组的瑞舒伐他汀在大鼠的心、肺、肾及脑组织的浓度高于对照组,以上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论剂量达到50 mg·kg-1的灯盏乙素对瑞舒伐他汀血浆浓度及肝组织分布均有显著影响,其分布机制可能与竞争蛋白转运体有关。     

灯盏花素在家犬体内的药代动力学

目的建立高效液相色谱法测定家犬血浆中灯盏花素主要有效成分灯盏乙素的浓度,研究灯盏花素在家犬体内的药代动力学。方法用高效液相色谱法测定6只家犬iv灯盏花素(以灯盏乙素计为120 mg/只)后不同时间血浆中灯盏乙素的浓度,绘制药-时曲线,计算药代动力学参数。结果灯盏乙素的药-时曲线符合三室模型,其T_1/2 γ,T_1/2α和T_1/2β分别为(1.1±0.8) min,(7.0±2.8) min和(52±29) min;Vc为(880±508) mL;CL为(190±54) mL·min^-1;AUC_0-90和AUC_0-∞分别为(574±134) mg·min·L^-1和(599±132) mg·min·L^-1。结论灯盏花素家犬iv给药后,血浆中灯盏乙素浓度迅速下降,提示制剂开发的剂型选择、临床给药方法或给药间隔时间的确定都应该考虑其T_1/2。