流感病毒血凝素在多种系统中表达的研究进展

流感疫苗是预防流感病毒感染最有效的方法。传统灭活流感疫苗通过在鸡胚中培养病毒后经纯化获得。流感每年都会发生季节性流行,流感病毒高度多变的特性使生产有效疫苗成为一项挑战。为了克服流感疫苗生产对鸡胚的依赖,需要开发新的流感疫苗生产策略。由于血凝素是流感病毒主要表面抗原之一,重组血凝素亚单位疫苗为流感疫苗的生产提供了一个方案。本文将对流感病毒血凝素在大肠埃希菌、毕赤酵母、昆虫细胞、哺乳动物细胞多种系统中表达的研究进行综述。     

流感疫苗的不良反应报告

流行性感冒(简称流感)是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病,是全球范围的严重公共卫生问题,经常引起地方性流行,但有时也会引起世界性大流行。我国是流感的高发区,每年均有不同程度流行,严重威胁人民健康。1957年以来发生的3次世界性流感大流行的新亚型均首发于我国。国外在流感疫苗的研发及应用方面取得了巨大进展,预防效果明显提高,流感疫苗已成为降低流感发病率及病死率的主要措施。流感疫苗是在鸡胚中培养,经裂解、灭活、纯化后应用。近年来,国内流感疫苗也逐步普及应用,其安全性越来越受到人们的关注,有关流感疫苗不良反应的报道也屡见…     

美国当前的疫苗生产能力可应对流感大流行

美国密歇根大学Lash等的一项研究显示，如果在今后5年内美国发生流感大流行，则利用现有设施生产细胞培养疫苗是控制疫情的唯一办法。 现行流感疫苗用鸡胚培养法制备。此法比细胞培养法费时费力。美国用鸡胚培养法需6个月才能生产出2．5亿～3亿剂流感疫苗，而且细胞培养法，4个月就能生产6亿剂疫苗。     

制备流感疫苗的细胞基质研究进展

考虑到鸡胚生产流感疫苗的局限性,研究者们开始关注细胞培养疫苗生产技术.此文主要介绍了几种常用的细胞基质(如Vero、PER.C6、Madin-Darby狗肾细胞和其他动物细胞),阐述了利用细胞培养技术制备流感疫苗的方法及研究进展.相关研究显示细胞基质生产的流感疫苗与鸡胚生产的流感疫苗相比,效果相似或者更好.     

基于MDCK细胞培养的流感疫苗研究进展

流感一直是威胁全世界人类健康的疾病,每年引起数以亿计的人感染。疫苗是防控流感的重要手段。除了传统的鸡胚制备的流感疫苗,基于哺乳动物细胞培养的流感疫苗已研制成功。此文重点介绍哺乳动物MDCK细胞的不同培养方式,以及基于MDCK细胞培养的流感疫苗的研究进展。     

基于哺乳动物细胞培养的流感疫苗生产

传统的流感疫苗生产多采用鸡胚培养,但该生产过程易受微生物污染、内毒素残余量高、对流感大流行应急能力差,因此基于哺乳动物细胞培养的病毒疫苗工业的发展变得尤为重要.本文综述国内外采用哺乳动物细胞培养,重点是MDCK细胞,生产流感疫苗的研究以及临床应用现状.     

流感疫苗的研究进展

流感是我国每年秋冬季常见的呼吸道传染病。接种疫苗是防控流感最为有效的措施。目前,多种类型的流感疫苗正在研发之中或已上市,同时,流感疫苗规模化生产的基质也逐渐从鸡胚转为哺乳动物细胞。此文介绍了流感疫苗的研究进展以及疫苗生产基质的变迁。     

大流行流感疫苗研发和质量管理中一些问题的探讨

季节性流感疫苗是公认的预防流行性感冒的有力武器,主要预防人流感病毒同型变异株造成的流行和感染.而大流行流感通常由新的流感病毒亚型引起,因此,大流行流感疫苗是一种全新的预防性疫苗.比较季节性流感和大流行流感的产生原因,进而从毒种制备、生产基质、抗原含量、佐剂、免疫效果评价、质控方法、生物安全等各个方面阐述大流行流感疫苗研制中面临的技术问题,同时介绍国外在质量管理方面的技术法规.     

MDCK细胞基质与鸡胚基质单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫反应的比较研究

目的:比较鸡胚基质和细胞基质的H1N1单价流感疫苗在小鼠体内诱导的免疫反应的差异。方法:分别采用鸡胚基质和MDCK细胞基质H1N1流感疫苗注射C57BL/6小鼠,通过体外中和实验,胞内细胞因子染色及多细胞因子检测比较2种基质生产的单价流感疫苗诱导的体液及细胞免疫反应的差异。结果:体液免疫方面,细胞基质疫苗组血清滴度与鸡胚基质疫苗组血清滴度基本一致。在细胞免疫方面,细胞基质疫苗组的细胞免疫相关细胞因子分泌水平更加显著。结论:由于病毒培养基质的不同,2种流感单价疫苗在诱导免疫反应时间存在一定差异。细胞疫苗具有诱导多种免疫反应的优势,综合细胞工艺的其他优势,说明利用细胞工艺生产流感疫苗将会成为趋势。本实验有助于评价不同基质制备的单价流感疫苗在小鼠中诱导的免疫水平。     

细胞培养物作为生产流感疫苗的基质

流感一直是严重的全球性公共卫生问题,近一百年来曾发生过三次大流行。免疫接种是控制流感大流行的最有效措施。鉴于快速大量生产流感疫苗需用受精鸡蛋来培养病毒,因此迫切需要一种可在发生流行时快速、大批量生产疫苗的替代的细胞培养系统。1995年2月16日世界卫生组织(WHO)在日内瓦召开了关于细胞培养物作为生产流感疫苗的基质的会议,讨论了几个实验室关于流感病毒在稳定细胞系中培养的研究结果,并对下一步工作提出了建议。     

解卫清气注射液对流感病毒的抑制作用

采用鸡胚培养和血球凝集试验观察解卫清气注射液对流感病毒的直接灭活作用。结果显示用药组和病毒对照组间鸡胚生长发育有明显差异，病毒的几何平均滴度分别为２０和１６０（Ｐ＜０．００１）。表明解卫清气注射液的抗病毒作用是通过抑制血凝素而实现的。     

金莲花醇提物体外抗甲型流感病毒作用研究

目的研究金莲花醇提物的抗呼吸道甲型流感病毒作用。方法采用鸡胚培养流感病毒,并用鸡红血球凝集试验检测药物对病毒在鸡胚尿囊液中增殖的抑制作用。结果在药物和病毒先在体外直接作用后的共同接种试验中,金莲花醇提物对甲型流感病毒具有体外直接灭活作用;在甲型流感病毒先感染鸡胚后再接种药物试验中,金莲花醇提物可抑制病毒在鸡胚内的增殖。结论金莲花醇提物在体外对甲型流感病毒具有直接杀灭作用,对甲型流感病毒在鸡胚中的增殖具有抑制作用。     

四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种传代稳定性研究

目的  研究四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种的传代稳定性,确保毒种适用于疫苗生产。方法  将WHO推荐的季节性流感疫苗甲型H1N1和H3N2、乙型BV和BY病毒株（原始种子批）在鸡胚中传代扩增,制备生产用主种子批和工作种子批毒种。按中国药典2015年版三部的要求对毒种进行检定,包括鉴别试验、病毒滴度和血凝滴度测定、外源微生物检查等。将毒种连续传10代,用反转录PCR扩增第2、3、4、5、10代病毒鸡胚尿囊液中的血凝素（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶（neuraminidase,NA）基因片段,并进行序列测定,分析传代过程中HA和NA的核苷酸和氨基酸序列同源性。结果  主种子批和工作种子批毒种的抗原性均与推荐的病毒株一致。各型病毒滴度均>6.5 lg半数鸡胚感染量/ml,血凝滴度均≥1：160。2个种子批的支原体和无菌检查结果均为阴性,主种子批外源性禽白血病病毒和禽腺病毒检查结果亦为阴性。毒种在鸡胚中连续传代后,各型病毒株HA和NA的核苷酸序列同源性均>99%,氨基酸序列同源性均为100%。结论  本研究的四价流感病毒裂解疫苗生产用毒种具有良好的传代稳定性,可用于疫苗生产。     

Influenza vaccines: new developments

Current inactivated influenza vaccines are being produced with three influenza virus strains that are recommended annually by the World Health Organization on the basis of information obtained from global influenza surveillance. The use of these vaccines, for which the antigens are produced in embryonated chicken eggs, can result in a significant reduction of influenza-related morbidity and mortality. Nevertheless, there is still a demand for vaccines with a higher efficacy that can be produced more rapidly and more flexibly in response to an epidemic or a pandemic. New developments in the field of influenza vaccine preparation include novel vaccine production technologies, reverse genetics technology for the generation of vaccine strains and novel adjuvants for the improvement of vaccine immunogenicity.     

生产用流感疫苗候选病毒株复制能力的提高

流感疫苗生产主要采用鸡胚病毒培养的方式,而提高流感病毒在鸡胚中的复制能力将能增加疫苗的产量和可靠性.影响病毒在鸡胚中繁殖的重要因素包括:流感病毒血凝素部分位点的氮基酸变异、血凝素与神经氨酸酶之间的作用平衡、病毒其他蛋白的作用及8个基因节段的重配比例.疫苗株制备方法瓶颈的突破和乙型流感病毒重配株的研究也将帮助疫苗生产商选择合适的候选疫苗株.     

生产用流感疫苗候选病毒株复制能力的提高

流感疫苗生产主要采用鸡胚病毒培养的方式,而提高流感病毒在鸡胚中的复制能力将能增加疫苗的产量和可靠性.影响病毒在鸡胚中繁殖的重要因素包括:流感病毒血凝素部分位点的氮基酸变异、血凝素与神经氨酸酶之间的作用平衡、病毒其他蛋白的作用及8个基因节段的重配比例.疫苗株制备方法瓶颈的突破和乙型流感病毒重配株的研究也将帮助疫苗生产商选择合适的候选疫苗株.     

The 2009 influenza pandemic: promising lessons for antiviral therapy for future outbreaks

The influenza A virus is the main circulating influenza virus in the human population. It can cause disease also in birds and other mammals and is responsible for annual epidemics and occasional pandemics. The most known and deadly pandemic was the "Spanish flu" (influenza type A/H1N1), which struck the human population between 1918 and 1919, with probably the heaviest toll ever recorded in terms of human lives. The most recent flu pandemic, caused in 2009 by the swine-origin reassortant virus (pH1N1), has raised several critical issues in terms of our preparedness in responding fast to new pandemic influenza strains. Probably, the most instructive lesson that has been learned from the 2009 pandemic, was that the speed of manufacturing and distributing an effective vaccine will not be able to keep up with the pace of a rapidly spreading pandemic virus, failing to grant accessibility to the vaccine for a significant percentage of the susceptible population, before the onset of the pandemic peak. Thus, our first and most effective line of defense against a pandemic influenza virus, particularly in the early phases, are the antiviral drugs. Here we analyze our current understanding of the influenza pandemic viruses, in general, and of the pH1N1 in particular, along with the most recent approaches being pursued to design new anti-influenza drugs.