促性腺激素与IL-6对上皮性卵巢癌细胞增殖影响的研究

目的:探讨促性腺激素及白细胞介素-6(IL-6)在卵巢癌细胞增殖中的作用.方法:将不同剂量的人重组促性腺激素、IL-6与人卵巢低分化乳头状腺癌细胞株(OVCAR-3)共培养,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)实验观测其对卵巢癌细胞生长的影响.IL-6的表达分别采用RT-PCR和ELISA法进行检测,IL-6受体(IL-6RAα和gp130)的表达采用RT-PCR及免疫印迹技术进行测定.结果:促性腺激素(20、60、100 U/L)、IL-6(20、40、60、80、100μg/L)对OVCAR-3具有促增殖作用,与对照组相比差异有统计学意义,同时细胞培养上清液中IL-6含量、细胞IL-6受体mRNA及蛋白表达水平有增高趋势.结论:促性腺激素对上皮性卵巢癌细胞株的促增殖过程可能由IL-6介导,促性腺激素、IL-6共同影响上皮性卵巢癌细胞的生长.     

银杏叶提取物对U937泡沫细胞IL-1β、TNF-α及IL-10表达的影响

本研究考察了氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激的U937细胞致炎细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、抗炎细胞因子白细胞介素10(IL-10)及其受体(IL-10R)的蛋白及mRNA的表达，同时观察银杏叶提取物(GbE)对它们的作用。U937细胞用100 mg·L^-1 ox-LDL刺激24 h形成泡沫细胞，同时分别加入不同浓度的GbE(0.1, 1及10 μg·L^-1)共孵育，采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测IL-1β、TNF-α、IL-10和IL-10R的蛋白或mRNA表达。U937泡沫细胞组IL-1β、TNF-α、IL-10和IL-10R的蛋白或mRNA的表达较对照组显著增加(P<0.01)。GbE组IL-1β及TNF-α的蛋白和mRNA的表达水平明显降低，IL-10的蛋白、IL-10和IL-10R的mRNA表达水平明显提高，与U937泡沫细胞组相比差异显著(P<0.05, P<0.01)。GbE对U937泡沫细胞致炎细胞因子IL-1β及TNF-α表达的显著抑制作用，对抗炎细胞因子IL-10及其受体IL-10R表达的显著上调作用可能是其抗atherosclerosis(AS)的机制之一。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血炎性细胞因子的变化及意义

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血炎性细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的变化及意义.方法 收集急性发作期的COPD患者(观察组)40例和健康体检者(对照组)30例,采用双抗夹心酶链免疫吸附(ELISA)法测定血浆IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α水平.结果 观察组血浆IL-6、IL-8和TNF-α水平明显高于对照组,IL-10水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(t =6.33,11.09,7.09,7.70,均P＜0.01).结论 血浆炎性细胞因子IL-6、IL-8、IL-10和TNF-α参与了COPD发病过程.通过调节血浆炎性细胞因子的水平,降低炎性细胞因子所引起的气道炎性反应,有望为COPD发病机制的进一步探讨和防治提供新的思路.     

木犀草素通过HIF-1α抑制糖酵解调控M1型巨噬细胞极化

目的 基于低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)介导糖酵解途径研究木犀草素(luteolin)调控M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法 RAW264.7细胞随机分为对照组(M0)和脂多糖(LPS)联合干扰素γ(IFN-γ)诱导组(M1);之后将M1组分为Luteolin治疗组、2-DG(糖酵解抑制剂)组、Luteolin+2-DG组、Luteolin+DMOG(HIF-1α激活剂)组。Western blot检测iNOS、Arg-1和HIF-1α蛋白表达;流式细胞仪检测巨噬细胞亚型;ELISA检测细胞IL-6和IL-10浓度;Real-time PCR检测GLUT1、HK2、PFK1、PK和HIF-1α mRNA表达。结果 与M1组比较,Luteolin治疗组以及Luteolin和2-DG共培养组糖酵解相关因子HIF-1α、GLUT1、HK2、PFK1和PK表达水平降低;细胞葡萄糖消耗增加、乳酸分泌量减少。M1型巨噬细胞标记物iNOS、CD86和IL-6表达降低,M2型巨噬细胞标记物Arg-1、CD206和IL-10表达增高。而DMOG能...     

存活素蛋白表达下调对卵巢癌细胞侵袭能力影响的实验研究

目的通过存活素(Survivin)反义寡核苷酸(ASODN)转染下调人卵巢癌细胞株SKOV3中Survivin蛋白表达,观察细胞侵袭能力的改变,探讨Survivin蛋白表达可能在调节卵巢癌细胞侵袭能力中的作用。方法用脂质体(LipofectamineTM2000)介导ASODN转染人卵巢癌细胞株SKOV3,流式细胞学技术检测细胞转染率及其Survivin蛋白表达,Transwell小室检测细胞侵袭能力的改变。结果LipofectamineTM2000介导ASODN人卵巢癌细胞株SKOV3转染,FCM检测转染率>95%。用600 nm/L ASODN转染48 h后,细胞中Survivin蛋白表达明显下调(t=7.8146,P<0.01),侵袭细胞数也明显下降(t=27.416,P<0.01)。结论卵巢癌细胞中Survivin蛋白表达下调,可降低卵巢癌细胞侵袭能力,提示Survivin蛋白可能是影响卵巢癌侵袭能力的重要分子,在卵巢癌转移机制中起关键性作用。     

炎性标志物在各类型冠心病患者中的水平及意义

目的探讨炎性因子白细胞介素IL-8、IL-10、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、细胞间黏附分子1(sICAM-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)在冠心病发病过程中的作用及其临床意义。方法采用酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)检测及比较各冠心病组及对照组上述因子水平。结果冠心病组各因子水平相比于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),不稳定型心绞痛(UAP)组Hs-CRP、sICAM-1、TNF-α水平高于稳定型心绞痛(SAP)组(P<0.05),而二者间IL-8、IL-10差异无统计学意义(P>0.05);急性心肌梗死(AMI)组IL-8、IL-10、HS-CRP、sICAM-1、TNF-α水平均高于SAP组及UAP组,其差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 IL-8、IL-10、HS-CRP、sICAM-1、TNF-α参与了冠心病的发生、发展,其水平与冠心病病情严重程度密切相关,可能是冠状动脉粥样硬化的标志。     

毛细支气管炎患儿血清细胞因子水平变化及分析

目的:探讨细胞因子在毛细支气管炎中的发病机制.方法:采用双抗体夹心ELISA法测定毛细支气管炎组32例患儿和对照组20例正常儿童血清中IL-4、IL-10、TNF-α水平.结果:血清中IL4、TNF-α水平,毛细支气管炎组显著高于对照组(P＜0.05),而IL-10水平毛细支气管炎组显著低于对照组(P＜0.05).血清中IL-4与TNF-a水平之间呈正相关,相关系数r=0.70(P＜0.001).IL-10与IL-4、TNF-a之间无相关关系(P＞0.05).结论:毛细支气管炎患儿血清中IL-4、IL-10、TNF-α水平检测结果与哮喘患儿相近,两者有相似的细胞因子紊乱,细胞因子在毛细支气管炎的发病中起着重要的作用.     

卵巢癌组织中IL-6和IL-8及TNF-α mRNA的表达及其意义

目的通过探索卵巢癌组织中细胞因子的表达,来探讨卵巢癌的内在发病机制。方法选择山东省济宁市第一人民医院2004年5月至2008年11月收治的原发卵巢癌患者30例为实验组,术前均未接受放化疗治疗。正常对照组卵巢组织取自同期30例子宫肌瘤行全子宫加一侧或双附件切除患者,荧光定量PCR的方法检测白细胞介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等因子mRNA的表达水平。结果卵巢癌组织中IL-6、IL-8mRNA表达明显高于正常对照组,分别达到正常卵巢组织表达的(8.78±1.32)和(11.4±11.65)倍,统计学差异非常显著(P<0.01);卵巢癌组织中TNF-α的表达差异较小,为对照组的(0.19±1.02)倍,有明显统计学差异(P<0.05)。结论IL-6、IL-8mRNA的过度表达表明有转移和浸润。TNF-α的作用有待于进一步探讨。     

氨溴索对慢性阻塞性肺疾病患者血清细胞因子与肺功能的影响

目的 探讨氨溴索治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效,及其对患者血清细胞因子与肺功能的影响.方法 将60例患者随机均分为两组,均予常规治疗,治疗组加用氨溴索.检测患者肺功能,采用酶联免疫吸附试验法测定患者血清白细胞介素8、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α水平.结果 治疗组总有效率为90.00%,明显高于对照组的70.00%(P＜0.05).两组治疗后用力肺活量(FVC)、第1秒用力呼气容积(FEV1)和FEV1/FVC%均较治疗前明显提高,且治疗组的肺功能指标改善明显优于对照组(P＜0.05).两组患者血清IL-8,IL-10,TNF-α含量均较治疗前明显降低,且治疗组降低程度较对照组更明显(P＜0.05).结论 氨溴索治疗慢性阻塞性肺疾病的临床疗效确切,能明显改善患者的肺功能,降低炎症细胞因子IL-8和TNF-α的表达水平,减轻气道中的炎性细胞浸润.     

左旋精氨酸对气道上皮细胞白细胞介素6和8的调节作用

目的研究左旋精氨酸对NCI-H292细胞中白细胞介素6(IL-6)和IL-8的影响。方法细胞共分为5组:最低需要培养基(MEM)组、MEM+A组(MEM+左旋精氨酸)、RPMI组(RPMI1640培养基,含1 mmol.L-1精氨酸)、常规培养基组(精氨酸含量>1 mmol.L-1)、地塞米松组(MEM+10μg.L-1地塞米松)。通过TNF-α和脂多糖刺激NCI-H292细胞建立哮喘气道炎症微环境,观察不同浓度TNF-α和脂多糖对IL-6和IL-8释放的影响,并比较各组间IL-6和IL-8水平。采用ELISA法测定细胞IL-6和IL-8释放水平,斑点印迹法测定其mRNA水平。结果 IL-6和IL-8水平与TNF-α的浓度正相关(r=0.644、0.715,均P<0.01)。不论有无脂多糖或TNF-α的刺激,MEM组IL-6和IL-8水平高于MEM+A组、RPMI组和地塞米松组(P<0.01)。MEM组IL-6水平高于常规培养基组(P<0.01),TNF-α刺激下IL-8水平高于常规培养基组(P<0.01),脂多糖刺激下2组IL-8水平相当(P>0.05)。地塞米松组IL-6和IL-8水平与MEM+A组相当(P>0.05)。细胞培养4、8、24 h,MEM+A组IL-6 mRNA和IL-8 mRNA表达显著低于MEM组(P<0.05)。结论一定浓度左旋精氨酸可抑制NCI-H292细胞IL-6和IL-8的释放,可能通过降低IL-6和IL-8转录活性引起,在哮喘治疗中具有潜在的应用价值。     

鼻咽癌组织中Survivin蛋白和HIF-1α表达水平及临床意义

目的 探讨鼻咽癌组织中Survivin蛋白和缺氧诱导因子-1α(HIF-1 α)表达水平及临床意义.方法 选取2010年12月-2015年12月经病理切片确诊为鼻咽癌的患者72例;同时选取24例慢性鼻咽炎组织标本进行对照.应用免疫组织化学检测Survivin蛋白和HIF-1α的表达情况,并分析其表达水平的临床意义.结果 鼻咽癌组织中Survivin蛋白和HIF-1α阳性表达率均高于慢性鼻咽炎组织(P＜ 0.001).Ⅲ+Ⅳ期鼻咽癌组织Survivin蛋白和HIF-1α的阳性表达率、中等及以上阳性表达率均高于Ⅰ+Ⅱ期鼻咽癌组织(P ＜0.001);有淋巴结转移的患者Survivin蛋白和HIF-1α的阳性表达率均高于无淋巴结转移的患者(P＜0.05和P＜0.001).结论 Survivin和HIF-1α表达在鼻咽癌组织中具有较高的表达,两者在鼻咽癌的分期,进展过程中起到了重要的作用.     

缺氧诱导因子-1α对结直肠癌细胞上皮间质转化及 侵袭迁移的影响

摘要： 目的 探讨缺氧是否能促进不同分化程度结直肠癌细胞上皮间质转化 （EMT）, 并分析缺氧对结直肠癌细 胞侵袭、 迁移的影响。方法 分别选取 HCT116（低度分化）和 HT-29（高度分化）结直肠腺癌细胞。观察 0、 10、 25、 50、 100 及 150 mg/L 氯化钴 （CoCl2） 诱导 2 种细胞 48 h 后的形态变化。分析 0、 10、 25、 50 及 100 mg/L CoCl2 处理 48 h 后缺氧诱导因子 （HIF） -1α蛋白表达变化, 筛选出 CoCl2诱导细胞缺氧的最适合浓度。MTT 实验检测不同时间点 （0 、 24 、 48 、 72 及 96 h） CoCl2诱导 2 种结直肠癌细胞的增殖情况, 筛选出 CoCl2诱导缺氧的最佳时间。最佳浓度和时间 条件下, 对 HCT116 和 HT-29 细胞分别进行缺氧 （缺氧组） 和常氧 （常氧组） 处理, Transwell 侵袭和划痕实验检测 2 组 2 种细胞的侵袭、 迁移情况; Western blot 实验和 RT-PCR 实验检测 2 组 HIF-1α、 E-cadherin 及 Vimentin 的蛋白及 mRNA 表达水平。结果 50 mg/L CoCl2作用 48 h 时 2 种细胞均出现明显的形态改变。2 组 HCT116、 HT-29 细胞的 HIF-1α蛋白表达水平随 CoCl2浓度增加均呈先增后减趋势, 50 mg/L 为最适宜浓度 （P < 0.05）。0~96 h 时 2 种细胞不 论有无缺氧, 细胞增殖能力均呈先增后减趋势 （P＜0.05）, 48 h 为最佳作用时间。HCT116 和 HT-29 细胞系中缺氧组 穿膜细胞数和细胞迁移率均明显高于常氧组 （P＜0.05）。HCT116、 HT-29 细胞系中缺氧组 HIF-1α、 Vimentin 的蛋白 和 mRNA 表达水平均高于常氧组, 而 E-cadherin 的蛋白和 mRNA 表达水平低于常氧组（均 P＜0.05）。结论 缺氧 能诱导不同分化程度结直肠癌细胞均发生 EMT, 并能增强 2 种结直肠癌细胞的侵袭、 迁移能力。     

PAK1、HIF-1α在结肠癌组织中侵袭、转移中的表达研究

目的 探讨PAK1(p-21活化激酶1)、缺氧诱导因子1α (HIF-1α)在结肠癌组织中侵袭、转移中的表达.方法 分别采用免疫组化法和荧光原位杂交检测41例结肠癌组织和癌旁正常组织中的HIF-1α、PAK1表达,并分析HIF-1α、PAK1与临床病理的关系.结果 本组研究中,结肠癌组织HIF-1α mRNA、PAK1 mRNA阳性表达率和HIF-1α蛋白、PAK1蛋白阳性表达率均显著高于癌旁正常组织(P＜0.05).从蛋白水平上讲,HIF-1α、PAK1在淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ～Ⅵ期和Dukes分期为C、D期中阳性表达率显著高于无淋巴结转移、TNM分期为Ⅰ～Ⅱ期、Dukes分期为A、B期患者,差异具有统计学意义(P＜0.05).Spearman等级相关性分析显示,在蛋白水平,HIF-1α、PAK1在结直肠癌表达中呈正相关关系.结论 HIF-1α、PAK1可能参与结肠转侵袭和转移中.     

含硅羟基磷灰石调节巨噬细胞极性促进成骨分化机制研究

摘要：目的　探讨无机骨再生修复材料含硅羟基磷灰石（si-HA）通过调节巨噬细胞极性转换促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1（3T3）的增殖及成骨分化的作用机制。方法　制备羟基磷灰石（HA）和si-HA纳米粒子,以10 mg/L的剂量刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞（RAW,分别为HA组和si-HA组）,另设Control组（10%FBS的DMEM培养基）。分析RAW细胞的极化状态及炎性因子的表达水平。收集完全培养基、HA和si-HA纳米粒子刺激RAW细胞3 d后获得的上清液,制备RAW条件培养基、HA+RAW条件培养基和si-HA+RAW条件培养基,并培养小鼠3T3前成骨细胞（分别为RAW组、HA＋RAW组和si-HA＋RAW组）,并设空白对照组（完全培养基）,检测各组细胞增殖和成骨相关基因［M1极化标志物诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、M2极化标志物Arginase基因及促炎、抗炎因子肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-10和IL-1ra］的表达水平。结果　si-HA组巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-1β mRNA表达水平低于Control组和HA组,Arginase、IL-10和IL-1ra mRNA表达水平高于Control组和HA组（P＜0.05）;IL-6 mRNA表达水平低于HA组（P＜0.05）,与Control组差异无统计学意义。si-HA+RAW组3T3细胞增殖能力、碱性磷酸酶（ALP）活性及矿化结节形成明显强于空白对照组、RAW组和HA+RAW组（P＜0.05）。培养14 d时,si-HA+RAW组3T3细胞ALP、OCN、OPN、Col-1、Runx2 mRNA表达水平均高于其他3组（P＜0.05）。结论　si-HA纳米粒子可诱导巨噬细胞产生较有利的骨免疫微环境,增强3T3细胞的增殖和成骨分化。     

白癜风患者血清IL-10、TNF-α的检测结果分析

目的 研究分析白介素-10(IL-10)与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在白癜风患者中的表达水平及临床意义.方法 2014年12月至2016年3月收住本院的寻常型白癜风患者46例(稳定期25例,进展期21例)为观察组,另选取同期于本院体检健康者30例为对照组.采用ELISA法检测两组受试者血清IL-10与TNF-α水平,并分析其含量差异.结果 观察组受试者IL-10含量为(124.7±35.6)pg/ml,TNF-α为(98.4±15.7) pg/ml;而对照组则分别为(169.5±38.7) pg/ml、(47.5±12.4) pg/ml.两组受试者IL-10与TNF-α水平比较差异有统计学意义(P＜0.05).进展期患者IL-10水平低于对照组和稳定期患者,而TNF-α含量明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 检测IL-10与TNF-α水平有助于判断白癜风病情.     

口腔鳞癌组织中ALG-2、HIF-1α和VEGF的表达水平及临床意义

目的 观察分析口腔鳞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)组织中凋亡相关基因-2(ALG-2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况,探讨ALG-2、HIF-1α和VEGF对OSCC患者的临床意义.方法 选取2015年5月-2016年5月48例OSCC患者口腔黏膜癌变组织(研究组)和同期48例正常者口腔黏膜组织(对照组)作为研究对象,比较两组口腔黏膜组织ALG-2、HIF-1α和VEGF的表达情况,并分析其与OSCC临床病理特征的相关性.结果 研究组中ALG-2、HIF-1α和VEGF总阳性率均明显高于对照组(P＜0.05).在OSCC组织分化程度上,高分化组ALG-2、HIF-1α和VEGF总阳性率均明显低于低分化组(P＜0.05).不同分期OSCC癌组织中ALG-2、HIF-1α和VEGF总阳性率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 OSCC口腔黏膜癌变组织中ALG-2、HIF-1α和VEGF的表达可考虑作为临床评估OSCC病情的指标.     

阿托伐他汀对脑出血大鼠TNF-α和IL-10的影响

目的 观察不同剂量的阿托伐他汀对大鼠脑出血模型肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)浓度的影响,探讨其神经保护作用的可能机制.方法 胶原酶诱发脑出血模型,ELISA检测血清、脑匀浆TNF-α、IL-10 动态变化;HE染色计数激活的小胶质细胞.结果 (1)与假手术组比较脑出血TNF-α、IL-10 的水平及激活的小胶质细胞增加(均P＜0.05).(2)与脑出血组相比阿托伐他汀干预组能减少激活的小胶质细胞(P＜0.05),能显著降低TNF-α水平(P＜0.05),能显著增加IL-10水平(P＜0.05),且在实验选取干预剂量中,随干预剂量的增大,调节作用有增强趋势.结论 上调IL-10下调TNF-α可能是阿托伐他汀减轻脑出血后急性炎性反应,阻止继发性脑损害,发挥神经保护作用的机制之一.     

溃疡性结肠炎患者血清白细胞介素8和肿瘤坏死因子-α的水平和意义

目的 探讨白细胞介素8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在溃疡性结肠炎（UC）发病中的作用及临床意义.方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定47例活动期UC患者（其中轻度15例、中度18例和重度14例）,21例缓解期UC患者及20例健康对照组的血清IL-8和TNF-α水平.结果 活动期UC患者血清IL-8和TNF-α水平分别为（58.3±11.6）、（62.1±10.8）ng/L,显著高于缓解期UC患者和健康对照组（均P＜0.05）,缓解期UC患者IL-8和TNF-α水平显著高于健康对照组（均P＜0.05）.重度活动期UC血清IL-8和TNF-α水平高于中度和轻度活动期UC,中度活动期UC血清IL-8和TNF-α水平高于轻度活动期UC,组间比较均差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 IL-8和TNF-α参与了UC的炎性过程,检测血浆IL-8和TNF-α可作为判断UC患者病变严重程度和活动性的重要指标.     

宫颈电环切除术前后肿瘤坏死因子α及白细胞介素2的变化及意义

目的探讨宫颈电环切除术（LEEP）前后肿瘤坏死因子α（TNF-α）及白细胞介素2（IL-2）等细胞因子的变化及意义。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定高危人乳头瘤病毒（HPV）感染的宫颈上皮内瘤变I级（CINI）30例、Ⅱ级（CINII）30例、Ⅲ级（CINⅢ）27例患者LEEP手术前后宫颈局部TNF—α及IL-2的水平。并与25例非HPV感染正常宫颈组织（NCE）相比较。结果LEEP手术前CINI组中TNF-α及IL-2水平与对照组比较．差异无统计学意义（P〉0．05）;LEEP手术前CINⅡ、CINⅢ组中TNF—α及IL-2水平均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;手术后均下降,与手术前比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;CINⅡ组手术后TNF-α、IL-2水平及CINⅢ组手术后IL-2水平与对照组比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;CINⅢ组手术后TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。CINI、CINⅡ、CINⅢ组HPV病毒转阴率分别为100．0％、93．3％、96．3％,总转阴率为96．6％。结论高危HPV感染的宫颈高度病变中宫颈局部可能存在免疫失衡,LEEP术后免疫失衡有所改善,手术对宫颈局部TNF-α及IL-2水平的影响有限,仍需大样本、多因素的长期追踪。