积雪草酸对糖尿病大鼠肾脏Nrf2-ARE信号通路的影响

目的 探讨积雪草酸(AA)对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及核因子NF-E2相关因子(Nrf2)-抗氧化反应元件(ARE)信号通路的影响.方法 18只雄性SD大鼠随机均分为糖尿病模型组(DM组)、AA 60 mg·kg-1·d-1干预组(AA组)和正常对照组(NC组).干预8周后,检测各组血糖、肾脏指数(KI)、血尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、尿白蛋白排泄率(UAER)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性,光镜下观察肾脏的病理形态改变,Western blot法检测Nrf-2、血红素氧合酶1(HO-1)蛋白表达.结果 与NC组相比,DM组肾脏病理形态改变明显,血糖、KI、BUN、SCr及UAER、MDA和Nrf-2均明显增加(P＜0.05),SOD活性、HO-1蛋白表达降低(P＜0.05);而AA组能明显改善上述指标的变化(P＜o.05).结论 AA可能通过激活Nrf2-ARE信号通路发挥对糖尿病大鼠肾脏的保护作用.     

α-硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏氧化应激及细胞凋亡的影响

目的 探讨氧化应激在糖尿病大鼠肾脏细胞凋亡中的作用以及α-硫辛酸的肾保护作用.方法 腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,并将糖尿病大鼠分为糖尿病非干预组(DM组)、α-硫辛酸干预组(LA组),非糖尿病正常大鼠作对照(NC组),每组10只.12周时检测肾皮质中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)的活性;原位末端标记(TUNEL)法检测肾脏细胞凋亡,免疫组化法检测半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达.结果 与NC组相比,DM组肾皮质MDA含量显著升高(P<0.01),SOD活性显著下降(P<0.01);肾脏凋亡细胞数及Caspase-3表达均显著增加(P<0.01).α-硫辛酸干预后可改善上述指标(P<0.01).结论 糖尿病可引起肾脏高水平的氧化应激和过度的细胞凋亡.α-硫辛酸通过抑制氧化应激和下调Caspase-3的表达来干预细胞凋亡发挥肾保护作用.     

全反式维甲酸抑制核因子 E2相关因子 2和血红素加氧酶 1加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤表达

目的观察用全反式维甲酸( all-trans retinoic acid,ATRA)抑制核因子 E2相关因子 2(Nrf2)和血红素加氧酶 1(HO-1)是否会加重大鼠肾脏缺血再灌注损伤( IRI)表达。方法 2020年 10月至 2022年 2月选取 24只健康成年雄性 SD大鼠切除右肾,并按随机数字表法分为 3组( n=8),即假手术组( Sham)、肾脏缺血再灌注( I/R)组、全反式维甲酸( I/R+ATRA)组。其中 Sham组和 I/R组给予腹腔注射玉米油( 1 mL·kg?1·d?1)1周, ATRA组则给予腹腔注射溶于玉米油的 ATRA(10 mg·kg?1·d?1)1周后, 3组大鼠用 10%的水合氯醛( 0.3 mL/100 g)进行麻醉后固定四肢,将其在 37 ℃条件下沿腹中线打开腹腔并分离出左肾动脉。其中 Sham组切除右肾,不予以夹闭左肾动脉; I/R组和 ATRA组采用右肾切除联合左肾动脉夹闭 45 min后再灌注 24 h的方法建立大鼠肾脏 I/R模型。实验结束后收集 3组大鼠血清及肾组织标本,用比色法检测血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)浓度; HE染色法观察肾组织病理改变; TUNEL法进行肾组织细胞凋亡的检测;二氢乙啶( DHE)荧光染色评估肾组织活性氧的表达情况;通过比色法检测肾组织丙二醛( MDA)浓度、超氧化物歧化酶( SOD)活性;用蛋白质印迹法分别对 Nrf2、HO-1的表达进行检测。结果与 Sham组相比, I/R组大鼠肾组织 Nrf2、HO-1蛋白表达量均增加( P<0.01)活性氧表达量增加, SOD活性下降, MDA含量、血清 Scr、BUN浓度升高( P<0.01)肾小管损伤评分及凋亡细胞表达较高(P<0.05),其中 Nrf2蛋白和 HO-1蛋白分别为 0.52±0.09和 0.37±0.79,高于Sham组的0.06±,0.01和 0.02±0.01。与 I/R组相比, I/R+ATRA组大,鼠肾组织 Nrf2、HO-1蛋白显著减少( P<0.01)活性氧表达量明显增加, SOD活性严重下降, MDA含量、血清 Scr、BUN浓度明显升高( P<0.01)肾小管损伤评分显著增加,凋亡细胞表达亦增高( P<0.05)其中 I/R+ATRA组 Nrf2蛋白和 HO-1蛋白分别为 0.29±0.04.15±0.03,显著低于 I/R组。结论 Nrf2/HO-1通路参与肾脏缺灌注损伤过程, ATRA可能通过抑制 Nrf2/HO-1通路,加重氧化应激,进一步加重肾肾脏,和0,血再,     

周络通胶囊激活转录因子Nrf2抑制糖尿病周围神经病变小鼠氧化应激

目的观察周络通胶囊激活转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)对糖尿病周围神经病变小鼠氧化应激的影响。方法 KK/Upj-Ay小鼠随机分为模型组、周络通胶囊高、中、低剂量组,另设C57BL/6小鼠对照组。灌胃给药12周,测定坐骨神经传导速度(MNCV)、空腹血糖(FBG)及糖化血红蛋白(HbA1c);比色法测定血液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量;荧光定量PCR测定坐骨神经Nrf2、血红素氧合酶-1(HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)mRNA的表达;Western blot测定坐骨神经总Nrf2、核内Nrf、HO-1、γ-GCS蛋白的表达。结果周络通能明显提高MNCV、SOD、GSH-Px、CAT,降低FBG、HbA1c、MDA;周络通组核内Nrf2蛋白表达明显上升;Nrf2 mRNA和总Nrf2蛋白表达在各组无差异;能升高HO-1、γ-GCS mRNA和蛋白表达。结论周络通胶囊通过促进Nrf2核转位发挥其抗DPN小鼠氧化应激损伤的作用。     

葡萄籽原花青素联合亚低温通过ERK/Nrf2/HO-1通路对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的基于ERK/Nrf2/HO-1通路探讨葡萄籽原花青素(GSP)联合亚低温(MHT)对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、MHT组、GSP组、MHT+GSP组。采用线栓法建立脑缺血再灌注损伤大鼠模型。评估各组大鼠神经功能缺损评分(NDS),TTC法观察并计算脑梗死面积,尼氏染色观察脑组织病理学变化,TUNEL法计算细胞凋亡指数,酶联免疫吸附法检测脑组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,Westernblotting检测Bax、Bcl-2、p-ERK1/2、Nrf2和HO-1蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠NDS、脑梗死面积、AI、脑组织MDA水平、Bax、p-ERK1/2、胞质和胞核Nrf2、HO-1蛋白表达均显著升高(P<0.05),SOD、GSH-Px活力和Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,MHT组、GSP组和MHT+GSP组大鼠NDS、脑梗死面积、AI、脑组织MDA水平、Bax和胞质Nrf2蛋白显著降低(P<0.05),SOD、GSH-Px活力、Bcl-2、p-ERK1/2、胞核Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。且MHT+GSP组的治疗疗效高于MHT组和GSP组。结论 MHT和GSP联合作用可能通过激活ERK/Nrf2/HO-1通路,上调p-ERK1/2、胞核Nrf2和HO-1蛋白表达,抑制氧化应激,发挥脑保护作用。     

缬沙坦对糖尿病肾病大鼠肾脏氧化应激的影响

目的观察缬沙坦干预治疗后糖尿病大鼠肾脏氧化应激的变化,探讨缬沙坦保护肾脏的部分机制。方法以链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,缬沙坦干预治疗10周,观察大鼠糖代谢、肾功能及肾皮质内丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果糖尿病大鼠糖化血红蛋白、血尿素氮、24h尿总蛋白、尿白蛋白定量(24h)、24h尿量、肾皮质MDA含量显著升高;肾皮质SOD活性显著降低。缬沙坦干预治疗组上述指标改善,差异有统计学意义。结论氧化应激参与了糖尿病肾病(DN)的发病过程,缬沙坦对DN的治疗作用部分是通过抗氧化实现的。     

桑枝多糖对糖尿病肾病小鼠肾皮质氧化应激作用的影响

目的研究桑枝多糖对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病小鼠肾皮质氧化应激作用的影响。方法 STZ(120 mg·kg~(-1))尾静脉注射诱导糖尿病小鼠模型,并随机分为:模型组,缬沙坦组(20 mg·kg~(-1)),桑枝多糖0.3、0.6、1.2 g·kg~(-1)组,另设空白组,连续灌胃给药90 d。于d 45将各组小鼠给药后置代谢笼中收集24 h尿液,记录排尿量,检测24 h尿微量白蛋白含量。90 d后处死小鼠,通过对肾脏HE染色观察肾脏病理学变化;全自动生化分析仪测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的含量;试剂盒测定大鼠肾皮质中锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、氧化氢酶(CAT)、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ的活性和丙二醛(MDA)含量;ELISA法检测肾皮质ROS的含量;蛋白免疫印迹法检测肾皮质中SIRT1、FOXO1、NF-κB的蛋白表达。结果桑枝多糖组的肾皮质病变得到缓解,较模型组的血糖有所下降,并明显降低尿微量白蛋白含量、尿量及血清中Cr、BUN(P<0.05),肾皮质Mn-SOD、CAT、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ活性有所升高,ROS、MDA含量下降(P<0.05),上调SIRT1、FOXO1的蛋白水平以及下调NF-κB的蛋白水平(P<0.05)。结论桑枝多糖对糖尿病小鼠肾脏损害有一定的保护作用,机制可能与其通过增加肾皮质中SIRT1、FOXO1的蛋白表达,增强组织的抗氧化能力有关。     

氧化应激在糖尿病肾病中的意义及吡格列酮干预研究

目的观察糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激水平,探讨氧化应激在糖尿病肾病中的作用及吡格列酮干预效果。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型。24只大鼠随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、吡格列酮干预组(3mg·kg-1.d-1,DT组),每组8只。12周末,测定各组相关生化指标。运用比色法检测肾皮质中丙二醛(MDA)的含量、铜锌超氧化物歧化酶(Cu-ZnSOD)及过氧化氢酶(CAT)的活性。结果与NC组相比,DM组和DT组血糖、胆固醇、甘油三酯、尿素氮、血肌酐、肾质量/体质量和尿蛋白定量(24h)值差异有统计学意义。DM组与NC组比较,肾皮质Cu-ZnSOD、CAT活性明显降低(P<0.01),MDA含量明显增加(P<0.01)。DT组与DM组比较,血糖、胆固醇、甘油三酯、尿素氮、血肌酐值差异无统计学意义(P>0.05),肾质量/体质量和尿蛋白定量(24h)明显降低(P<0.05);肾皮质CAT和Cu-ZnSOD活性增加(P<0.05),肾皮质MDA含量降低(P<0.05)。结论糖尿病大鼠肾脏组织中氧化应激水平升高,在糖尿病肾病发病机制中起重要作用。吡格列酮可能通过抗氧化作用改善糖尿病大鼠肾脏损害。     

牛膝多糖对糖尿病肾脏保护作用的研究

目的:观察牛膝多糖对实验性糖尿病(DM)大鼠肾脏的保护作用及对转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法:用链尿佐菌素(STZ)诱发、建立糖尿病大鼠模型,通过牛膝多糖干预治疗,观察糖代谢(血糖、胰岛素)、肾功能、血及肾组织的TGF-β1表达等指标的变化.结果:①牛膝多糖治疗组与糖尿病未治疗组比较明显降低DM大鼠血糖、尿素氮、尿总蛋白(24h)及微量白蛋白,升高胰岛素水平,抑制肾皮质TGF-β1表达.②肾脏TGF-β1表达量与尿总蛋白(24 h)、尿白蛋白(24 h)浓度呈显著正相关.结论:牛膝多糖具有减少尿微量白蛋白排出、血尿素氮浓度、减少肾脏TGF-β1表达的作用;牛膝多糖有防治糖尿病肾病(DN)的作用,其防治DN及保护肾功能的作用与其降低肾脏TGF-β1表达有关.     

Nrf2-自噬通路在大鼠切口痛-瑞芬太尼诱导痛觉过敏中的作用

摘要： 目的 探讨切口痛-瑞芬太尼痛敏模型大鼠脊髓内核因子 E2 相关因子 2 （Nrf2） -自噬通路在痛觉过敏中的作用。方法 24 只雄性 SD 大鼠依随机数字表法分为 3 组： 盐水+切口痛组 （I 组）、 切口痛-瑞芬太尼痛敏组 （RI 组）、 Nrf2 激动剂 t-BHQ 组 （t-BHQ 组） ,每组 8 只。I 组和 RI 组建模前分别经尾静脉输注生理盐水 0.1 mL/ （kg·min）和瑞芬太尼 1 μg/ （kg·min）, 连续输注 60 min。t-BHQ 组于输注瑞芬太尼前 0.5 h 腹腔注射 t-BHQ （15 mg/kg）, 12 h 1 次, 连续 4 次, 余处理同 RI 组。3 组输注同时于双侧后足建立 Brennan 切口痛模型。分别于输注前 24 h （T0 ）、 输注后 2 h （T1 ）、 6 h （T2 ）、 24 h （T3 ） 和 48 h （T4 ） 测定大鼠机械刺激缩足阈值 （PWT） 及热刺激缩足潜伏期 （PWL）。测试完毕后将大鼠处死, 取 L4~6 脊髓节段, Western blot 法测定脊髓自噬相关蛋白微管相关蛋白 1 轻链 3Ⅱ （LC3Ⅱ）、 Beclin-1、 Nrf2 及其下游分子血红素氧化酶 1 （HO-1） 表达水平。结果 随着处理时间的延长, 3 组 PWT、 PWL 呈总体下降的趋势。从 T1 开始, 与 I 组相比, RI 组 PWT 下降、 PWL 缩短, T4 时 LC3Ⅱ、 Beclin-1 表达升高、 Nrf2、 HO-1 蛋白表达降低 （P＜0.05）; 与 RI 组相比, tBHQ 组 PWT 升高、 PWL 延长 （P＜0.05）, 同时 Nrf2、 HO-1、 LC3Ⅱ、 Beclin-1 蛋白表达均明显升高 （P＜0.05）。结论 Nrf2-自噬通路的激活可明显改善切口痛-瑞芬太尼诱导的痛觉过敏。     

达格列净对大鼠造影剂肾病的保护作用及机制

目的 探讨达格列净对大鼠造影剂肾病（CIN）的保护作用及作用机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、CIN模型组、达格列净组,采用尾静脉注射吲哚美辛、左旋硝基精氨酸甲酯、碘海醇注射液制备急性肾损伤大鼠模型,达格列净组于造模前2 h灌胃给予达格列净,正常组、模型组灌胃给予等体积生理盐水。造模24 h后分别检测大鼠血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、尿肌酐（Ucr）、24 h尿量,计算肌酐清除率;检测大鼠肾组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量;苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠肾组织病理损伤情况;免疫荧光染色观察大鼠肾组织核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）的表达情况。结果 达格列净组Scr、BUN、肾组织MDA含量显著降低（与模型组P<0.01或P<0.05）,肌酐清除率、肾组织SOD含量显著提高（与模型组P<0.05）。病理结果显示达格列净组大鼠肾小管上皮细胞变性区域明显减少。造影剂肾损伤后肾小管细胞 HO-1、Nrf2表达均有轻度代偿性升高,达格列净干预后其表达量明显增多（与模型组比较P<0.01）。结论 达格列净对大鼠CIN有一定的保护作用,机制可能与增加Nrf2、HO-l蛋白的表达、提高大鼠抗氧化应激能力有关。     

番石榴叶总黄酮对糖尿病大鼠肾脏Nrf2/HO-1信号通路的影响

目的 探讨番石榴叶总黄酮（TFPGL）对糖尿病大鼠肾脏病变的保护作用及机制探讨。方法 雄性SD大 鼠24只,按随机数字表法分成对照组、糖尿病组、TFPGL治疗组,每组8只,后2组大鼠采用单次腹腔注射链脲佐菌素 （55 mg/kg）诱导糖尿病模型,TFPGL治疗组加用200 mg/kg TFPGL灌胃。12周后收集血、尿及肾组织,检测血糖（BS）、 血尿素氮（BUN）、尿蛋白/尿肌酐比值（ACR）及血清肌酐（SCr）的变化,HE染色检测肾脏病理改变,免疫荧光、免疫组 织化学染色及Western blot检测肾脏核因子NF-E2相关因子2（Nrf2）、血红素氧合酶-1（HO-1）表达。结果 与对照 组相比,糖尿病组BS、BUN、ACR及SCr明显升高,Nrf2表达增加,HO-1表达下降（均P＜0.05）;而给予TFPGL治疗 后,BS、BUN、ACR及SCr较糖尿病组明显降低,Nrf2、HO-1表达明显增加（均P＜0.05）。结论 TFPGL对糖尿病大鼠 肾脏病变具有一定的治疗效果,其机制可能与降低血糖和激活Nrf2/HO-1信号通路有关。     

早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体功能及超微结构变化

目的观察早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体功能和结构变化。方法将20只健康雄性大鼠随机分为正常对照组和糖尿病组,每组10只。糖尿病组大鼠采用链脲佐菌素诱导糖尿病模型。第10周末测定2组血糖、肾重/体质量、24h尿蛋白定量;检测各组肾脏线粒体丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）含量及锰超氧化物歧化酶（Mn-S0D）、总一氧化氮合酶（T-NOS）、组分ATP酶活性和线粒体呼吸控制率（RCR）,分析线粒体比表面。结果与正常对照组比较,糖尿病组血糖、肾重/体质量、24 h尿蛋白定量明显增加（P〈0.01）,肾脏线粒体MDA、NO含量、T-NOS明显增加（P〈0.01）,Mn-S0D、组分ATP酶活性、线粒体RCR及比表面明显减少（P〈0.01）。结论早期糖尿病肾病大鼠肾脏线粒体存在明显的氧化损伤和功能、结构障碍。