妊娠期糖尿病患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4的表达

目的：探讨妊娠期糖尿病患者胎盘组织中IRS-1和GLUT4的表达。方法选取2012年3月∽2014年3月本院产科门诊收治的住院分娩孕妇共83例,按照检查结果将其分为妊娠期糖尿病组（GDM组）（n=43）和正常足月妊娠组（对照组）（n=40）。检测两组孕妇的各临床指标（身高、血压、体重以及空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油等）,同时采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法测定患者胎盘组织中的IRS-1和GLUT4的表达水平。结果 GDM组的空腹血糖、空腹胰岛素、总胆固醇、三酰甘油等指标水平均高于对照组（P〈0.05）。 GDM组的HOMA-IR高于对照组,GDM组的HOMA-ISI、HOMA-β%低于对照组（P〈0.05）。IRS-1在两组胎盘组织中的表达水平比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;GLUT4在两组胎盘组织胞质中的表达水平的比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,在胎盘组织细胞膜中的表达水平比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 IRS-1、GLUT4作为胰岛素信号通路中的信号转导分子,其在胰岛素抵抗环节中发挥重要作用。     

葛根素对胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白4的影响

目的 :探讨葛根素对高糖高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞葡萄糖转运蛋白 4 (GLUT4 )表达水平及其转位机制的影响。方法 :实验大鼠随机分为正常组、模型组和葛根素组 ,每组 10只。模型组和葛根素组大鼠喂以高糖高脂饲料 ,4周后葛根素组大鼠予以葛根素 10 0mg·kg-1·d-1腹腔注射。以Westernblot法检测各组大鼠脂肪细胞GLUT4的含量 ,定期检测实验大鼠的体质量、血甘油三酯和胆固醇、空腹血糖及血浆胰岛素水平 ,并计算胰岛素敏感指数。结果 :模型组大鼠脂肪细胞内膜GLUT4含量较正常组减少 38.72 % (P <0 .0 5 ) ,细胞外膜减少2 1.91% (P <0 .0 5 )。给予葛根素治疗 6周后 ,大鼠脂肪细胞内膜GLUT4的含量与模型组相比无明显变化 ,而细胞外膜GLUT4含量增加 2 1.4 6 % (P <0 .0 5 )。结论 :葛根素可提高胰岛素抵抗大鼠脂肪细胞GLUT4蛋白表达水平 ,且能够改善其转位机制 ,从而加强葡萄糖的摄取和利用。     

SGLT抑制剂联合胰岛素在1型糖尿病中的应用

钠-葡萄糖共转运蛋白抑制剂(SGLTi)通过抑制肾脏葡萄糖重吸收/延缓肠道葡萄糖吸收发挥降糖作用。SGLTi辅助胰岛素治疗1型糖尿病,不仅可降低糖化血红蛋白、改善血糖变异性和增加葡萄糖目标范围内时间,而且不增加低血糖、心肾事件和骨折的风险,还具有减少胰岛素用量和改善代谢的作用。SGLTi的不良反应主要有酮症酸中毒和生殖系统感染,其作为1型糖尿病患者胰岛素的补充治疗显示出一定的应用前景,但要根据患者的个体情况,平衡获益与风险,为患者选择最佳的治疗决策。     

蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素信号转导蛋白表达的影响

目的 探讨蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞磷脂酰肌醇3激酶(P13K)与葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)蛋白表达的影响.方法 胰岛素抵抗HepG2细胞模型建立后,培养液中加入蜕皮甾酮共同孵育,观察蜕皮甾酮及吡格列酮对模型细胞葡萄糖掺入率的影响;应用免疫细胞化学染色法及Western blot等方法观察蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞P13K与GLUT-4蛋白表达的影响.结果 与模型细胞组比较,1×10-5M蜕皮甾酮可使胰岛素抵抗HepG2细胞P13K、GLUT-4蛋白的表达增加(P＜0.05).结论 蜕皮甾酮的胰岛素增敏作用可能与胰岛素信号转导分子P13K、GLUT-4蛋白的表达增强有关.     

乙醇对大鼠骨骼肌胰岛素信号传递分子表达的影响

目的　探讨乙醇对大鼠骨骼肌葡萄糖摄取能力和胰岛素受体 (IR)、胰岛素受体底物 1(IRS1)和胰岛素受体底物 2 (IRS2 )及葡萄糖转运体 4(glut4)表达的影响。方法　雄性Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为对照组和饮酒组 ,每组 10只。饮酒组每天乙醇灌胃 1次 ,乙醇量为 5g (kg·d) ;对照组每天蒸馏水灌胃 1次 ,蒸馏水量 5g (kg·d)。喂养时间 5个月。测大鼠空腹血糖和胰岛素、口服糖耐量 2h血糖 ;体外胰岛素刺激实验检测骨骼肌糖摄取能力 ;用RT- PCR和Westernblot法测定IR、IRS1和IRS2mRNA和蛋白表达水平 ,Real- timePCR测定glut4mRNA水平。结果　与对照组相比 :(1)饮酒组大鼠空腹血糖、空腹血胰岛素和口服糖耐量 2h血糖未见差异 ;(2 )饮酒组大鼠骨骼肌细胞基础和胰岛素刺激后糖摄取能力显著下降 (P <0 . 0 5 ) ;(3 )饮酒组大鼠骨骼肌glut4mRNA水平显著下降 (饮酒组 :△CT =5 . 3 7± 0 .2 4,对照组 :△CT =4. 86± 0 .3 1,P <0 .0 1) ;(4 )饮酒组大鼠骨骼肌IR、IRS1和IRS2mRNA及蛋白水平明显增加 (P <0 . 0 5 )。结论　长期摄入乙醇可以通过下调glut4表达而损害大鼠骨骼肌胰岛素敏感性 ,而胰岛素受体及其底物 1、2表达呈代偿性上调。     

利拉鲁肽对高脂诱导胰岛素抵抗小鼠糖代谢的影响

目的探讨利拉鲁肽对高脂诱导胰岛素抵抗小鼠糖代谢的影响。方法 16只小鼠建立高脂诱导胰岛素抵抗模型后分为两组,每组8只,分别连续7 d腹腔注射利拉鲁肽400μg·kg^-1·d^-1(利拉鲁肽组)和等量生理盐水(OC组)。另设正常对照组8只。测量小鼠体重、脂肪及糖代谢相关指标;ELISA检测小鼠血浆IL-1、IL-6及鸢尾素水平;Western blot检测小鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)相关通路蛋白表达水平。结果与OC组比较,利拉鲁肽组小鼠体重和脂肪下降,糖代谢相关指标下降,血浆IL-和IL-6水平下降,而血浆鸢尾素水平升高,骨骼肌GLUT4相关通路蛋白水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论利拉鲁肽能够改善高脂诱导胰岛素抵抗小鼠的糖代谢,提高骨骼肌胰岛素敏感性;其机制可能与激活骨骼肌GLUT4相关通路蛋白表达及提高鸢尾素分泌有关。     

单纯性肥胖及2型糖尿病儿童胰岛素受体底物-1的研究

目的:探讨单纯性肥胖及2型糖尿病儿童胰岛素受体底物-1(IRS-1)表达的改变。方法:对20例单纯性肥胖儿童,20例2型糖尿病儿童及20例对照组儿童,采用细胞免疫技术进行白细胞染色,运用图像分析软件计算光密度值,从而定量分析白细胞中IRS-1的含量变化。结果:肥胖组、2型糖尿病组白细胞中IRS-1表达下降,且与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。结论:肥胖组、2型糖尿病组白细胞中IRS-1表达下降,与对照组相比有统计学意义(P<0.05),提示肥胖组与2型糖尿病组儿童胰岛素信号传递中受体后作用的关键底物缺陷,影响了胰岛作用的发挥。提示IRS-1与胰岛素抵抗有关,有利于进一步理解2型糖尿病的发病机制,指导临床治疗。     

葡萄糖转运蛋白4与骨骼肌、脂肪组织胰岛素抵抗的关系

胰岛素抵抗（Insulin resistance，IR）是2型糖尿病的一个重要的病理特征，其定义是正常或高分泌量的胰岛素产生低于正常生物效应的一种状态，表现为肝脏、肌肉、脂肪等外周组织对葡萄糖的代谢障碍，其中骨骼肌对葡萄糖利用依赖于胞膜上的运载蛋白，葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）是主要的葡萄糖运载体，其所介导的葡萄糖转运是骨骼肌糖代谢的主要限速步骤，因此GLUT4对于全身血糖内稳态的调控具有重要意义。     

游离脂肪酸对B细胞胰岛素受体底物-1及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶表达的研究

在分子水平,胰岛素受体底物蛋白被认为是游离脂肪酸（FFA）导致胰岛素抵抗（IR）的重要靶分子,其机制可能与FFA诱导B细胞胰岛素受体底物1（IRS-1）丝氨x酸（Ser）307磷酸化从而影响胰岛素信号转导有关。然而FFA导致IRS-1Ser307磷酸化的分子机制目前尚不知。为此我们采用软脂酸（PA）体外培养胰岛B细胞株,探讨FFA导致IR的可能分子机制。     

脂联素影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4表达的研究

目的：通过建立骨骼肌L6细胞胰岛素抵抗模型,探讨骨骼肌L6细胞中脂联素（ APN）的分泌,以及脂联素对骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法（1）体外培养大鼠L6成肌细胞,诱导分化后,给予不同浓度的棕榈酸（PA）,测定不同时间细胞培养上清液葡萄糖浓度,观察PA对L6细胞摄取葡萄糖的影响,建立胰岛素抵抗模型;（2）根据实验条件的不同分为三组：NC组（正常对照组,即骨骼肌L6细胞组）;IR组（胰岛素抵抗模型组）;IR＋PIO组（胰岛素抵抗模型＋吡格列酮组）。应用Western blot方法分别测定上述三组APN和GLUT4表达水平。结果（1）0．4 mmol· L^-1的棕榈酸在作用12、24、36 h以及0．6～0．8 mmol· L^-1棕榈酸作用8～36 h后,细胞培养上清液中葡萄糖含量,明显高于对照组。胰岛素抵抗模型建立;（2）Western blot结果显示：①与NC组比较,IR组APN和GLUT4表达均减少,差异有统计学意义;②与IR组比较,IR＋PIO组其APN和GLUT4表达均增加,差异有统计学意义。结论（1）大鼠L6成肌细胞培养并诱导分化后,经过一定条件下PA刺激,可以建立胰岛素抵抗模型;（2）大鼠L6细胞可分泌和表达脂联素,骨骼肌源性脂联素上调L6细胞GLUT4的表达;（3）吡格列酮作为PPAR-γ激动剂,可增加大鼠L6细胞脂联素的分泌,进而改善胰岛素敏感性。     

子宫内膜癌与胰岛素/Ras/MAPK信号通路的相关性研究

目的：探讨胰岛素/Ras/MAPK通路中主要调节蛋白生长因子受体结合蛋白2 (growth factor receptor binding protein 2,Grb-2)、Ras、P-ERK、细胞周期素D1（CyclinDl,CD-1）在子宫内膜癌中的表达及意义;方法：采用免疫组化方法检测48例正常子宫内膜,10例不典型增生子宫内膜,51例子宫内膜癌组织中Grb-2、Ras、P-ERK及CD-1的表达情况,放免法检测内膜癌患者空腹血清胰岛素水平;结果：Grb-2、Ras、P-ERK、CD-1在正常子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜、子宫内膜癌组织中阳性表达率依次升高,其中Grb2、P-ERK、CD-1差别有统计学意义。Grb-2、P-ERK在子宫内膜癌中的表达与肿瘤的手术-病理分期呈正相关(P<0.05),子宫内膜癌中Grb-2与Ras、Grb-2与P-ERK表达呈正相关,差异有统计学意义(P<0.05) ,Grb-2与淋巴结转移呈正相关（P＜0.05）。循环胰岛素水平与Grb-2、P-ERK表达呈正相关（P＜0.05） 结论：胰岛素/ Ras / MAPK信号传导通路在子宫内膜癌的发生发展过程中可能起重要作用。     

中药降糖复方水提取物对KK-Ay糖尿病小鼠骨骼肌糖代谢PI3K/Akt信号通路的影响

目的 研究中药降糖复方水提取物（WEJTD）对自发性2型糖尿病（T2DM）模型KK-Ay小鼠骨骼肌糖代谢PI3K/Akt信号通路的影响。方法 将KK-Ay小鼠按随机数法随机分为5组：模型组、盐酸二甲双胍（MH,250 mg/kg）组和WEJTD低、中、高剂量（2、4、8 g/kg）组,C57BL/6J小鼠作为对照组,每天ig给药1次,共12周,对照组和模型组ig等体积蒸馏水。给药12周后,取小鼠血清,ELISA试剂盒法检测胰岛素水平;Trizol法提取肌肉组织中的RNA,荧光实时定量PCR（qRT-PCR）检测磷脂酰肌醇激酶-3（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、葡萄糖转运蛋白-4（GLUT-4）、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）、糖原合成酶（GS）、胰岛素受体底物（IRS-1）mRNA水平。结果 与模型组比较,WEJTD高、中剂量显著上调小鼠血清胰岛素水平、骨骼肌中IRS-1 mRNA水平（P<0.05、0.001）;高、中、低剂量均显著下调骨骼肌中GSK-3β mRNA水平,显著上调PI3K、Akt、GLUT-4、GS mRNA水平（P<0.05、0.01、0.001）。结论 中药降糖复方通过上调PI3K/Akt信号通路,减少糖原沉积,刺激骨骼肌中葡萄糖转运。     

灵芝多糖对大鼠胰岛细胞分泌胰岛素功能的影响

目的 :探讨灵芝多糖 (Gl PS)对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。方法 :分离大鼠胰岛细胞 ,分别观察在葡萄糖为 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 时 ,Gl PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。进一步加入不同的抑制剂观察Gl PS对胰岛细胞分泌胰岛素的影响。采用Westernblotting观察Gl PS对胰岛细胞葡萄糖转运蛋白 2 (GLUT2 )表达的影响。结果 :在 5 .6mmol·L- 1葡萄糖时 ,1 0 0mg·L- 1 的Gl PS可明显促进胰岛细胞胰岛素的分泌 ;当葡萄糖浓度为 1 6.7mmol·L- 1 时 ,5 0和 1 0 0mg·L- 1 的Gl PS均可明显促进胰岛细胞胰岛素的分泌。维拉帕米或维拉帕米 +EGTA均可显著抑制 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 葡萄糖时胰岛素的分泌 ,维拉帕米只能部分抑制Gl PS的促胰岛素分泌作用 ,而维拉帕米 +EGTA则可完全抑制Gl PS的这种作用。在葡萄糖浓度为 5 .6和 1 6.7mmol·L- 1 时 ,Gl PS 5 0和 1 0 0mg·L- 1 均能明显促进胰岛细胞GLUT2的蛋白表达。结论 :Gl PS可能通过促进胰岛细胞GLUT2蛋白的表达从而有助于葡萄糖转运入B细胞 ,促进葡萄糖的代谢 ,引起胰岛细胞外Ca2 + 内流而起到促胰岛素释放的作用     

胰岛素强化联合钠-葡萄糖转运蛋白-2抑制剂对脆性糖尿病患者血糖波动的影响

目的 探讨胰岛素强化联合钠-葡萄糖转运蛋白-2抑制剂对脆性糖尿病患者血糖波动的影响。方法 回顾性选取2018年1月至2020年10月大连市第五人民医院收治的82例脆性糖尿病患者作为研究对象,按随机数字表法分为对照组与观察组,各41例。对照组给予胰岛素强化治疗,观察组在胰岛素强化基础上联合使用钠-葡萄糖转运蛋白-2抑制剂。比较两组患者治疗前后血糖及其波动情况、胰岛素用量、糖化血红蛋白（HbA1c）及低血糖事件。结果 观察组治疗后血糖水平标准差、日间最大血糖波动幅度、餐后血糖波动幅度、胰岛素使用量、HbA1c均低于对照组,同时低血糖事件及严重低血糖发生率也低于对照组,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 脆性糖尿病患者于胰岛素强化基础上联用钠-葡萄糖转运蛋白-2抑制剂方案治疗,可改善血糖、减少血糖波动幅度,同时减少胰岛素的使用量并降低低血糖事件。     

丙泊酚对肝脏缺血-再灌注损伤大鼠胰岛素受体及其底物表达和磷酸化的影响

目的 研究丙泊酚对肝脏缺血-再灌注损伤(HIRI)大鼠胰岛素受体及其底物表达和磷酸化的影响.方法 健康SD大鼠80只,随机分为丙泊酚组(P组)和缺血-再灌注组(I-R组),每组40只.建立HIRI大鼠模型(肝门阻断30 min后再灌注2 h)后,P组从肝门阻断前20 min以10 mg·kg-1·h-1注入丙泊酚直到2 h再灌注结束,I-R组注入等量生理盐水.肝门阻断前(T1)及肝门阻断30 min再灌注2 h后(T2)测定血糖值,检测两组大鼠肝组织胰岛素受体β亚单位(IRβ)、胰岛素受体底物2(IRS-2)蛋白及其酪氨酸磷酸化蛋白的表达水平.结果 与T1比较,两组T2血糖均明显升高[I-R组,(10.92±0.94)mmol/L vs.(4.91±0.73)mmol/L;P组,(9.79±0.81)mmol/L vs.(4.57±0.54)mmol/L](P<0.01);T2时I-R组血糖明显高于P组[(10.92±0.94)mmol/L vs.(9.79±0.81)mmol/L](P<0.05).I-R组大鼠肝组织IRβ、IRS-2蛋白表达与P组无明显差异(P>0.05);但其酪氨酸磷酸化蛋白表达水平分别减少了22.8%和24.1%(P<0.01).结论 丙泊酚可通过改善IRβ、IRS-2蛋白的酪氨酸磷酸化表达水平减轻HIRI导致的血糖升高.     

基于网络药理学及实验验证补骨脂乙素治疗2型糖尿病的作用机制

目的 通过网络药理学与实验验证相结合的方法探究补骨脂乙素治疗2型糖尿病的作用机制。方法 使用ECTM、SwissTargetPrediction、PubChem数据库预测补骨脂乙素的作用靶点,使用GeneCards数据库预测2型糖尿病的潜在靶点。使用Venn数据库进行靶点交互分析,通过STRING数据库计算蛋白相互网络关系(PPI),通过Cytoscape 3.9.1插件MCODE和Cytohubba筛选核心靶点。通过DAVID数据库进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)途径的富集分析。建立胰岛素抵抗的HepG2细胞模型,通过2-NBDG检测细胞对葡萄糖摄取的能力,通过RT-PCR和Western blotting检测网络药理学预测的磷脂肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关mRNA及蛋白表达。结果 补骨脂乙素和2型糖尿病共同作用的基因92个,PPI网络(交互得分 ≥ 0.150)包含补骨脂乙素和2型糖尿病共同目标的86个节点和379个"边"。在MCODE和Cytohubba的筛选结果交叉后,获得了35个共同靶点。聚类分析表明,补骨脂乙素作用于2型糖尿病涉及PI3K/Akt信号通路等多种途径及细胞氧化还原反应等多种细胞进程。补骨脂乙素显著增强了胰岛素抵抗细胞对葡萄糖的摄取能力(P<0.05、0.01)。与模型组相比,补骨脂乙素处理后显著增加了胰岛素受体(INS-R)、胰岛素受体底物1(IRS1)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、PI3K、Akt mRNA的表达(P<0.01、0.001)。与模型组相比,二甲双胍组和补骨脂乙素组的INS-R、IRS1、GLUT2、Akt、PI3K、p-Akt、p-PI3K的蛋白表达显著上调(P<0.05、0.01、0.001)。结论 补骨脂乙素可能通过PI3K/Akt信号通路增加胰岛素抵抗细胞对葡萄糖的摄取能力,发挥其抗2型糖尿病作用。     

仙人掌果多糖降血糖作用及其机制

目的：研究仙人掌果多糖提取物（CFPE）的降血糖作用及其相关分子机制。方法：采用链脲佐菌素（STZ）复制糖尿病大鼠模型。连续给药8周,观察各组大鼠体重和糖化血红蛋白（GHb）的变化。运用RT-PCR技术,检测糖尿病大鼠肝组织和骨骼肌的胰岛素受体（IR）及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4（GluT4）mRNA的表达。结果：与模型组比较,CFPE可明显降低糖尿病大鼠GHb含量,可使糖尿病大鼠体重明显回升;增加肝脏和骨骼肌IR及骨骼肌GluT4 mRNA的表达。结论：CFPE对糖尿病大鼠有明显的降血糖作用,其机制可能与其增加肝脏和骨骼肌IR以及骨骼肌GluT4 mRNA的表达有关。     

ER、PR 和GLUT-1在子宫内膜息肉中的表达及意义

目的 研究子宫内膜息肉组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter protein,Glut-1)的表达及意义.方法 采用聚合酶链反应检测正常增生期子宫内膜和子宫内膜息肉中ER、PR和GLUT-1的转录水平.结果 子宫内膜息肉中ER和GLUT-1表达升高(P<0.05),PR表达降低(P<0.05).结论 子宫内膜息肉患者的息肉组织中ER和GLUT-1mRNA表达水平增高,而PR表达水平降低,提示它们可能参与了本病的病理生理过程.     

妊娠期糖尿病与胰岛素受体底物-1

胰岛素抵抗和胰岛素分泌相对不足是妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）的两大特征，研究表明孕期胰岛素靶组织（如骨骼肌）存在胰岛素抵抗，GDM状态时胰岛素抵抗增加，这与胰岛素受体底物-1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）异常改变有关，本文就近年来有关进展作一综述。     

胰岛素样生长因子-1受体和胰岛素受体双重抑制剂类抗癌药Linsitinib

胰岛素样生长因子-1(IGF-Ⅰ)受体是一种跨膜受体酪氨酸激酶,与许多人类肿瘤的发生发展密切相关,由胞外α亚单位和含跨膜及胞内区部分的β亚单位构成,其中α亚单位负责与IGF-Ⅰ和-Ⅱ等可溶性IGF-Ⅰ受体配体结合,而β亚单位则发挥胞内受体酪氨酸激酶作用.与配体结合后,IGF-Ⅰ受体的同源二聚体和IGF-Ⅰ受体-受体酪氨酸激酶的异源二聚体便自身磷酸化,并激活下游PI3K/Akt/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和Ras/有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路,最终抑制细胞凋亡,促进细胞生长和迁移,导致肿瘤的生长和转移.