硫酸锌对高脂喂养载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉PPARα和VCAM-1表达的影响

<正>动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生具有多种原因,但血脂异常、炎症和氧化应激在动脉粥样硬化的发展中具有重要作用。锌是人体必需的微量元素之一,近年来研究发现它不但具有抗炎和抗氧化功能,而且还具有抗AS作用[1,2]。研究还发现锌能降低老年受试者的C反应蛋白、脂过氧化作用和炎性细胞因子,是潜在的抗动脉粥样硬化剂[3]。但补锌能     

硫酸锌对高脂喂养ApoE基因敲除小鼠肝脏抗氧化作用的研究

<正>肝脏是人体参与糖脂代谢的重要器官,而氧化损伤是造成肝脏损伤的原因之一。目前我国居民的高脂肪摄入逐渐增多,而高脂肪饮食会造成机体的氧化损伤[1],所以研究补锌对高脂喂养小鼠肝脏的抗氧化作用具有重要意义。1仪器和材料1.1主要试剂和仪器1.1.1试剂:七水合硫酸锌(天津博迪化工股份有限公司,分析纯);Trizol(Invitrogen公司);RT试剂盒(反转录试剂盒)和SYBR试剂盒(荧光定量试剂盒)(Takara公司);丙氨酸氨基     

血清基质金属蛋白酶-9脂联素与冠状动脉病变的相关性研究

目的通过测定血清基质金属蛋白酶(MMP)-9、脂联素(APN)水平,分析其与冠状动脉病变程度之间的关系,探讨MMP-9、APN在冠状动脉粥样硬化发生发展中的可能机制及临床意义。方法将确诊冠心病并接受冠状动脉造影的126例患者分为急性冠状动脉综合征(ACS)组62例、稳定型心绞痛(SA)组64例,并选取健康对照64名,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定3组MMP-9、APN水平,比较两者之间的相关性及其与冠状动脉病变程度的相关性。结果 ACS组、SA组的MMP-9水平均高于健康对照组(P<0.05),ACS组的MMP-9水平又高于SA组[分别为(116.5±0.24)ng/mL,(62.23±0.93)ng/mL,P<0.05];ACS组、SA组的APN水平均低于健康对照组(P<0.05),ACS组的APN水平又低于SA组[分别为(6.65±2.24)mg/L,(8.32±2.93)mg/L,P<0.05];冠状动脉病变支数多者MMP-9水平高于冠状动脉病变支数少者,而APN则显著降低;MMP-9与APN呈负相关(r=-0.552,P<0.05);MMP-9水平与Gensini积分呈正相关(r=0.406,P<0.05),APN含量与Gensini积分呈负相关(r=-0.364,P<0.05)。结论冠心病患者MMP-9、APN之间关系密切,并且MMP-9、APN与冠状动脉病变程度密切相关。     

基质金属蛋白酶-9与糖尿病肾病的相关性

目的观察大鼠糖尿病肾病(DN)发展过程中肾脏局部基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的改变,分析其与DN的相关性。方法对16只链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型分别于造模后第4、8周通过免疫组织化学染色法观察肾脏局部MMP-9的表达,以MMP-9平均积分吸光度(IDP)为观察指标。结果正常对照组第4、8周大鼠肾脏MMP-9表达(IDP分别为15.6±73.4,16.2±3.1)呈强阳性;实验组第4、8周大鼠肾脏MMP-9的表达(IDP分别为8.2±0.9,3.9±0.6)呈递减(P<0.01)。结论MMP-9表达减少是DN早期病理改变的重要原因之一。     

基质金属蛋白酶-9基因在胃癌及癌旁组织中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）基因在胃癌中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测97例胃癌组织及89例癌旁组织中MMP-9的表达。结果10例（11．2%）癌旁组织、80例（82．5%）胃癌组织表达MMP-9,差异有统计学意义（P=0．000）。MMP-9蛋白的过量表达与患者性别、肿瘤分级、分化和淋巴结转移无相关性,与肿瘤浸润深度、肿瘤分期存在相关性（P＜0．05）。结论MMP-9蛋白在胃癌中过量表达与胃癌的发生发展密切相关,可以作为胃癌的预后判断标准之一。     

阿托伐他汀对高脂饮食糖尿病大鼠主动脉几丁质酶-3样蛋白-1表达的影响

目的：观察阿托伐他汀对高脂饮食饲养糖尿病Sprague－Dawley（SD）大鼠主动脉炎症因子几丁质酶－3样蛋白－1（YKL一40）表达水平的影响。方法：SD大鼠被随机分为五组：正常饮食组,高脂饮食组,高脂饮食阿托伐他汀干预组,高脂饮食合并糖尿病组,高脂饮食合并糖尿病阿托伐他汀干预组,每组9只。高脂模型是单次腹腔内注射维生素D3和辅以高脂饮食;腹腔内注射链脲佐霉素（STZ）造模成糖尿病。阿托伐他汀治疗（20mg／kg）8周后,测定各组空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbAlC）、甘油三酯（TG）和总胆固醇（TC）水平,半定量PCR和Real－timePCR测定大鼠主动脉YKL－40的mRNA表达水平,免疫组化评价主动脉内膜YKL－40的表达。结果：高脂饮食合并糖尿病组SD大鼠FBG、HbAlC和TG水平明显高于正常饮食组（P均〈0．01）和高脂饮食组（P均〈0．05）。YKL－40的mRNA表达水平在高脂饮食组明显高于正常饮食组（P〈0．01）,尤其在高脂饮食合并糖尿病大鼠中表达最高;免疫组化的结果也显示高脂饮食合并糖尿病大鼠的主动脉内膜YKL－40蛋白表达最高。经阿托伐他汀治疗后,YKL－40蛋白和mRNA表达水平均下调（P均〈0．01）。结论：阿托伐他汀明显降低高脂饮食糖尿病SD大鼠主动脉炎症因子YKL－40表达,有助于减轻YKL－40在早期粥样硬化中的致病作用。     

辛伐他汀对慢性阻塞性肺疾病大鼠白细胞介素-6基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨辛伐他汀早期干预对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠白细胞介素(IL)-6和基质金属蛋白酶(MMP)-9表达的影响。方法 Wistar大鼠随机分为正常对照组(A组)、COPD模型组(B组)、辛伐他汀干预组(C组)。采用放射免疫法测血清IL-6水平,免疫组织化学法测肺组织MMP-9表达。结果 B组大鼠IL-6和MMP-9的表达明显高于A组(P<0.05);C组IL-6和MMP-9的表达明显低于B组(P<0.05)。结论辛伐他汀对COPD慢性炎症有抑制作用,可降低IL-6和MMP-9的表达。     

细胞周期蛋白E基质金属蛋白酶-9生存素与PTEN在大肠癌中的表达及临床意义

目的探讨细胞周期蛋白E(Cyclin E)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、生存素(Survivin)及染色体同源丢失性磷酸酶和张力蛋白基因(PTEN)的表达与大肠癌临床病理特征的相关性,以期在分子水平上更准确地判断大肠癌患者的预后,寻找相应的基因治疗方法。方法采用免疫组织化学Envision两步法检测66例大肠癌组织标本中Cyclin E、MMP-9、Survivin及PTEN的表达情况,12份大肠健康黏膜组织作为健康对照。结果66例大肠癌中CyclinE、MMP-9、Survivin蛋白的表达阳性率分别为62%、76%、71%,明显高于正常大肠黏膜上皮的表达(8%、25%、0),两者比较差异有统计学意义(P<0.01);PTEN在大肠癌中的阳性表达率为53%,明显低于大肠健康黏膜中的表达(92%),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin E的异常表达与大肠癌Dukes分期及淋巴结转移相关(P<0.05);MMP-9的表达与浸润深度、组织分化程度、Dukes分期及淋巴结转移均相关(P<0.05);Survivin的表达与Dukes分期及淋巴结转移相关(P<0.05);PTEN表达与大肠癌浸润深度、Dukes分期及淋巴结转移相关(P<0.05)。结论Cyclin E、MMP-9、Survivin及PTEN基因蛋白的表达与一些临床病理特征具有相关性,Cyclin E、MMP-9和Survivin基因的表达上调与PTEN基因表达下调可能在大肠癌的发生、发展进程中发挥协同作用,检测这4种基因蛋白对于评估大肠癌的生物学行为具有重要价值,有助于估计患者的预后,为临床治疗提供依据。     

实验性关节炎大鼠滑膜组织核因子-κB基质金属蛋白酶-9表达相关性分析

目的观察核因子κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶(MMP)-9在实验性关节炎(CIA)和对照组大鼠滑膜组织中不同时间点的表达差异及其血浆中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β的含量变化,探讨这些细胞因子在CIA发病中的作用机制,为类风湿关节炎(RA)今后的治疗提供理论依椐。方法将42只雄性Wistar大鼠随机分为模型组和对照组,通过免疫组织化学的方法检测各组大鼠不同时期滑膜组织NF-κB、MMP-9的表达水平,用放射免疫法(RIA)测定TNF-α、IL-1β的血浆含量,同时观察其发病时间与关节炎指数(AI)积分、病理评分及上述细胞因子之间的关系。结果随着CIA大鼠发病时间延长,AI和病理评分逐渐增加,NF-κB、MMP-9表达水平和TNF-α、IL-1β血浆含量也随之增加。CIA大鼠这些细胞因子的测定值都显著高于对照组(P<0.01),AI、病理评分与NF-κB、MMP-9呈正相关关系(P<0.05);CIA大鼠滑膜组织NF-κB、MMP-9表达水平之间呈正相关(P<0.05),而且它们的表达水平与IL-1β、TNF-α血浆含量之间亦呈正相关(P<0.05)。结论通过与TNF-α和IL-1β相互作用,滑膜组织中NF-κB、MMP-9的表达之间可能互相影响、互相促进,形成正反馈式的损坏机制,在CIA大鼠病情进展中起着重要作用,可能是RA发生发展以及骨质侵蚀的关键因子。     

细胞因子对人脐静脉内皮细胞表达CD40和CD40L的影响

ＣＤ40 ＣＤ40Ｌ是一对互补的跨膜糖蛋白 ,在机体免疫应答中起重要作用 ,近年来的研究表明这一对配体 -受体参与了ＡＳ的发生和发展[1] 。ＡＳ的形成与发展过程中可有多种细胞因子参与和合成多种细胞因子。本文研究细胞因子γ干扰素 (ＩＦＮ γ)、肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ)、白介素 6(ＩＬ 6)和白介素 1(ＩＬ 1)对人脐静脉内皮细胞表达ＣＤ40及ＣＤ40Ｌ的影响 ,以期揭示ＣＤ40 ＣＤ40Ｌ在ＡＳ发生中的作用地位。1　材料和方法1.1　材料　ＩＦＮ γ、ＴＮＦ、ＩＬ 6、ＩＬ 1、ＣＤ40和ＣＤ40Ｌ单抗购自Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ公司 ,鼠ＩｇＧＰＥ…     

通心络对动脉粥样硬化模型兔内皮功能、CD40及CD40L表达的影响

目的 观察通心络对动脉粥样硬化家免模型的预防治疗作用,并探讨其对内皮功能、CD40及CD40L mRNA表达的影响.方法 选取60只雄性健康家兔,随机分为对照组、模型组、通心络组三组,每组20只,后两组家兔分别通过高脂饮食制备动脉粥样硬化模型.给药处理前及12周后分别测定以下指标：血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和高密度酯蛋白胆固醇（HDL-C）的浓度;主动脉内膜/中膜厚度比值及粥样斑块面积;测定血清内皮素（ET）水平和血清一氧化氮（NO）水平;运用定量逆转尿PCR技术（RT-PCR）测定外周血单核细胞中CD40及CD40L mRNA的表达水平.结果 模型组和通心络组家免的TC水平均显著高于对照组（P〈0.01）,通心络组又低于模型组（P〈0.05）;通心络组血清ET水平和ET/NO显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,血清NO水平显著升高（P〈0.01）;通心络组中,家兔的主动脉内膜/中膜厚度比值及斑块面积占血管总面积百分率均明显低于模型组[（0.56±0.07）与（1.16±0.08）,P〈0.01;（36.88±2.38）%与（76.58±2.86）%,P〈0.01];与模型组（0.798±0.115）、（0.592±0.132）比较,通心络组家兔外周血单-核细胞中的CD40及CD40L mRNA表达量明显降低[（0.686±0.132）、（0.498±0.108）]（P〈0.01）.结论 通心络可抑制动脉粥样硬化斑块的形成,其机制可能下调CD40及CD40L表达及有效地改善内皮功能有关.     

普伐他汀和阿司匹林对CD40-CD40L表达及斑块稳定性的影响

目的：研究普伐他汀和阿司匹林对兔腹主动脉粥样硬化斑块CD40-CD40L表达及斑块稳定性的影响。方法：新西兰大白兔32只予高脂饲养16wk及腹主动脉球囊损伤术建立腹主动脉粥样硬化模型,分4组：P组（普伐他汀）、A组（阿司匹林）、A＋P组（联合用药）与N组（不用药）,分别予相应药物灌胃8wk。通过免疫组化检测比较各组兔腹主动脉粥样硬化斑块内CD40-CD40L表达、MMP-1、胶原及脂质含量变化,超声检测腹主动脉内膜-中膜厚度（IMT）改变,ELISA法测定血清C反应蛋白（CRP）变化,分析2药干预动脉粥样硬化斑块稳定性的机制。结果：用药各组兔腹主动脉斑块内CD40-CD40L表达较N组显著受抑,普伐他汀作用更显著（P组和A＋P组均P＜0．01）；同时各用药组MMP-1的表达、IMT增厚及CRP增高较N组均得到明显抑制（P＜0．01）,P组和A＋P组较N组斑块内脂质显著减少（P＜0．01）,胶原含量明显增加（P＜0．01）。结论：普伐他汀和阿司匹林都可抑制斑块CD40-CD40L系统的表达,促进斑块的稳定性。普伐他汀促进斑块稳定的机制可能是多方面的。     

非霍奇金淋巴瘤中CD40、CD40L的表达及意义

目的探讨非霍奇金淋巴瘤（NHL）中CD40、CD40L表达与NHL预后间的关系及意义。方法免疫组织化学法检测50例非霍奇金淋巴瘤、22例淋巴结反应性增生组织中CD40、CD40L的表达。结果 （1）NHL中CD40过度阳性率（66.0%）显著高于淋巴结反应性增生（36.4%）,P〈0.05;NHL中CD40L过度阳性率（20.0%）显著低于淋巴结反应性增生（63.6%）,P〈0.05。（2）NHL中CD40与CD40L表达呈负相关,r=-0.486,P〈0.05。（3）NHL患者CD40、CD40L的过度阳性率与恶性程度、结外浸润及临床分期均显著相关,P〈0.05。结论 （1）CD40、CD40L过度阳性率与恶性程度、结外浸润及临床分期密切相关,其可能与NHL侵袭性及预后有关。（2）NHL中CD40表达的增高、CD40L表达的减少可能是影响其发病的因素之一。     

阿托伐他汀对大鼠缺血再灌注脑组织中CD40L和MMP-3的抑制作用

目的:探讨阿托伐他汀对脑缺血再灌注损伤的脑保护作用机制.方法:采用Zealonga线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型血管内皮细胞间黏附分子.将Wistar大鼠随机分组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(IR组)、阿托伐他汀治疗组(AT组).采用免疫组织化学法检测大鼠脑组织CD40L、金属基质蛋白酶-3(MMP-3)的表达.结果:AT组脑组织CD40L、MMP-3表达及脑含水量和神经功能评分较IR组低(P＜0.01),而较Sham组明显增高(P＜0.01).结论:阿托伐他汀可以通过抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织CD40L、MMP-3表达,发挥脑保护作用.     

体外循环对血小板CD40L表达的影响

目的研究体外循环（CPB）过程中血小板膜表达CD40L的变化,及其与血小板激活、全身炎症反应及凝血变化的联系。方法CPB心内直视手术患者40例,分别于麻醉诱导后10min（T1）、CPB后30min（T2）、CPB停机即刻（T3）、CPB后2h（T4）、4h（T5）、8h（T6）,抽取外周动脉血,测定血浆TNF-α浓度、血小板表面CD40L和CD62P表达,计算术后24h纵隔引流量。结果T2时CD40L较CPB前明显升高（P〈0.01）,T3时达到峰值,T6时恢复到T1水平。血小板CD62P表达、血浆肿瘤坏死因子-α的峰值、术后24h引流量均和CD40L表达呈正相关（r=0.610,P〈0.01）。结论CD40L是随着CPB对血小板的激活而表达的,CD40L可能是联系炎性反应和凝血异常这两个导致CPB术后主要并发症的一个重要环节。     

噻托溴铵干预对慢性阻塞性肺疾病大鼠气道重塑和MMP-9表达的影响

目的观察噻托溴铵早期干预对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠模型气道重塑及基质金属蛋白酶(MMP)-9的表达变化。方法Wistar大鼠随机分为3组:健康对照组(A组),COPD模型组(B组),噻托溴铵干预组(C组),采用熏烟并气管内注入脂多糖的方法建立COPD模型,C组于早期给予噻托溴铵雾化干预。观察肺组织病理形态学变化,图像分析测量小气道管壁和平滑肌厚度,采用免疫组织化学法测MMP-9蛋白。结果与B组相比,C组大鼠肺组织气道重塑病理变化减轻,MMP-9降低。结论噻托溴铵对COPD气道重塑有抑制作用,可降低MMP-9表达。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤中CD40L的表达及意义

目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）组织中CD40L表达与DLBCL预后间的关系及意义。方法免疫组织化学法检测27例弥漫性大B细胞淋巴瘤、20例淋巴结反应性增生组织中CD40L的表达。结果（1）DLBCL中CD40L过度阳性率（25．93％）显著低于淋巴结反应性增生（63．64％），P〈0．05。（2）CD40L在Ⅲ、Ⅳ期DLBCL过度阳性率（14．29％）低于Ⅰ、Ⅱ期（38．46％），P〈0．05。CD40L过度阳性率在有结外浸润DLBCL（11．76％）低于无有结外浸润DLBCL（40％），P〈0．05。（3）DLBCL患者CD40L的过度阳性率与远处转移、临床分期均显著相关，P〈0．05。结论（1）CD40L过度阳性率与结外器官浸润及临床分期密切相关，其可能作为判断DLBCL侵袭性及预后的指标。（2）DLBCL中CD40L表达的减少可能是影响其发病的因素之一。     

硫酸锌对小鼠半数致死量测定的可行性分析

目的探讨硫酸锌对小鼠半数致死量(LD50)测定的可行性。方法将60只小鼠随机分成6组,每组10只,分别按0.2437g/kg、0.3482g/kg、0.4973g/kg、0.7106g/kg、1.0150g/kg、1.4500g/kg质量浓度受试值以体质量(0.2m l/kg)给小鼠灌服不同浓度的硫酸锌溶液。观察小鼠的中毒症状及死亡情况。采用B liss法计算硫酸锌的LD50值及其95%的可信范围。结果给药后不同时间内小鼠出现活动受抑制,自由活动减少;濒死时出现呼吸困难、紫绀等症状;剖开腹腔可见胃肠道呈松弛膨胀,肝、肺充血等状态。硫酸锌的LD50为583.2mg/kg,LD50的95%平均可信限为(583.2±0.1528)mg/kg。结论明确了硫酸锌对小鼠LD50适宜剂量范围,为后续的实验研究工作提供了参考依据。