牛磺酸对胰腺癌细胞系BxPC-3和PANC-1细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的 探讨牛磺酸（Tau）对胰腺癌导管细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法 体外培养胰腺癌BxPC-3和PANC-1细胞，采用不同浓度Tau(0、10、20、40、80、160 mmol/L)进行预处理。采用CCK-8、细胞划痕实验、TUNEL法观察Tau对BxPC-3和PANC-1细胞增殖、迁移和凋亡的影响；实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和蛋白质免疫印迹法检测Tau影响BxPC-3和PANC-1细胞中相关细胞凋亡及细胞周期分子mRNA和蛋白表达的情况。结果 Tau可抑制BxPC-3和PANC-1的细胞增殖和迁移活性；同时，Tau能够促进BxPC-3和PANC-1细胞凋亡。与对照组相比，Tau处理后的BxPC-3细胞中相关凋亡因子P53、P21、Bcl-2关联X蛋白（BAX）表达水平呈上升趋势，而增殖细胞核抗原（PCNA）的表达降低；Tau处理后的PANC-1细胞中B淋巴细胞瘤-2蛋白（Bcl-2）、PCNA、细胞周期蛋白CyclinA2、CyclinB1、CyclinE、周期蛋白依赖性激酶CDK1、CDK2、CDK4、CDK6等的表达较对照组均下降，而相关凋亡蛋白P53、P21的表...     

三叶青乙酸乙酯提取物对人胰腺癌PANC-1细胞凋亡的影响及机制研究

目的探讨三叶青乙酸乙酯提取物(ethylacetate fraction,EAF)对人胰腺癌PANC-1细胞的凋亡作用及其机制。方法 MTT法检测三叶青EAF对人胰腺癌PANC-1细胞的生长抑制作用;光镜及Hoechst 33258荧光染色分别观察药物作用后细胞形态和细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白印记法(Western blot)检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2和P53的表达情况。结果与对照组比较,三叶青EAF能显著地抑制人胰腺癌细胞PANC-1的生长,并呈明显的量-效关系。药物作用后,细胞形态改变,有明显的凋亡特征。流式细胞术检测细胞凋亡率有浓度依赖性。Western blot检测表明三叶青EAF可以促进Bax、P53蛋白表达升高,Bcl-2表达下降。结论三叶青EAF对人胰腺癌PANC-1细胞具有抑制增殖和促进凋亡作用,其机制可能与上调p53和Bax的表达,下调Bcl-2的表达有关。     

人参皂苷Rg1对细胞光老化模型中p53信号转导途径的影响

目的观察人参皂苷Rg1对光老化p53信号转导途径中相关基因损伤及蛋白表达水平的影响。方法采用8-MOP/UVA(8-methoxypsoralen and subsequent ultraviolet A irradiation)联合处理人皮肤成纤维细胞建立光老化模型,用流式细胞周期分析、SA-β-半乳糖苷酶(senescence associatedβ-galactosidase)化学染色,免疫荧光及Western blot等方法检测人参皂苷Rg1对培养真皮成纤维细胞多项细胞衰老指标及p53信号途径中蛋白表达的影响。结果人参皂苷Rg1可明显抑制细胞和组织老化的指标表达(包括SA-β-Gal表达减少及细胞周期G1阻滞率降低);减少基因氧化应激损伤产物8-oxo-dG及老化相关蛋白p53,p21WAF-1及p16INK-4a的表达。结论人参皂苷Rg1可能通过缓解基因的氧化应激损伤,抑制相关信号转导,从而缓解细胞光老化进程。     

胰腺癌组织中p53和bc1-2蛋白的表达和意义

目的通过检测凋亡抑制基因bcl-2蛋白和突变型p 53蛋白在不同胰腺疾病组织中的表达,探讨其生物学意义.方法应用标记的链霉卵白素-生物素(LSAB)免疫组化方法对33例胰腺导管腺癌(PC)、10例慢性胰腺炎(CP)、9例正常胰腺组织进行P53及bcl-2癌基因蛋白检测.结果 bcl-2和p 53蛋白阳性表达仅见于PC,阳性率分别为36%和55%;p 53蛋白表达与胰腺癌临床病理特征无关,而bcl-2蛋白表达在组织学1、2级和临床1、2期显著高于组织学3级和临床3、4期.结论p 53和bcl-2蛋白在部分胰腺癌的发生中可能起重要作用;bcl-2蛋白表达可能为胰腺导管腺癌的早期表现.     

食管鳞状细胞癌中p53基因突变和蛋白表达研究

目的检测食管鳞状细胞癌(ESCC)中p53基因突变和蛋白表达及其与临床病理和预后的相关性。方法采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和免疫组织化学(SP)两种方法检测56例ESCC中p53基因突变和蛋白的表达。结果56例ESCC组织中p53蛋白阳性表达率为61%(34/56),它与患者的年龄、性别和家族史无关(P>0.05),有和无淋巴结转移的阳性率分别为81%(17/21),49%(17/35);生存率<3年组和>3年组的p53阳性表达率为74%(17/23),46%(13/28),差异有统计学意义。PCR-SSCP检测p53基因突变率为77%(43/56),突变位于第4外显子者5例,第5外显子者23例,第6外显子者1例,第7外显子者4例,第8外显子者7例,有3例在内显子。p53基因突变/过度表达率为46%(26/56),两种方法检测的符合率为55%(31/56)。结论p53基因突变/过度表达在食管鳞癌发生、发展中可能发挥重要作用,可作为判断食管鳞癌患者预后的参考指标之一。     

进展期胃癌组织中p53、p16蛋白的表达及意义

目的探讨p53、p16蛋白在进展期胃癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学法检测24例正常胃黏膜、55例进展期胃癌手术切除标本p16、p53蛋自的表达。结果p53蛋自在正常胃黏膜组织、胃癌组织中阳性率分别为0、100％。p16蛋自在正常胃黏膜组织、胃癌组织中阳性率为67．3％、30．9％。p53、p16蛋白在低、未分化胃癌和中、高分化胃癌中阳性率分别为80．0％、56．7％和48．0％、56．0％。结论p53、p16蛋白表达的异常有助于胃癌的早期诊断及预后的判断。p53蛋白随胃癌分化程度降低表达率升高。p16蛋白与分化程度无关。     

MG132诱导HepG_2细胞凋亡及其对p53表达的影响

目的观察蛋白酶体抑制剂MG132对人肝癌细胞系HepG2的致凋亡作用及其对凋亡相关基因p53蛋白表达的影响。方法采用多个浓度(2,5,10μmol/L)的蛋白酶体抑制剂MG132处理HepG2细胞;流式细胞术和Hoechst荧光染色检测细胞凋亡;免疫细胞化学检测HepG2细胞p53蛋白含量。结果对照组HepG2细胞凋亡率低于5%,在2,5,10μmol/LMG132作用下,细胞凋亡率分别为42.9%,66.1%和72.8%,MG132诱导HepG2细胞凋亡具有剂量—效应关系。经Hoechst荧光染色可见细胞染色质浓缩等凋亡改变。免疫组织化学检测HepG2细胞p53蛋白表达水平增高。结论蛋白酶体抑制剂MG132能够诱导HepG2细胞凋亡,其作用呈剂量—效应关系;p53蛋白表达增加与MG132抑制泛素—蛋白酶体系统降解细胞内p53蛋白有关。     

survivin 与p53蛋白在结肠癌中的表达及相关性

目的 研究survivin与突变型p53基因在大肠癌组织中的表达和相关性并探讨其意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测58例大肠癌组织、25例癌旁组织和39例正常黏膜组织中survivin和p53的表达.结果 大肠癌组织中survivin与p53表达阳性率分别为72.4%(42/58)和63.8%(37/58).大肠癌组织中survivin与p53的阳性表达率高于癌旁组织及正常黏膜组织(P＜0.05).survivin与p53基因的表达与肿瘤的淋巴转移相关(P＜0.05).在大肠癌组织中survivin与p53基因的表达显著相关(r=0.291,P=0.020).结论 survivin的过度表达和p53的突变可能在大肠癌的发生和发展中起重要作用.     

p16和p53基因在乳腺癌和卵巢癌中表达水平的比较研究

目的研究乳腺癌和卵巢癌中p53和p16蛋白的表达,探讨它们之间的关系及其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法,检测38例乳腺癌和39例卵巢癌中p16、p53蛋白的表达。结果乳腺癌中p53和p16基因蛋白异常表达率分别为60．5%、63．2%,卵巢癌中两蛋白异常表达率分别为66．7%、64．1%;差异均无统计学意义（P＞0．05）。p53蛋白阳性率与组织学分级有相关性,随着组织学分级的增加而逐渐增高;p16的变化规律与p53蛋白阳性率的变化恰好相反。p53蛋白与p16蛋白表达率呈显著负相关（r= 79．68．P＜0．05）。结论p16蛋白的缺失表达及p53蛋白的高表达与乳腺癌的发生发展有关,可作为判断乳腺癌生物学行为和预后的重要指标。     

人参炔醇对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的抑制作用

目的探讨人参炔醇(PNN)对人胰腺癌细胞PANC-1增殖的抑制作用。方法将人胰腺癌细胞PANC-1分为3个PNN浓度(1、9、27μmol/L)组和对照(C)组,MTT检测各组细胞增殖情况,流式细胞术检测各组细胞周期变化,Western blot检测各组细胞Ki67蛋白表达。结果 PNN组细胞抑制率和G1期细胞比例均呈浓度依赖性增加,而Ki67蛋白表达量呈浓度依赖性递减(P<0.01)。结论 PNN可能通过抑制细胞分裂和Ki67表达对人胰腺癌细胞PANC-1增殖发挥抑制作用。