乙肝病毒感染者血清抗核抗体检测分析

目的 分析乙型肝炎病毒(HBV)感染者血清中抗核抗体(ANA)检测结果及临床意义.方法 采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA、AMA、SMA、LSP等自身抗体,免疫印迹法检测ANA谱.结果 189例中ANA阳性82例(43%),慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝后肝硬化(LC)、原发性肝癌(HCC)组检出率分别为42.2%、38.3%、66.6%,3组均明显高于正常对照组(16.7%),HCC组阳性率显著高于CHB组和LC组(P<0.01).CHB、LC和HCC组ANA以低滴度(1:100)为主,分别为73.3%、69.4%、68.7%.结论 HBV感染者出现的自身抗体以ANA为主,HCC组阳性率最高.其滴度的高低与肝细胞损伤未见明显相关性.     

自身抗体在乙型病毒性肝炎和自身免疫性肝炎中的特点分析

目的 分析自身抗体在乙型病毒性肝炎及自身免疫性肝炎中的特点.方法 将血清样本分为3组:乙型病毒性肝炎组(HBV) 306例、自身免疫性肝炎组(AIH)235例和健康对照组150例,采用间接免疫荧光法和欧蒙印迹法检测血清中抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(ASMA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗肝肾微粒体Ⅰ型(LKM-1)抗体和抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗体等肝病相关自身抗体.结果 (1) HBV组和AIH组ANA检出率分别为9.1％、80.42％,明显高于健康对照组;AIH组ANA阳性率显著高于HBV组(P＜0.05).(2)HBV组ANA滴度1:100、1:320、1:1 000阳性率分别为6.2％、2.6％、0.3％,以低滴度(1:100)为主,AIH组1:100、1:320、1:1 000滴度阳性率分别为22.98％、41.28％、14.47％,以高滴度(≥1:320)为主.(3)HBV组AMA、ASMA、抗LKM-1及抗SLA/LP抗体的阳性率分别是0.3％、0.9％、0.3％和0％,AIH组的阳性率分别为36.6％、25.1％、23％和2.55％,明显高于HBV组.(4)AIH组荧光模型以核均质型和核仁型为主;HBV患者以颗粒型为主.(5)采用1999年诊断积分系统评估,28例自身抗体阳性乙肝患者中有1例评分超过16分,达到自身免疫性肝炎确诊标准(≥16分).结论 自身免疫性肝炎患者具有高滴度的自身抗体;乙型病毒性肝炎患者血清中低滴度的自身抗体不构成自身免疫性肝炎,高滴度的自身抗体要结合临床资料排除自身免疫性肝炎.     

孕妇乙型肝炎病毒感染与血清自身抗体的相关性研究

目的探讨孕妇乙型肝炎病毒(HBV)感染与自身抗体的相关性。方法采用ELISA、荧光定量PCR对108例乙肝孕妇的HBV标志物(HBVM)、HBVDNA进行检测,同时采用间接免疫荧光法(IIF)、免疫印迹法(WB)分别对HBV孕妇及40例健康孕妇行抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体(AMA)、抗平滑肌抗体(ASMA),可提取核抗原抗体谱(ENA)、肝抗原自身抗体谱(anti-LKM1、anti-LC1、anti-SLA/LP、anti-A-MAM2)检测,采用速率散射法检测RF,采用金标法检测抗-dsDNA。结果108例HBV孕妇检出多种自身抗体,总阳性率为31.48%,显著高于健康孕妇对照组的12.50%(P<0.05),检出的自身抗体以低滴度为主且以ANA,RF为多见。HBV阳性孕妇自身抗体阳性组与自身抗体阴性组的年龄、妊娠周期及ALT水平无明显差异(P>0.05),而HBeAg或/和HBVDNA阳性组自身抗体的检出率显著高于HBeAg或/和HBVDNA阴性组(P<0.01)。108例HBV孕妇检出1例ANA、ASMA同时阳性且滴度较高,2例anti-SLA/LP阳性,1例anti-LKM1阳性,其肝功能明显损害。结论孕妇HBV感染可引发机体自身免疫反应,产生多种以低滴度为主的自身抗体,这种免疫反应与HBV复制水平有关,而与孕妇年龄、孕周及ALT无关,且部分HBV孕妇可能重叠自身免疫性肝炎(AIH)。     

间接免疫荧光法与线性免疫印迹法对自身抗体检测结果分析

目的:探讨自身特异性抗体筛查试验间接免疫荧光法(IIF)与确认试验线性免疫印迹法(LIA)检测结果的相关性。方法:用IIF法作为抗核抗体(ANA)的筛查试验,用LIA法作为抗核抗体谱(ANAs)特异性抗体的确认试验,对自身免疫性疾病组(AID)及非AID疾病对照组进行检测分析,并将检测结果分为四组:IIF-ANA+/LIA+组,IIF-ANA+/LIA-组,IIF-ANA-/LIA+组和IIF-ANA-/LIA-组。结果:1在611例AID组中,IIF-ANA+/LIA+336例(55%),IIF-ANA+/LIA-116例(19%),IF-ANA-/LIA+55例(9%),IIF-ANA-/LIA-104例(17%)。2在100例非AID组中,IIF-ANA+/LIA+2例(2%),IIF-ANA+/LIA-7例(7%),IIF-ANA-/LIA+3例(3%),IIF-ANA-/LIA-88例(88%),总体符合率90%。AID组与非AID组自身抗体的检测结果比较差异有统计学意义。3 IIF-ANA-/LIA+组中,以抗SSA抗体、抗Ro-52抗体、抗ds-DNA抗体、抗组蛋白抗体、抗Jo-1抗体为主要检测出的阳性自身抗体。AID组IIF-ANA+/LIA-中,ANA检测核型以均质型、斑点型为主,混合核型以均质斑点型为主,荧光检测滴度以1∶40~1∶320为主;非AID组IIF-ANA+/LIA-中,核型以斑点型为主,荧光滴度以1∶40~1∶320为主。结论:AID患者可能会出现IIF-ANA检测阳性而LIA-ANAs检测阴性或者IIF-ANA检测阴性而LIAANAs检测阳性,检查除了进行IIF筛查ANA外,还需进行自身抗体谱的特异性抗体确认实验。     

慢性HBV感染患者血清自身抗体的检测与临床意义

目的:检测慢性HBV感染患者血清自身抗体,探讨其临床意义。方法:收集2009年4月-2011年3月贵阳医学院附属医院感染科住院部慢性HBV感染患者190例,其中45例慢性乙型肝炎(CHB),18例慢性重型肝炎(CLF),102例乙肝后肝硬化(LC),25例原发性肝癌(HCC),以30例健康体检者为正常对照组。采用间接免疫荧光法、免疫印迹法、速率散射比浊法分别检测血清ANA、ENA谱、RF。时间分辨荧光免疫分析法检测乙肝病毒标志物(HBV-M),荧光定量PCR法检测HBVDNA,并常规测定ALT、AST、TBIL、ALB。结果:慢性HBV感染者自身抗体的总检出率32.1%明显高于正常对照组的3.3%,比较差异有统计学意义(P=0.001);CHB、CLF、LC、HCC组的自身抗体检出率分别为24.4%、27.8%、33.3%、44.0%,与正常对照组比较差异均有统计学意义(PO.05),但四组间比较差异无统计学意义(PO.05);HBV DNA阳性与阴性组自身抗体检出率比较差异无统计学意义(P0.05);慢性HBV感染者自身抗体阳性与性别无明显关系,与年龄、肝功能损害程度有密切关系(t年龄=2.37,P=0.019;tALT=4.33,P=0.000;tAST=2.60,P=0.01;tTBIL=3.53,P=0.001;tALB=-2.47,P=0.014)。结论:慢性HBV感染可诱发自身免疫性反应,导致多种自身抗体的产生。这种自身免疫性反应与感染者的性别、病毒复制无关,与年龄、肝功能损害程度有关。     

慢性乙型肝炎患者血清自身抗体与HBV基因型关系的研究

目的总结慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者血清自身抗体特征和乙型肝炎病毒(HBV)基因型的分布情况,探讨HBV基因型与自身抗体的相互关系。方法对196例CHB患者进行HBV基因分型和血清自身抗体检测,对30例健康体检者进行自身抗体检测。分析HBV基因型、HBV-DNA载量、生化指标、年龄、性别与自身抗体的关系。结果 196例CHB患者中67例(34.2%)自身抗体阳性,阳性率明显高于正常对照组(P0.05);196例CHB患者中基因B型41例,C型134例,B+C型21例,其自身抗体阳性者分别为12例(29.3%)、46例(34.3%)、9例(42.9%),自身抗体阳性率在不同基因型之间差异无统计学意义;自身抗体阳性组和阴性组、高滴度组和低滴度组患者比较,其性别比例、年龄分布、HBV-DNA、生化指标的差异均无统计学意义。结论 HBV慢性感染可以诱导机体产生低滴度非器官特异性自身抗体,且不同HBV基因型诱发自身免疫反应的能力无明显差异。     

荧光PCR法检测HBV感染者HBV基因型及其临床应用

目的:了解南通地区乙型肝炎病毒(HBV)基因型分布情况及其临床特点.方法:选取本地区HBV感染者共125例,其中无症状携带者(ASC)31例,慢性乙型肝炎(CHB)46例,乙型肝炎肝硬化(LC)23例,原发性肝细胞癌(HCC)25例.应用实时PCR技术对患者进行血清HBV基因分型测定,FAM波长检测B型HBV,JOE或HEX波长检测C型HBV;部分结果进行基因测序验证;以3例非乙型肝炎患者为对照.结果:3例非乙型肝炎患者HBVM、HBV-DNA、HBV B、C基因均阴性.6例患者双份标本荧光PCR法、基因测序检测HBV基因型结果完全一致均为HBV C型.125例HBV感染者中HBV-DNA阳性的104例标本HBV基因型显示:B基因型25例(24.0%),C基因型74例(71.2%),B+C混合基因型5例(4.8%),未检出非B非C型;其中ASC组HBV-DNA定量阳性患者中以B型为主90%(9/10);而其余3组感染者中以C型基因居多:CHB患者中C型为80.43%(37/46),LC患者中C型为69.57%(16/23),HCC患者中C型为80%(20/25).结论:荧光PCR法可特异性检测HBV基因型;南通地区HBV基因型主要以C型为主,其次为B型和少量B+C混合基因型.HBV基因C型与B型各有显著的临床特点,可为临床诊断及指导临床抗病毒治疗药物选择提供依据.     

慢性乙型肝炎患者滤泡辅助性T细胞相关表达分子与自身抗体的表达分析

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血滤泡辅助性T细胞(Tfh)相关表达分子CXCR5、CXCL13、IL-21和TGF-β₂的表达水平,观察自身抗体出现的频率,分析其关联性。方法 选取2018年10月~2019年3月广州中医药大学第一附属医院收治的CHB 患者50例,再选取同期健康体检人员30例作为对照组,采用ELISA法检测两组受试者外周血中CXCR5、CXCL13、IL-21和TGF-β₂的表达水平,间接免疫荧光法检测ANA、LKM抗体、LC1抗体、ASMA和AMA等自身抗体的效价,ANA同时区分核型。结果 CHB患者组CXCR5、CXCL13、IL-21和TGF-β₂表达明显高于健康对照组(P<0.01),自身抗体阳性率也明显高于健康对照组(P<0.05),ANA阳性荧光核型表现为核颗粒型7例,胞质颗粒型1例,胞质纤维型1例和1例混合核型(核仁型和核颗粒型),ASMA阳性率为6%,未检出AMA抗体、LC1抗体和LKM抗体。CHB患者自身抗体阳性组的CXCL13、CXCR5、TGF-β₂和IL-21表达与阴性组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Tfh细胞相关表达分子CXCL13、CXCR5、TGF-β₂和IL-21在CHB患者中高表达,CHB患者体内存在明显自身免疫紊乱现象,但CHB患者体内自身抗体的出现与CXCL13、CXCR5、TGF-β₂和IL-21的关联性并不强,有待于更深入研究。     

鲁南地区HBV基因型和HBV核心启动子双点突变与肝硬化、肝癌的关系

目的 研究鲁南地区肝细胞癌(HCC)、肝硬化(LC)患者与乙型肝炎病毒(HBV)基因型及基本C区启动子(BCP)基因区A1762T/G1764A双位点变异之间的关系,探讨其相关性.方法 按慢性HBV感染者111例的不同临床分型,对其中HCC、LC和慢性乙型肝炎(CHB)患者各37例,采用实时荧光定量PCR法及PCR微板核酸杂交ELLSA技术进行HBV基因定量、分型检测;采用HBV基因多态性芯片检测BCP区A1762T/G1764A双位点变异;对不同性别、年龄、病毒基因型分布、临床分型患者进行HBV基因分型、BCP区双突变,以及不同HBV基因型BCP双突变的比较.结果 在CHB、LC、HCC患者中,HBeAg阴性者分别为24.3％、75.7％和83.8％;HCC患者HBeAg阴性率较CHB患者明显升高(P＜0.05).男、女性别HBV均以C基因型占优势,分别为57.3％和54.5％,性别间无统计学差异(P＞0.05);年龄＜30岁组HBV以B基因型(40.3％)、C基因型(51.7％)占优势,≥30岁组以C基因型(67.2％)占优势,＜30岁组B基因型构成比高于≥30岁组(29.6％,P＜0.05);HCC、LC患者中HBV以C基因型为主,分别占73.0％和75.6％.BCP双突变率在HCC、LC分别为64.9％和56.8％;HBV C基因型多发生BCP双突变,占63.6％ (42/66).结论 鲁南地区HBV基因型以C型和B型为主,其中LC、HCC患者基因型以C型占优势,HCC患者BCP双突变率显著高于CHB患者,在慢性HBV感染者中HBV C基因型多发生BCP双突变.     

肝病患者抗肝抗原自身抗体及抗核抗体的研究

目的：观察我国不同类型肝病患中几种抗肝抗原自身抗体的存在状况；结合抗核抗体（ANA）探讨非甲-非戊型肝炎中存在自身免疫性肝病的可能性。方法：200例肝功能异常患分为5组：（1）自身免疫性疾病组24例；自身免疫性肝炎5例，原发性胆汁性肝硬化6例，原发性硬化性胆管炎2例，干燥综合征4例，SLE1例和6例自身免疫性肝病未分型；（2）HAV组23例；（3）HBV组67例；（4）HCV组26例；（5）非甲-非戊型肝炎组60例，免疫荧光，Western blot，免疫印迹和EISA法分别检测ANA，AMA，SMA，LKM-1，LC-1，SLA/LP和AMA中M2，M4和M9亚型，以及SS-A，SS-B，dsDNA等ANA的多种抗原成分抗体。结果：200例血清LKM-1和LC-1全部阴性，2/200例SLA/LP阳性，NonA-E组4例AMA和M2阳性，3例SMA高滴度阳性，4例出现SS-A，SS-B或dsDNA等自身抗体，ANA在HBV组22例，HCV组10例滴度超过1：320，HAV组1例出现SS-A，SS-B或dsDNA等自身抗体，ANA在HBV组22例，HCV组10例滴度超过1：320。HAV组1例SMA达1：1000，结论：三种肝抗原抗体（LKM-1，LC-1和SLA/LP）是自身免疫性肝病特异性抗体；非甲-非戊型肝炎中存在自身免疫性疾病；病毒标志阳性患是否合并自身免疫性疾病值得进一步探讨。     

慢性乙型肝炎病毒感染者血清TNF-α和IFN-γ水平分析

目的：分析不同临床阶段的慢性HBV感染者血清TNF-α和IFN-γ水平差异,探讨其水平差异与慢性HBV感染结局的关系。方法：选择慢性乙型肝炎（CHB）87例,乙型肝炎肝硬化（LC）38例,HBV相关肝细胞癌（HCC）34例,应用ELISA法分别检测其血清IFN-γ和TNF-α水平。结果：在所观察的3组中,TNF-α水平均有明显升高,其中LC组和HCC组均显著高于CHB组（P〈0.001）,但LC组和HCC组间无显著性差异;而CHB、LC和HCC3组间血清IFN-γ水平无显著性差异（P=0.208）。结论：血清TNF-α水平可能与慢性HBV感染的结局相关,而IFN-γ水平与慢性HBV感染结局无明显相关性。     

T3098C and T53C Mutations of HBV Genotype C Is Associated with HBV Infection Progress1

Objective To analyze the association between mutation(s) in preS region of HBV and hepatitis B disease progress in Chinese patients with genotype C chronic HBV infection. Methods Ninety-three patients with chronic genotype C HBV infection, including 24 asymptomatic carriers (ASC), 26 patients with chronic hepatitis B (CHB), 22 patients with liver cirrhosis (LC) and 21 HCC patients were investigated. Levels of HBV DNA, HBeAg, alanine aminotransferase (ALT), asparate transaminase (AST) were measured. HBV preS region was analyzed by PCR direct sequencing. Results The prevalence of lareS T3098C and T53C mutations of genotype C HBV was significantly higher in LC and HCC patients than ASC and CHB patients. The rate of T3098C mutation in ASC, CHB, LC, and HCC patients were 0.00% (0/24), 3.85% (1/26), 9.09% (2/22),and 30.77% (8/22), respectively (P=-0.0015), while the rate of T53C mutation was 12.50% (3/24), 3.85% (1/26), 40.91% (9/22),and 42.31% (11/26), respectively (P=0.0012). Conclusion The frequency of genotype C HBV preS T3098C and T53Cmutations is associated with hepatitis B infection progression.     

HBV-M表达模式和HBV-DNA定量与原发性肝癌的关系研究

目的 探讨乙型肝炎病毒血清学标志物(HBV-M)表达模式、HBV-DNA复制水平与原发性肝癌(HCC)的关系.方法 216例原发性肝癌(HCC组),353例慢性乙型肝炎(CHB组),应用酶联免疫吸附试验和聚合酶链式反应方法分别检测两组血清HBV-M和HBV-DNA水平.结果 两组HBV-M表达模式构成差异有统计学意义(P＞0.05),HCC组血清学小三阳(HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性)表达率(62.04%)显著高于大三阳(HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性)表达率(18.98%);CHB组小三阳表达率为61.47%,大三阳为36.83%;CHB组大三阳表达率高于HCC组(P＜0.05).HBV-DNA阳性率HCC组为56.5%,CHB组为79.0%,差异无统计学意义(P＞0.05),但在HBV-DNA阳性患者中,HCC组HBV-DNA复制水平显著低于CHB组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 HCC患者HBV-M表达模式以小三阳为主,其HBV-DNA复制水平较CHB患者低.     

HBV多基因位点变异与肝细胞癌相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒前C区和C基因启动子基因变异与肝细胞癌发生的关系。方法采用实时荧光PCR检测29例慢性乙型肝炎（CHB）,27例乙型肝炎肝硬化（LC）,26例HBV相关肝细胞癌（HCC）患者血清HBV前C区G1896A和BCP区A1762T／G1764A的变异情况。结果HCC组和LC组前c区G1896A和BCP区A1762T／G1764A变异率均显著高于CHB组（P≤0．005）,HCC组和LC组间无显著差异（P〉0．05）。结论乙型肝炎病毒C基因启动子和前c区基因变异与肝细胞癌、肝硬化的发生密切相关。     

抗核抗体检测在自身免疫性疾病的临床应用

目的 探讨抗核抗体(ANA)在自身免疫性疾病(AID)中的临床意义.方法 选取符合AID诊断标准的患者2055例,采用间接免疫荧光法对患者血清标本进行ANA检测,分析ANA的阳性率、核型及滴度的变化.结果 ANA滴度AID患者以1:160为主,对照组以1:80为主.AID检测患者中,ANA阳性率为80%,与对照组比较有...     

GSTM1基因多态与HBV相关性肝细胞癌易感

目的:探讨谷胱甘肽转硫酶(GSTs)M1基因多态性与乙型肝炎相关性肝细胞癌及其与HBV感染引起的慢性乙型肝炎和肝硬化的相关性.方法:采用病例-对照流行病学研究方法,选取了91例原发性肝癌(HCC)患者、58例肝硬化(LC)患者、63例慢性乙型肝炎(CHB)患者和134例正常对照者.以多重PCR技术,检测GSTM1缺失情况.结果:正常组GSTM1基因缺失率(46.92%)与HCC组(61.53%)差异有显著性(P<0.05),与LC组(45.61%)、CHB组(49.18%)差异无显著性.携带GSTM1空白基因型者比非空白基因型者患原发性肝癌的风险高1.81倍(OR=1.81,95% CI=1.05～3.12).携带的55岁前发病的HCC病人GSTM1空白基因型分布明显较55岁后发病者高(P<0.05).结论:GSTM1空白基因型与肝癌易感性有关,且与其发病年龄有关,与肝硬化和慢乙肝无明显相关.     

四川省自贡市159例慢性HBV感染者的HBV基因型分布及其与疾病进展关联研究

目的 了解四川省自贡市慢性HBV感染者的HBV基因型分布情况,并探讨其与慢性乙肝患者病情进展的关系。方法 收集2015年9月—2018年6月159例经本院确诊的慢性HBV感染者,且HBV-DNA水平含量在 10³ IU/mL以上,根据疾病诊断将慢性HBV感染者分为三组：慢性乙型肝炎组（CHB）、乙肝相关性肝硬化组（LC）、乙肝相关性肝癌组（HCC）。采用多通道实时荧光探针PCR法检测乙肝病毒的3种基因型（B、C、D型）,同时检测HBV-DNA及HBV的五项标记物。采用SPSS17.0软件对数据进行统计分析。结果 本文研究显示B基因型115例（72.3%）,C基因型43例（27.0%）,B/C混合型1例（0.6%）,D基因型0例;B基因型的HBV-DNA水平高于C基因型（P<0.05）;慢性HBV感染患者中,男、女组均以B基因型为主,B基因型和C基因型分布在年龄、性别、HBeAg阳性率方面比较差异无统计学意义（P>0.05）;乙肝相关性肝癌组（HCC）的C基因型比例明显高于CHB组和LC组（P<0.05）。结论 自贡市HBV主要流行B基因型,其次是C基因型;B基因型和C基因型的慢性HBV感染患者进展为肝硬化或肝癌可能存在一定的差异。     

乙肝病毒基因分型及其临床意义

目的:探讨南通地区乙肝病毒(HBV)基因型分布状况及其临床相关性。方法:选择南通地区HBV-DNA阳性者200例,其中乙肝表面抗原携带者(ASC)28例,慢性乙型肝炎(CHB)89例,重型肝炎(FHF)26例,肝硬化(LH)30例,肝细胞癌(HCC)27例,采用多对型特异性引物巢式PCR法检测HBV基因型。结果:200例中B型51例(25.5%),C型141例(70.5%),BC混合型8例(4.0%);C基因型在FHF组、LC组、HCC组中的比例显著高于ASC组(P<0.05)。B型、C型、BC混合型HBeAg阳性率分别为49.0%、53.2%和37.5%,无统计学意义(P>0.05)。C型和BC混合型HBV-DNA载量显著高于B型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:南通地区HBV基因型以B、C型为主,C型为优势基因型,并与重型肝炎、肝硬化、肝癌的发生及血清HBV-DNA高载量相关。