应用液相芯片技术对上海地区尖锐湿疣患者进行人乳头瘤病毒分型

目的 采用液相芯片技术分析上海地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒(HPV)型别的分布情况.方法 从116例尖锐湿疣患者的疣体标本中提取脱氧核糖核酸(DNA),应用液相芯片技术进行HPV基因型检测,并与聚合酶链反应(PCR)的检测结果进行比较,明确液相芯片的检测效能.结果 液相芯片检测的116例标本中,HPV阳性114例,阳性率为98.3%.其中单一型别感染占71.6%(83/116),双重型别感染占18.1%(21/116),三重型别感染占7.8%(9/116),四重型别感染占0.9%(1/116).共检出18种HPV亚型,其中HPV6和HPVll最为常见,感染率分别为60.3%(70/116)和42.2%(49/116).在高危型HPV感染中,最常见的3种亚型依次为HPV16、HPV52和HPVl8.液相芯片与PCR检测结果的符合率为90.7%,并且液相芯片对多重感染的检出率高于PCR.结论 上海地区尖锐湿疣以HPV6和HPV11感染为主.高危型HPV感染中最常见的3种亚型依次为HPV16、HPV52和HPV18.液相芯片对HPV多重感染的检出率高于PCR.     

液相芯片技术在人乳头瘤病毒分型检测中的应用

目的构建人乳头瘤病毒(HPV)基因分型的液相芯片,针对中国常见的23种型别的HPV进行分型检测,并探讨其在临床应用中的特异性和敏感性。方法采用HPV通用型引物MY09/11以及一条简并引物对临床样本进行PCR扩增;针对HPV不同型别设计分型探针,并偶联到Luminex微球上,通过LuminexTM平台对PCR产物进行分型检测。同时以测序法作为验证标准,对液相芯片法(Luminex法)检测结果进行评价。结果以测序法作为验证标准,Luminex法对314例HPV样本的分型检测结果为灵敏度98.10%,特异性98.08%,符合率98.09%。Kappa一致性检验结果为0.962。结论 Luminex法用于HPV感染样本中的分型检测具有高灵敏度和特异性,可以用于临床HPV诊断。     

冷冻治疗宫颈上皮内瘤变及人乳头瘤病毒感染的疗效分析

目的:探讨冷冻治疗对宫颈上皮内瘤变(CIN)1～2及高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的疗效及安全性.方法:选取2007年11月～2008年3月在我院门诊检查并冷冻治疗的CIN2、高危型HPV(+)的CIN1或慢性宫颈炎、CINI合并慢性宫颈炎患者共35例.术后3个月评价高危型HPV感染转阴率及CIN治愈率等.术中、术后观察不良反应.结果:冷冻治疗后高危型HPV DNA转阴率为55.9%,HPV DNA含量明显下降(P<0.05).CIN患者有27例(90%)治愈.冷冻治疗宫颈柱状上皮异位(糜烂)、湿疣的有效率分别为100%、87.5%;治疗后白带多的症状明显改善(P<0.01).术中无严重不良事件发生、术后主要反应为阴道排液.结论:冷冻治疗CIN1～2及高危型HPV感染是安全、有效的.     

宫颈癌病理学类型与人乳头瘤病毒感染型别的关系

探讨宫颈癌病理学类型与人乳头瘤病毒感染型别的关系。方法每例宫颈癌标本取样两份,一份进行组织病理学检查,包括ＨＥ、ＰＡＳ和粘液卡红染色;另一份用于提取ＤＮＡ,分别用于ＨＰＶ－１６和ＨＰＶ－１８基因组探讨针进行核酸杂交。结论宫颈鳞癌与ＨＰＶ－１６感染密切相关,宫颈腺癌与ＨＰＶ－１８感染密切相关;而宫颈鳞癌中的不同类型与ＨＰＶ－１６之间的以及宫颈腺癌中的不同类型与ＨＰＶ－１８之间均无明显的相关性。     

下生殖道人乳头瘤病毒感染与上皮内瘤变关系的探讨

目的：探讨女性下生殖道人乳头瘤病毒（HPV）感染与上皮内瘤变关系。方法：回顾性分析经活组织检查确诊332例下生殖道HPV感染及43例上皮内瘤变。结果：HPV感染发病率逐年升高,HPV感染发生上皮内瘤变主要集中在31～40岁年龄段（P〈0．05）,下生殖道各部位的HPV感染均可并发上皮内瘤变,以宫颈最显著（P〈0．01）。结论：早期诊断下生殖道HPV感染,可减少上皮内瘤变的发生,对于宫颈癌前筛查具有重要意义。     

600例不同程度宫颈糜烂患者人乳头瘤病毒感染状况分析

女性宫颈的病变,从慢性宫颈炎到宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)再到宫颈癌,都是妇产科常见的病变.慢性宫颈炎的常见的病理状态有[1]:宫颈糜烂、宫颈肥大、宫颈息肉、宫颈腺囊肿等.尽管目前各种文献已不主张"宫颈糜烂"的称呼,但通常在临床工作中仍很常用.人乳头状瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染是现在研究的热点,诸多的流行病学及分子生物学研究资料表明HPV感染与宫颈癌及癌前病变密切相关,高危型HPV感染是导致宫颈癌的主要病因,而且是宫颈癌的独立发病因素[2,3],但是对于HPV与宫颈糜烂的研究并无太多文献报道.     

宫颈病变检测人乳头瘤病毒感染的意义

目的 探讨人乳头瘤病毒（HPV）感染与宫颈病变的关系.方法 用荧光定量PCR法检测15例正常宫颈,57例宫颈尖锐湿疣,78例宫颈上皮内瘤变（CIN）,43例宫颈尖锐湿疣合并CIN,13例宫颈癌的HPV感染情况.结果 本组宫颈病变中HPV感染率92.72％,单一型HPV感染率89.52％,高危型HPV感染率98.25％;宫颈尖锐湿疣以HPV52感染为主（41.18％）;CIN以HPV16感染为主（41.67％）;尖锐湿疣合并CIN感染HPV58者占25.00％,感染HPV16和HPV52的各占15.00％; 60.00％宫颈癌感染HPV16;多重型HPV感染以HPV亚型双重感染为主.结论 HPV检测对于宫颈病变的筛查及临床分流监测有重要价值.     

新余地区2273例女性生殖道人乳头瘤病毒感染状况分析

目的：了解新余地区女性生殖道人乳头瘤病毒感染状况,探讨高危型HPV感染与宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌的关系。方法：对新余地区2273例女性进行人乳头瘤病毒检测,对TCT结果异常者进行阴道镜及宫颈组织病理活检。结果：2273例女性中检出HPV阳性711例,阳性率31.3%,阳性感染者中,单一性感染最多,为609例,占85.7%,混合感染者102例,占14.3%。排在前十位的亚型分别是HPV52（24.1%）、HPV16（15.3%）、HPV58（13.2%）、HPV81（10.1%）、HPV6（8.3%）、HPV68（8.1%）、HPV53（7.7%）、HPV56（6.5%）、HPV51（6.3%）、HPV39（6.2%）。在各年龄组中,小于20岁女性感染率最高,为72.2%,各年龄组HPV感染差异有统计学意义。妇女CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌现患率分别为3.43%、2.02%、1.58%、0.62%,HPV感染率随着宫颈病变的加重呈趋势性增加。结论：新余地区女性有相当高比例的HPV感染,HPV52、16、58、81亚型是最主要的感染亚型,持续高危型HPV感染是宫颈癌的主要病因,新余地区妇女宫颈癌发病率高,防癌重点在于采用HPV病毒检测联合宫颈液基细胞学（TCT）检测,早期发现与诊断。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的快速检测与分型

RDB是将我们设计的HPV6B、11、16、18、31、33、35的7个序列特异性寡核苷酸（SSO）探针分别依次固定在尼龙膜上,再与经PCR扩增的DNA靶序列杂交,即可在同一张膜上分辨7型HPVDNA的任一型。我们检测尖锐湿疣患者62例,对其中20例进行组织活检,阳性检出率为950（19／20）。阳性检出中,HPV6B型8例（40．0％）、HPV11型9例（45．0％）、HPV6B／11型（混合型）2例（10．0％）;对其中42例进行宫颈抹片检测,阳性检出率为92．9％（39／42）。阳性检出中,HPV6B型15例（35．7％）、HPV11型19例（45．2％）、HPV6B／11型3例（7.1％）、HPV16型2例（4．8％）。结果表明尖锐湿疣患者检出HPV总阳性率为94％,感染HPV型主要为HPV6B及11型。     

人乳头瘤病毒高低危基因型感染子宫颈组织的比较蛋白质组学分析及其差异

目的观察人乳头瘤病毒(HPV)感染子宫颈组织后蛋白质组表达情况,探讨高、低危基因型感染子宫颈组织后表达的差异及意义。方法采用比较蛋白组学研究技术,对HPV高危基因型感染的子宫颈上皮内瘤变、低危基因型感染的子宫颈尖锐湿疣和正常对照的子宫颈上皮组织进行两两比较,筛选差异表达蛋白质,并对差异蛋白质点进行质谱分析。结果对3组26个差异蛋白质点的分析共获得了22张肽质量指纹图,搜索后得到18个与其相匹配的蛋白质点。通过查询NCBInr数据库获得初步鉴定的18个蛋白质功能信息,主要与细胞代谢、信号传导、细胞分泌、细胞骨架构建及细胞增殖、分化与凋亡等相关。结论高、低危基因型HPV感染子宫颈组织后蛋白质组表达存在明显差异。     

用PCR检测新疆部分女性尖锐湿疣与宫颈上皮内瘤变组织HPV的初探

应用多重引物人乳头瘤病毒(HPV)6b、11、16、18型聚合酶键反应(PCR)技术检测74例新疆南疆、北疆部分地区女性下生殖道尖锐湿疣(CA)与宫颈上皮内瘤变(CIN)组织中人乳头瘤病毒DNA(HPV DNA).其中在南疆检测出CA17例,CIN Ⅲ级20例,在北疆检测出CA22例,CINⅠ～Ⅲ级2例,CINⅢ级13例.结果:总HPV DNA检出率分别为94.1%、90.0%、90.9%、86.7%.CIN与CA患者的HPVDNA检出率在地区性方面无显著性差异(P>0.05).在南、北疆患者CA组织中HPV6b、11、16、18型检出率分别为89.7%、12.8%、5.1%.CIN组织中HPV6b、11型检出率为0%,HPV16、18型检出率分别为65.7%、20%.提示CA与HPV6b、11型感染有关,CIN则与HPV16、18型密切相关.并且在南、北疆CA与CIN患者所感染的HPV亚型无地理分布差异(P>0.05).CIN组织中,HPV16、18型检出率较国内外报道高,值得重视;CA组织中,检出HPV高危型(HPV16、18型)7例,其中1例伴宫颈不典型增生Ⅰ～Ⅱ级,这些病例应继续密切随访.     

人宫颈癌组织中Survivin蛋白及人乳头瘤病毒16、18感染检测

目的:检测人宫颈癌组织中Survivin蛋白及高危人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染情况,并探讨其在宫颈癌癌变过程中的作用.方法:选取13例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)及42例宫颈癌(鳞癌36例,腺癌6例;临床分期:Ⅰ、Ⅱ期34例,Ⅲ、Ⅳ期8例;病理分级:Ⅰ、Ⅱ级22例,Ⅲ级20例;有淋巴结转移12例,无淋巴结转移30例)组织,另取8例正常宫颈组织作为对照.分别采用免疫组织化学法检测Survivin蛋白表达情况,原位杂交法检测HPV16、18感染情况.结果:正常宫颈组织中Survivin蛋白的阳性表达率为0,CIN为53.84%,宫颈癌组织中为95.23%,3组间差异有统计学意义(P＜0.05);正常宫颈组织中HPV16、18的感染率为12.50%,与CIN(46.15%)和宫颈癌(85.71%)组织相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).宫颈癌组织中Survivin蛋白表达率与病理分级、临床分期及淋巴结转移有关(P均＜0.05).宫颈癌组织中Survivin蛋白表达率与HPV16、18感染率呈正相关(P＜0.05).结论:在宫颈细胞的恶变和进展过程中,Survivin的表达及HPV16、18感染可能起协同作用.     

北京地区尖锐湿疣患者皮损中人乳头瘤病毒的检测和分型

目的分析北京地区尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的型别和发病特点,比较普通患者和抵抗力弱的患者的发病差异。方法采用PCR和RFLP方法分析HPV型别,对于难以通过酶切鉴定的PCR产物,构建重组测序质粒,检索GenBank进一步分型鉴定。结果普通患者HPV6型为主要感染型别,其次是HPV11型。HPV6型患者年龄较HPV11和HPV6 HPV11型更低;而高龄患者和免疫抑制患者则以HPV11 HPV6的混合感染和HPV11感染为主。部分患者还检测出HPV16和HPV53感染。结论HPV6是尖锐湿疣的主要致病型别,但患者年龄比其他型别更低,而抵抗力弱的患者则多与HPV11的感染有关。一般存在于正常生殖道组织的HPV53也可致尖锐湿疣的发生。     

HPV分型检测对宫颈高度病变的筛查作用

目的 观察HPV分型检测在宫颈高度病变筛查中的作用.方法 对460例行液基细胞学及HPV分型检测患者资料进行回顾性分析,其中细胞学结果≥ASCUS的患者行宫颈病理学活检.结果 257例HPV检测阳性(阳性率为55.87％),其中分型检测感染频度前6位分别为16、58、52、18、68、53型.208例宫颈细胞学异常,确诊宫颈高度病变62例,其中高危型HPV+与HPV-者分别为58例和4例(P ＜0.01);145例ASCUS,活检确诊宫颈高度病变39例,其中高危型HPV+与HPV -者分别为37例和2例(P ＜0.01 );45例LSIL,确诊宫颈高度病变12例,其中高危型HPV+与HPV -者分别为11例和1例(P ＜0.05); 18例HSIL,确诊宫颈高度病变11例,其中高危型HPV+与HPV-者分别为10例和1例(P ＜0.01).结论 随着宫颈细胞学和组织病理学病变级别的升高,高危型HPV感染的阳性率呈上升趋势(P＜0.05).HPV分型检测对细胞学异常者宫颈高度病变筛查有重要意义.     

人乳头瘤病毒16型DNA整合对宫颈癌变的影响*

研究人乳头瘤病毒（HPV）16型DNA在宫颈鳞状细胞癌（SCC）及其癌前病变中的整合状况,探讨其在宫颈癌变中的作用。方法 采用多重聚合酶链反应技术检测428例HPV-16阳性并经组织学证实具有不同程度宫颈病变及正常宫颈上皮女性的宫颈脱落细胞中HPV-16 DNA的整合状况;采用E2/E6的比值作为整合的替代标志物。研究对象分为病例组（354例）包括经组织病理学证实的103例SCC及251例宫颈高级别鳞状上皮内病变（HSIL）,对照组（74例）包括34例宫颈低级别鳞状上皮内病变（LSIL）及40例正常宫颈上皮细胞女性。不同程度宫颈病变中HPV-16 DNA整合率的变化采用χ2趋势分析;病毒整合与现患HSIL及SCC风险的优势比（OlR）采用非条件Logistic回归分析。结果 HPV-16 DNA整合率随宫颈病变的加重逐渐升高,从对照组中的6.8%（5/74）,升高至HSIL组的29.9%（75/251）及SCC组的68.0%（70/103）,3组整合率比较差异有统计学意义（P?<0.05）。经多因素分析调整吸烟状况及合并感染其他高危型HPV后,HPV-16基因组整合与现患HSIL及SCC风险的优势比为OlR=2.30（95% CI：1.62,3.18）。结论 HPV-16 DNA整合发生在病毒感染自然史的早期,病毒整合在宫颈癌变过程中起促进作用。     

546例宫颈上皮内瘤变患者人乳头瘤病毒感染状况分析

目的：探讨徐州地区宫颈上皮内瘤变（ CIN）患者人乳头瘤病毒（ HPV）感染及亚型分布情况。方法将阴道镜下多点活检病理诊断确诊的CIN病例546例分为CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ三组（ CINⅡ-CINⅢ归为CINⅢ）,分析3组HPV感染及亚型分布情况。结果①546例患者HPV感染率86．08％（470/546）,其中CINⅠ级68．92％（129/187）、CINⅡ级91．71％（166/181）、CINⅢ级98．31％（175/178）,HPV感染率随病变程度的增加而增加,差异具有统计学意义（P＜0．05）。②HPV单一感染率71．06％（334/470）,多重感染率28．94％（136/470）。3组间HPV单一及多重感染的分布情况比较,差异均无统计学意义（ P＞0．05）。③共检出19种HPV 亚型（ HPV42、43型未检出）,感染率排在前6位的亚型分别为16、58、31、33、52、18型;其中CINⅠ级为16、52、58、18、31、66型, CINⅡ级为16、58、31、33、11、52型,CINⅢ级为16、58、33、31、52、18型。 HPV16型感染率随病变等级升高而升高,差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论徐州地区CIN 高发年龄段为31～50岁;HPV感染率随CIN等级的增高而增加;HPV16型是主要致病型,排在前6位的常见亚型为16、58、31、33、52和18型;HPV多重感染与CIN病变程度无直接相关性。     

PCR直接测序法检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒DNA

目的 探索检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)DNA的有效手段。方法 采用HPV通用引物对宫颈癌标本中的HPVL1区基因序列进行PCR扩增,根据PCR产物序列分析对HPV分型。结果 50例宫颈癌组织HPVDNA检出率为78%,其中HPV16和HPV18型混合感染最多见。检测出1例HPV58型,其L1区基因序列与德国标准株58型比对,未发现碱基变异。结论 PCR直接测序法是对宫颈癌组织中HPV检测和分型的一种有效方法,并可检测到HPV少见的特殊类型,同时也能提供已知的HPV型别的突变信息。     

宫颈癌前病变和宫颈癌组织中凋亡相关基因survivin的表达及其与人乳头状瘤病毒感染的关系

目的探讨凋亡相关基因survivin在宫颈癌前病变和宫颈癌组织中的表达及其与人乳头状瘤病毒（HPV）感染的相关性.方法选取76例宫颈癌前病变或宫颈癌患者,另取10例正常宫颈组织作为对照.应用免疫组织化学SP法检测各组宫颈组织中凋亡相关基因survivin的表达;设计高危型HPV（HPV16,18,31,33,58等）通用引物,以touch-down PCR法检测各组宫颈组织中高危型HPV的感染率.结果（1）从正常宫颈→癌前病变→宫颈癌,survivin表达逐渐增强（P＜0.05）;（2）survivin表达与宫颈癌组织学分级有关（P＜0.05）,而与年龄、临床分期及组织学分型无关（P＞0.05）;（3）从正常宫颈→癌前病变→宫颈癌,高危型HPV阳性率逐渐升高（P＜0.05）;（4）高危型HPV感染率在不同年龄、临床分期、组织学分级及组织学分型中,均无统计学差异（P＞0.05）;（5）survivin与高危型HPV在宫颈癌组织中的表达呈正相关（P＜0.05）.结论survivin表达及高危型HPV感染可能与宫颈癌的发生、发展密切相关,两者在宫颈癌的发病机制中可能起着协同作用.