DMPP对于鸡胚血管形成的抑制作用

目的研究1,1-二甲基-4-苯基哌嗪(1,1-dimethyl-4-phenyl piperazinium,DMPP)对于鸡胚发育期血管新生的作用。方法采用质量浓度为50μg/mL的DMPP溶液局部处理鸡胚绒毛尿囊膜(chickenchorioallantoic membrane,CAM)和鸡胚卵黄囊膜(yolk sac membrane,YSM)表面,分别用肉眼和显微镜观察与被测物作用后CAM膜上血管生成情况和YSM膜血管密度和生长率的变化。结果 DMPP能明显抑制CAM模型血管的生成和YSM模型的血管面积和密度的增长。结论 DMPP可抑制鸡胚血管的形成。     

鸡胚模型筛选抗血管生成药物的实验方法改进

目的对传统的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和卵黄囊膜(YSM)测定法改进，利于评价和筛选抗血管生成的药物。方法在CAM模型中，改变传统的开窗位置、加药载体和结果观察方法；针对YSM模型，改进加药载体和加药部位，优化对实验数据的统计分析；使用重组人血管内皮抑制素endostar和生理盐水对照组评价效果。结果 endostar能明显抑制CAM血管形成，并且抑制YSM的血管密度和面积增长率，与对照组相比有统计学差异(P <0.01)。结论通过本实验对CAM和YSM测定的改进，建立了一个成熟而稳定的筛选抗血管形成药物的实验方法。     

当归、黄芪注射液对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨当归、黄芪注射液对鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响。方法种蛋在37.8℃孵育7d后制备CAM模型,当归、黄芪注射液及其不同配比滴加于CAM表面的载体上,继续孵育3d,观察鸡胚存活状况,然后制备鸡胚CAM标本,解剖显微镜下计数新生毛细血管数目。结果当归、黄芪注射液及其不同配比均具有促进鸡胚CAM血管生成作用,与生理盐水对照组相比有显著性差异(P<0.05),除当归与黄芪1∶5,其他各组药效低于表皮生长因子(EGF)(P<0.05)。结论当归注射液、黄芪注射液及其不同配比具有显著促进鸡胚CAM血管生成作用,其可能的机制是血管内皮细胞的增殖与迁移。     

海金沙草对鸡胚血管新生的抑制作用

目的 研究从海金沙草中分离的各类成分对鸡胚血管新生的抑制作用,筛选出抑制效果最佳的有效成分.方法 系统提取海金沙草的各类组分,利用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)和鸡胚卵黄囊膜(YSM)模型,观察海金沙各类组分对鸡胚血管新生的作用.结果 海金沙正丁醇组及正丁醇黄酮组处理过的CAM和YSM血管新生密度和迁移面积明显低于其他组分和对照组,差异有统计学意义.结论 海金沙正丁醇组及正丁醇黄酮组对鸡胚血管新生有明显抑制作用.     

川芎嗪对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成影响的实验研究

目的:观察川芎嗪对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。方法:将90只8 d龄鸡胚随机分成6组(生理盐水组、贝复济组、盐酸川芎嗪A组、B组、C组、D组),建立CAM模型,将NS、bFGF、4种浓度的川芎嗪分别加在CAM表面的载体上,继续孵育3 d后制备CAM标本,观察血管生成表现,并进行新生血管计数。结果:川芎嗪各浓度组新生血管数增加,与生理盐水组和贝复济组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:川芎嗪具有促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成作用,川芎嗪促血管生成作用与其浓度有一定依赖关系。     

雷公藤化合物对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的:通过观察三种雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook,TW)化合物TW1、TW2和TW3对鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响,探讨雷公藤的抗新生血管形成作用。方法:50枚新鲜香港麻花鸡种蛋,随机分为5组:PBS组、TW1组、TW2组、TW3组、参一胶囊(ginsenoside,Rg3)组,每组各10枚。种蛋消毒后,放入37.8C恒温箱内孵育6 d,暴露尿囊膜,将含有待测品的滤纸放在尿囊膜血管较少部位,继续孵育2 d,以滤纸为中心,把膜剪下,固定,拍照并记录各组CAM血管生长情况。结果:PBS组CAM血管及其网络清晰可见,生长良好;TW1、TW2、TW3(剂量均为10μg/枚)处理组的毛细血管数目较PBS组明显减少,血管结构模糊,颜色变浅、苍白,三者对CAM血管生成的抑制率分别为80%、60%、100%;阳性对照Rg3在相同剂量时,对CAM血管生成的抑制率仅10%。结论:三种雷公藤化合物TW1、TW2、TW3对CAM血管生成均有明显的抑制作用,值得进一步研究。     

鸡胚尿囊膜法筛选具有抑制血管生成作用的中药

目的筛选具有抑制新生血管生成作用的药物,为肿瘤治疗提供新的药物。方法种蛋随机分为16组,孵育8 d后,将熬制的15种单味中药及0.14 mol.L-1NaCl溶液分别加于鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)表面的载体上。作用4 d后,观察统计CAM上血管生长状况。结果在筛选的15味中药中,牡丹皮和香附子对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成具有明显的抑制作用,与NaCl组相比有显著差异(P<0.05)。结论牡丹皮和香附子能有效抑制新生血管生成。     

超声激活血卟啉声动力作用对鸡胚绒毛尿囊膜VEGF表达的影响

目的:本研究探讨超声激活血卟啉(Hematoporphrin,Hp)声动力作用对鸡胚绒毛尿囊膜(Chorioallantoie membrane,CAM)的血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial cell growth factor,VEGF)表达的影响,为应用声动力疗法(Sonodynamic therapy,SDT)进行抗肿瘤血管新生提供实验基础.方法:种蛋随机分为4组,孵育7d后建CAM模型,随机分为空白组、单纯超声组、单纯Hp组、声动力治疗组.各组药物分别加于CAM表面的载体上,作用后制备标本,用免疫组化检测各组鸡胚CAM VEGF表达情况.结果:与空白组相比,单纯Hp组差异无统计学意义(P>0.05);单纯超声组、声动力治疗组与之差异有统计学意义(p<0.05);单纯超声组与声动力治疗组之间比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:Hp介导的声动力作用显著抑制了鸡胚绒毛尿囊膜VEGF的表达,这可能是其抑制新生血管形成的重要机制.     

人大肠癌鸡胚尿囊膜移植模型的建立及血管生成特征的观察

目的 研究人大肠癌腺癌细胞株HT-29鸡胚尿囊膜移植模型建立的方法,观察和分析其血管生成的特征.方法 将不同浓度的人大肠癌腺癌细胞株HT-29接种于鸡胚尿囊膜(chick embryo chorioallantoic membrane,CAM),观察影响大肠癌鸡胚移植模型瘤体成活的因素、瘤体生长特征和血管生成情况.结果 建立了人大肠癌CAM移植模型.移植模型瘤体易于生长,具有较强的血管生成作用.结论 该模型易于复制,能动态观察大肠癌的血管生成过程,可用于大肠癌的生物学行为、药物筛选等领域的研究.     

Image-Pro Plus图像分析软件定量鸡胚尿囊膜血管新生面积的方法

目的应用Image-Pro Plus 5.0图像处理和分析软件,研究鸡胚尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)血管新生面积定量的新方法。方法20只发育良好的7日龄鸡胚,分为龙葵给药组和对照组,每组10只。将中药龙葵水提液及等量蒸馏水吸附于5 mm直径的定性滤纸,置于CAM上。利用Image-Pro Plus 5.0软件,定量血管新生面积、蛋壳开窗处对应的CAM面积,计算出血管新生面积与CAM面积的比值。结果用Image-Pro Plus 5.0可方便、自动、准确地进行给药前后的数据收集和面积计算。统计分析表明,受试物龙葵可明显抑制CAM血管新生,与对照组比较有极显著差异(P<0.001)。结论Image-Pro Plus 5.0图像处理和分析软件是一种高效、准确的统计血管新生面积的工具,用该软件定量蛋壳开窗部位下的血管新生面积占开窗部位所对应的CAM总面积,不仅操作简便,而且数据计算自动生成,可较准确地反映鸡胚血管新生情况。     

血管内皮生长因子受体Flt-1结合小肽抑制肿瘤生长的实验研究

目的：检测从十二肽库中筛选获得的能与血管内皮细胞生长因子（VEGF）受体Flt-1结合的小肽的生物学活性。方法：免疫细胞化学方法检测小肽融合蛋白DHFR-F56/F90与人脐静脉内皮细胞的结合活性;鸡胚尿囊膜血管增生抑制实验检测DHFR-F56/F90能否抑制鸡胚新生血管形成;裸鼠成瘤实验检测DHFR-F56/F90对荷瘤裸鼠中肿瘤的生长抑制;免疫组织化学方法检测DHFR-F56/F90能否定位于肿瘤组织。结果：小肽融合蛋白DHFR-F56/F90能与人脐静脉内皮细胞结合,DHFR-F56能抑制鸡胚尿囊膜新生血管的形成,且DHFR-F56能与肿瘤细胞结合,促进肿瘤组织坏死及显著抑制肿瘤生长。结论：十二肽F56是VEGF结合Flt-1的有效拮抗剂,具有抑制VEGF诱导的新生血管形成而抗肿瘤生长和转移的潜在应用前景。     

改良鸡胚尿囊膜肿瘤实验动物模型及其生物学行为观察

目的利用鸡胚尿囊膜建立人移植瘤模型并观察其生物学行为和组织学形态已有报道。但是,在实际工作的过程中仍存在不少的问题。因此,通过改良的方法,获得简单,快捷,可重复的动物模型。方法将人胶质瘤SWO-38细胞滴加到鸡胚尿囊膜上,观察影响鸡胚的存活和成瘤的可能因素、移植瘤的生长特性和形态学特征。结果利用改良的方法成功建立胶质瘤鸡胚尿囊膜的模型;肿瘤组织能够诱导血管生成,镜下形态符合恶性胶质瘤的形态学特征。结论该模型简单,快捷,易于建立。便于观察肿瘤组织的生物学行为,可用于抗肿瘤的药物筛选。     

人内皮抑素基因的克隆及其表达产物抗肿瘤活性

目的：克隆人内皮抑素（endostatin)基因并对其表达产物进行抗肿瘤活性研究。方法：从人肝cDNA文库中获得人endostatin基因，构建人载体PET15b，在大肠杆菌BL21（DE3）中表达，将表达产物（rhEndostatin)纯化后应用于小鼠Lewis肺癌治疗，并通过鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验。观察rhEndostatin的血管抑制作用。结果：rhEndostatin可抑制鸡胚绒毛尿囊膜新生血管形成，明显抑制小鼠Lewis肺癌的生长。结论：rhEndostatin具有抗肿瘤活性。且此活性可能与其抑制肿瘤新生血管形成有关。     

益气生骨冲剂对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响

目的探讨益气生骨冲剂对鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）血管生成的影响。方法取9日鸡胚24枚建立CAM模型，随机分为实验组和空白组，每组12枚。实验组加药益气生骨冲剂于无血管区的载体上，空白组加生理盐水。每日上下午各加药1次。3d后检测CAM载体周围1．5cm的血管数目。结果实验组小血管数目和血管总数均多于空白组，两组比较有显著性差异（P〈0．05）。结论益气生骨冲剂可以促进血管内皮生长因子及其受体表达，促进血管内皮细胞的增殖可能是促进血管生成的原因之一。     

椿皮对鸡胚尿囊膜血管生成的影响

目的:研究收涩中药椿皮对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。方法:建立鸡胚绒毛尿囊膜血管模型,观察椿皮含药血清对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的影响。结果:椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜新生血管数目有一定抑制作用。结论:椿皮对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成具有抑制作用。     

重组血管生成抑制因子r—K4K5的分离纯化与功能鉴定

目的 分离纯化r-K4K5,探讨r-K4K5对牛毛血管内皮（BCE）细胞、鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）新生血管生成及实验性人肺腺癌SPC-A1生长的抑制作用。方法 通过盐析、凝胶过滤提纯r-K4K5,BCE细胞在含r-K4K5的DMEM中培养24、48、72h后分别计数;孵化7d的鸡胚加r-K4K5后继续孵育72h,观察新生血管生成;已经接种入SPC-A1肺腺癌组织的荷瘤裸小鼠（Balb/c,nu/nu）,瘤旁注射r-K4K5继续饲养,观察肿瘤生长变化。结果 r-K4K5抑制BCE细胞增殖,48～72h作用明显;r-K4K5处理的CAM组中直径小于50um的小血管明显减少;高剂量r-K4K5治疗的荷瘤裸小鼠组,平均瘤重与对照组比较有统计学意义。结论 r-K4K5能够抑制BCE细胞增殖,抑制鸡胚CAM新生血管生成,抑制实验性人SPC-A1肺腺瘤生长。     

丹参酮ⅡA对CAM血管生成影响的实验研究

目的探讨丹参酮ⅡA(TsⅡA)对鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)模型血管生成作用的影响。方法将鸡胚随机分为生理盐水组、溶媒对照组、bFGF组、TsⅡA0.005mol/L组、TsⅡA0.010mmol/L组、TsⅡA0.015mmol/L组,检测尿囊膜的血管增生程度。结果①各组浓度的TsⅡA均具有较明显的促血管新生作用,与生理盐水组和溶媒对照组相比,差异有统计学意义(P0.01或P0.05);TsⅡA0.010mol/L组和TsⅡA0.015mol/L组与bFGF组相比,差异无统计学意义(P0.05);②具有一定的剂量依赖关系:TsⅡA0.010mol/L组与TsⅡA0.005mol/L组相比,差异有统计学意义(P0.05),但TsⅡA0.010mol/L组与TsⅡA0.015mol/L组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论活血化瘀中药单体——TsⅡA可促进CAM的血管增生,具有一定的促血管新生作用。