狭缝印迹杂交分析癌转移抑制基因nm23在人肺癌中的表达

为探讨癌转移抑制基因（ｎｍ２３）在人肺癌发生、发展中的作用，采用狭缝印迹杂交技术检测了不同部位、不同性质人肺组织中的ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的ｍＲＮＡ表达。结果发现，ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２基因的ｍＲＮＡ表达，都有从正常肺组织、肺良性病变组织、非癌肺组织及癌旁组织、癌灶组织、到癌转移淋巴结组织逐渐降低的趋势。其中，肺癌组织较正常肺组织的ｎｍ２３－Ｈ２基因ｍＲＮＡ表达显著降低（Ｐ＜０．０５），癌转移淋巴结组织较正常肺组织的ｎｍ２３－Ｈ１和ｎｍ２３－Ｈ２ｍＲＮＡ表达均显著降低（Ｐ＜０．０５）。肺癌组织的ｎｍ２３基因表达与淋巴结有无癌转移无明显相关关系（Ｐ＞０．０５）。提示ｎｍ２３基因表达降低可能与肺癌发生有关，未发现ｎｍ２３有癌转移抑制作用。     

与肿瘤转移抑制基因nm23高度同源的nm23—H3b基因的克隆和序…

ｎｍ２３是一种有效的肿瘤转移抑制基因，目前已发现的两种人类ｎｍ２３（Ｈ１和Ｈ２）的氨基酸肽具有８８％的同源性。我们采用ＰＣＲ技术从人肝基因组ＤＮＡ中扩增ｎｍ２３序列，经克隆筛选得到５’端３７５ｂｐ克隆，命名为ｎｍ２３－Ｈ３ｂ。序列分析发现，ｎｍ２３－Ｈ３ｂ在４０ｂｐ￣７０ｂｐ之间与原序列完全不同，其他序列与ｎｍ２３－Ｈ１有８６％的同源性，与ｎｍ２３－Ｈ２有９０％的同源性。ＢｇｌＩＩ消化人肝基因组Ｄ     

nm23-H1与人卵巢癌转移及预后的关系

目的 探讨人卵巢癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１基因的表达水平与卵巢癌病理组织学类型、转移倾向及患者预后的相关性。方法 分别采用原位杂交及免疫组化方法检测４１例人卵巢癌标本中 ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ及其编码蛋白 ＮＤＰＫ－Ａ的表达水平。结果 ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ及其编码蛋白 ＮＤＰＫ－Ａ在卵巢癌组织中的表达水平与卵巢癌的病理组织学类型无关（Ｐ＞０．０５）,与卵巢癌转移倾向呈负相关（Ｐ＜０．０５;Ｐ＜０．０１）,在原发灶中的表达水平明显高于转移灶（Ｐ＜０．０１）,与卵巢癌患者预后呈正相关（Ｐ＜０.０５）。在被测卵巢癌标本中,ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ与ＮＤＰＫ－Ａ两者间的表达水平具有正相关性。结论ｎｍ２３－Ｈ１基因在人卵巢癌的扩散转移过程中发挥抑制作用,它在卵巢癌组织中的表达水平可作为判断患者预后的重要指标。     

nm23—H1基因在人乳腺癌组织中的及其与淋巴结转移的关系

目的 探讨ｎｍ２３－Ｈ１基因在人乳腺癌和良性乳腺疾患中的表达规律，及其与淋巴结转移等预后因素之间的关系。 方法 乳腺组织标本共７６例，ＨＥ染色对病变进行病理诊断，以鼠抗人ｎｍ２３－Ｈ１单克隆抗体ＩｇＧ２ａ、用免疫组化方法检测ｎｍ２３－Ｈ１基因在乳腺组织中的表达产物。 结果 ①ｎｍ２３－Ｈ１表达产物位于胞浆；②ｎｍ２３－Ｈ１表达频率在良性乳腺疾患中明显高于乳腺癌中；③ｎｍ２３－Ｈ１的表达与乳癌淋巴结     

nm23-H1基因在结肠癌中的表达及其意义

目的：研究肿瘤转移相关基因ｎｍ２３－Ｈ１在结肠癌中的表达及其与临床病理的关系。方法：应用ＳＰ免疫组化法对４例正常结肠组织、４例结肠腺瘤组织、２８例结肠癌组织中的ｎｍ２３－Ｈ１基因进行半定量分析。结果：ｎｍ２３－Ｈ１表达强度在正常结肠组织、结肠腺瘤组织、结肠癌组织中的水平差异不大。结肠癌中ｎｍ２３－Ｈ１在伴淋巴结转移组的表达强度明显低于不伴淋巴结转移组（Ｐ＜０．０５）,Ｄｕｋｅｓ Ｃ、Ｄ期低于Ｄｕｋｅｓ Ａ、Ｂ期（Ｐ＜０．０５）。结论：ｎｍ２３－Ｈ１基因可能参与结肠癌的发生、发展,其表达强度与结肠癌的淋巴结转移呈负相关。     

与肿瘤转移抑制基因nm_（23）高度同源的nm_（23）－H_3b基因的克隆和

ｎｍ＿（２３）是一种有效的肿瘤转移抑制基因，目前已发现的两种人类ｎｍ＿（２３）（Ｈ＿１和Ｈ＿２）的氨基酸肽具有８８％的同源性。我们采用ＰＣＲ技术从人肝基因组ＤＮＡ中扩增ｎｍ＿（２３）序列，经克隆筛选得到５’端３７５ｂｐ克隆，命名为ｎｍ＿（２３）－Ｈ３ｂ。序列分析发现，ｎｍ２３－Ｈ＿３ｂ在４０ｂｐ～７０ｂｐ之间与原序列完全不同，其他序列与ｎｍ＿（２３）－Ｈ１有８６％的同源性，与ｎｍ＿（２３）－Ｈ２有９０％的同源性。ＢｇｌＩＩ消化人肝基因组ＤＮＡ，用ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿３ｂＤＮＡ为探针，经ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｌｏｔ后发现１０．５、７．９和４．０ｋｂ的３条杂交带，未见与ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿１和Ｈ＿２相同的杂交带。因此认为ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿３ｂ是一种与人肿瘤转移抑制基因ｎｍ＿（２３）－Ｈ＿１和Ｈ＿２高度同源的新基因克隆。     

口腔癌及癌前病变nm23—H1肿瘤抑制基因与CD44v的表达研究

目的探讨肿瘤抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１与ＣＤ４４变异型（ＣＤ４４ｖ）在口腔癌中的作用和意义。方法采用流式细胞术,对肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１和ＣＤ４４ｖ的表达量定量分析。结果ｎｍ２３－Ｈ１抑制基因在口腔癌、白斑、扁平苔右表达的阳性率分别为５５％、１０％和７％;ＣＤ４４ｖ在口腔癌、白斑、扁平苔藓中表达的阳性率分别为７５％、３０％和２１％;在ｎｍ２３－Ｈ１基因的平均表达量中,口腔癌与白斑以及与扁平苔癣     

nm_(23)-H_1 mRNA在胰腺癌中的表达及其与预后的关系

目的：探讨肿瘤转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１表达产物ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ在胰腺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，检测２７例胰腺癌及７例正常胰腺组织中ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ的表达。结果：７例正常胰腺组织仅１例表达ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ，占１４．２８％，２７例胰腺癌标本中有１９例表达ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ，占７０．２５％。经卡方检验发现：ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达与胰腺癌病理分级、临床分期及伴随局部淋巴结转移呈显著相关（Ｐ＜０．０５）。结论：检测ｎｍ２３－Ｈ１ｍＲＮＡ表达对判断胰腺癌恶性程度及预测预后有重要参考价值。     

胃癌CD44V6,nm23—H1蛋白表达与淋巴结转移

目的：研究胃癌ＣＤ４４Ｖ４、ｎｍ２３－Ｈ１蛋白表达与淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法。结果：胃癌ＣＤ４４Ｖ６、ｎｍ２３－Ｈ１阳性率分别炎６１．４％和４５．２％,伴有淋巴结转移者ＣＤ４４Ｖ６、ｎｍ２３－Ｈ１阳性率分别高于和低于无淋巴结转移者（Ｐ〈０．０１）。结论：转移相关基因和转移抑制基因之间的失衡是导致胃癌淋巴转移机制之一,ＣＤ４４Ｖ６、ｎｍ２３－Ｈ１,可作为胃癌淋巴结转移的重要生物学标     

转移力不同的肺癌克隆细胞中nm23—H1基因产物NDPK的表达

目的 比较转移抑制基因ｎｍ２３－Ｈ１表达产物核苷酸二磷酸激酶（ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅ ｄｉｐｈｓｏｐｈａｔｅ ｋｉｎａｓｅ,ＮＤＰＫ）在转移力不同的肺癌克隆株中的表达。方法 通过单细胞克隆技术及裸鼠接种筛选出高转移及低转移的人肺巨细胞克隆细胞株及高思考多的人肺腺癌克隆细胞株,用ＬＳＡＢ免疫组化法检测ｎｍ２３－Ｈ１基因产物ＮＤＰＫ的表达。结果 ＮＤＰＫ在高转移及低转移的人肺巨细胞癌克隆细胞移植瘤及转移     

甲状腺乳头状癌nm23-H1、CD31表达与肿瘤转移关系的研究

[目的]研究甲状腺乳头状癌组织中nm23-H1和CD31的表达水平与甲状腺癌转移的关系。[方法]应用EnVision^TM免疫组织化学法检测55例甲状腺乳头状癌和10例癌周组织nm23-H1蛋白和CD31蛋白的表达;并计数CD31标记的肿瘤组织微血管密度。[结果]甲状腺乳头状癌组织中nm23-H1阳性表达率为65.46%,均高于癌周组织,差异有统计学意义（P〈0.01）;微血管密度（MVD）与nm23-H1的表达之间存在负相关关系。[结论]nm23-H1抑制甲状腺癌肿瘤微血管形成,在抑制肿瘤转移中起重要的作用。     

三种抑癌基因产物在NSCLC表达的临床与病理研究

为探讨ｐ５３、ｎｍ２３,ｐ１６基因产物在肺癌表达的临床意义,采用链霉抗生素蛋白－过氧化物酶（ｓ－ｐ）快速免疫组化法检测了６４例ＮＳＣＬＣ（非小细胞型肺癌）患者肺癌组织及配对淋巴结组织三种基因产物的表达。结果显示：肺癌组织ｐ５３表达阳性率达７６．５６％（４９／６４）,ｎｍ２３蛋白阳性为６０．９４％（３９／６４）,ｐ１６蛋白缺失率４８．４％（３１／６４）。５１．５６％呈阳性表达,阳性表达中很可能存在突     

CD44v6和nm23-H_1的表达对大肠癌淋巴结转移的影响

目的　探讨CD44v6和nm2 3-H1基因产物表达与大肠癌淋巴结转移的关系。方法　应用SP免疫组化染色法 ,对 76例大肠癌标本进行CD44v6和nm2 3-H1基因产物测定。结果　CD44v6基因产物的高表达和nm2 3-H1基因产物的低表达与大肠癌淋巴结转移有关 (P <0 .0 1)。大肠癌CD44v6和nm2 3-H1表达无相关性 (P >0 .0 5 ) ,但CD44v6阳性表达伴nm2 3-H1阴性表达的患者发生淋巴结转移的可能性大。结论　CD44v6和nm2 3-H1与大肠癌淋巴结转移密切相关 ,两者在淋巴结转移中起协同作用 ,联合检测对判断大肠癌淋巴结转移是一个有用的指标。     

血管内皮生长因子与nm23-H1基因在青年女性乳腺癌组织中的表达及其与预后之间的关系

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)及nm23-H1基因在青年女性乳腺癌组织中的表达及其与预后间的关系。方法应用免疫组化方法检测48例青年女性、30例绝经后乳腺癌组织及10例乳腺纤维腺瘤组织中VEGF及nm23-H1基因的表达情况,分析他们之间及其与临床病理指标之间的关系,并随访患者5年生存率。结果青年组较绝经组患者淋巴转移率高(P<0.01);青年组与绝经组患者组织中,VEGF及nm23-H1的表达差异皆有显著性意义(P<0.01);青年组、绝经组以及乳腺纤维腺瘤组,两者表达差异也有显著性意义(P<0.01,P<0.01);各组中腋窝淋巴结转移者和未转移者VEGF及nm23-H1的表达差异均有显著性意义(P<0.01);各组中VEGF及nm23-H1的表达与组织分化程度无关(P>0.05);青年乳腺癌组织中VEGF与nm23-H1基因表达成负相关(P<0.01),随访发现:青年乳腺癌患者nm23-H1阳性者5年生存率显著高于p53阳性者生存率(P<0.05)。结论VEGF及nm23-H1基因的表达状况标志着青年乳腺癌恶性侵袭程度,因而二者可作为青年乳腺癌患者极有价值的生物学预后指标。     

CK19及nm23-H1基因联合检测在胃癌淋巴结微转移中的研究

目的 研究胃癌淋巴结微转移情况以判断肿瘤预后，指导肿瘤的综合治疗。方法 采用RT-PCR方法对胃癌上皮及淋巴结进行CK19mRNA的检测及胃癌上皮细胞nm23-H1mRNA的检测。结果 6例正常淋巴结无CK19mRNA表达，20例胃癌组织均有CK19mRNA表达，其中有12例淋巴结存在CK19mRNA表达，占60%，而病理组织学检查只有4例存在淋巴结转移，占20%，另外该12例有淋巴结转移的胃癌组织中有9例nm23-H1mRNA低表达，结论 应用RT-PCR方法对胃淋巴结CK19mRNA及胃癌组织nm-H1mRNA进行联合检测，可提高胃癌淋巴结微转移的早期诊断率。     

转移抑制基因NM23-H1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移抑制基因(nm23-H1)mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其与NSCLC临床病理特征间的关系。方法采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量反转录聚合酶链反应(real-time qRT-PCR)方法检测48例NSCLC癌组织、10例癌旁正常肺组织以及10例良性疾病肺组织中nm23-H1 mRNA的表达水平。结果 nm23-H1 mRNA在NSCLC组的表达水平为(0.599±0.566),明显低于癌旁组的(1.232±0.328)及良性疾病肺组的(1.443±0.427)(P<0.01);NSCLC组中NM23-H1的低表达与肿瘤病理类型、癌细胞分化程度、淋巴结转移和临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄、性别以及吸烟情况无关(P均>0.05)。结论 NSCLC组织中nm23-H1低表达,其表达量降低与NSCLC的侵袭、转移和预后有关。     

血管内皮生长因子与nm23-H1基因在青年女性乳腺癌组织中的表达及其与预后之间的关系

OBJECTIVE: To investigate the expressions of vascular endothelial growth factor (VEGF) and nm23-H1 gene in breast cancer tissues and their relation to the prognosis in young women. METHODS: The expressions of VEGF and nm23-H1 gene were detected using immunohistochemical method (SP) in the breast cancer tissues of 48 young and 30 postmenopausal women with breast cancer and in breast fibroadenoma tissues of 10 patients for analysis of the association of the expressions with the patients' clinical and pathological characteristics, with also observation of the 5-year survival rate in each patient group. RESULTS: The rates of axillary lymph node metastasis was higher in the young women than in the postmenopausal women, who also had significantly different rates of VEGF and nm23-H1 expressions in the breast cancer tissues (P<0.01, P<0.01 and P<0.05, respectively); between the two breast cancer groups and breast fibroadenoma group, the expressions were also different (P<0.01). In both young and postmenopausal women with breast cancer, patients with axillary lymph node metastasis had significantly higher positivity rate of VEGF expression than those without (P<0.01 and P<0.01), but the reverse was found true in the expression of nm23-H1 gene. VEGF expression was inversely correlated with nm23-H1 expression in young patients (P<0.01), and the 5-year survival rate of patients with nm23-H1 gene expression was higher than that of p53-positive patients (P<0.05). No significant correlation of VEGF and nm23-H1 expressions with the differentiation of the tumor was found (P>0.05). CONCLUSION: The expressions of VEGF and nm23-H1 indicate the angiogenetic activity and invasion of breast cancer, and have a close relation to the prognosis in young women.     

乳腺癌CD44和nm23基因表达与侵袭转移的关系

目的：探讨粘附分子CD44和抑癌基因nm23与乳腺癌侵袭转移的关系。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）方法对30例乳腺癌及10例乳腺良性肿瘤组织中CD44V6和nm23-H1基因的表达进行检测,结果：乳腺癌组织中CD44V6及nm23-H1的表达明显高于乳腺良性肿瘤;CD44V6和nm23-H1的阳性表达与乳腺癌的临床分期和是否有淋巴结转移密切相关,而与乳腺癌的病理类型无关。结论：CD44V6和nm23-H1异常表达是乳腺癌发生发展,浸润转移的重要分子学改变。同时检测两者可更好地预测其进展程度和对淋巴结转移的判断。     

肿瘤转移相关基因mts1及nm23-H1在肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系

目的探讨转移相关基因mts1及nm23-H1在人肺癌中的表达及其与淋巴结转移的关系.方法对手术切除后新鲜的26例肺鳞癌和13例肺腺癌组织标本采用地高辛标记的mts1及nm23-H1 cDNA探针进行原位杂交.结果26例鳞癌中,淋巴结转移组11例,mts1 mRNA阳性表达9例,阳性率82%,nm23-H1 mRNA阳性表达8例,阳性率73%;无淋巴结转移组15例,mts1 mRNA阳性表达4例,阳性率27%,nm23-H1 mRNA阳性表达10例,阳性率67%.13例肺腺癌中,淋巴结转移组5例,mts1 mRNA阳性表达4例,阳性率80%,nm23-H1 mRNA阳性表达4例,阳性率80%;无淋巴结转移组8例,mts1 mRNA阳性3例,阳性率38%,nm23-H1 mRNA阳性表达6例,阳性率75%.结论mts1 mRNA表达在肺鳞癌的淋巴结转移与非转移组之间相差显著,在肺腺癌的淋巴结转移组与非转移组之间差异性无统计学意义;nm23-H1 mRNA表达在肺鳞癌、腺癌的淋巴结转移组与非转移组之间差异性不显著.