暴发性肝衰竭中Fas及caspase-3与肝细胞凋亡的关系

目的研究在暴发性肝衰竭（fulminant hepatic failure，FHF）中Fas及caspase-3表达与肝细胞凋亡的关系。方法联合应用脂多糖（LPS）和D-氨基半乳糖（D—GalN）制备FHF小鼠模型；采用免疫组化方法检测肝组织Fas表达，原位杂交方法检测肝组织caspase-3表达，TUNEL法检测肝组织肝细胞凋亡；在用药后2、4、8和12h动态观察Fas、caspase-3表达及肝细胞凋亡变化。结果在FHF模型小鼠中，用药后8h可出现典型的肝细胞凋亡表现，12h仍存在肝细胞凋亡。用药后2h开始Fas有少量表达，至8h和12h表达均很多，二者比较差异无显著，与2h组比较P〈0．01，与4h组比较P〈0．05。用药后2hcaspase-3少量表达，8h达最高峰，12h较8h减少，8h与2h比较，P〈0．01，与4h和12h比较P〈0．05。Fas和caspase-3表达相一致。结论在FHF中，肝细胞凋亡的发生与Fas及caspase-3的表达增加有关，且Fas介导肝细胞凋亡的过程与caspase-3的激活有关。     

Bcl-2蛋白及caspase-3基因表达与暴发性肝衰竭肝细胞凋亡关系的研究

目的：研究Bcl-2蛋白与caspase-3基因表达在实验性暴发性肝衰竭（FHF）中对肝细胞凋亡的作用。方法：用脂多糖和D-氨基半乳糖制备FHF小鼠模型；免疫组化法检测肝组织内Bcl-2蛋白表达；原位杂交法检测肝组织内ccqspcqse-3基因表达；缺口原位末端标记技术检测肝细胞凋亡。结果：模型组用药后2h Bcl-2有较多表达，4h表达最多，以后逐渐减少，4h与2h比较差别显著（P〈0．05），与8h、12h比较差别十分显著（P〈0．01）。模型组用药后2h caspase-3开始少量表达，8h达最高峰，并出现典型的肝细胞凋亡改变。12h表达下降，且同时存在肝细胞凋亡和坏死。Bcl-2与caspase-3表达及肝细胞凋亡均呈负相关。结论：在FHF中，肝细胞凋亡与caspase-3的激活有关；Bcl-2可能通过抑制caspase-3的活性而抑制肝细胞凋亡。     

人骨髓间充质干细胞体外分化为肝样细胞的实验研究

目的 探索肝细胞生长因子（HGF）联合成纤维细胞生长因子-4（FGF-4）诱导人骨髓间充质干细胞（HMSCs）向肝细胞方向分化的能力，为生物人工肝及肝细胞移植等找到新的种子细胞来源。方法 分别用HGF、FGF-4、HGF＋FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞：以未加诱导因素的HMSCs、L-02人肝细胞株为阴、阳性对照组。相差显微镜观察细胞形态的变化：在不同诱导分化阶段免疫细胞化学染色检测AFP和CK18，并用图像分析法计算HMSCs的分化比率；免疫荧光细胞化学染色法检测AFP、ALB的表达；RT-PCR检测AFP和ALB mRNA表达的情况。结果 HMSCs经诱导向肝样细胞转化，变成纺锤形、不规则圆形或多角形细胞。免疫细胞化学染色各诱导组均可检测出AFP和CK18表达，图像分析表明HGF＋FGF-4联合诱导分化的AFP、CK18阳性率最高，HGF次之，FGF-4则较弱；免疫荧光细胞化学染色发现各诱导组AFP、ALB均为阳性表达，而阴性对照组则为阴性表达；各诱导组RT-PCR均可检测出AFP和ALB mRNA的表达，而阴性对照组则没有表达。结论 HGF、FGF-4、HGF＋FGF-4均能诱导HMSCs分化为肝样细胞，分化的肝样细胞能分泌肝细胞特异性产物AFP、ALB、CK18等。以HGF＋FGF-4诱导HMSCs分化为肝样细胞的阳性率最高，HGF次之，FGF-4则较弱。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外诱导分化为肝细胞

目的：研究HGF、aFGF及OSM诱导MSCs成为肝细胞的能力及其在分化中的作用。方法：用HGF、aFGF、OSM诱导分化MSCs后,用化学发光法、RT—PCR法及谷氨酸脱氢酶法检测细胞AFP、ALB及尿素的表达情况。结果：除对照组外其余各组细胞均有AFP表达（P〈0．05）;对照组及a＋O组无ALB、尿素的表达,其余各组出现ALB及尿素的表达（P〈0．05）。结论：HGF联合aFGF、OSM及aFGF能够诱导MSCs分化为表达AFP、ALB、尿素的肝细胞;aFGF与OSM在没有HGF存在时不能诱导MSCs向较为成熟的肝细胞的分化。     

小鼠胚胎干细胞体外分化为肝细胞的实验研究

[目的]探讨小鼠胚胎干细胞(ESCs)分化为肝细胞的条件,为肝细胞移植寻找新的细胞来源.[方法]采用半固体培养D3胚胎干细胞系,形成胚胎体,加入或不加入细胞因子,在不同的时间点采用PCR方法对肝细胞的特异性蛋白甲胎蛋白(AFP)和白蛋白(ALB)进行检测.[结果]小鼠胚胎干细胞在小鼠白血病抑制因子(LIF)存在的情况下保持未分化生长状态,不表达肝细胞的特异性基因AFP和ALB,撤去LIF后在半固体培养基中很快发育为胚胎体并继续分化.分化8 d的胚胎体可以检测到AFP mRNA的表达,且其在8～18 d的胚胎体中表达逐渐增加.16 d的胚胎体开始检测到ALB mRNA的表达,它也表达在18 d的胚胎体,成纤维细胞生长因子(aFGF、bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)和神经生长因子(NGF)对胚胎干细胞向肝细胞分化在此培养体系中没有作用.[结论]胚胎干细胞经过胚胎体发育阶段,可分化为肝细胞,细胞因子aFGF、bFGF、HGF和NGF生长因子在此体系中无明显的作用.     

体外诱导小鼠胚芽干细胞分化为肝细胞的实验研究

目的寻找一种诱导小鼠胚芽干细胞向肝细胞定向分化的最佳诱导剂。方法分离提取孕11 d小鼠胚胎的原始生殖细胞,体外培养扩增后,一部分胚芽干细胞接种到6孔培养板中。向不同孔中分别加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、表皮生长因子（EGF）、β-神经生长因子（β-NGF）、维甲酸（RA）、肝细胞提取液进行诱导分化。另一部分胚芽干细胞与胎肝组织共培养。将培养12 d的细胞采用靛青绿摄入试验和白蛋白（ALB）免疫细胞化学染色来鉴定原始生殖细胞向肝细胞分化的情况。结果与胎肝组织共培养和添加了β-NGF、肝细胞提取液的胚芽干细胞能够诱导成肝样细胞,这些肝样细胞能够摄取ICG并表达ALB,上述3组细胞ALB阳性细胞数较对照组明显增多（P〈0.05）。bFGF、EGF、RA并无诱导分化作用。结论β-NGF、胎肝组织产生的细胞因子及肝细胞提取液中的细胞因子可诱导小鼠胚芽干细胞向肝细胞分化。     

胚胎干细胞向肝细胞定向诱导分化的体外实验研究

目的 探讨胚胎干细胞体外定向诱导分化为肝细胞的条件和机制。方法 选用Balb／c小鼠胚胎干细胞,经过拟胚体发育分化5d后开始定向诱导培养,将拟胚体转入白明胶处理的培养板中贴壁生长,在不同时间段分别在细胞培养基中添加酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)、肝细胞生长因子(HGF)等细胞生长因子进行肝细胞定向诱导。细胞分化过程的形态学变化用倒置显微镜追踪观察;用放免法对细胞培养上清中抗小鼠甲胎蛋白(AFP)和抗小鼠白蛋白(ALB)进行动态检测,用免疫细胞化学法检测肝细胞分化标记物AFP,ALB,CK8,CK18,并计算其阳性表达率(肝细胞分化率)。结果 胚胎干细胞在重组小鼠白血病抑制因子(LIF)存在的情况下保持未分化生长状态,撤去LIF后很快发育为拟胚体并继续分化。在第8天检测到上清中AFP出现,浓度为3．4n/ml,ALB在第11天开始检测到,浓度为0．2μg／ml,随培养时间延长,AFP和ALB浓度逐渐增加。第8天分化细胞开始出现AFP阳性,第10天出现CK8、CK18阳性,第11天出现ALB阳性,阳性细胞结构符合正常肝细胞结构特点。计算分化细胞中ALB阳性细胞率,得到肝细胞的分化率为30％。结论 胚胎干细胞经过拟胚体发育阶段,在特定培养条件和aFGF、HGF、等生长因子的作用下,可定向分化为肝细胞,这种细胞分化系统有望成为肝细胞替代疗法中的新型肝细胞来源。     

OCT4介导肝细胞去分化过程中巢蛋白的表达及意义探讨

目的探讨OCT4介导的原代肝细胞去分化过程中巢蛋白（nestin）的表达及其意义。方法体外分离培养小鼠原代肝细胞。包装、浓缩表达OCT4的慢病毒并感染肝细胞。观察细胞的形态变化,用RT-PCR法监测nestin、白蛋白（albumin,ALB）、甲胎蛋白（alpha-fetoprotein,AFP）以及叉头框A2（FOXA2）的表达并进行定量分析。结果 OCT4慢病毒感染后,肝细胞内颗粒逐渐释出,并在7 d左右开始出现肝细胞增殖。在肝细胞ALB减弱,AFP、FOXA2增强的过程中,nestin从第3天持续至第9天,表达逐渐增强,从12 d起开始减弱,至18 d时上述基因的表达几近消失。结论 Nestin的表达伴随肝细胞去分化和增殖的过程。     

小鼠骨髓间充质干细胞体内定向诱导分化与治疗肝功能损伤的实验研究

目的 观察小鼠骨髓间充质干细胞（MSC）在肝脏特定微环境下是否向具肝细胞表型与功能的细胞横向分化,并探讨其治疗肝功能损伤的可行性。方法 20只裸小鼠,随机分为4组,每组5只：A组：CCl4与橄榄油1：1混合,按1ml／kg腹腔注射,每周2次。1周后经尾静脉移植1×10^6GFP阳性MSC,术后继续注射CCl4,每周2次;B组：CCl4注射同A组,经尾静脉注入等量生理盐水;C组：正常小鼠,细胞移植同A组;D组：正常对照。术后4周处死全部受试动物,血清检测肝功能,HE、Masson染色行组织学观察,双荧光染色确认GFP阳性细胞并观察其是否表达肝细胞特异性蛋白。结果 A、B组受体肝纤维组织增生显示肝功能损伤模型制作成功,二组胶原分布百分比差异并无统计学意义（10．5±1．5vs12．7±1．6,t=-2．238,P〉0．05）。A组镜下可见GFP阳性细胞主要分布于汇管区及小叶间隔周围,部分同时表达白蛋白（35％±7％）;B、C、D组镜下均未见绿色荧光细胞。A组白蛋白水平明显高于B组（24．4g／L±3．3g／Lvs18．6g／L±2．9g／L,P〈0．05）,两组血清丙氨酸转氨酶（ALT）水平差异有统计学意义（121U／L±21U／Lvs192U／L±29U／L,P〈0．05）。结论 持续肝功能损伤可以有效诱导MSC向肝迁移增殖,部分MSC在肝细胞持续损伤的微环境下有向肝样细胞横向分化的潜能,提示MSC移植可以在一定程度上修复受损肝功能。     

c-Kit＋Lin -细胞体外扩增及体内分化的实验研究

目的：研究移植刚分选及扩增后雄性小鼠的骨髓c-Kit＋Lin-细胞到酒精性肝纤维化雌性模型小鼠体内后,模型小鼠的肝脏形态改变、肝功能变化和移植细胞的分布、分化及归巢情况。方法采用酒精灌胃法建立酒精性肝纤维化雌性小鼠模型,造模成功后随机选取8只模型小鼠（模型组）与正常小鼠8只（对照组）比较两组肝功能变化。剩余模型小鼠再随机选取32只,分为4组处理,并再随机选取8只正常小鼠（第1组）与其对照。模型小鼠的4组分别为：移植前取血处死组（第2组）,移植新鲜分选的c-Kit＋Lin-细胞组（第3组）,移植扩增后的c-Kit＋Lin-细胞组（第4组）,仅予以注射Buffer组（第5组）。采用免疫磁珠法分选雄性小鼠骨髓c-Kit＋Lin-细胞;利用SCF＋HGF＋FL＋LIF ＋TPO＋IL-3因子组合对其进行体外扩增;将刚分选及扩增后c-Kit＋Lin-细胞移植入酒精性肝纤维化雌性模型小鼠体内,检测两组肝功能改变、肝脏纤维化改善、含雄性小鼠Y染色体性别决定基因cDNA（Sry）的移植细胞在受体肝内定居分化情况。结果（1）两移植组在移植30天后,较移植前肝脏纤维化改善明显;（2）两移植组在移植30天后AST、ALT、ALB与移植前比较差异有显著性意义（P＜0．05）;（3）两移植组均可见含雄性小鼠Y染色体性别决定基因cDNA（ Sry）的移植细胞,并同时表达ALB mRNA,计数细胞比例,比较差异无显著性意义（P＞0．05）。结论移植c-Kit＋Lin-细胞后能在受体肝内定居并转化成有功能新生肝细胞;移植c-Kit＋Lin-细胞后能明显改善肝损伤小鼠的肝功能及肝脏纤维化;扩增对c-Kit＋Lin-细胞的归巢、在体内分化没有明显影响。     

Hepatic differentiation from embryonic stem cells in vitro

Objective To investigate an method for hepatic differentiation from embryonic stem cells (ES cells) in vitro and the resulting differentiation ratio, in order to develop a procedure for producing a new type of hepatocyte for hepatocyte replacement therapy in the treament of liver failure.Methods ES cells from Balb/C mice were cultured and maintained in an undifferentiated state in gelatin-coated dishes using Dulbecco’s modified Eagle’s medium (DMEM) containing 1000 U/ml leukemia inhibitory factor (LIF). Then, LIF was withdrawn from the DMEM to allow the ES cells to develop into embryonic bodies (EBs). EBs were plated onto tissue culture dishes, and growth factors such as acidicfibroblast growth factor (aFGF) and hepatocyte growth factor (HGF) were added to the medium to promote directional differentiation. The course of development and differentiation was observed dynamically using an inversion microscope. The expression of hepatic proteins, such as α-fetoprotein (AFP), albumin (ALB), cytokeratin 8 (CK8), cytokeratin 18 (CK18), in cytoplasm was analyzed by immunocytochemistry (ICC). The concentration of ALB in the medium was determined dynamically by radioimmunoassay (RIA). Results ES cells replicated as clones, without differentiating, in DMEM containing LIF. They developed into EBs in medium without LIF. Our ICC assay showed that differentiating cells did not express hepatic proteins, such as AFP, ALB, CK8, and CK18 until day 7, day 9, day 11, and day 11, respectively (up to 2 days later when growth factors are not present). The concentration of AFP in the medium was first detected on day 8, at a concentration of 3.4 ng/ml, and increased to 22.8 ng/ml by day 15. The concentration of ALB in the medium was 0.2 μg/ml on day 11, and increased to 2.2 μg/ml by day 15. ALB-positive cells under ICC manifest morphological structures were consistent with normal mouse hepatocytes. The differentiation ratio of hepatocytes in the ES cell differentiation system was 30％ on day 15 (significantly lower without the presence of growth factors).Conclusions ES cells can differentiate into mature hepatocytes. Growth factors, such as aFGF and HGF, can enhance this differentiation and produce sufficient numbers of functional hepatocytes. This method may be a reliable new way of differentiating ES cells into hepatocytes for use in replacement therapy in the treament of liver failure.     

体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究

目的：探讨大鼠骨髓间充质干细胞（mMSCs）在体外定向诱导分化为肝细胞及其方法。方法：采用梯度离心法分离纯化雄性SD大鼠的mMSCs。A组原代培养；B组原代培养分别加刺激因子50ng／ml肝细胞生长因子（HGF）和50ng／ml成纤维细胞生长因子4（FGF-4），倒置显微镜连续观察细胞分化过程的形态学变化。于培养的7、14、21、28d，细胞免疫荧光法检测各组细胞甲胎蛋白（AFP）、白蛋白（ALB）、细胞角蛋白18（CK-18）、细胞角蛋白19（CK-19）的表达。采用过碘酸希夫（PAS）染色法检测各组细胞糖原染色情况。结果：分离纯化B组大鼠的mMSCs，应用HGF和FGF-4诱导10d后变为肝细胞样圆形。细胞免疫荧光测定B组显示，培养第7dAFP即出现阳性，第21d表达明显减弱；第7dCK-19染色阳性，以后增强；第14d白蛋白与CK-18染色开始阳性，以后表达逐渐加强。A组在培养过程中不表达AFP、ALB、CK-18和CK-19。糖原染色显示，B组第14d开始阳性，-直持续到第28d；A组未见阳性染色。结论：大鼠mMSCs在较高浓度的HGF及FGF-4诱导下可分化为肝细胞。     

TGF-β1信号介导的肝星状细胞促进胚胎肝前体细胞向胆管细胞方向分化

目的 探讨转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1) 激活的小鼠肝星状细胞(mouse hepatic stellate cells,mHSCs) 对小鼠胚胎肝前体细胞(mouse hepatic progenitor cells, mHPCs) 分化的影响.方法 mHSCs细胞株加入10 ng /mL TGF-β1刺激48 h,并分为激活组(mHSCs- TGF-β1) 和对照组(mHSCs) .qRT-PCR和Western blot法检测mHSCs激活情况.采用荧光激活细胞筛选法(fluorescence-activated cell sorter,FACS) 分选DLK1(delta-like1 homologue) 表面抗原阳性的原代mHPCs,分选的细胞利用免疫荧光染色法观察甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP) 、白蛋白(albumin, ALB) 及细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19) 抗原表达情况.mHPCs与mHSCs Transwell共培养6 d后,分为mHPCs + mHSCs-TGF-β1组、mHPCs + mHSCs组和mHPCs组.细胞免疫荧光技术法和qRTPCR法检测分化标志物表达情况.结果 激活组mHSCs中TGF-β1、α-SMA、TGF-β-R1、Jagged1、VEGF、 HGF等mRNA和TGF-β1、a-SMA、TGF-β-R1、Jagged1等蛋白的表达量均较对照组明显增加(P＜0. 01);FACS新分选的mHPCs胞质中表达AFP和少量ALB,但不表达CK19;mHPCs + mHSCs-TGF-β1组mHPCs胞质中大量表达胆管细胞标志物,并且CK19、SOX9、Hes1等mRNA表达量均较其他两组明显增加,而其他两组mHPCs中ALB、AFP等的表达量明显增加(P＜0. 01) .结论 TGF-β1激活的肝星状细胞诱导胚胎肝前体细胞向胆管细胞分化.     

人胎肝干细胞体外分离培养及脾内移植的初步研究

目的 将人胎肝于细胞脾内移植2/3肝切除的严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠,观察其在受体小鼠内定植、迁移及分化的可行性.方法 ①以临床上自然流产废弃的孕期16～24周健康胎肝为供体,分离纯化胎肝干细胞,并行光镜、电镜观察及免疫细胞化学和流式细胞检测鉴定.②人胎肝干细胞经脾内移植到2/3肝切除的SCID小鼠.③免疫组化检测15、30、60、90 d受体小鼠脾脏和肝脏的人Hepatocyte、α1-AT、AFP的定位和表达.PAS染色检测受体小鼠各时间点脾脏组织糖原表达.④RT-PCR检测30、60、90 d受体小鼠脾脏组织AFP和白蛋白(Alb)基因的表达.结果 ①镜下观察分离细胞体积较小、约为肝细胞的1/6～1/3,核与浆比例大,内质网、线粒体和核糖体不发达.免疫细胞化学和流式细胞检测分别显示分离的人胎肝干细胞表达AFP、Thy-1、C-kit和CD34、CK19.②各时间点免疫组化均可检测到肝干细胞移植小鼠的肝脏和脾脏组织人Hepatocyte、α1-AT和AFP阳性表达.PAS染色显示各时间点受体小鼠脾脏组织不同程度的糖原表达.③人胎肝干细胞移植后30、60、90 d受体小鼠脾脏组织表达人AFP和Alb基因.结论 人胎肝干细胞经脾内移植可在异体内存活、定植并向受体受损肝脏迁移,在受体内增殖和定向分化为肝细胞.     

胎肝细胞的分离培养及其功能的研究

目的探讨人胎肝细胞分离、培养的简单方法并证实其具有近似正常肝细胞的功能。方法取水囊引产中期(4~6月龄)妊娠死胎,用两步灌注法分离胎肝细胞,观察细胞形态及存活情况,并以正常成人肝组织作正常对照,检测胎肝细胞五种基因的表达,进行光密度分析。结果经台盼蓝染色、FDA荧光染色观察,细胞培养后11天内均存活良好,最长可存活18天;新鲜分离、培养3、5、7、10天组胎肝细胞均可表达GAPDH(Glyceraldehyde Phosphate Dehydrogenase磷酸甘油醛脱氢酶)、ALB(Albumin白蛋白)、GS(Glutamine Synthetase谷氨酰胺合成酶)、CK(Cytokera-tin细胞角蛋白),经光密度分析证实,上述四种基因在培养肝细胞和正常成人肝细胞中的表达无明显统计学差异;AFP(Alpha Fetoprotein甲胎蛋白)基因表达明显强于正常肝细胞,并且于培养5天后呈显著的减弱。结论经分离、培养的人胎肝细胞存活良好,具有和正常成人肝细胞类似的基因表达。     

肝祖细胞移植对四氯化碳诱导急性肝衰竭小鼠模型肝损伤的修复作用

目的:观察肝祖细胞(HPCs)移植后不同浓度四氯化碳(CCl₄)诱导的急性肝衰竭小鼠模型肝脏修复情况,评价HPCs对肝损伤的修复能力,为评估HPCs移植疗效建立理想的肝衰竭模型。方法:96只ICR小鼠随机分为空白对照组、阴性对照组(0.1% CCl₄组、0.5% CCl₄组、2.0% CCl₄组、10.0% CCl₄组)和实验组(0.1% CCl₄+HPCs组、0.5% CCl₄+HPCs组、2.0% CCl₄+HPCs组和10.0% CCl₄+HPCs组)。空白对照组小鼠灌胃给予生理盐水,阴性对照组和实验组小鼠灌胃给予不同剂量CCl₄。CCl₄造模后1 d,将实验组和阴性对照组小鼠常规麻醉后切开腹腔,实验组小鼠经脾脏注射HPCs,阴性对照组小鼠注射等剂量无菌生理盐水。动态观察小鼠生命体征,监测其存活率;采血检测小鼠血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性;取肝脏计算肝脏指数;HE染色观察各组小鼠肝脏组织病理学变化;Hoechst33342标记外源性HPCs,激光共聚焦显微镜检测移植HPCs在肝脏中的分布情况及肝脏标志蛋白细胞角蛋白18(CK18)和白蛋白(ALB)的表达。结果:与空白对照组比较,0.1%和0.5% CCl₄组小鼠存活率、肝脏指数、AST和ALT活性无明显变化(P>0.05)。病理学检测,肝细胞有自我修复作用,HPCs移植治疗的效果不明显。与2.0 %CCl₄组比较,2.0%CCl₄+HPCs组小鼠AST和ALT活性及肝脏指数降低(P<0.01),存活率增加(P<0.01);病理学检测可见肝细胞再生和大量外源性肝细胞,CK18和ALB表达与内源性肝细胞相当,HPCs移植治疗有效。10.0%CCl₄组和10.0% CCl₄+HPCs组小鼠2 d内全部死亡,无法评估HPCs的治疗效果。结论:HPCs移植可提高急性肝衰竭模型小鼠存活率,改善AST和ALT活性,对肝损伤具有较强的修复能力;且2.0%CCl₄诱导的ICR小鼠急性肝衰竭模型能有效反映HPCs移植治疗的效果。     

小鼠c-Kit+lin-骨髓细胞移植生成肝细胞的实验研究

目的 评价小鼠c-Kit^＋Lin-骨髓细胞的肝干细胞潜能，为骨髓源性肝干细胞的临床运用提供可行性实验依据。方法 供体为纯系BALB／C雄性小鼠．c-Kit^＋Lin-骨髓细胞采用免疫磁珠分选法分离细胞。受体为行35Gy全肝照射处理后的同龄同系BALB／C雌性小鼠，立即移植供体c-Kit^＋lin-骨髓细胞。接受c-Kit^＋lin-骨髓细胞移植1月后，活杀取肝做常规病理学检查、Y染色体的原位杂交检查、甲胎蛋白与白蛋白的免疫组化检测。结果 移植1月后小鼠肝脏的组织结构已恢复正常．肝组织细胞中存在原位杂交和免疫组化均呈阳性反应的双阳性细胞。结论 小鼠c-Kit^＋Lin-骨髓细胞具有肝干细胞潜能，移植后可以在肝内定居并分化形成肝细胞。可做为肝病细胞移植疗法的种子细胞。     

丹参对大鼠肝缺血后残肝再生促进作用的初步观察

采用大鼠部分肝缺血后肝部分切除模型，研究了术后第１、３、７天残肝肝再生度、肝细胞有丝分裂指数（ＭＩ）、血清甲胎蛋白（ＡＦＰ）阳性率、血清谷丙转氨酶（ＳＧＰＴ）和白蛋白（ＡＬＢ）的变化，以及动物１０ｄ存活率。结果显示：丹参组ＳＧＰＴ和ＡＬＢ术后第７天恢复到正常水平，动物１０ｄ存活率为６６．７％（缺血组为２５．０％，Ｐ＜０．０５），术后第３天ＡＦＰ阳性率为８５．７％（缺血组为３３．３％，Ｐ＜０．０５），与缺血组比较，术后残肝再生度和肝细胞ＭＩ增加。结果表明，丹参对缺血残肝再生有明显促进作用。