转录因子FoxO4的研究现状

自1989年Weigle等首次从果蝇中发现第一个Fox基因即Forkhead以来,对该基因家族的研究就一直进行着.目前发现Fox家族共有19个(A-S)亚家族[1-2],FoxO(forkhead box subtype O,FoxO)是其中研究最深的一个亚类.在哺乳动物细胞中FoxO包括FoxO1、FoxO3a、FoxO4及FoxO6.尽管FoxO成员之间具有不同程度分子结构和生理效应上的相似性,然而各成员在组织中表达并不均衡,提示不同FoxOs 分子具有其独特的细胞功能.近年来研究发现,FoxO4通过转录调控及信号转导途径对机体的生理调节、代谢、应激抵抗和细胞凋亡、自噬等诸方面起重要作用,逐渐成为生命科学研究的热点.     

Notch信号通路介导的自噬改变在多囊卵巢综合征中的作用及机制研究

目的 研究Notch信号通路在大鼠多囊卵巢综合征(PCOS)发生过程中对自噬发生的调控机制.方法 通过来曲唑200μg/d灌胃的方式建立PCOS大鼠模型;实验分为对照组、来曲唑干预组(200μg/d)、Jagged1处理组、来曲唑+Jagged1处理组,21 d建模成功后观察各组血清中雌二醇(E2)、促卵泡生长激素(FSH)水平的改变;HE染色检测实验各组卵巢形态学变化;运用Western blot检测各组卵巢组织中自噬相关蛋白LC3和Beclin1及mTOR信号通路、Notch信号通路相关分子的表达改变.结果 与对照组相比,PCOS模型组血清中E2、FSH水平显著降低,卵巢组织形态学变化明显:模型组呈现病理性的改变,黄体结构较少,卵泡大量扩张,颗粒细胞层排列稀疏,无放射冠及卵母细胞存在,卵巢间质细胞出现增生;Western blot检测发现PCOS模型组自噬相关蛋白Beclin1、LC3蛋白表达水平升高;Notch信号通路也处于抑制状态,Notch1和Hes1蛋白在模型组均低表达.运用Notch信号通路的激活剂Jagged1处理后能够改善PCOS的病理改变,降低卵巢组织的自噬发生.结论 Notch信号通路介导的自噬改变参与了来曲唑诱导SD大鼠PCOS的病理进程.     

黄芪多糖调控Sirt1/FoxO1通路抑制多囊卵巢综合征大鼠颗粒细胞自噬的研究

目的探究黄芪多糖(APS)调控沉默信息调节因子1/叉头状转录因子O1(Sirt1/FoxO1)通路对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠颗粒细胞自噬的影响。方法大鼠中分离卵巢颗粒细胞并经促卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光鉴定,且CCK8检测APS对卵巢颗粒细胞增殖的影响。10~(-5)mol/L丙酸睾丸酮、10μmol/L C2-神经酰胺作用大鼠卵巢颗粒细胞24 h诱导PCOS大鼠颗粒细胞自噬模型,CCK8检测细胞增殖情况;透射电镜观察自噬体情况;免疫印迹法检测细胞中Sirt1、Fox O1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)蛋白表达情况。结果免疫荧光检测显示,FSHR蛋白在大鼠卵巢颗粒细胞中的平均阳性表达量93.18%90%,可进行接下来实验。0、100、200、400μg/mL APS处理正常卵巢颗粒细胞,在贴壁0、24 h比较,细胞OD_(450)差异均无统计学意义(P0.05)。与正常组相比,模型组细胞核附近出现大量自噬小体,双层、单层膜包裹胞质形成封闭、圆形结构,部分自噬小体内膜溶解,自噬小体周围可见单层膜结构包裹着一些被降解的胞浆、类似自噬小体结构;100μg/mL APS组与模型组细胞结构类似,随着APS剂量的升高,自噬小体数量减少,在400μg/m L APS组时细胞正常。正常组、模型组、100、200、400μg/mL APS组在细胞贴壁0 h时,细胞OD_(450)差异无统计学意义(P0.05)。细胞贴壁24 h,与正常组相比,模型组细胞OD_(450)降低(P0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平升高(P0.05);与模型组相比,100、200、400μg/mL APS组细胞OD_(450)升高(P0.05),细胞中Sirt1、Fox O1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平降低(P0.05)。结论 APS可以抑制PCOS大鼠颗粒细胞自噬,可能是通过抑制自噬通路Sirt1/FoxO1实现的。     

卵巢上皮性癌组织中肝癌缺失因子-1和Crk相关底物的表达

目的:探讨卵巢上皮性癌组织中肝癌缺失基因-1(DLC-1)和Crk相关底物(p130Cas)的表达及其与卵巢上皮性癌发生发展的关系.方法:分别采用RT-PCR和免疫组织化学技术检测卵巢上皮性癌组织和正常卵巢组织中DLC-1和p130Cas mRNA及蛋白的表达.结果:卵巢上皮性癌组织中DLC-1 mRNA和蛋白的表达低于正常卵巢组织(t=3.284,χ2=14.903,P<0.05),p130Cas mRNA和蛋白的表达高于正常卵巢组织(t=27.196,χ2=24.955,P<0.05).DLC-1 mRNA和蛋白的表达与临床分期(t=3.156,χ2=4.846,P<0.05)、淋巴结转移(t=2.944,χ2=5.939,P<0.05)和腹水(t'=2.470,χ2=6.074,P<0.05)有关,p130Cas mRNA和蛋白的表达与临床分期(t'=2.404,χ2校正:5.597,P<0.05)和淋巴结转移[t'(P)=2.507(0.018),P=0.021]有关.卵巢上皮性癌组织中DLC-1和p130Cas mRNA和蛋白的表达呈负相关(r=-0.375,P=0.015;rp=0.330,P:0.006).结论:DLC-1和p130Cas可能与卵巢上皮性癌的发生、浸润和转移密切相关,且二者在卵巢上皮性癌发生发展中可能存在负调控作用.     

红景天苷调控FoxO1/β-catenin通路对2型糖尿病骨质疏松大鼠的保护作用研究

目的探讨红景天苷(SDS)对2型糖尿病骨质疏松(DOP)大鼠的保护作用及叉头框转录因子O亚族1(Fox O1)/β-连环蛋白(β-catenin)通路的影响。方法高糖高脂饲养8周,8周后腹腔注射30 mg/kg链脲佐菌素(STZ),第10周无菌条件下去除卵巢构建DOP大鼠模型,建模成功后随机分为模型组、SDS组、Fox O1激动剂组,每组8只;正常组8只大鼠常规饲料正常饲养相同时间。造模成功后第2天予SDS组灌胃36 mg/(kg·d) SDS,Fox O1激动剂组灌胃40 mg/(kg·d)白藜芦醇(Res),连续11周。血糖仪检测空腹血糖水平;苏木精-伊红(HE)检测大鼠股骨组织形态;双能X射线吸收法测定股骨组织骨密度情况;活性氧(ROS)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒检测血清中ROS、SOD、MDA、GSH-Px水平;蛋白免疫印迹检测股骨组织中Fox O1、β-catenin蛋白水平。结果建模后给药前,与正常组相比,模型组、SDS组、Fox O1激动剂组空腹血糖水平升高(P<0.05)。给药后,模型组骨小梁出现明显断裂、破坏严重、数量减少;SDS组、Fox O1激动剂组骨小梁明显断裂,但空隙间隔有所缓解,数量有所增加。与正常组相比,模型组空腹血糖水平,血清中ROS、MDA水平升高(P<0.05);股骨组织骨密度,血清中SOD、GSH-Px水平,股骨组织中Fox O1、β-catenin蛋白水平降低(P<0.05)。与模型组相比,SDS组、Fox O1激动剂组空腹血糖水平,血清中ROS、MDA水平降低(P<0.05);股骨组织骨密度,血清中SOD、GSH-Px水平,股骨组织中Fox O1、β-catenin蛋白水平升高(P<0.05)。结论SDS可激活Fox O1/β-catenin通路,增强抗氧化应激作用,实现对DOP大鼠的保护。     

非动脉炎性缺血性视神经病变的线粒体DNA核苷酸改变

研究者整理了1组19例非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)患者和100例对照的全部线粒体DNA编码区,NAION患者的同义核苷酸和非同义核苷酸改变更常见(P<0.001),12例(11例为新发现的病例)存在可疑的病理改变,9例受累的蛋白质功能区的氨基酸已发生中、重度改变。线粒体功能障碍可成为NAION的危险因素。非动脉炎性缺血性视神经病变的线粒体DNA核苷酸改变@Bosley T.M.$King Khaled Eye Speci alist Hospital, PO Box 7191, Riyadh 11462, Saudi Arabia Dr @Abu Amero K.K. @Ozand P.T. @杨建刚…     

环磷酰胺对成年大鼠卵巢的损伤以及GnRHR在卵巢的表达

目的 探讨化疗药物对卵巢的损伤及其可能机制.方法 将成年SD大鼠分为2组:生理盐水组和环磷酰胺组.大鼠腹腔注射环磷酰胺;8周后固定一侧卵巢,连续切片,观察卵巢形态学改变并计数卵泡数目;免疫组化法检测GnRHR在卵巢的表达.RT-PCR法检测对侧卵巢GnRHR mRNA的表达.结果 环磷酰胺可引起卵巢皮质区原始卵泡发生大量丢失,卵巢间质严重损害,血管发生特征性病理改变;局部发生纤维化.GnRHR mRNA和蛋白质可表达于大鼠卵巢.与对照组相比,环磷酰胺组颗粒细胞GnRHR蛋白表达减少;化疗组GnRHR mRNA表达量低于对照组(P＜0.05).结论 GnRHR在化疗卵巢较低水平的表达,提示化疗晚期卵巢局部微环境的紊乱.     

FoxM1与恶性肿瘤相关性的研究进展

Fox M1是Fox基因家族中的一员,是一种与细胞增殖相关的转录因子。近年来大量的研究证实Fox M1在人类多种恶性肿瘤细胞中过表达,并且与肿瘤的分期相关。此外,Fox M1能通过对下游肿瘤相关基因调控来影响肿瘤的侵袭和远处转移,在肿瘤药物的耐药性方面也起到十分重要的作用,预示着Fox M1能够为肿瘤的诊断、评估和预后提供重要指标,并有望成为肿瘤治疗的新靶点。     

不同冷冻保护剂对冻融人卵巢组织形态学的影响

目的:比较两种冷冻保护剂对人卵巢组织形态学的影响,为人卵巢组织的最佳冷冻保护剂的选择提供实验依据.方法:获取12例活检人卵巢组织标本进行冷冻保存,每例标本随机分为新鲜对照组乙二醇(EG)组和丙二醇(PROH)组,冻融卵巢皮质块采用慢速冷冻法和快速解冻法,冻融前后的卵巢皮质分别进行光学显微镜观察(存活率等)和透射电子显微镜观察(亚细胞结构).结果:光镜观察新鲜对照组、PROH组及EG组的卵巢组织中卵泡正常率分别为(73.57±4.94)%、(68.40±12.31)%和(58.48士15.53)%.PROH组与新鲜对照组,卵泡正常率差异无显著性(P＞0.05),但EG组卵泡正常率低于新鲜对照组和PROH组,差异均有显著性(P＜0.05).透射电镜观察发现,卵巢组织中细胞的大部分超微结构保存良好.冷冻损伤细胞的超微结构主要表现为细胞浆内空泡,线粒体水肿、空泡化,核固缩等改变.EG组与PROH组相比,卵母细胞胞浆内可见更多空泡,基质细胞及颗粒细胞发生核固缩更多.结论:实验结果提示人卵巢皮质中细胞的大部分组织结构和超微结构能成功冷冻保存,冷冻损伤细胞的超微结构主要表现为细胞浆内空泡,线粒体水肿、空泡化,核固缩等改变.应用慢冻快融法冷冻人卵巢组织PROH可能比EG更为合适.     

体外受精与长效醋酸曲普瑞林治疗中的意外妊娠可增加妊娠期糖尿病的患病率

35例患者在体外受精(IVF)卵巢刺激前的黄体中期应用长效促性腺激素释放激素激动剂醋酸曲普瑞后获得意外妊娠。大多数上述患者的妊娠发生在IV F的第1次或第2次治疗前,且极易发展为妊娠期糖尿病,有显著相关性。这种意外妊娠中的妊娠荒废或先天性畸形发生率并未增加。体外受精与长效醋酸曲普瑞林治疗中的意外妊娠可增加妊娠期糖尿病的患病率@Mayer A. @Lunenfeld E. @Wiznitzer A. @E.Levi-tas$Dr.IVF Unit Department of Obstetrics and Gynecology, Soroka University Medical Center, P.O. Box 151, Beer-Sheva 84101…