脐带间充质干细胞治疗肌萎缩侧索硬化的安全性与有效性研究

目的观察人脐带间充质干细胞（UC—MSC）治疗肌萎缩侧索硬化（ALS）的临床效果及不良反应。方法ALS30例,给予UC—MSC静脉滴注联合鞘内注射治疗,每次静脉滴注约3×10^7个细胞,鞘内注射约7×107个细胞,1次为1个疗程。采用ALSFRS评分量表及APPEL评分对患者治疗前及疗程结束后1周、1个月、3个月时神经功能进行评定,对比治疗前及治疗后上述各项指标的变化,并对患者年龄、病程、治疗前病情严重程度（ALSFRS评分）与治疗后改善程度相关性进行分析。结果治疗后1周、1个月、3个月与治疗前相比ALSFRS评分升高（P〈0．05）,APPEL评分降低（P〈0．05）。治疗后1个月与治疗后1周相比ALSFRS评分升高（P〈0．05）,APPEL评分降低（P〈0．05）。治疗后3个月与治疗后1个月相比,ALSFRS评分升高（P〉0．05）,APPEL评分降低（P〉0．05）,差异无统计学意义。患者年龄、病程、性别与症状改善程度无明显相关性（P〉0．05）;治疗前神经损伤程度与改善程度呈负相关（P〈0．05）。结论US—MSC鞘内注射联合静脉滴注治疗ALS,在一定程度上可延缓病情进展,未出现严重不良反应。     

脐血源间充质干细胞治疗肌萎缩侧索硬化的临床研究

目的对脐血间充质干细胞（uMscs）治疗肌萎缩侧索硬化进行研究。方法将脐血间充质干细胞用腰穿的方法移植人肌萎缩侧索硬化患者的脑脊液中,术后给予鼠神经生长因子,比较患者治疗前后的变化。结果采用Norris评分量表,表明患者治疗前后的病情有显著改善,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论脐血间充质干细胞对治疗肌萎缩侧索硬化有一定的临床效果。     

骨髓干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化症转基因鼠的疗效

目的观察骨髓干细胞移植后肌萎缩侧索硬化症(ALS)模型鼠生存期和运动功能的变化。方法PCR法鉴定的6~9周龄ALS转基因阳性雌鼠(40只)分为ALS移植组(25只)和ALS对照组(15只),移植前5~7d给予5·5~6·5Gyγ射线预处理移植鼠;收取来自同窝正常雄鼠的全骨髓细胞,经尾静脉注射移植到移植鼠体内[(1~2)×107/只],ALS对照组尾静脉注射无血清培养基;评估移植物抗宿主病(GVHD)表现,移植8周后PCR法检测ALS移植鼠血基因组Y染色体的性别决定基因(Sry基因);与ALS对照组比较发病时间、生存期的改变,并以悬尾、转棒、转轮和牵引实验检测16~17周龄时两组ALS鼠的运动功能差别。结果部分移植鼠出现不同程度GVHD反应,GVHD总体评分1~2分,移植8周后检测移植鼠血基因组Sry基因结果呈阳性;ALS移植组比ALS对照组发病时间和生存期平均延后5周(P<0·01);16~17周龄时的悬尾、转棒、转轮和牵引实验检测结果显示移植组的运动功能比ALS对照组明显改善(P<0·01)。结论经静脉移植的正常小鼠骨髓干细胞能在ALS转基因阳性鼠体内长期存活,并可改善模型鼠的生存期、发病时间和运动功能,提示骨髓干细胞移植可能改善ALS预后的临床治疗前景。     

肌萎缩侧索硬化症的治疗

肌萎缩侧索硬化症(ALS)是运动神经元病的一种类型,病变累及上下运动神经元,其中大多为散发性,5%～10%为家族性.迄今为止,病因尚不清楚.调查显示,本病发病率为1/10万.     

应用胚胎干细胞移植治疗老年重症肌萎缩脊髓侧索硬化症的护理

<正>肌萎缩性脊髓侧索硬化症是一个渐进和致命的神经退行性疾病。临床表现为四肢肌肉逐渐萎缩、无力,直至瘫痪。晚期患者容易发生呼吸衰竭和吞咽困难,最终因肺部感染,病情迅速恶化,全身肌肉极度萎缩,痛苦而终[1]。目前,该病国际上尚无有效的治疗方法,以对症治疗为主。我院2009年10     

肌萎缩侧索硬化症

肌萎缩侧索硬化症(ALS)的电生理学诊断用的一直都是Lambert的诊断标准(1969),但临床确诊的ALS,初次肌电图检测未必都能完全满足此标准,在增加电生理内容后发表的EI Escorial诊断标准,明确了电生理学诊断在ALS诊断中的价值:凡是临床经过及神经病学所见疑为ALS的患者,必须施行电生理学检查,其目的是.     

肌萎缩侧索硬化症13例护理

目的: 总结肌萎缩侧索硬化症(ALS)的护理体会。方法: 对13例ALS患者进行心理护理、一般护理及呼吸衰竭护理。结果: 13例患者中3例出现明显焦虑、抑郁等心理问题,5例出现呼吸衰竭,4例合并吞咽困难,5例合并肺部感染。经治疗3~6个月,症状短时缓解7例,无明显变化4例,病死2例。结论: 加强心理护理,重视呼吸及吞咽等功能护理和防治感染,对ALS患者生活质量及预后至关重要。     

肌萎缩侧索硬化症预警分类处理程序

肌萎缩侧索硬化症（amyotrophic lateral sclerosism，ALS）又称运动神经元病，患者起病后平均存活时间仅为3年。晚期如并发肺部感染，由于肋间肌无力，患者咳痰无力，极易痰阻，迅速发生急性呼吸衰竭，严重者可导致死亡。目前主要的治疗手段是对症及支持治疗，消除各种并发症和不适，尽可能延缓病情发展，延长生存期。我院近年制定了一套ALS预警分类处理程序，经临床实践证明，能有效减少住院期间风险，现介绍如下：     

肌萎缩侧索硬化症24例临床分析

目的探讨肌萎缩侧索硬化症(ALS)的诊断.方法对24例ALS患者的临床资料进行回顾性分析.结果本组患者均出现上、下运动神经元损害的表现,病程呈进行性发展,肯定ALS为17例,拟诊ALS 6例,可能ALS1例.结论临床症状、体征以及肌电图是诊断ALS的依据.肌电图和肌活检是ALS诊断的重要辅助手段.     

尿酸与肌萎缩侧索硬化症关系的研究进展

尿酸是人体嘌呤代谢的终产物,主要经肾脏排泄。一直以来尿酸被认为是人体代谢的废物,尿酸水平增高可导致痛风、肾结石、高血压、冠心病、糖尿病和肾脏疾病的发生。但最新研究证实尿酸与尿酸盐在生理条件下是有效的自由基清除剂,高尿酸水平可能在某些神经变性疾病中起到积极作用。古老的生物学标记物对进一步研究疾病的发病机制提供了新的思路,并对临床监测病情和治疗提供了更多的可行性方案。此研究主要对尿酸在帕金森病、阿尔茨海默病以及肌萎缩性侧索硬化症三种神经变性疾病患者中的研究进展做一简要综述。     

脐带血间充质干细胞移植联合中药治疗肝硬化的临床研究

【摘要】目的探讨经外周静脉输注脐带血间充质干细胞移植联合口服中药治疗失代偿期肝硬化的临床效果及不良反应。方法22例肝硬化失代偿期患者采取外周静脉输注途径移植脐带血间充质干细胞,移植后＂-3天起连续给予口服中药汤剂10d,分别于移植术后观察患者临床症状、肝功能及不良反应。结果术后4周、8周肝功能明显改善（P〈0．05）,患者临床症状也有不同程度改善,未见明显不良反应和并发症发生。结论经外周静脉输注脐带血间充质干细胞移植联合口服中药治疗失代偿期肝硬化短期内有效、安全。     

脐带间充质干细胞早期单次移植治疗对急性脑梗死的神经功能恢复

目的：观察脐带间充质干细胞对急性脑梗死患者的神经功能恢复。方法：选择2012年1月～2013年12月我院收治的脑卒中患者16例为治疗组,选取16例脑梗死患者为对照组,所有患者均常规给予抗血小板,强化降脂,营养神经及康复训练等治疗。治疗组在梗塞后第3天行脐带间充质干细胞动脉介入移植治疗。3个月后行功能独立性评分（ FIM）。结果：对照组治疗前后FIM评分有统计学差异,（P＜0．05）,提示对照组治疗有效。治疗组治疗前后FIM评分有显著统计差异（P＜0．01）,提示治疗组治疗效果明显。但治疗组治疗后FIM评分与对照组治疗后FIM评分有统计学差异（P＜0．05）,提示治疗组治疗效果优于对照组。结论：脐带间充质干细胞早期一次性移植治疗急性脑梗死有明显临床效果,能够显著促进患者神经功能恢复。     

脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化患者神经系统功能的影响

目的:探讨脐血间质干细胞移植对肌萎缩侧索硬化(ALS)患者神经系统功能的影响.方法:移植脐血间质干细胞治疗8例ALS患者,选用"神经康复功能评定系统-V2003"软件对治疗前3 d、治疗后2～3月ALS患者的肢体运动(Carr-Shephard 评分)、构音障碍(Frenchay评分)、平衡能力(Berg评分)、功能独立性评定(FIM)各方面的功能进行评估.结果:移植治疗前ALS患者Carr-Shephard、Frenchay、Berg、FIM评分与治疗后比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:脐血间质干细胞移植治疗可以显著改善ALS患者的神经系统功能.     

人脐带间充质干细胞治疗失代偿期肝硬化的疗效观察

目的 观察人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUC-MSCs)治疗失代偿期肝硬化患者的疗效.方法 24例肝硬化失代偿期患者,经HUC-MSCs移植,于移植前、移植后1、2、4、8、12周检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBiL)、凝血酶原时间(PT)和白蛋白(ALB)平.于移植前、移植后8、12周分别行CT检查,观察临床症状改善情况及不良反应.结果 移植后2周各项肝功能指标无显著变化(P>0.05);移植后4周,ALT由(106±18)IU/L降至(82±12)IU/L,AST由(121±23)IU/L至(87±14)IU/L,较移植前明显改善(P<0.05),其余指标无明显改善;移植后8周各项肝功能指标均有改善(P<0.05).12周有显著改善(P<0.01).临床症状随时间进展逐步改善且无不良反应.肝脏最大横截面积改善(P<0.05),但肝脏CT值无显著变化(P>0.05).结论 HUC-MSCs移植可显著改善失代偿期肝硬化患者肝功能及临床症状,并能促进肝脏修复.     

脐带间充质干细胞对小胶质细胞增殖及活化的影响

目的 观察人脐带来源的间充质干细胞(hUC-MSCs)在正常环境和炎症环境下对小胶质细胞活化的调节作用,探讨hUC-MSCs对中枢神经系统炎症反应的免疫调节作用。 方法 将BV2细胞与人脐带间充质干细胞来源的条件培养基(hUC-MSCs-CM)和(或)脂多糖(LPS)共培养24或48 h后利用MTT比色法分析BV2增殖活力的变化,ELISA试剂盒分析BV2细胞上清中TNF-α和IL-6的变化,免疫印迹法检测精氨酸酶1(Arg1)的表达, Real-time PCR分析TNF-α、IL-6、ARG1基因的表达水平。 结果 (1)BV2在LPS长程刺激下表现出明显的增殖效应,而hUC-MSCs-CM可以抑制这种增殖反应;(2)炎症刺激诱导BV2表达TNF-α和IL-6明显增多,而在hUC-MSCs-CM和LPS共刺激时TNF-α和IL-6表达明显低于LPS单刺激组;(3)hUC-MSCs-CM共培养组BV2细胞高表达M2型小胶质细胞标志物Arg1。 结论 脐带间充质干细胞抑制炎症所致的小胶质细胞增殖;脐带间充质干细胞通过旁分泌机制调节小胶质细胞向M2型活化,降低促炎因子表达,这可能是其最终发挥神经保护作用的机制之一。     

谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨谷氨酰胺联合脐血间充质干细胞(MSCs)移植在大鼠肠缺血再灌注损伤中作用。方法体外复苏并培养脐血间充质干细胞移植前备用,观察CM-Di I荧光标记后脐血间充质干细胞的去向。80只SD大鼠随机分为正常对照组,缺血再灌注损伤组,谷氨酰胺组,MSCs移植组及联合组每组各15只。对照组采用生理盐水灌肠,损伤组采用TNB(S乙醇稀释)灌肠,在TNBS建模后1 h,谷氨酰胺组于尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg、MSCs移植组于尾静脉输入1×10~(10)/L脐血间充质干细胞悬液,联合组尾静脉输入谷氨酰胺0.45 g/kg+脐血间充质干细胞悬液1×10~(10)/L。通过ELISA法检测各组大鼠血清中肠脂肪酸结合蛋白(IFABP)、白介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)的含量;各组于再灌注1 h、3 h后检测肠组织含水率;通过RT-PCR、Western blot观察大鼠肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-k B、Bcl-2在谷氨酰胺联合MSCs移植后的mRNA和蛋白的表达情况。结果通过荧光示踪法观察到移植的MSCs细胞分布于肠粘膜淋巴组织内和腺上皮细胞间,表明MSCs可能参与了肠缺血再灌注损伤的修复过程。各组大鼠血清中SOD、IFABP、IL-6的含量变化比较,损伤组血清中IFABP、IL-6的含量较对照组显著增加,而谷氨酰胺组,MSCs移植组及联合组与之比较,则显著减少,联合组减少更为明显,损伤组血清中SOD的含量较对照组显著减少,而谷氨酰胺组,MSCs移植组及联合组与之比较,则显著增高,联合组增高更为明显(P0.05)。再灌注1 h和3 h,损伤组肠组织含水率均明显高于对照组;与损伤组相比,谷氨酰胺组、MSCs移植组及联合组肠组织含水率值均显著降低,联合组降低更为明显,而谷氨酰胺组、MSCs移植组差异无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,损伤组肠黏膜上皮细胞caspase-3、NF-k B的mRNA和蛋白表达明显上调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显下调(P0.05),而谷氨酰胺组、MSCs移植组及联合组与之比较,caspase-3、NF-k B的mRNA和蛋白表达明显下调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达明显上调(P0.05),谷氨酰胺组及MSCs移植组之间无统计学差异(P0.05),但两组与联合组比较,差异明显(P0.05)。结论谷氨酰胺组及MSCs移植后,明显减轻了大鼠肠缺血再灌注损伤程度,其可能通过抑制caspase-3、NF-k B表达和促进Bcl-2表达减轻肠黏膜缺血再灌注损伤。     

移植Toll样受体3处理脐带间充质干细胞对小鼠狼疮性肾炎的治疗效果及其机制

目的 探讨Toll样受体3（TLR3）激活对人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）移植治疗狼疮性肾炎（LN）的效果,并初步阐明其作用机制。 方法 培养hUC-MSCs并鉴定,10 mg·L^－1聚肌胞苷酸处理hUC-MSCs。45只MRL/Lpr雌性小鼠随机分为模型组、hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组,另取15只C57BL/6C雌性小鼠作为对照组;小鼠尾静脉注射hUC-MSCs或聚肌胞苷酸处理的hUC-MSCs。给药后,每2周测定1次小鼠24 h尿蛋白水平;8周后采血并取肾组织,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测各组小鼠血清中抗双链DNA（dsDNA）抗体水平和肾组织中肿瘤坏死因子α（TNF?α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素17（IL-17）水平。HE染色和PAS染色观察各组小鼠肾组织病理形态表现,免疫荧光染色检测各组小鼠肾组织中IgG和补体C3沉积。Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B（Akt）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和自噬相关蛋白表达水平。 结果 hUC-MSCs具有典型的间充质干细胞特征。与对照组比较,模型组小鼠血清中抗dsDNA抗体水平明显升高（P<0.05）,肾组织中TNF?α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显升高（P<0.05）,肾组织中出现肾小球系膜细胞增生、肾小管萎缩坏死和炎症细胞浸润现象,肾组织中IgG和C3沉积明显（P<0.05）,肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,而微管相关蛋白1轻链3Ⅱ（LC3Ⅱ）和酵母ATG6的同系物（Beclin1）蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。与模型组比较,给药4周时TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平降低（P<0.05）,6和8周时hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠24 h尿蛋白水平均明显降低（P<0.05）,血清中抗dsDNA抗体水平降低（P<0.05）,肾组织中TNF?α、IL-1β、IL-6和IL-17水平明显降低（P<0.05）,肾组织病变有一定程度的改善,肾组织中IgG和C3沉积减少（P<0.05）,且TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织改善更为明显;hUC-MSCs组和TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织中Akt和mTOR蛋白表达水平明显降低（P<0.05）,LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。与hUC-MSCs组比较,TLR3+hUC-MSCs组小鼠肾组织中LC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。 结论 TLR3能够增强hUC-MSCs移植治疗小鼠LN的作用,可抑制肾组织炎症反应并调节细胞自噬水平。     

运动神经元病体外器官模型的建立

目的:利用微孔膜器官型脊髓组织片培养的方法,加入适当剂量的线粒体功能抑制剂丙二酸钠,造成选择性运动神经元数目减少从而建立肌萎缩侧索硬化症(ALS)的体外器官模型.方法:取出生后6天的SD乳鼠的腰段脊髓冠状切片后将脊髓片置于微孔膜上进行培养,首先经丙二酸钠量效检测确定最佳丙二酸钠剂量.在培养第3天时加入适量的丙二酸钠,维持此浓度继续培养至第15天时结束培养,并利用免疫组化方法行运动神经元及中间神经元计数.结果:经丙二酸钠量效检测后确定2 mmol/L为最佳加入剂量(存活率为75%,P<0.01).造模实验结果显示,对照组的脊髓片内的运动神经元数目为每半侧(15.29±1.70)个,丙二酸钠组为每半侧(11.00±2.45)个, 两组比较差异有统计学意义(P<0.01);两组中间神经元的数目略有减少,但两组间差异无统计学意义.结论:利用微孔膜进行器官型脊髓片培养并加入2 mmol/L丙二酸钠造成的此病理模型符合运动神经元病患者的特点,可重复性强,适用于ALS的发病机制、治疗等方面的研究.