E26转录因子和VEGF在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义

目的 探讨E26转录因子(E26 transformation specific-1, Ets-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义。方法 在55例卵巢上皮性肿瘤以及12例正常卵巢组织中,采用免疫组化SP法检测其中Ets-1及VEGF蛋白的表达;原位杂交法检测组织中Ets-1mRNA的表达。结果Ets-1及VEGF在卵巢上皮性癌中的表达显著高于正常、良性及交界组(P<0.01)。FIGO Ⅲ-Ⅳ期组中Ets-1以及VEGF蛋白的表达均高于FIGO Ⅰ-Ⅱ早期组(P<0.05);肿瘤细胞低分化组中Ets-1的表达明显高于中高分化组(P<0.01);有淋巴结转移组中两者表达高于无淋巴结转移组(P<0.05);Ets-1蛋白和m RNA的表达显著相关(r_s为0.609,P<0.01);肿瘤组织中Ets-1和VEGF的表达密切相关(r_s=0.288,P<0.05)。结论 Ets-1和VEGF是卵巢上皮性肿瘤中重要的促血管生成因子,与肿瘤的发展转移及患者的预后关系密切。     

羟基红花黄色素A抑制异常增殖血管内皮细胞的机制研究

目的研究羟基红花黄色素A(HSYA)抑制异常增殖血管内皮细胞的作用机理。方法建立人结肠腺癌细胞LS180上清液和人脐静脉内皮细胞ECV304体外共培养模型,通过实时荧光定量PCR检测ECV304细胞中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(KDR)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)及其受体(b FGFR)、HSPG2、p53、c-myc mRNA水平的表达;ELISA法检测细胞培养上清VEGF、VEGFR(KDR)、b FGF、b FGFR蛋白的表达。结果在共培养细胞模型中,0.66、0.33 mg/L浓度的HSYA对血管生成促进因子VEGF及其受体KDR、b FGF及其受体b FGFR和癌基因c-myc及与细胞增殖相关蛋白多糖HSPG2的mRNA表达具有抑制作用;对抑癌基因p53 mRNA的表达具有促进作用。0.66、0.33 mg/L浓度的HSYA对血管生成促进因子VEGF及其受体KDR、b FGF及其受体b FGFR的蛋白表达具有抑制作用。结论 HSYA抑制新生血管的生成、抑制共培养模型中血管内皮细胞的异常增殖,其可能的作用机理是通过调控VEGF及其受体、b FGF及其受体、HSPG2、c-myc和野生型p53的表达发挥抗肿瘤作用,揭示HSYA可能是潜在的肿瘤血管生成抑制剂。     

VEGF受体flt-1和KDR在骨髓间充质干细胞中的表达及意义

目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)受体flt1和KDR在成人骨髓间充质干细胞(MSCs)的表达情况,探讨MSCs分化为血管内皮细胞的可能性。方法:采用Percoll(1.073g·mL-1)分离液分离骨髓单个核细胞,体外培养MSCs,流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度,在激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)下观察flt1和KDR的表达,RTPCR检测VEGF作用下flt1及KDR表达改变情况。结果:经Percoll分离、体外培养扩增的MSCs,细胞纯度可达95%左右;flt1和KDR定位于MSCs的胞膜及胞浆;经VEGF处理的MSCs和flt1mRNA的表达较对照组增强,KDRmRNA的表达无明显改变。结论:培养的MSCs在体外稳定扩增,具有VEGF受体,传导VEGF的刺激,在适宜的环境和诱导因子的作用下,MSCs有望分化为血管内皮细胞。     

VEGF对体外培养的人脐静脉内皮细胞Ets-1的诱导表达

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）对体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中转录因子Ets-1的诱导表达。 方法：原代培养获得HUVECs;应用细胞免疫化学染色技术及形态计量分析系统Image-Pro Plus（IPP）,检测VEGF对培养的内皮细胞Ets-1蛋白的诱导表达作用并对相关指标进行半定量分析。结果：VEGF（10 μg•L^-1）可诱导内皮细胞Ets-1蛋白的短时表达升高（P<0.01）,即随时间的延长,Ets-1表达也逐渐增强,在10 min时达高峰,30 min后Ets-1表达逐渐降低到无VEGF刺激的水平。 结论：VEGF可诱导人脐静脉内皮细胞中Ets-1蛋白的短时表达增加。     

去甲二氢愈创木酸对VEGF及其受体KDR基因表达影响的研究

目的：探讨去甲二氢愈创木酸（NDGA）对血管生成因子（VEGF）及其相应受体KDR基因表达状况的影响及其意义。方法：采用免疫组化、原位杂交及图像分析等技术方法观测NDGA作用下人恶性胶质瘤细胞系SHG－44细胞VEGF基因、人脐静脉内皮细胞系ECV－304细胞VEGF的相应受体KDR基因表达的变化。结果:①100μmol/L的NDGA处理胶质瘤细胞1－3d ,引起VEGF蛋白及mRNA表达水平的降低;②100μmol/L的NDGA处理内皮细胞1－3d,受体KDR的蛋白表达也呈下降趋势,且KDR基因表达的降 低较胶质瘤细胞VEGF的降低更为明显。结论：NDGA对胶质瘤细胞VEGF的表达有抑制作用,NDGA也抑制了内皮细胞KDR的表达,此抑制作用可能是NDGA抗血管生成的重要分子基础。     

Ets-1,MMP-9,VEGF在胃癌组织中的表达及意义

目的 观察胃癌组织中转录因子Ets-1、基质金属蛋白9（MMP-9）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达,并探讨其与临床病理因素的关系及意义.方法 采用免疫组化法检测52例胃癌组织中Ets-1,MMP-9和VEGF的表达.结果 52例胃癌组织中,Ets-1,MMP-9和VEGF表达的阳性率分别为73.1％,69.2％,65.4％;Ets-1,MMP-9和VEGF在胃癌中的表达高于癌旁组织（P值均＜0.05）,并且与浸润深度、淋巴结转移及临床分期相关（P值均＜0.05）;胃癌组织中Ets-1与MMP-9,VEGF表达呈正相关（r=0.438,0.390,P值均＜0.05）.结论 Ets-1,MMP-9和VEGF在胃癌组织中的表达差异具有显著性,并且与胃癌浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关,三者协同促进胃癌的发生及发展.     

Ets-1和MMP-9在淋巴瘤病理组织中的表达及其意义

目的探讨淋巴瘤（1ymphoma）患者病理组织中Ets-1和MMP-9蛋白的表达,并分析其相互关系与临床及预后的意义。方法采用免疫组织化学S-P法,检测了60例淋巴瘤和15例良性增生性淋巴结炎中Ets—l、MMP-9的蛋白表达。结果①Ets-1、MMP-9在淋巴瘤中的表达高于良性增生性淋巴结炎（P〈0．05）;Ⅲ、Ⅳ期淋巴瘤患者的Ets—1、MMP-9蛋白阳性率高于Ⅰ、Ⅱ期患者（P〈0．05）;淋巴结内组Ets-1表达阳性率高于淋巴结外病变组（P〈0．001）。②淋巴瘤病理组织中Ets-1表达率与MMP-9表达率间存在相关性。结论Ets-1、MMP-9蛋白在淋巴瘤病理组织中表达上调,可能是预测淋巴瘤侵袭转移和预后的相关因素。     

VEGF、Ets-1在骨巨细胞瘤中的表达及意义

目的：观察骨巨细胞瘤（GCT）中血管内皮生长因子（vascularendotheliumgrowthfactor,VEGF）、转录调控因子（Ets—1）的表达,探讨其临床意义,并作相关性研究。方法：30例骨巨细胞瘤标本分别按照Jaffe病理分级、临床分期、有无复发进行分组。应用S-P免疫组化方法检测标本组中的VEGF和Ets-1的表达。结果：30例标本中复发10例,复发率为33．3％,VEGF和Ets-1在GCT中的阳性表达率分别为70％（21／30）和36．7％（11／30）,Ets-1和VEGF在临床分期及预后各组中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。而在Jaffe病理分级组中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：VEGF和Ets-1在GCT中的表达与GCT的临床分期和复发有关,有助于评估肿瘤的预后。     

MMP-9与VEGF在成人肝血管瘤中的表达及其意义

目的：探讨MMP-9、VEGF、FLT1、KDR、FLT4在成人肝血管瘤中的表达及其临床意义。方法：收集成人肝血管瘤组织30例、正常肝组织15例,RT-PCR检测MMP-9、VEGF、FLT1、KDR、FLT4的mRNA表达,免疫组化法检测肝组织标本中MMP-9和VEGF的表达,蛋白质印迹法测定MMP-9蛋白的表达,明胶酶谱法检测标本中MMP。9和pro-MMP9的活性变化。结果：肝血管瘤中MMP-9mRNA的表达量明显高于正常组织,VEGF、FLT1、KDR、FLT4的mRNA表达未见明显差异;免疫组化的检测结果与mRNA的趋势一致;肝血管瘤中MMP-9蛋白的表达及活性亦较正常组织明显增高。结论：MMP-9在成人肝血管瘤组织中高表达可能与基质降解重塑、内皮细胞迁移及管状结构形成有关。     

血管内皮生长因子及其受体Flt-1在乳腺癌中的表达及意义

目的　试图揭示血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flt 1)在乳腺癌组织中的表达规律 ,探讨其与血管生成和肿瘤浸润、转移等生物学行为的关系。方法　应用原位杂交和免疫组织化学技术 ,检测 4 8例乳腺癌组织中VEGF和Flt 1的mRNA和蛋白表达特性。结果　乳腺癌细胞高表达VEGFmRNA和蛋白 ,阳性率分别为 75 %、70 8% ,而血管内皮细胞几乎不表达 ;血管内皮细胞主要表达受体Flt 1mRNA和蛋白 ,阳性血管数分别为 2 6个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 、2 4个 / 0 72mm2 ± 12个 / 0 72mm2 ,而少数癌细胞有少量表达 ;VEGF和Flt 1高表达组血管密度明显高于低表达组 ;VEGF和Flt 1表达与组织学分级和淋巴结转移密切相关。结论　VEGF以旁分泌途径促进乳腺癌血管形成 ,并参与肿瘤浸润和淋巴道转移过程 ,检测VEGF和Flt 1表达可做为判定乳腺癌血管生成、恶性度以及浸润转移等生物学行为的可靠指标。     

血管内皮细胞生长因子及其受体在大肠癌组织中的表达

目的观察血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）及其受体（ＫＤＲ）在大肠癌组织中的表达情况。方法利用免疫组化ＳＡＢＣ 法检测８０例大肠癌组织及１０例正常大肠组织中的ＶＥＧＦ及ＫＤＲ的表达。结果ＶＥＧＦ染色性物质主要位于肿瘤细胞 膜及胞浆,ＫＤＲ染色性物质主要位于癌组织及癌组织旁的血管内皮细胞上,大肠癌组织中ＶＥＧＦ和ＫＤＲ的表达阳性 率显著高于正常对照组织（Ｐ＜０．０１）,ＶＥＧＦ和ＫＤＲ的表达与肿瘤的分化程度及Ｄｕｋｅｓ分期密切相关（Ｐ＜０．０５）,与病理 分型无关（Ｐ＞０．０５）。结论ＶＥＧＦ和ＫＤＲ在大肠癌的发生和发展中起着重要作用,可反映大肠癌的恶性程度和进展情 况,并作为预后的指标。     

水通道蛋白1和血管内皮生长因子在宫颈癌组织中的表达及相关性

目的:探讨水通道蛋白1(AQP1)和血管内皮生长因子(VEGF)在宫颈癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组织化学方法对30例宫颈癌、20例宫颈上皮内瘤变及10例正常宫颈组织中AQP1和VEGF的表达进行检测。结果:AQP1和VEGF在宫颈癌组的表达高于宫颈上皮内瘤变组及对照组,3组之间差异有统计学意义;AQP1和VEGF的表达与宫颈癌病理分级及淋巴结转移相关,组织分化程度越差,二者的表达越高;在有淋巴结转移组中二者的表达高于无淋巴结转移组;不同临床分期、组织分型以及肿瘤大小宫颈癌组中AQP1和VEGF的表达均无显著统计学差异;二者的表达存在正相关。结论:宫颈癌组织中AQP1和VEGF呈高表达,提示2个因子在宫颈癌的发生、发展过程中起促进癌细胞生长、转移和血管生成的作用。     

髓母细胞瘤中血管内皮生长因子及其受体的表达和临床意义

目的探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及其受体激酶插入嵌合受体(kinase insert domain-containning receptor,KDR)在髓母细胞瘤中的表达情况及它们与肿瘤微血管密度(microvascular density,MVD)以及患者预后的关系。方法通过免疫组化方法测定VEGF、KDR在45例髓母细胞瘤和10例正常小脑组织中的表达,并结合临床资料,对病人生存时间与VEGF、KDR表达阳性率、肿瘤MVD之间关系进行分析。结果①正常小脑组织标本极少或不表达VEGF、KDR,而髓母细胞瘤标本多为不同程度的阳性表达;②生存时间长者KDR表达阳性率较低(r=-0.444,P<0.01);③VEGF与肿瘤MVD呈正相关(P<0.001),但是VEGF MVI与患者预后并无显著相关性。结论KDR在肿瘤细胞中的阳性表达率与髓母细胞瘤的预后呈负相关。髓母细胞瘤中KDR的表达水平可以作为判断病人预后的指标之一。     

血管内皮生长因子受体KDR在髓母细胞瘤中的表达及临床意义

目的　探索激酶插入嵌合受体 /胎肝激酶 - 1(kinase insert domain- containing receptor/ fetal liverkinase- 1,KDR/ Flk- 1)在髓母细胞瘤中的表达情况及其与预后的关系。方法　通过免疫组化方法测定 KDR在 5 0例髓母细胞瘤和 10例正常小脑组织中的表达 ,并结合临床资料 ,对病人生存时间与 KDR表达阳性率之间的关系进行分析。结果　 1正常小脑组织标本极少表达 KDR,而髓母细胞瘤标本多为不同程度的阳性表达 ,且以高阳性率为主 ,并发现阳性染色主要位于肿瘤细胞浆 ,部分内皮细胞中度或轻微着色。 2生存时间长者 KDR表达阳性率较低 (r=- 0 .5 2 7,P<0 .0 1)。结论　 KDR不仅在髓母细胞瘤血管内皮细胞中有表达 ,在肿瘤细胞中也有表达 ;KDR在肿瘤细胞中的阳性表达率与髓母细胞瘤的预后呈负相关。髓母细胞瘤中 KDR的表达水平可以作为判断病人预后的指标之一。     

血管内皮生长因子受体KDR胞外区基因对裸鼠人膀胱癌生长的影响

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)受体KDR胞外区基因对肿瘤新生血管的抑制作用.方法采用脂质体转染技术,将KDR胞外区基因的真核表达质粒pcDNA3.1/KDRn7转入人膀胱癌EJ细胞,用G418筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞克隆,经固相结合实验筛选得到表达与VEGF特异结合的目的蛋白的细胞克隆,阳性细胞克隆进行了RT-PCR鉴定.结果鸡胚测活表明,EJ细胞表达rKDRn7的能抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管形成;表达rKDRn7的EJ细胞株对裸鼠人膀胱癌生长及血管生成明显抑制,实验组的微血管密度(MVD)为12±4,阴性对照组62±11.结论阻断VEGF/KDR信号传导途径能够抑制肿瘤新生血管的形成,延缓肿瘤的生长速度.     

血管内皮生长因子及其受体在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的 :检测了食管鳞癌组织中血管内皮生长因子 ( VEGF)及其受体 ( Flk- 1 )的表达、分布。探讨二者在食管鳞癌浸润转移中的作用及临床意义。方法 :采用链霉菌抗生素蛋白 -过氧化物酶 ( S- P)免疫组织化学法检测 1 6例正常食管粘膜 ,45例食管鳞癌石蜡切片中 VEGF及 Flk- 1的表达及分布情况。结果 :45例食管鳞癌组织 ,VEGF阳性表达主要集中于癌细胞胞浆中 ,Flk- 1阳性表达主要在癌组织的血管内皮细胞及癌细胞中。正常食管粘膜仅 1例 VEGF弱阳性表达。VEGF及 Flk- 1阳性表达随食管鳞癌的临床分期升高 ,二者均有升高 ,且二者与强度等级显著相关 ( P<0 .0 5 )。有淋巴结转移的癌组织中 VEGF及 Flk- 1的表达明显高于无淋巴结转移的癌组织 ( P<0 .0 5 )。结论 :VEGF及 Flk- 1的表达与食管癌浸润、转移关系密切。VEGF及 Flk- 1可作为临床评价疗效及预后的一项重要参考指标     

血管内皮生长因子及其受体在人胃癌组织中的分布和意义

目的：探讨ＶＥＧＦ在固体肿瘤生长，进展，转移过程中的作用为通过阻断ＶＥＧＦ与其受体ＫＤＲ的作用治疗肿瘤提供依据。方法；采用免疫组织化学ＡＢＣ法对５０例人胃癌组织中的血管内皮生长因子及其受体的定位与分布进行研究。结果：５０％的胃癌组织表达ＶＥＧＦ，阳性物质主要位于肿瘤细胞胞膜及胞浆，ＫＤＲ染色阳性物质主要位于癌组织及癌组织旁的血管内皮细胞上。     

VEGF反义寡核苷酸对人胆囊癌细胞VEGF、Flt-1及KDR mRNA和蛋白水平表达的影响

目的 体外研究Oligofectamine介导的血管内皮生长因子（VEGF）反义寡核苷酸（ASODN）转染对人胆囊癌细胞VEGF、Fit-1及KDR在mRNA和蛋白水平的表达及生长增殖和凋亡的影响。方法运用Oligofectamine介导的VEGFASODN和SODN转染人胆囊癌细胞GBC-SD,半定量RT-PCR检测各组细胞VEGF、Fit-1及KDRmRNA转染前后不同时间的表达变化、ELISA测定转染后各组细胞培养上清液VEGF蛋白浓度。结果ASODN组及ASODN＋Oligofectamine组都能显著抑制VEGF、Fit-1及KDRmRNA的表达,且VEGFASODN＋Oligofectamine的抑制作用比ASODN更强（P〉0．05）。ELISA测定结果显示ASODN组及ASODN＋Oligofectamine组均抑制VEGF蛋白的分泌（P〈0．05）,且ASODN＋Oligofectamine组的VEGF蛋白浓度低于ASODN组（P〉0．05）。结论VEGFASODN能抑制人胆囊癌细胞VEGF、Fit-1和KDR在mRNA水平的表达和VEGF蛋白的表达,从而促进GBC-SD细胞的凋亡;Oligofectamine能明显增强VEGFASODN的抑制效果。     

VEGF mRNA、KDR mRNA及蛋白在非小细胞肺癌中表达的意义探讨

目的探讨非小细胞肺癌中血管内皮生长因子(VEGF)、受体KDRmRNA和蛋白表达的意义。方法应用原位杂交技术及免疫组织化学PV-9000法分别检测30例新鲜非小细胞肺癌标本中VEGFmRNA、KDRmRNA及蛋白的表达。结果VEGF、KDRmRNA和蛋白均主要分布在肺癌细胞、血管内皮细胞及纤维母细胞,肺癌细胞VEGFmRNA和蛋白的阳性率分别为66.67%(20/30)和60.00%(18/30),两者的表达有极显著正相关性(r=0.86,P<0.01);KDRmRNA和蛋白的阳性率分别为73.33%(22/30)和76.67%(23/30),两者的表达亦有极显著正相关性(r=0.7366,P<0.01);VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白在肺癌细胞中的表达均呈极显著性正相关(原位杂交r=0.853,免疫组化r=0.5148,均P<0.01);肺癌细胞VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白的阳性表达率在不同大小的3组肺癌标本间,差异均具有显著性(确切P=0.014,P=0.002;P=0.0087,P=0.0016);淋巴结有转移组的VEGFmRNA、KDRmRNA及相应蛋白在肿瘤细胞中的阳性表达率显著高于淋巴结无转移组者(确切P=0.007,P=0.003;P=0.0008,P=0.0073)。结论肺癌细胞产生的VEGF通过自分泌环作用于癌细胞上的KDR受体促进癌细胞生长;VEGF及KDR的检测可作为肺癌淋巴结转移的有效评估指标;VEGF及KDR有望成为肺癌治疗的新靶点。