炎症上调SREBP-1致C57BL/6J小鼠肝脏脂质积聚

目的：研究炎症是否通过影响核转录因子固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)而致C57BL/6J小鼠肝脏脂质的异常聚集。方法：将8周龄C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组(n=6)和炎症组(n=6)组,两组均喂以高脂饮食,炎症组小鼠皮下注射酪蛋白建立慢性炎症模型,对照组注射相应量磷酸盐缓冲液,18周后处死,测定血清中炎症介质水平及肝脏中的脂质水平,油红O染色观察肝脏脂质沉积情况,实时定量PCR和Western blotting检测肝脏炎症因子TNF-α、MCP1及脂肪酸合成相关基因SREBP1、ACCα、FAS的基因和蛋白水平。结果：与对照组相比,炎症组血清中的炎症因子IL-6和SAA水平以及肝脏中炎症因子MCP1 和 TNF-α的mRNA和蛋白水平均显著上升(P<0.05)。炎症状态下,肝脏甘油三酯和游离脂肪酸含量显著高于对照组(分别为0.21?0.07 vs 0.40?0.14mg/mg,P<0.05;3.80?0.58 vs 5.38?1.38nmol/mg,P<0.05)。油红O结果显示,炎症使脂质积聚更显著。SREBP1及其下游与脂肪酸和甘油三酯合成相关的基因ACCα,FAS的mRNA和蛋白水平在炎症组均显著上升(P<0.05)。结论：炎症可能通过上调SREBP1,加重脂质在肝脏的聚集。     

氟西汀对小鼠肝脏Ces1d,Ces1e和CYP3A11抑制作用及机制

目的探讨氟西汀对小鼠肝脏药物代谢酶(Ces1d,Ces1e和CYP3A11)的作用及机制。方法雄性C57BL/6N小鼠分为对照组(CON)、氟西汀低剂量组、氟西汀低剂量组和LPS组,分别腹腔注射等容积生理盐水、氟西汀10、20 mg/kg和LPS 2 mg/kg,连续3 d。提取肝脏组织蛋白,测定酶活性,Western Blot分析药物代谢酶(Ces1d、Ces1e、CYP3A11)、PXR和Stra13的表达。结果氟西汀明显降低小鼠肝脏总水解酶活性以及羧酸酯酶(Ces1 d,Ces1e)的表达(P<0.05、0.01);明显降低小鼠肝脏CYP3A11活性以及氧化酶(CYP3A11)的表达(P<0.05、0.01);氟西汀能浓度依赖性降低调节药物代谢酶的核受体PXR的表达(P<0.05、0.01),同时增加转录因子Stra13的表达(P<0.05、0.01)。结论氟西汀降低药物代谢酶(Ces1d、Ces1e、CYP3A11)的表达及活性可能与其降低PXR表达和增加Stra13表达有关。     

Role of KupffeR cells in fructose-evoked non-alcoholic fatty liveR disease

目的 探讨肝脏Kupffer细胞在果糖引起非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用及其可能的机制.方法 选取48只雌性ICR小鼠随机分为4组:对照组、果糖组、三氯化钆(GdCl3)组和GdCl3+果糖组.对照组与GdCl3组小鼠均饮用自来水,GdCl3组同时给予GdCl3(10 mg/kg,ip)每周2次;果糖组与GdCl3+果糖组小鼠均饮用30%果糖水溶液,GdCl3+果糖组小鼠同时给予GdCl3(10 mg/kg,ip)每周2次.喂养10周后剖杀所有小鼠,取血清检测甘油三酯(TG)含量;取肝脏组织制备石蜡切片用于病理学检查,制备冰冻切片用于油红O染色;其它肝脏组织用于RT-PCR、Western blot和肝脏TG含量检测.结果 果糖组小鼠血清和肝脏TG含量显著升高,肝脏组织HE和油红O染色显示小鼠肝脏脂质沉积明显,而GdCl3干预明显降低果糖组小鼠肝脏TG含量,同时肝脏脂质沉积明显得到改善;果糖组小鼠肝脏核蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)明显激活,其靶基因肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)等TG合成相关酶表达水平显著上调,而GdCl3干预明显抑制肝脏核蛋白SREBP-1c的激活及其靶基因上调.结论 果糖引起肝脏组织SREBP-1c激活导致肝细胞TG合成增加.肝脏Kupffer细胞激活在果糖诱导的小鼠肝脏SREBP-1c激活和脂质沉积中起重要作用.     

Kupffer细胞在果糖引起的非酒精性脂肪肝中的作用

目的探讨肝脏Kupffer细胞在果糖引起非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用及其可能的机制。方法选取48只雌性ICR小鼠随机分为4组:对照组、果糖组、三氯化钆(GdCl3)组和GdCl3+果糖组。对照组与GdCl3组小鼠均饮用自来水,GdCl3组同时给予GdCl3(10 mg/kg,ip)每周2次;果糖组与GdCl3+果糖组小鼠均饮用30%果糖水溶液,GdCl3+果糖组小鼠同时给予GdCl3(10 mg/kg,ip)每周2次。喂养10周后剖杀所有小鼠,取血清检测甘油三酯(TG)含量;取肝脏组织制备石蜡切片用于病理学检查,制备冰冻切片用于油红O染色;其它肝脏组织用于RT-PCR、Westernblot和肝脏TG含量检测。结果果糖组小鼠血清和肝脏TG含量显著升高,肝脏组织HE和油红O染色显示小鼠肝脏脂质沉积明显,而GdCl3干预明显降低果糖组小鼠肝脏TG含量,同时肝脏脂质沉积明显得到改善;果糖组小鼠肝脏核蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)明显激活,其靶基因肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)等TG合成相关酶表达水平显著上调,而GdCl3干预明显抑制肝脏核蛋白SREBP-1c的激活及其靶基因上调。结论果糖引起肝脏组织SREBP-1c激活导致肝细胞TG合成增加。肝脏Kupffer细胞激活在果糖诱导的小鼠肝脏SREBP-1c激活和脂质沉积中起重要作用。     

宫内生长受限子鼠肝脏脂肪代谢关键酶表达的研究

目的 通过检测胎儿宫内生长受限(intrauterine growth restriction,IUGR)子鼠肝脏中脂肪代谢关键酶及可促进脂肪合成的核转录因子固醇调节元件结合蛋白1c(SREBP1c)的表达,探讨IUGR个体发生脂肪性肝病的分子机制.方法 通过孕期低蛋白饮食法复制大鼠IUGR模型,采用定量逆转录-聚合酶链反应和Western blotting技术检测孕20 d(E20)胎鼠和12周成年子鼠(A12)肝脏中SREBP1c的mRNA和蛋白含量,同时检测肝脏脂肪酸合酶(FAS)和肝脂肪酶(HL)的表达变化.结果 IUGR成年子鼠肝脏三酰甘油浓度增加(P＜0.01).IUGR胎鼠和成年子鼠肝脏SREBP1和FAS的mRNA和蛋白表达均明显高于同龄对照,且FAS与SREBP1c的mRNA水平成正相关(均P＜0.05).IUGR胎鼠肝脏HL表达正常但成年后表达增高(均P＜0.05).结论 “胎儿程序化”影响使IUGR子代自围产期至成年肝脏中脂肪合成的调控因子SREBP1表达增加,诱导生脂酶FAS的表达,可能是成年肝脏脂质堆积及脂肪性肝病高发的机制之一.     

姜黄素对HepG2细胞脂质沉积的改善作用及机制研究

目的:探讨姜黄素对油酸诱导的HepG2细胞脂质沉积的影响及其作用机制。方法:将HepG2细胞分为对照组、模型组及姜黄素低、高剂量组。除对照组外,其他3组给予0.3 mmol/L油酸干预24 h,诱导细胞脂质沉积模型。造模后,姜黄素干预组分别予以50、100μmol/L姜黄素干预9 h。油红O染色观察各组细胞内脂质沉积情况,试剂盒检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量,PCR检测各组细胞固醇调节元件结合蛋白1C(SREBP1C)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶α(ACCα)的mRNA表达。结果:与对照组相比,模型组细胞内脂滴明显增多,TG、TC水平显著升高(P0.05,P0.01),SREBP1C及其下游基因FAS、ACCα的mRNA表达水平均显著升高(P0.01)。与模型组相比,姜黄素干预组细胞内的红色脂滴明显减少,TG水平显著降低(P0.01),SREBP1C、FAS、ACCα的mRNA表达水平均显著下调(P0.05,P0.01)。姜黄素低剂量(50μmol/L)对脂质沉积的改善作用更为显著。结论:姜黄素或通过下调SREBP1C、FAS、ACCα的表达,抑制脂质的合成,进而改善HepG2细胞的脂质沉积。     

二甲双胍治疗2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝疗效

目的 探讨二甲双胍(metformin,Met)对高脂联合链脲佐菌素(STZ)诱导的SD糖尿病大鼠肝脏沉积代谢的影响.方法 健康雄性7～8周龄SD大鼠随机分为高脂组(HF组,n=20)和普通饲料组(NC组,n=10),喂养8周后,以35 mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ得到2型糖尿病(T2 Diabetes Mellitus,T2DM)模型.成模大鼠再随机分成生理盐水组(DM+ saline组,n=10)和二甲双胍干预组(Met,500 mg/(kg.d),n=10),干预时间8周.干预结束后留全血标本并分离血清,收取肝脏组织并称重;检测全血和肝脏组织中的脂质水平;采用Western blot的方法测定小鼠肝脏组织脂代谢相关蛋白的表达.结果 模型组大鼠血清甘油三酯和胆固醇含量明显升高(P＜0.05);二甲双胍治疗后,血清胆固醇和甘油三酯明显降低(P＜0.05);DM大鼠肝功能和氧化应激得到了改善.肝脏组织学检测显示二甲双胍明显降低了肝脏中的脂质沉积;蛋白表达水平,二甲双胍治疗后改善了小鼠肝脏SREBP1及FAS表达水平.结论 二甲双胍干预可改善高脂饮食联合链脲佐菌素(STZ)诱导的SD大鼠的肝脏脂质沉积.     

葛根素通过Fetuin B-AMPK/ACC信号通路减轻2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗

目的 探讨葛根素通过Fetuin B-AMPK/ACC信号通路对高脂饮食联合链脲佐菌素诱导的2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素抵抗的调控机制。方法 C57BL/6J小鼠随机选取10只正常饮食作为正常对照组,其余40只通过高脂饲料喂养联合腹腔注射100 mg/kg链脲佐菌素建立2型糖尿病小鼠模型,造模成功后采用随机数字表法将小鼠分为模型对照组、葛根素低剂量组（Pue-50 mg/kg）、葛根素中剂量组（Pue-100 mg/kg）和葛根素高剂量组（Pue-200 mg/kg）,干预8周。末次给药后,尾静脉取血检测各组小鼠空腹血糖（FBG）,取血和肝组织;ELISA法检测各组小鼠血清空腹胰岛素（FINS）,肝脏甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸水平;HE染色法观察小鼠肝脏病理变化;免疫组化法检测小鼠肝脏Fetuin B含量;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测小鼠肝脏Fetuin B、AMPK、ACC mRNA表达;Western blot法检测小鼠肝脏Fetuin B、AMPKα1、ACC、P-AMPKαT183/T172、P-ACCS79蛋白表达。结果 末次给药后,Pue-100 mg/kg、Pue-200 mg/kg剂量组甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸及FBG低于模型对照组（P<0.01）;葛根素不同剂量给药组较正常对照组,FINS和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)降低（P<0.01）。与正常对照组比较,模型对照组小鼠肝脏 Fetuin B、ACC mRNA表达明显上升,AMPK mRNA表达降低（P<0.01）;Fetuin B、ACC蛋白表达升高,AMPKα1、P-AMPKαT183/T172、P-ACC S79蛋白表达降低（P<0.01）;病理学观察到肝脏脂肪变性明显,肝脏Fetuin B表达含量增加。与模型对照组比较,葛根素呈剂量依赖性抑制肝脏Fetuin B、ACC mRNA表达和Fetuin B、ACC蛋白表达,上调AMPK mRNA表达和AMPKα1、P-AMPK αT183/T172、P-ACC S79蛋白表达（P<0.01）。Pue-50 mg/kg给药组上调AMPK mRNA表达,下调ACCmRNA表达差异无统计学意义（P>0.05）。结论 葛根素可能通过调节肝脏Fetuin B-AMPK/ACC信号通路减轻2型糖尿病小鼠胰岛素抵抗,进一步改善糖脂代谢。     

内质网应激通过SCAP/SREBP-1c调控L02肝细胞脂质合成代谢

目的 在内质网应激状态下,观察SCAP/SREBP-1c对肝细胞脂质合成代谢的影响.方法 用毒胡萝卜素(Tg)诱导人L02正常肝细胞株建立内质网应激模型,Western blot检测GRP78的蛋白表达.甘油三酯(TG)试剂盒和油红O染色检测肝细胞内脂变程度;实时荧光定量PCR检测SREBP-1c下游脂代谢相关基因FAS、ACC1的mRNA表达情况,Western blot检测nSREBP-1c、FAS、ACC1的蛋白表达情况.通过miRNA瞬时转染沉默SCAP基因的表达,观察上述指标的变化情况.结果 实验组GRP78蛋白的相对表达量与对照组比较,均显著增加(P＜0.05),Tg在体外成功建立肝细胞内质网应激模型.与空白对照组相比,Tg组肝细胞内甘油三酯含量明显增加(P＜0.05),脂滴明显增多;nSREBP-1c的蛋白水平明显升高(P＜0.05);下游靶基因FAS和ACC1的基因和蛋白水平均明显上调(P＜0.05),与nSREBP-1c的升高趋势一致.转染SCAP-3 miRNA载体后,以上指标均明显下调(P＜0.05).结论 内质网应激通过SCAP/SREBP-1c调控肝细胞脂质合成代谢,促进脂质沉积,是NAFLD重要的发病机制之一.靶向干扰SCAP,能减轻内质网应激所致的肝细胞脂肪变程度,成为安全有效的NAFLD防治新靶点.     

去泛素化酶YOD1调控肝脏脂代谢的初步研究

目的：探索去泛素化酶YOD1在肝脏营养代谢中发挥的作用。方法：通过Q?PCR检测高脂饮食C57BL/6小鼠、db/db小鼠肝脏中以及油酸（oleic acid,OA）处理后的Hepa1?6细胞内,YOD1的表达情况。在C57BL/6小鼠中,通过Q?PCR法检测YOD1的组织分布及不同营养状态下的表达情况。对Hepa1?6细胞中给予OA处理,通过甘油三酯试剂盒检测细胞内甘油三脂含量,并利用油红染色观察细胞内脂滴。经Q?PCR和蛋白免疫印迹法检测细胞内相关基因的mRNA及蛋白水平。结果：短期高脂饮食后,肝脏中YOD1的mRNA水平显著下降。而与对照组db/+小鼠相比,db/db小鼠肝脏中YOD1的mRNA水平无变化。但是,经OA处理后,Hepa1?6细胞内的YOD1的mRNA水平明显减少。另外,YOD1主要表达于肝脏中。小鼠禁食后,肝脏YOD1的mRNA水平显著增加,而再喂食后显著下降。此外,过表达YOD1的Hepa1?6细胞中OA诱导的脂质堆积明显减少,且SREBP?1c的剪切被抑制。结论：本研究初步发现,去泛素化酶YOD1的表达水平受营养状态调控,并通过抑制SREBP?1c的剪切影响肝细胞的脂代谢。     

利拉鲁肽对人HepG2肝细胞脂代谢的影响及作用机制

目的:建立HepG2肝细胞脂肪变性模型,了解利拉鲁肽是否可改善HepG2细胞内脂代谢状态,并对相关机制进行初步探讨?方法:软脂酸钠诱导建立HepG2肝细胞脂肪变性模型,并给予利拉鲁肽干预?油红O染色确定HepG2肝细胞脂肪变性模型的建立?Western blot检测HepG2 中脂质合成和分解关键酶蛋白水平的变化情况及HepG2 中PI3K信号通路活化情况?采用PI3K信号通路抑制剂预处理HepG2 细胞,观察PI3K信号通路在软脂酸钠诱导建立HepG2肝细胞脂肪变性中的作用?结果:油红O染色结果显示模型建立成功?Western blot结果显示,软脂酸钠诱导可显著升高HepG2中固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein1c,SREBP1c)?脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)的蛋白水平,降低脂肪甘油三酯脂酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)的蛋白水平(P < 0.01),并上调HepG2中PI3K信号通路活化水平;与软脂酸钠组相比,利拉鲁肽干预可显著降低HepG2中SREBP1c?FAS 的蛋白水平,升高ATGL的蛋白水平,并抑制HepG2中PI3K信号通路活化水平;阻断HepG2中的PI3K信号通路后,软脂酸钠诱导HepG2脂肪变性的能力显著降低(P < 0.01)?结论:利拉鲁肽可通过调节HepG2中的PI3K信号通路,进而改善HepG2细胞的脂代谢情况?     

孕期维生素A缺乏对大鼠子代肝脏脂质合成的影响

目的 通过孕期维生素A(VA)缺乏大鼠模型,探讨孕期VA缺乏对子代肝脏组织中脂质合成的影响.方法 建立大鼠孕期VA缺乏模型,分VA正常(VAN)、VA缺乏(VAD)、VA缺乏后补充(VAS)3组,检测子代血脂水平;肝脏中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合成酶(FAS)、固醇调节元件结合蛋白(SREBP1)等脂质合成分子的mRNA表达变化;观察子代肝脏组织切片HE染色后脂滴沉积情况.结果 VAD组的HDL-C水平显著低于VAN组和VAS组(P＜0.05),而VAN组和VAS组之间差异无统计学意义(P＞0.05).TG水平在3组间差异有统计学意义(P＜0.05).VAD组ACC1、FAS、SREBP1 mRNA表达水平显著增加.VAD组肝脏出现较多的脂滴沉积,细胞质中有部分脂滴空泡;而VAS组和VAN组肝细胞排列规则,未见明显脂滴沉积.结论 孕期VA缺乏可诱发大鼠子代肝脏脂质合成通路的异常活化,造成质脂代谢紊乱.     

肝X受体的激活对小鼠糖尿病肝脏脂肪酸合成酶表达的调节

目的 探讨肝X受体(LXR)对糖尿病肝脏脂肪酸合成酶(FAS)表达的影响及机制.方法 将16周龄、雄性、C57BL/6背景下瘦素受体基因缺陷的db/db小鼠和对照的db/m小鼠,分别予以LXR激动剂TO901317(TO)(3 mg·kg-1·d-1)或DMSO灌胃处理7 d;TO(10 μmol/L)刺激人肝癌细胞系HepG2细胞24 h.此外,HepG2细胞转染小鼠FAS启动子报告基因表达质粒,同时转染pcDNA3.1表达载体或LXR或活化型固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1c)表达质粒12 h;采用免疫组织化学方法检测FAS蛋白在肝脏上的表达,实时荧光定量PCR和蛋白印迹方法分别在mRNA和蛋白水平检测FAS和SREBP-1的表达及TO对其表达的影响,荧光素酶报告基因方法检测LXR激动剂和SREBP-1c对小鼠FAS启动子活性的影响.结果 免疫组化结果显示FAS蛋白在肝脏广泛表达,主要位于肝细胞胞质内.TO可显著降低db/db小鼠空腹血糖水平[由(12.00±1.06)mmol/L下降到(7.73±0.69)mmool/L,P＜0.01]和糖化血红蛋白水平(由5.67%±0.10%下降到4.87%±0.08%,P＜0.01).db/db小鼠肝脏FAS mRNA水平明显高于db/m小鼠,约为5.5倍(P＜0.01);在蛋白水平,db/db小鼠肝脏上的FAS也明显高于db/m小鼠.TO处理可使db/m小鼠肝脏FAS mRNA表达升高约3.5倍(P＜0.05),可使db/db小鼠肝脏FAS mRNA升高约1.7倍(P＜0.05);TO处理可使db/m小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2.4倍(P＜0.05),使db/db小鼠肝脏SREBP-1 mRNA升高约2.1倍(P＜0.01).TO能够上调HepG2细胞FAS的mRNA表达水平,升高约1.9倍(P＜0.05);LXR的激活还能显著增加HepG2细胞中FAS基因启动子活性,约为对照组的1.5倍;过表达LXR或SREBP-1c也能增加HepG2细胞FAS基因启动子活性,分别为对照组的1.9倍和1.6倍(均P＜0.01).结论 LXR可能通过其本身的直接作用和SREBP-1C的间接作用上调肝脏FAS的表达,LXR可能介导了糖尿病肝脏的脂质生成过程.     

沙苑子总黄酮对肾阳虚高脂血症模型大鼠血脂、甘油三酯合成途径的影响

目的探讨沙苑子总黄酮(TFS)对肾阳虚高脂血症的治疗作用及其对肝脏甘油三酯(TG)合成途径的影响。方法 10周龄雌性SD大鼠,按体重随机区组法分为6组,即假手术组,模型组,雌激素组和TFS高、中、低剂量组,每组10只。双侧卵巢切除手术并连续给予6周高脂饲料复制肾阳虚高脂血症大鼠模型。假手术组和模型组灌胃生理盐水(10 m L/kg),雌激素组灌胃戊酸雌二醇(0.2 mg/kg),其余分别灌胃TFS 28.5、57、114 mg/kg,持续给药8周。检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),酶免法检测肝脏脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性和甘油三磷酸酰基转移酶(GPAT)、肉毒碱棕榈酰转移酶-1α(CPT-1α)、乙酰辅酶A氧化酶(ACO)水平,免疫组化法检测肝脏固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)蛋白表达。结果与模型组相比,TFS高剂量组大鼠血清TG、TC、LDL-C水平显著降低(P0.05,P0.01),血清HDL-C水平显著升高(P0.05);肝脏ACC活性和GPAT水平显著降低(P0.01,P0.01),ACO、CPT-1α水平显著升高(P0.01,P0.05);肝细胞膜SREBP-1c蛋白表达量显著降低,肝细胞核PPARα蛋白表达量显著增加。结论实验结果表明TFS具有良好的调节血脂代谢的作用,其作用机制可能是通过抑制肝脏SREBP-1c表达,降低TG合成途径中限速酶FAS、ACC、GPAT的活性及水平;上调PPARα蛋白表达,提高脂肪酸β氧化途径中ACO、CPT-1α的表达水平,两者共同发挥作用抑制肝脏中TG的合成,达到调脂作用。     

AMPK参与调节大鼠脂肪肝相关性肝癌前病变的形成

目的 探讨单磷酸腺苷活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)在低剂量二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine, DEN)合并高脂饮食诱导的大鼠肝癌前病变发生中的作用及其机制。方法 体内实验采用腹腔注射DEN(30 mg/kg)合并高脂饮食饲喂大鼠16周诱导肝癌前病变模型,通过HE染色、Western blotting、Real-time PCR、免疫组织化学等方法观察谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase-π,GST-π)、固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein-1c, SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase,ACC)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)及AMPK、p-AMPK的表达变化;体外实验观察AMPK对棕榈酸(palmitic acid, PA)诱导的大鼠H4IIE细胞脂质代谢的影响。结果 与单纯DEN处理组比较,DEN+高脂组大鼠肝细胞脂肪变性、气球样变、伴有炎性细胞浸润及小灶性坏死;GST-π表达水平增高;三酰甘油(triglyceride,TG)及SREBP-1c、FAS、ACC、SCD1表达水平上升;p-AMPK水平下降。AMPK通过抑制SREBP-1c的表达水平降低棕榈酸诱导的H4IIE细胞内脂质合成。结论 AMPK可能通过抑制SREBP-1c的表达水平参与大鼠肝癌前病变的形成。     

大叶茜草素对高脂诱导小鼠非酒精性脂肪肝的影响

目的 探讨大叶茜草素(SW)对高脂饲料诱导的小鼠非酒精性脂肪肝(Nonalcoholic fatty liver dis-ease,NAFLD)的作用机制.方法 将120只雄性C57小鼠随机分为正常组,模型组,阿托伐他汀组,SW低、中、高剂量组.正常组小鼠食用标准饮食,其他各组小鼠均采用高脂(含有59.3％脂肪)饲料喂...     

Effects of Insulin Treatment on Intracellular Lipid Metabolism in Liver of Diabetic Rats

Withtherecognizedneedforstrictglycemiccontrolinthepreventionofcomplications,strate giesforaggressivetreatmentmustbeputintoeffect.Hence,theuseofinsuliniswiderandwi der,somuchastheearlyuseofinsulinisempha sized.Asitiswildlyknownthatinsulinisalipo genesishormone,andtype2diabetesarefrequent lyassociatedwithfattyliver,thisstudywasthere foredesignedtoexploretheeffectsofinsulintreat mentonhepaticintracellularlipidcontentandlipidmetabolisminliverinhigh fatfeedingtype2dia beticratsandthepossiblemechani…     

不同摄食模式对小鼠生物钟及脂质代谢基因节律的影响

目的：研究不同摄食模式对ICR小鼠脑内及肝脏生物钟基因表达的影响。方法：将90只雄性ICR小鼠分为自由摄食组、明期摄食组和暗期摄食组,每 组30只,12 h与12 h明-暗交替条件下喂养两周。以4 h为间隔,每组分别在08∶00、12∶00、16∶00、20∶00、0∶00、04∶00时间点各处死5只小鼠取脑和肝脏 ,检测各时间点小鼠脑和肝脏组织内各生物钟及钟控基因的表达。结果：与肝脏相比,脑内节律振荡器更易受摄食方式的影响;且暗期摄食使脑内Cry2、Per1 、Per2的峰值分别下调了81.8%、76.7%、85.9%,对脑内节律振荡器的影响更为显著。而暗期摄食条件下肝脏各生物钟基因的表达模式与自由摄食条件 下相似。此外,与自由摄食组相比,明、暗期摄食条件下,Rev-erbα和Dbp的峰值均明显下调（下调了50%、90.5%和70.6%、64.3%）,且Rev-erbα、 Dbp的表达模式在两种摄食条件下相反。明、暗期摄食条件下,肝脏脂质代谢基因SREBP1-c、PPARα、FAS、CPT的表达模式不同,且明、暗期摄食均下调了 肝脏脂质代谢基因SREBP1-c和PPARα的表达水平（分别下调了81.8%、75.0%和4.75%、79.2%）。结论：改变固有的摄食方式会夹带小鼠脑和肝脏内节 律振荡器,肝脏中各节律振荡器均与摄食（时间）相偶联。     

Mechanisms of dysregulation of low-density lipoprotein receptor expression in HepG2 cells induced by inflammatory cytokines

Background Low-density lipoprotein (LDL) receptor is normally regulated via a feedback system that is dependent on intracellular cholesterol levels. We have demonstrated that cytokines disrupt cholesterol-mediated LDL receptor feedback regulation causing intracellular accumulation of unmodified LDL in peripheral cells. Liver is the central organ for lipid homeostasis. The aim of this study was to investigate the regulation of cholesterol exogenous uptake via LDL receptor and its underlying mechanisms in human hepatic cell line (HepG2) cells under physiological and inflammatory conditions. Methods Intracellular total cholesterol (TC), free cholesterol (FC) and cholesterol ester (CE) were measured by an enzymic assay. Oil Red O staining was used to visualize lipid droplet accumulation in cells. Total cellular RNA was isolated from cells for detecting LDL receptor, sterol regulatory element binding protein (SREBP)-2 and SREBP cleavage-activating protein (SCAP) mRNA levels using real-time quantitative PCR. LDL receptor and SREBP-2 protein expression were examined by Western blotting. Confocal microscopy was used to investigate the translocation of SCAP-SREBP complex from the endoplasmic reticulum (ER) to the Golgi by dual staining with anti-human SCAP and anti-Golgin antibodies.Results LDL loading increased intracellular cholesterol level, thereby reduced LDL receptor mRNA and protein expression in HepG2 cells under physiological conditions. However, interleukin 1β (IL-1β) further increased intracellular cholesterol level in the presence of LDL by increasing both LDL receptor mRNA and protein expression in HepG2. LDL also reduced the SREBP and SCAP mRNA level under physiological conditions. Exposure to IL-1β caused over-expression of SREBP-2 and also disrupted normal distribution of SCAP-SREBP complex in HepG2 by enhancing translocation of SCAP-SREBP from the ER to the Golgi despite a high concentration of LDL in the culture medium.Conclusions IL-1β disrupts cholesterol-mediated LDL receptor feedback regulation by enhancing SCAP-SREBP complex translocation from the ER to the Golgi, thereby increasing SREBP-2 mediated LDL receptor expression even in the presence of high concentration of LDL. This results in LDL cholesterol accumulation in hepatic cells via LDL receptor pathway under inflammatory stress.