32 P-磷酸铬-紫杉醇-聚L乳酸缓释粒子实体瘤间质植入microSPECT-CT韧致辐射显像的实验研究

目的：以32 P‐磷酸铬‐紫杉醇微球‐聚L乳酸（32 P‐CP‐PSP‐PLLA）缓释粒子实体瘤间质靶向植入后,行小动物单光子发射计算机断层成像‐透射断层成像（microSPECT‐CT ）韧致辐射显像,探讨其32 P体内生物学分布及其降解缓释特性。方法构建前列腺癌皮下移植瘤动物模型,microSPECT‐CT融合显像介导完成实体瘤间质植入32 P‐CP‐PSP‐PLLA缓释粒子,显像和生物学分布实验验证放射性32 P在荷瘤鼠体内分布,电镜下观察粒子超微结构变化。结果 microSPECT‐CT 韧致辐射显像可有效指导缓释粒子实体瘤内植入操作,显像清晰,缓释的部分32 P主要在实体瘤内滞留,在肝脾等重要脏器分布少,并为生物学分布结果证实,缓释粒子瘤内植入后电镜下可见粒子表面及内部微孔和隧道形成并进行性增加、融合和贯通。结论 microSPECT‐CT 韧致辐射显像可有效监测32 P‐CP‐PSP‐PLLA缓释粒子及缓释的32 P体内生物学分布,为缓释粒子前列腺癌靶向植入治疗奠定基础。     

125I粒子对耐药肺癌A549细胞的杀伤作用

目的探讨放射性125I粒子对耐药肺癌细胞的杀伤作用。方法采用胎牛血清,用DMEM培养基比例为1：10的培养液培养肿瘤细胞,将细胞分为4组,分别为对照组,125I处理组、125I＋顺铂处理组、顺铂处理组;取对数生长期的细胞进行处理,处理后分别对处理后的细胞进行AnnexinV、MTY、细胞凋亡Caspase-3以及细胞色素C检测。结果125I粒子处理组及125I＋顺铂处理组细胞凋亡率明显高于对照组以及顺铂处理组。结论放射性125I粒子对耐药肿瘤细胞有杀伤作用。     

99Tcm-TP1093的制备及其在健康动物体内的生物分布及动力学特点

目的 制备标记率符合显像要求的99Tcm-TP1093,探讨其在健康动物体内的生物分布及动力学特点.方法 化学合成G(D) AGG-Aba-ATAQSAYG-NH2(TP1093);氯化亚锡还原法99Tcm标记TP1093,纸层析测定标记率,计算比活度;体外稳定性实验、血清蛋白结合实验及脂/水分配实验鉴定99Tcm-TP1093的理化性质;研究标记多肽在健康家兔体内的示踪动力学和正常小鼠体内生物分布;健康家兔99Tcm-TP1093显像,观察体内放射性动态分布变化,利用感兴趣区(region of interest,ROI)技术分析重要组织器官的时间-放射曲线(time-activity curve,TAC).结果 99Tcm-TP1093的标记率为(97.23±0.87)％,比活度为(15.91±0.62) TBq/mmol.标记多肽室温放置4h,其放射化学纯度为(93.34±0.91)％.标记多肽与血清蛋白无明显结合,脂/水分配系数lgP=-(1.68±0.09).标记多肽在健康家兔体内的动力学过程符合权重为1/c的二室模型,t1/2α为(2.689 ±0.541) min,t1/2β为(69.156±20.342) min,总清除率(CL)为(5.029±4.381)mL/kg.小鼠体内分布和健康家兔显像示:血液放射性清除迅速,软组织放射性消退快;胃区呈放射性缺损,甲状腺区未见异常放射性浓聚,脑呈低放射性分布;体内放射性主要经泌尿系统排泄,少量通过肝胆系统分泌.结论 99Tcm-TP1093标记方法简便,标记率与比活度高,可制备成一步法冻干药盒,具有良好的稳定性、体内生物分布及动力学性质.     

低聚左旋聚乳酸的降解性能研究

目的研究自制低聚左旋聚乳酸(poly-L-lacticacid,PLLA)在体内、体外的降解性。方法通过PBS溶液体外水解试验和动物体内植入试验,定期观察试样的形态、失重率、分子量和弯曲强度的变化,评价自制左旋聚乳酸的降解性能。结果体外降解的pH值前12周基本维持稳定,12周后虽明显下降,但降幅最大不超过0.8个单位;两组的粘均分子量在前12周下降较快,达50%以上,其后降解减慢,24周粘均分子量降解90%以上(剩余约3kDa);失重率前12周则基本没变化,其后迅速增加,体外降解36周时失重率为32%,体内降解24周时失重率接近25%,36周时达61%;弯曲强度4周时只维持1/3左右,8周时体外组不到初始1/4,体内组多已断裂;体内降解36周后材料崩解成颗粒状,部分溶解于水,体外组外形保持完整,但质脆易碎。结论自制PLLA的体内、体外降解速度无显著性差异,符合简单水解的规律,作为骨修复材料,机械性能的维持有待提高。     

99Tcm标记VPAC1配体TP1724及其在动物体内分布与显像研究

目的 制备同位素99Tcm标记血管活性肠肽受体(vasoactive intestinal peptide receptor,VIPR)结合肽TP1724(标记率＞90％),鉴定其理化性质,并探讨其在正常动物体内的生物分布特点、示踪动力学及显像表现.方法 制备G(D) AGG-Aba-VP2 (TP1724);99Tcm间接标记TP1724(SnCl2·2H2O还原法),纸层析法测定标记率和比活度;稳定性实验(体外)、人血浆蛋白结合实验、半胱氨酸置换实验及脂/水分配实验等鉴定标记多肽的理化性质;35只正常小鼠分成7组,每只尾静脉注射3.7 MBq99Tcm-TP1724后于不同时间处死,收集9种组织器官并称取质量、分别测定各种组织器官的放射性,换算为％ ID/g(每克组织百分注射剂量);9只健康家兔各静脉注射37 MBq 99Tcm-TP1724后不同时间取血,测定血液放射性并换算为kBq/L,经DAS 3.1.6软件处理判断最佳房室模型,并得出动力学参数;5只健康家兔分别静脉注射37 MBq 99Tcm-TP1724,SPECT动态显像观察体内放射性分布变化.结果 99 Tcm-TP1724的标记率(96.57±0.71)％,比活度(25.52±0.29) TBq/mmol.室温下隔绝空气放置4h,放化纯度为(93.64±2.25)％;Sephadex G-50柱层析示,99Tcm-TP1724血浆蛋白结合率约为6.61％;99Tcm-TP1724与不同浓度半胱氨酸37℃温育1h后,未结合99Tcm含量无明显变化;脂/水分配系数lg P为-(1.99 ±0.02).99Tcm-TP1724在健康家兔体内的动力学符合权重为1的二室模型,分布半衰期t1/2α为(2.64±1.32) min,消除半衰期t1/2β为(78.36±13.38) min.体内生物分布和/或动态显像示:血液放射性清除迅速;颈部及胃区未见异常放射性聚集,脑部显示低放射性分布;放射性大部分通过肾脏排泄,少量经肝胆分泌.结论 99Tcm-TP1724标记方法简便、标记率和比活度高、稳定性好、体内动力学性质优良.     

组织工程人工神经诱导管的制备及其在体外与大鼠体内降解性能研究

目的　以构成比不同的聚乳酸 聚羟基乙酸共聚物 (PLGA)为原料制备人工神经诱导管 ,并对其体内外降解性能变化进行观测。方法　①以 0 2mol LPBS(pH 7 4)为人工降解液 ,观测PLGA ( 85 :15 )和PLGA ( 5 0 :5 0 )管 12周体外降解期间吸水率、失重率及生物降解率变化 ,并以扫描电镜观察其微结构变化 ;②采用肌肉包埋方法 ,观测PLGA ( 85 :15 )和PLGA ( 5 0 :5 0 )管 8周体内生物降解率变化。结果　①体内外降解条件下 ,PLGA ( 5 0 :5 0 )管吸水率、失重率及生物降解率显著高于PLGA ( 85 :15 )管 ;②两种材料样品体内生物降解率显著高于体外降解率 ;③扫描电镜观察显示 ,随降解时间延长 ,材料样品表现为特征性的虫蚀样破坏并逐渐加重 ,以PLGA ( 5 0 :5 0 )管尤为明显。结论　共聚物的构成比以及降解环境是影响聚乳酸 -聚羟基乙酸共聚物生物降解性能的重要因素。     

两种聚酯微球的体外降解机制研究

目的:研究聚乳酸-羟基乙酸及聚乳酸微球降解的过程及机制.方法:用5种方法分别研究:①扫描电子显微镜观察微球外观形态及表面状态;②测定干燥失重;③凝胶渗透色谱法测定聚合物的平均相对分子量;④测定介质pH值;⑤测定介质中乳酸含量.结果:聚乳酸-羟基乙酸微球的降解呈现明显外形改变和蚀解,聚乳酸微球降解表现为明显的溶胀和伴有孔洞形成.两者均降解成为分子量分布小的低聚物,介质中乳酸量明显增加以及pH显著下降.共聚物微球的降解速度随羟基乙酸比例的增加而加快.结论:聚乳酸-羟基乙酸微球的降解为表面溶蚀与本体蚀解结合机制,而聚乳酸微球的降解为本体蚀解机制.     

~(32)P胶体滑膜切除术治疗慢性难治性关节积液

[目的]评价32P胶体磷酸铬放射性滑膜切除术治疗慢性难治性关节积液的疗效。[方法]慢性难治性关节积液32 例(39个关节),分别于关节腔内注射32P胶体磷酸铬,其中有18个关节进行了第2次治疗,32P胶体用量膝关节185-222 MBq(5～6 mCi),肘关节及踝关节111-148 MBq(3-4 mCi)。[结果]治疗后6个月痊愈率51.1％,总有效率76.9％;12个月 痊愈率74.3％,总有效率89.7％。[结论]32P胶体放射性滑膜切除术治疗慢性难治性关节积液是一种简单、安全、有效的治疗 方法。     

CT引导~（125）I放射性粒子植入治疗复发性直肠癌32例报告

目的探讨125I放射粒子植入治疗复发性直肠癌的技术方法、疗效和安全性。方法32例直肠癌术后局部复发患者行CT引导125I放射性粒子植入术。全部在局麻下进行,根据术前计划确定粒子数目、空间分布和粒子针数目。单纯粒子治疗肿瘤匹配周边剂量为120～140Gy,既往曾行放射治疗为100～120Gy。粒子活度为0.5～0.7mCi,间距为1.0～1.5cm,共植入粒子20～75颗,术后即刻行CT扫描并进行质量验证,术后定期复查CT。结果完全缓解（CR）10例,部分缓解（PR）18例,无变化（NC）4例,有效率为88%（28/32）。疼痛缓解率为86%（18/21）,平均疼痛缓解时间为8d。中位生存时间为12个月,1、2年生存率分别为75%、41%。未出现与治疗相关的严重并发症。结论CT引导125I放射性粒子植入治疗复发性直肠癌具有微创、安全、疗效确切和并发症低等优点,值得进一步推广应用。     

99Tcm-MIBI脂质体纳米粒制备及生物分布实验研究

目的 探索99Tcm-MIBI脂质体纳米粒的制备方法,考察其在体外条件下的物理、生物学表征和稳定性,并研究其在小鼠体内的生物学分布特征。 方法 采用乙醇滴注-超声分散工艺制备99Tcm-MIBI脂质体纳米粒。测定其粒径及包封率指标。在体外37℃条件下,观察99Tcm-MIBI脂质体纳米粒在正常人血清和生理盐水中(NS)不同时间点的放化纯及其稳定性,研究其在小鼠体内15、60、120 min的分布特征。 结果 乙醇滴注-超声分散方法制备的99Tcm-MIBI脂质体纳米粒在电镜下观察呈球形、均匀,平均粒径(168.2±18.6)nm。体外稳定性实验表明,在正常人血清和NS中将99Tcm-MIBI脂质体纳米粒孵育15、30、60、120 min,其放化纯分别达96%、93%、90%、89%和92%、89%、86%、85%。体内生物分布实验表明,与99Tcm-MIBI比较,静脉注射99Tcm-MIBI脂质体纳米粒后,在观察时间内发现脾脏摄取显著,肾脏的放射性摄取率较低。 结论 99Tcm-MIBI脂质体纳米粒的制备方法简单,具有较为理想的物理、生物学表征,在血清中的稳定性较好。与99Tcm-MIBI比较肾脏摄取率低,在动物体内的循环时间延长。      

心肌球培养基血清浓度优化研究

目的 通过比较含有不同胎牛血清浓度的心肌球培养基分离培养大鼠心肌干细胞(CSCs)的效果,探讨最优的心肌干细胞血清培养浓度.方法 选取15只健康新生Wistar大鼠(出生1天龄),无菌条件下取出心脏,经胰酶和Ⅱ型胶原酶反复消化后,种植于培养瓶中,应用含20%胎牛血清的完全培养基培养组织块源性心脏祖细胞(CPCs),将所得的培养外植物源性细胞(EDCs)随机分为A、B、C 3组,各组5瓶细胞(25 mL塑料培养瓶),分别应用含10%、11%、15%不同浓度胎牛血清的心肌球生长培养基培养,培养至第三代CSCs时行细胞表面抗原C-kit染色,鉴定C-kit阳性CSCs占所获得细胞的比率,比较所得的细胞数量,生长周期和生长曲线.结果 从新生大鼠心肌组织中成功分离培养出CSCs,C-kit阳性率87%.培养后所得细胞数量以细胞倍增水平(PDL)表示,各组细胞PDL呈匀速递增,PDL水平和其递增速率(生长曲线所示)比较:B组>C组>A组.应用含11%胎牛血清的心肌球生长培养基培养EDCs获得的CSCs,与其他两组相比,具有生长周期短(P<0.05),生长数量多的特点(P<0.05).结论 含11%胎牛血清浓度是心肌球生长培养基培养原代大鼠心肌干细胞的最优血清培养浓度.     

原代人胚肺、肾细胞成功培养方法的改进

目的：培养出广泛适合于基础与临床研究的原代人胚肺、人胚肾细胞。方法：分别用不同的培养基及不同浓度的血清,以改进的方法对原代人胚肺、肾细胞进行培养。结果：经水囊引产的３月大小的胚胎肺及肾,用ＭＥＭ及１６４０加上２０％的牛血清,对细胞的贴附及增殖十分有利,细胞生长状态良好。结论：经改进后的对人胚肺细胞和人胚肾细胞的原代培养,用含２０％的小牛血清的ＭＥＭ和１６４０的培养液对细胞的生长极为有利。     

不同培养基体外培养旋毛虫新生蚴成活率分析

用 4种不同培养基对旋毛虫新生蚴进行体外连续培养 ,观察新生蚴存活率。结果 :新生蚴在生理盐水中 4h之内全部死亡 ;在纯 1 99培养基中存活 9d ;在加有小牛血清或胎牛血清的 1 99培养基中可存活 2 6d。提示 :新生蚴的存活率在无血清与加有血清的培养基中有显著性差异 ,在 2种加有不同血清的培养基中无显著性差异     

胎鼠嗅球分离培养出神经干细胞的研究

目的研究胎鼠嗅球中分离培养产生神经千细胞(NSCs)的情况。方法取孕16～18d的孕鼠。取胎鼠的嗅球,用含10％FCS的培养基培养传代分离出的细胞。免疫细胞化学方法鉴定培养和传代出的细胞,对染色阳性的细胞计数检测纯度。结果P^75染色阳性证明分离培养的细胞为嗅鞘细胞(OECs)；来源于嗅球的细胞培养出的神经球行NeS血染色阳性证明为NSCs；传代OECs纯度为95%-98％。结论胎鼠嗅球中可分离培养出NSCs,OECs可稳定传代。可以作为移植用的种子细胞。     

大鼠皮质神经元的体外培养和纯化

目的：探讨大鼠皮质神经元分离纯化的有效方法。方法：取胎鼠大脑皮质细胞，分别在不同的培养液中进行原代培养，利用相差显微镜对培养的细胞进行动态观察；并以免疫细胞化学技术对神经元进行染色。结果：在相差显微镜下可见加用N2添加剂和胎牛血清培养的神经元生长良好，胞体形态多样，突起数目多，长度长，与邻近神经元的胞体或突起形成接触，而胶质细胞则大量死亡，神经元纯化率达94％以上，未加用N2添加剂培养的神经元胶质细胞大量存在，神经元纯化率达50％左右。结论：N2添加剂和胎牛血清联合应用可使大鼠皮质神经元得到良好的生长和有效纯化。     

32P-磷酸铬胶体对荷Lewis肺癌C57小鼠治疗作用的初步研究

目的:建立荷Lewis肺癌C 57小鼠动物模型,对瘤内注射32 P-磷酸铬胶体治疗肺癌的疗效进行初步研究,并观察大分子聚合白蛋白(MAA)的作用.方法:实验动物随机分组进行32 P-磷酸铬胶体(32 P-CP)内照射治疗,计算肿瘤缩小率;韧致辐射显像观察肿瘤组织的放射性潴留情况;放射免疫法测定肿瘤组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性变化.结果:32 P-CP内照射治疗使瘤组织明显缩小,韧致辐射显像结果显示32 P-CP聚集于肿瘤组织局部.MAA对肿瘤缩小率的影响无统计学意义.治疗后肿瘤内SOD含量明显增加.结论:32 P-CP瘤内注射可使放射性长时间聚集于肿瘤内,肿瘤组织明显缩小.MAA并不能增加肿瘤内放射性聚集.SOD可用于评价32 P-CP治疗疗效.     

Effect of human growth hormone on the proliferation of human fetal islet cells in vitro.

In this study it was shown that 1000 micrograms/L hGH in serum-free medium promoted the attachment, spreading and formation of monolayer of islet cells. The radioactivity test indicated that hGH significantly stimulated the DNA synthesis of islet cells (P < 0.001). Furthermore, after 48 h exposure to hGH (1000 micrograms/L), both the insulin contents and release of islet cells significantly increased (P < 0.001); hGH also enhanced the responsiveness of fetal islet cells to high-concentration glucose plus theophylline stimulation (P < 0.001). However, the effect of hGH in the medium containing 10% newborn calf serum was not so prominent in comparison with that in the serum-free medium. The morphologic assay for mitotic cells showed a combination of 1000 micrograms/L hGH and 10% serum was the most efficient for inducing the mitosis, the mitotic index being 5.95%. We conclude that hGH is an important growth factor for human islet cells.