深低温保存自体外周血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的临床研究

目的探讨自体外周血干细胞移植(APBSCT)治疗多发性骨髓瘤(MM)的临床疗效及安全性。方法1例MM患者接受APBSCT治疗,采用环磷酰胺(CTX) 粒细胞集落刺激因子(G-CSF)方案动员干细胞,CS-3000血细胞分离机采集外周血干细胞并保存于-80℃冰箱;用马法兰200 mg/m2方案预处理后,解冻回输冻存的干细胞。观察患者移植前后的临床疗效。结果动员后获得单个核细胞数(MNC)3.705×108/kg;CD34 细胞数2.56×106/kg。患者获得造血重建,中性粒细胞数(ANC)>0.5×109/L、血小板计数(PLT)>20×109/L的时间分别是12 d、15 d。移植后随访1年患者处于完全缓解(CR)状态。结论APBSCT治疗MM安全有效。     

异基因干细胞移植后T细胞重建及与慢性移植物抗宿主病关系的研究

目的:探讨恶性血液病异基因干细胞移植后T细胞免疫重建的特点及与慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的关系.方法:采用流式细胞仪动态检测42例恶性血液病患者异基因干细胞移植前、后不同时期T淋巴细胞亚群的变化,并对其中18例白血病患者检测其移植前、后不同时期的CD3 CD5 、CD3 CD45RA 、CD4 CD45RA 细胞的变化情况.结果:42例患者均重建造血.移植后CD4 T细胞恢复较慢,而CD8 T细胞则恢复较快,导致CD4 /CD8 细胞比值在移植后1年内持续倒置.回输CD 34细胞数量分别与移植后30 d时的CD3 、CD4 、CD8 T细胞数呈正相关.cGVHD组患者的CD3 CD45RA 、CD4 CD45RA 细胞均明显低于无GVHD组患者(均P<0.05).结论:异基因干细胞移植后CD4 T细胞恢复慢,而CD8 T细胞恢复较快.回输CD 34细胞数与移植后早期患者T细胞重建的快慢密切相关.cGVHD可引起初始T细胞亚群(CD45RA 细胞)减少.     

CD34+细胞分选在异基因造血干细胞移植中的应用

CD34^ 细胞分选可有效去除T细胞，显著降低急慢性移植物抗宿主病（GVHD）的发生率及严重程度，对于植入率及疾病复发率无不良影响。随着CD34^ 细胞生物学特性研究的深入及其分离纯化技术的成熟，CD34^ 细胞分选和移植的应用日益广泛，在拓宽供体来源（HLA不全相合或半相合移植）以及提高无关供体移植安全性等方面有良好的应用前景，但也存在着不少问题。本文就有关CD34^ 细胞移植中免疫活性细胞数量与移植效果、G－CSF（GM－CSF）和供体淋巴细胞输注的应用、移植并发症以及HLA半相合CD34^ 细胞移植等问题作一综述。     

自体外周血干细胞移植治疗系统性自身免疫病

目的探讨大剂量化疗并自体外周血干细胞移植治疗重症／难治性系统性自身免疫病的可行性、疗效及安全性。方法对包括系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)、原发性干燥综合征(pSS)、系统性硬化症(SSc)、混合性结缔组织病(MCTD)在内的21例常规治疗不能缓解病情的重症／难治性系统性自身免疫病患者给予大剂量免疫抑制剂并自体外周血干细胞移植治疗。采用环磷酰胺(CTX)3～4g／m^2及粒细胞集落刺激因子(G—CSF)行干细胞动员,并行CD34^ 细胞分选。预处理方案采用环磷酰胺200mg／kg 抗胸腺细胞免疫球蛋白(ATG)90mg／kg或环磷酰胺200mg／kg 全身照射4～6Gy,之后进行分选后的造血干细胞回输。结果21例患者中2例死于移植相关并发症,分别为巨细胞病毒感染和粒细胞缺乏时的严重肺部感染。1例于干细胞动员后等待移植前死于原发病。2例SLE患者分别于移植后26、37个月复发,1例RA患者于移植后15个月复发。其余SLE患者随访超过6个月者,其疾病活动评分(SLE—DAI)平均由移植前17分降至移植后2分,尿蛋白由6．7g降至2．3g;RA患者的简明疾病活动评分(DAS28)下降;pSS患者的症状改善,唾液流率等客观检查恢复正常。结论对于常规治疗无效的重症、难治性自身免疫病,自体外周血干细胞移植是可供选择的治疗方案,可使病情达到短期和中期缓解,具有可行性和一定的安全性。移植后有一定的复发率,长期效果有待进一步观察。     

粒细胞集落刺激因子对大鼠实验性心肌梗死的治疗作用

目的：探讨粒细胞集落刺激因子（G0CSF）动员的自体骨髓来源的干细胞对大鼠急性心肌梗死动物模型的治疗作用。方法：用异丙肾上腺素（ISO）复制大鼠急性心肌梗死动物模型，用骨髓干细胞动员剂G－CSF动员自体骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗死部位，于用ISO后24，48h和2周后杀死大鼠，取出心脏，用免疫组化和HE染色方法检测动物模型心梗区的CD34^ 单个核细胞浸润以及心肌细胞和血管的再生情况。结果：用ISO后24h,G-CSF处理组大鼠心梗区可见大量CD34^ 单个核细胞浸润，并用CD34^ 的新生心肌细胞生长，2周后瘢痕组织较少，毛细血管浸密度明显高于对照组，而用ISO后24h，对照组心梗坏死区有大量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润，无CD34^ 细胞浸润及新生心肌细胞生长，2周后出现较大量的瘢痕组织。结论：G－CSF能促进心肌梗死后心肌细胞和血管的再生，减小心肌梗死的范围，用G－CSF动员自体骨髓干细胞来修复坏死心肌组织的“干细胞自身移植”疗法，可用于急性心肌梗死的治疗。     

纯化的自体CD34+细胞移植治疗多发性骨髓瘤的临床观察

目的采用CD34+细胞体外分选技术对多发性骨髓瘤患者进行自体CD34+细胞移植,以降低自体移植后肿瘤复发率.方法对1例多发性骨髓瘤患者采用CliniMACS临床型细胞富集仪,利用磁性分选技术收集CD34+细胞,患者于预处理后,输注分选后的CD34+细胞.结果 CD34+细胞体外纯化富集可使回输CD34+细胞中位数达3.9×106/kg,CD34+细胞回收率为35%,纯度达到97.6%;移植后,患者于+14 d时,中性粒细胞数＞0.5×109/L,+35 d时血小板＞20×109/L,提示造血重建.结论 CD34+细胞移植后获得迅速、稳定的造血重建.体外CD34+细胞纯化富集后移植可望提高多发性骨髓瘤患者自体移植疗效.     

自体外周血干细胞移植治疗急性白血病护理体会

自体造血干细胞移植(APBSCT)就是将病人进行大剂量的放化疗预处理后,把事先采集好的自体外周血造血干细胞回输体内,重建造血与免疫的过程[1],是目前治疗血液系统恶性肿瘤的根治手段.     

两次输注自体干细胞移植治疗血液肿瘤4例报告

目的:观察两次干细胞输注在自体外周血干细胞移植(APBSCT)中对中性粒细胞及血小板减少的影响,观察其对患者并发感染和出血的影响.方法:对4例血液肿瘤患者经化疗 G-CSF动员并采集外周血干细胞,预处理后分别于0、 3天回输外周血干细胞采集物,观察外周血ANC、BPC及移植相关并发症和血液制品支持治疗情况.结果:用Cy AraC G-CSF动员可获足够CD34 细胞,患者ANC低于0.5×109/L为5～12天,BPC持续低于20×109/L仅为3～4天,仅1例因输血小板发热,仅1例因口腔出血点输血小板1单位,移植费用降低.结论:两次干细胞输注在自体干细胞移植中可缩短粒细胞及血小板减少时间,并减少感染和出血,降低支持治疗费用.     

自体外周血干细胞移植的护理体会

自体外周血干细胞移植（AP13SCT）较之自体骨髓具有一定的优越性，大有替代自体骨肉移植（ABMT）的趋势，并为血液恶性肿瘤患者提供了最大的治愈机会。我们于1996年12月以来为3例恶性肿瘤患者进行APBSCT，现将我们对APBSCT中护理体会介绍如下。临床资料3例中男三例，女2例。年龄17～48岁，急性白血病首次完全缓解1例，恶性淋巴瘤阳细胞、皿B）回例，小细胞肺癌广泛转移1例。外用血干细胞动员与采集回输：3例均用大剂量化疗加惠尔血（G－CSF）进行动员。至白细胞上升至7．OX10’／I，时用CS3000PI，US血细胞分离机分离外周血干…     

免疫磁珠分选系统在急性髓系白血病干细胞分离中的应用

目的：采用免疫磁珠分选系统（MACS）分离人白血病骨髓CD34^＋、CD38^-干细胞群。方法：收集人白血病骨髓，Percoll密度梯度离心分离单个核细胞，CD34、38磁性标记，MACS分离纯化CD34＋、CD38^-干细胞群，流式细胞仪检测其纯度和分选前后CD34^＋、CD38^-百分比，计算回收率。结果：分选后的CD34^＋、CD38细胞纯^-度达72．6±3．2％，回收率85．8±1．2％。结论：免疫磁珠分选系统是一种有效的白血病干细胞分离提纯方法，所得细胞纯度比较高。     

儿童外周血造血干细胞移植的护理

目的：分析总结13例儿童自体外周血造血干细胞移植治疗的护理经验。方法：2001年3月～2003年5月采用自体外周血干细胞移植治疗儿童白血病和淋巴瘤13例，进入层流室后实施心理护理，预处理阶段护理，化疗的毒副作用护理及严格无菌护理操作外，对急性反应加强对症支持治疗。结果：全部患儿均安全渡过移植极期，均成功重建造血功能，无1例因护理原因中断治疗或治疗失败。结论：自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)是比较安全、有效的儿童恶性血液病的治疗方法，预处理后的护理是APBSCT护理工作中的重点。     

影响自体干细胞移植后造血功能重建相关因素分析

笔者就 31例化疗敏感的实体瘤行造血干细胞移植后 ,对影响造血功能重建的相关因素进行分析。结果 :自体外周血干细胞移植 (APBSCT)比自体骨髓移植 (ABMT)造血功能重建快 ,并发症轻。 ABMT加用重组人粒细胞集落刺激因子 (G- CSF)可加快造血功能重建 ;APBSCT加用 G- CSF并不能缩短骨髓衰竭时间。回输干细胞数量、采集干细胞前化疗时间及年龄对造血功能重建的影响有显著性差异 ;而预处理方案中是否包括放疗、性别及病种对造血功能重建的影响差异无显著性。     

两种预处理方案在自体造血干细胞移植治疗自身免疫性疾病中的前瞻随机性研究

目的 探讨含／不含全身照射（TBI）作为预处理方案在自体外周血干细胞移植（APBSCT）治疗自身免疫性疾病中的造血重建、免疫重建、疗效和并发症等方面的差异。方法 自1999-2006年6月,共有32例严重的自身免疫性疾病患者接受了APBSCT。其中女性27例、男性5例,中位年龄29岁（15～49岁）。所有患者均采用环磷酰胺（CTX）＋粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）方案动员,采集物均应用CliniMACS细胞分选仪分选CD34^＋细胞。21例患者预处理方案采用CTX＋TBI,11例采用CTX＋抗胸腺细胞球蛋白（ATG）。结果 两组的造血重建CTX＋TBI组粒细胞植入中位时间为11d,CTX＋ATG组为9d,组间比较差异有统计学意义（P＝0．003）。两组血小板植入的中位时间分别为13d和8d,组间比较P＝0、001;移植后12个月时两组患者淋巴细胞各亚群均已恢复,但CD4／CD8比值仍倒置,各亚群水平两组间差异均无统计学意义;所有患者随访12个月以上,CTX＋TBI组有3例（14．3％）复发,CTX＋ATG组有2例（18.2％）复发,其余患者病情稳定;移植期间CTX＋TBI组细菌感染发生率为5／21（23.8％）,病毒感染1例（4．8％）,放射性腮腺炎4／21（19％）,CTX＋ATG组细菌感染发生率为2／11（18．2％）,病毒感染2例（18．2％）,血清病反应3／12（25％）。两组患者感染均在抗生素或抗病毒治疗后很快得到控制,均无因血小板减少引起致命的出血并发症。两组患者在随访时间内均未出现肺间质纤维化、白内障等远期并发症。结论 含TBI的预处理方案在造血重建上迟于不含TBI的方案,但CTX＋TBI的耐受性好,疗效上两者无明显差异,在免疫重建方面差别不明显。     

异基因外周血干细胞的动员,检测及临床移植的应用研究

目的：探讨异基因外周血干细胞移植（ａｌｌｏ－ＰＢＳＣＴ）供者经Ｇ－ＣＳＦ或Ｇ－ＣＳＦ＋ＧＭ－ＣＳＦ动员后,采集的外周血干细胞（ＰＢＳＣ）移植物中的幼稚粒细胞与单个核细胞（ＭＮＣ）、ＣＤ３４＾＋细胞及ＣＦＵ－ＧＭ之间的相关性和移植的剂量标准及临床应用效果。方法：对１１例ａｌｌｏ－ＰＢＳＣＴ供者用Ｇ－ＣＳＦ（９例）或Ｇ－ＣＳＦ＋ＧＭ－ＣＳＦ（２例）进行动员,于动员前及动员后,分别对外周血及ＭＮＣ惧物中的幼稚粒细胞、ＣＤ３４＾＋细胞及ＣＦＵ－ＧＭ进行检测计数,预处理方法主要用大剂量环磷酰胺（ＣＴＸ）＋全身照射（ＴＢＩ）。结果：动员后外周血中的幼稚粒细胞与ＣＤ３４＾＋细胞及ＣＦＵ－ＧＭ同步增加,外周血ＭＮＣ中的幼稚粒细胞数与ＣＤ３４＾＋细胞数及ＣＦＵ－ＧＭ有较好的相关性。１１例患者全部植活和恢复造血功能,并为染色体核型     

3种G-CSF动员224例外周血干细胞效果比较

目的比较3种粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对外周血干细胞的动员效果。方法我科自体外周血干细胞移植病人224例,采用3种粒细胞集落刺激因子(吉赛欣、欣粒生、惠尔血)进行外周血干细胞动员,对干细胞动员情况、干细胞质量、移植后造血重建和药物毒副作用进行比较。结果224例病人全部移植成功,其动员效果、干细胞质量及在移植后造血重建中的临床效果差异均无显著性,毒副作用小。结论吉赛欣和欣粒生两种国产制剂及惠尔血能可靠用于外周血干细胞动员及造血重建,尤其是国产制剂的价格明显低于进口产品,在有效保证动员效果的同时大大减轻了病员的经济负担,值得临床应用推广。     

基于Hyper-CVAD/MA方案的强化化疗后自体外周血干细胞移植治疗淋巴瘤的研究

目的探讨以Hyper-CVAD/MA方案为基础的大剂量强化化疗后行自体外周血干细胞移植(APBSCT)治疗恶性淋巴瘤的方法和疗效。方法 23例恶性淋巴瘤患者采用CHOP方案常规化疗;每2～3个化疗疗程后予Hyper-CVAD/MA方案强化及利妥昔单抗治疗;APBSCT前患者接受预处理,预处理方案为NEAC(12例)、NEAM(8例)及NEAM+TBI(3例)方案;5例弥漫性大B细胞型、1例套细胞型及1例滤泡细胞型(Ⅲb级)患者于移植前加用利妥昔单抗。结果全部患者均获造血功能重建,移植后患者达到外周血绝对中性粒细胞计数(ANC)≥0.5×109/L、血小板(PLT)≥20×109/L的时间分别为(12.8±2.5)、(16.1±4.1)d。随访45～1 092d,15例患者无病生存,5例复发,3例死亡。患者总生存率及无病生存率分别为86.96%(20/23)及65.22%(15/23)。结论以Hyper-CVAD/MA方案为基础的大剂量强化化疗后行APBSCT治疗恶性淋巴瘤可提高患者无病生存率,安全性较好。     

自体造血干细胞移植治疗重症/难治性自身免疫病的淋巴细胞亚群演变

目的 研究自体造血干细胞移植（HSCT）治疗重症／难治性自身免疫病（AID）的淋巴细胞亚群免疫重建规律。方法 以2003年4月-2005年4月在我院行HSCT的13例AID患者和40例正常对照者为研究对象,采用流式细胞学技术分别于动员前、后,移植后2周,1、3、6、12及18个月共8个时间窗监测受试者体内的淋巴细胞、T细胞（CD3＋）、B细胞（CD19＋）、NK细胞（CD3-CD16＋CD56＋）、Th细胞（CD3＋CD4＋）、Tc细胞（CD3＋CD8＋）、纯真T细胞（CD4＋CD45RA）、记忆T细胞（CD4＋CD45RO）和CD4／CD8比值的变化。结果 13例AID患者中,系统性红斑狼疮（SLE）8例,类风湿关节炎（RA）4例,原发性干燥综合征（pSS）1例。动员前SLE组的淋巴细胞各亚群均明显低于正常人和RA组（P均〈0．01）。B细胞在移植后18个月内从0恢复至正常。NK细胞和T细胞亚群未恢复至正常,NK细胞恢复较快,维持低水平;T细胞亚群中的CD4＋T细胞恢复迟于CD8＋T细胞,纯真T细胞恢复迟于记忆T细胞。结论 SLE患者外周血中淋巴细胞、T细胞及各亚群、B细胞、NK细胞异常较RA患者更明显。AID患者体内和移植物的T／B细胞去除有效,非清髓性处理可能成为AID复发隐患,CD4＋T细胞的长期受抑可能与AID患者移植后病情缓解相关。     

难治性天疱疮自体外周血干细胞移植后T细胞受体克隆性的分析

目的探讨难治性天疱疮患者自体外周血干细胞移植（APBSCT）前、后T细胞抗原受体B链（TCRl3）互补决定区3（CDR3）基因表达谱型变化,深入了解天疱疮发病机制以及患者造血干细胞移植后T细胞克隆的免疫重建特点。方法应用RT—PCR方法扩增天疱疮患者移植前、后外周血单个核细胞24个TCRl3CDR3区段基因序列,分析其基因表达情况。采用免疫扫描谱型分析技术,分析正常人外周血单核细胞TCRl3链CDR3谱型分布特征,以及难治性天疱疮患者干细胞移植前、后CDR3谱型变化情况。结果动员前天疱疮患者TCRl3CDR3谱型均出现异常,表现为一定程度的T细胞单（寡）克隆增生性表达;移植后12个月内仍出现部分表达缺失及寡克隆表达;而后T细胞克隆分布渐趋于正常,CDR3恢复多态性。结论难治性天疱疮患者外周血T细胞表现单（寡）克隆增生,CDR3多态性降低,可能与其发病机制有关。APBSCT后的免疫功能重建恢复了CDR3的多态性,提示造血干细胞移植是治疗难治性天疱疮的有效手段。     

Allogeneic peripheral blood stem cell transplantation in the treatment of severe aplastic anemia and severe infection

Severeaplasticanemia (SAA)ischaracterizedbyafailureofbloodcellproductionresultinginseverepancytopeniawithamarkedlyhypocellularbonemarrow Bonemarrowtransplantation (BMT)isoneofthecurativeapproachesinpatientswithSAA Peripheralbloodstemcelltransplantation(PBSCT )hasbeenmainlyusedinthetreatmentofmalignanttumors Recently ,successfulsyngeneicandallogeneicPBSCTinpatientswithSAAwasreported ,1 3 　andsomewasasasalvagetreatmentinpatientswithSAAwhofailedtoBMT 4,5Wesuccessfullycompletedanallo…