甲基丁香酚对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜水通道蛋白5的影响

目的 观察甲基丁香酚对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜水通道蛋白(aquaporin,AQP)5表达的影响,并探讨其意义。方法 Wistar 大鼠126只随机分为正常对照组,变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)模型对照组,布地奈德阳性对照组,甲基丁香酚80 mg/kg组、40 mg/kg组、20 mg/kg组及10 mg/kg组,每组18只,除正常对照组外,其余组大鼠经卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏建立变应性鼻炎模型,造模成功后分别给予蓖麻油、布地奈德及对应剂量甲基丁香酚干预,于给药1、2、4周后应用免疫组织化学方法观察鼻黏膜AQP5的分布,Western blotting比较各组鼻黏膜中AQP5的表达,Real-time PCR比较AQP5 mRNA的表达。结果 AQP5主要位于鼻黏膜腺上皮及导管上皮细胞的胞膜和胞质。AR模型对照组大鼠鼻黏膜的AQP5及AQP5 mRNA均较正常对照组表达减少(P<0.05)。各给药组大鼠鼻黏膜AQP5及AQP5 mRNA均较AR模型对照组有不同程度增高。药物干预1、2、4周,布地奈德阳性对照组AQP5的表达与正常对照组比较,差异均无统计学意义(P均>0.05), 与AR模型对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05);布地奈德阳性对照组的AQP5 mRNA分别与正常对照组及AR模型对照组比较,差异均有统计学意义(P均<0.05)。干预2周后,甲基丁香酚各剂量组AQP5的表达即与布地奈德阳性对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。干预1周, 20 mg/kg组的AQP5 mRNA与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 甲基丁香酚可能通过上调AQP5的表达减轻鼻黏膜腺体水肿程度、减少腺体分泌,从而缓解变应性鼻炎鼻痒、喷嚏及流涕等症状。     

变应性鼻炎患者鼻黏膜水通道蛋白-5的表达

目的 探讨水通道蛋白-5(aquaporin 5,AQP5)在变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者鼻黏膜中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学技术检测32例变应性鼻炎患者(变应性鼻炎组)下鼻甲黏膜和25例行鼻中隔偏曲矫正术的无变应性鼻炎患者(对照组)下鼻甲黏膜组织中AQP5表达情况,分析AQP5表达与变应性鼻炎严重程度间的关系.结果 ①对照组鼻黏膜HE染色呈轻度炎症反应,AQP5表达较弱;AQP5染色阳性细胞很少且散在分布于鼻黏膜上皮下细胞.②变应性鼻炎组患者鼻黏膜HE染色表现为明的腺体增生、炎症反应和嗜酸粒细胞浸润;免疫组织化学染色显示鼻黏膜组织中大量AQP5阳性细胞,主要分布在腺上皮细胞、导管上皮细胞、纤毛上皮细胞以及鼻黏膜血管的内皮细胞的胞膜和胞质中,与对照组比较AQP5表达阳性细胞数差异具有统计学意义(P<0.01).③变应性鼻炎组AQP5的表达与变应性鼻炎严重程度密切相关(r=0.819,P<0.001).结论 AQP5在变应性鼻炎鼻黏膜中高表达,能客观反映免疫或炎症反应的程度,AQP5的高表达与腺体过度分泌密切相关.对AQP5的研究开发可能成为为变应性鼻炎诊断评分系统的补充及新的基因治疗效靶.     

变应性鼻炎小鼠鼻黏膜水通道蛋白5的表达

目的探讨水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中的表达。方法应用qPCR和Western blot分别检测20只正常小鼠和20只变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5 mRNA和蛋白的表达。结果变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中AQP5mRNA和蛋白显著高于正常小鼠(P<0.05)。结论 AQP5在变应性鼻炎小鼠鼻黏膜组织中高表达,对AQP5的研究开发可能会成为变应性鼻炎新的基因治疗靶点。     

前列腺素E1对急性肺损伤小鼠水通道蛋白1、5基因表达的影响

目的研究急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)基因的表达变化,探讨前列腺素E(PGE1)治疗ALI的机制,为临床治疗ALI提供新的选择靶点和方法。方法 32只昆明小鼠随机分成4组(每组8只),即空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、前列腺素E1治疗组(PGE1组)、地塞米松治疗对照组(Dex组),观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RTPCR检测AQP1mRNA、AQP5 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达变化。结果 ALI组小鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,伴明显的肺泡充血、水肿。前列腺素E及地塞米松治疗后,肺组织炎症、充血明显改善,ALI组的W/D的比值与其他3组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);与NS组相比,ALI组AQP1mRNA的表达显著降低(P<0.05),而PGE1组、Dex组的AQP1 mRNA的表达显著高于ALI组(P<0.05)。AQP5 mRNA表达的变化与AQP1mRNA的变化相似。与NS组相比,ALI组TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05),而PGE1组、Dex组的TNF-αmRNA的表达显著低于ALI组(P<0.05)。IL-1βmRNA表达的变化与TNF-αmRNA的变化相似,肺损伤炎症减轻。结论PGE1可通过上调AQP1、AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿。可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现的。     

鼻炎清颗粒对大鼠变应性鼻炎IgE、ECP水平的调节作用

目的:观察鼻炎清颗粒治疗大鼠变应性鼻炎(AR)后鼻粘膜组织形态学变化和血清特异性IgE和嗜酸粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平,探讨该药治疗AR的部分免疫学机制。方法:用卵清蛋白、氢氧化铝、百白破疫苗联合致敏大鼠制成变应性鼻炎动物模型,将鼻炎清颗粒灌胃给药2周后,观察鼻粘膜组织学变化,用ELISA法检测血清中IgE和ECP水平。结果:鼻炎清颗粒治疗组中大、中和小剂量组的血清IgE水平分别为(26.46±6.12)、(49.11±4.48)(、70.68±7.59)ng/ml,与阳性模型组(81.03±7.54)ng/ml比较差异有统计学意义。鼻炎清颗粒治疗组中大、中和小剂量组血清ECP水平分别为(1.48±0.25)(、2.30±0.56)、(3.05±1.27)ng/ml,与阳性模型组(4.23±1.20)ng/ml比较差异有统计学意义,与小剂量组差异无统计学意义。光镜观察发现,模型组鼻粘膜上皮细胞脱落、水肿,血管扩张,腺体增生,固有层内可见大量嗜酸性粒细胞、肥大细胞浸润,用药组中大剂量组和中剂量组及阴性对照组则无上述改变。结论:鼻炎清颗粒通过降低血清特异性IgE和ECP水平并抑制炎症细胞在鼻粘膜的汇集,防止其脱颗粒,在变应性鼻炎的治疗中发挥着免疫调节作用。     

臭氧对小鼠实验性变应性鼻炎的影响

[目的]探讨反复臭氧暴露对小鼠实验性变应性鼻炎的影响.[方法]将雌性BALB/c实验小鼠分为对照组、卵清蛋白喷雾组、卵清蛋白喷雾/臭氧暴露组、卵清蛋白全身致敏组及卵清蛋白全身致敏/臭氧暴露组,给予相应处理.用ELISA法测定总血清中IgE,anti-OVA IgE,anti-OVA IgG1含量及鼻腔灌洗液中IL-4,IL-5,INF-γ水平.用Luna染色法测定鼻黏膜中嗜酸性粒细胞浸润数量.[结果]单独卵清蛋白喷雾暴露诱导较弱过敏反应,与臭氧同时暴露可明显升高血清IgE,anti-OVA IgE,anti-OVA IgG1水平,从而加剧免疫反应,且显著增加鼻腔灌洗液中Th2细胞因子水平及鼻黏膜中嗜酸性粒细胞数目;卵清蛋白喷雾/臭氧暴露组血清IgE,anti-OVA IgE水平显著低于卵清蛋白全身致敏组(P<0.05);全身致敏小鼠卵清蛋白喷雾与臭氧同时暴露可加重过敏反应.[结论]臭氧暴露诱导或加重过敏反应,其可能机制是通过抗原特异性抗体及Th2细胞因子生成增多而引起.     

半夏提取物对小鼠肺水通道蛋白5表达的影响

目的 了解急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白5(AQP5)的表达变化,探讨半夏提取物(EP)治疗ALI的药理机制,为半夏的临床应用提供理论基础.方法 36只昆明种小鼠随机分成3组,即空白对照组(NS组)、肺损伤造模组(ALI组)和半夏提取物治疗组(EP组),6h后观察测定肺组织湿干重比值(W/D),HE染色光镜下观察肺炎症变化,ELISA法检测小鼠血清TNF-α浓度,RT-PCR检测肺组织匀浆AQP5 mRNA表达情况.结果 ALI组小鼠肺部炎症反应显著,中性粒细胞浸润为主,同时肺泡明显充血水肿.EP组肺组织炎症减轻、充血消退.与NS组和EP组比较,ALI组的W/D值差异有统计学意义(P＜0.05);ALI组肺组织AQP5mRNA的表达,较NS组显著降低,较EP组的表达显著升高(P＜0.05).ALI组血清TNF-α的表达,较NS组显著升高,较EP组的表达显著降低(P＜0.05).结论 半夏提取物可通过上调肺AQP5的表达减轻肺水肿,作用机制可能是通过抑制炎症因子TNF-α的表达实现的.     

水通道蛋白1在鼻部疾病中的研究进展

水通道蛋白是具有高选择性的跨膜蛋白家族,迄今共发现13个家族成员,即AQP0-12,水通道蛋白1是最早被发现的,研究发现,它参与鼻部疾病的发生与发展,在鼻息肉、变应性鼻炎鼻腔粘膜高表达。本文参阅了近几年国内外关于水通道蛋白1的研究文献,就水通道蛋白1在鼻部的分布、生理功能以及与鼻部疾病等方面进行综述。     

外燥对小鼠肺组织水通道蛋白5表达的影响及意义

目的观察外燥对小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的影响。方法40只SPF级昆明小鼠随机分为常温常湿组(A组)、常温常燥组(B组)、温燥组(C组)、凉燥组(D组),每组10只。图像分析各组第6天、12天、18天小鼠肺组织AQP5免疫组化染色结果。结果AQP5蛋白表达阳性部位多在肺泡膜缘;温燥组第12、第18天气道液黏多糖(RS)持续下降时,AQP5蛋白表达阳性率呈平行下降,凉燥组也呈同样趋势,尤以第12天为甚(P0.01),伴肺泡炎性病变并随时间延长而加重。结论外燥致肺部炎性改变同时,与肺泡液体的细胞内外转运相关的AQP5蛋白表达下降,提示与外燥伤肺、耗津的病机相关。     

变应性鼻炎免疫活性细胞及细胞因子研究进展

变应性鼻炎亦称过敏性鼻炎,是由变应原引起的一种慢性炎症性疾病,其发病涉及多方面因素,并呈现出与环境密切相关的特点。随着环境污染的严重,发病率在全球范围内逐年升高,已经成为耳鼻喉科的常见疾病。参与过敏性鼻炎发生、发展的因素有很多,随着研究的深入发现,多种细胞因子、炎症细胞以及炎性介质等共同参与了变应性鼻炎,深入研究免疫细胞及其分泌的细胞因子在变应性鼻炎中的作用机制,可为变应性鼻炎的治疗提供新的途径和方法。     

麻黄汤对变应性鼻炎大鼠炎症、AQP5及cAMP/PKA-CREB信号通路的影响

目的:探讨麻黄汤对变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)大鼠炎症的影响及作用机制。方法:SD大鼠分为正常组、模型组、麻黄汤低剂量组(2.8 g·kg~(-1))和麻黄汤高剂量组(5.6 g·kg~(-1)),通过卵清蛋白全身致敏结合局部激发的方法,建立AR大鼠模型,对喷嚏、抓鼻、流涕行为学进行评分。采用酶联免疫吸附检测血清中Ig E、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)含量;观察鼻黏膜组织的病理变化,鼻腔分泌物涂片脱落细胞学检查;通过免疫组织化学染色、蛋白质印迹法和RT-PCR检测AQP5、p-CREB(ser133)的表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠行为学评分增加,鼻黏膜上皮下大量炎性细胞浸润、腺体扩张,血清中IL-4和Ig E水平显著升高(P0.05),INF-γ含量显著降低(P0.01),AQP5和p-CREB(ser133)蛋白相对表达量显著降低,AQP5 mRNA水平减少(P0.01)。麻黄汤各给药组能明显降低模型大鼠的行为学评分,减轻鼻黏膜组织病理改变,降低外周血Ig E、IL-4水平,增加IFN-γ水平(P0.01),AQP5和p-CREB(ser133)蛋白相对表达量显著增加(P0.01),AQP5 mRNA水平显著增加(P0.01)。结论:麻黄汤对变应性鼻炎具有一定的治疗作用,作用机制可能与调节AQP5表达及c AMP/PKA-CREB信号通路有关。     

急性肺损伤大鼠呼吸膜AQP1和AQP5的表达

目的确定水通道蛋白AQP1及AQP5是否在大鼠肺泡毛细血管膜(呼吸膜)表达,进而研究急性肺损伤(ALI)大鼠AQP1和AQP5的表达调节及激素干预的作用。方法采用亲和的抗人AQP1和AQP5抗体,应用免疫组化及免疫电镜的方法研究AQP1及AQP5在呼吸膜的分布。选用肺泡内灌注脂多糖(LPS)制作大鼠ALI动物模型,研究ALI时呼吸膜AQP1及AQP5的变化。结果免疫染色显示AQP1主要表达于正常肺组织的微血管内皮,而AQP5主要表达于肺泡I型上皮细胞。免疫组化分析进一步表明LPS灌注后4h~48h AQP1及AQP5在呼吸膜的表达均下降;AQP1蛋白于LPS灌注后24h及激素干预后有部分恢复(P0.05),而AQP5无这种恢复现象。结论 ALI时AQP1及AQP5在呼吸膜的表达减少,提示ALI时AQP1和AQP5的下降表达可能与其液体转运的异常有关。     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋白5AC的表达变化及其相关性研究

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性。方法制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达。结果小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P<0.01),而MUC5AC表达显著升高(P<0.01),两者呈负相关(r=0.901,P<0.01)。结论哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌。     

阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织AQP1和AQP5表达的影响

目的 通过研究阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织水通道蛋白1（AQP1）和水通道蛋白5（AQP5）表达的影响,旨在从水液代谢及气道黏液分泌的角度探讨阳和平喘颗粒治疗支气管哮喘的作用机制。方法 SD大鼠90只随机分为正常组（N）、模型组（M）、阳和平喘颗粒低、中、高剂量治疗组（YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H）和地塞米松治疗组（DXM）,每组15只。其中,M、YHPC-L、YHPC-M、YHPC-H和DXM组采用卵蛋白（OVA）腹腔注射致敏及雾化吸入的方法建立哮喘大鼠模型,同时应用氢化可的松腹腔注射复制肾阳虚模型,N组则均使用生理盐水作为对照。采取HE染色检测各组大鼠肺组织形态学改变,应用Real-time PCR和Western blot检测各组大鼠肺组织AQP1和AQP5 mRNA及蛋白表达水平的变化,采用免疫组化法检测AQP1和AQP5在肺组织的分布及表达水平变化。结果 与N组相比,M组AQP1和AQP5在mRNA及蛋白表达水平均发生显著下降（P<0.01）;与M组相比,YHPC-L、YHPC-M和YHPC-H组AQP1和AQP5的表达水平均显著上升（P<0.05~0.01）,且具有一定的剂量依赖效应;与DXM相比,YHPC-L对AQP1和AQP5的作用效果低于DXM（P<0.05）,而YHPC-M和YHPC-H则与之具有相当的作用效果（P>0.05）。结论 阳和平喘颗粒可通过上调AQP1和AQP5的表达而调控水液代谢平衡及气道黏液分泌,进而发挥其治疗支气管哮喘的作用。      

AQP5和AQP8在人结肠癌中的表达及意义

目的研究水通道蛋白5和水通道蛋白8在人结肠癌组织中的表达,初步探讨其在人结肠癌发生发展中的意义。方法采用免疫组织化学和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)的方法,检测人结肠癌组织和癌旁组织中AQP5和AQP8的表达。结果 AQP5主要表达于人结肠癌组织中肿瘤细胞,癌旁正常组织基本没有表达;AQP8主要表达于癌旁正常组织,而在人结肠癌组织肿瘤细胞则基本没有表达。结论 AQP5在人结肠癌组织肿瘤细胞中高表达,AQP8在人结肠癌癌旁正常组织中高表达,二者在结肠癌组织和癌旁组织中的表达与肿瘤的TNM分期和淋巴转移相关,在人结肠癌的发生发展及转移过程中起重要作用。     

中药对变应性鼻炎Th1/Th2细胞因子影响的研究进展

变应性鼻炎(AR)的发生发展与Th1/Th2细胞分泌的细胞因子密切相关,中医药治疗AR的疗效与调整患者免疫反应失衡有关。综述近5年来中医药治疗变应性鼻炎的临床与基础研究,客观评价中药治疗后细胞因子的变化,以期为临床选择用药提供一定的依据。     

克敏通窍止嚏汤对变应性鼻炎大鼠IgE、IL-4和IL-5含量的影响

目的:观察自拟克敏通窍止嚏汤对变应性鼻炎(AR)大鼠血清中IgE、IL-4和IL-5含量影响。方法:40只SD大鼠按体重随机分为正常对照组、治疗组和地塞米松(DXM)干预组,每组10只。除正常对照组外,余三组用卵清蛋白(OVA)建立AR大鼠模型,DXM干预组和治疗组分别给予DXM、自拟通窍止嚏汤中药汤剂干预14天,正常对照组用生理盐水代替OVA及干预药物。用被动皮肤过敏原试验(PCA)检验大鼠模型制备及药物干预后情况,ELISA法测定各组大鼠外周血清IL-4、IL-5和IgE。结果:模型组大鼠鼻喷嚏平均次数明显多于正常对照组、治疗组和DXM干预组(P0.05)。模型组大鼠PCA试验阳性率为92%,其余三组全部表现为阴性。模型组IgE均显著高于正常对照组(P均0.05);治疗组IgE、IL-4、IL-5均显著低于模型组(P0.05)。治疗组各项指标与干预组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:自拟通窍止嚏汤可降低AR大鼠IL-4、IL-5和IgE含量,减轻鼻黏膜变应性炎症。     

布地奈德对变应性鼻炎鼻黏膜黏蛋白MUC5AC和MUC5B表达的影响

目的研究皮质类固醇激素（布地奈德混悬液）对体外培养的变应性鼻炎鼻黏膜组织黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因和蛋白表达的影响。方法采用体外鼻黏膜组织培养方法,分空白对照组、组胺刺激组和组胺刺激加布地奈德干预组进行研究,培养后组织分别用RT-PCR和免疫组织化学2种方法检测黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因和蛋白表达。结果与其他两组相比,组胺刺激组黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因及蛋白的表达均显著增强（均P〈0.05）,而布地奈德干预组中黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因及蛋白的表达与对照组相比差异无显著性意义（均P〉0.05）。结论皮质类固醇激素——布地奈德混悬液能下调黏蛋白MUC5AC和MUC5B基因和蛋白的表达,从而减少变应性鼻炎鼻黏膜黏液的过度分泌。     

变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜组织重塑和转录因子T-bet/GATA-3的表达

【目的】 建立变应性鼻炎小鼠模型,了解鼻黏膜组织重塑情况,探讨核因子T-bet/GATA-3 比值在变应性鼻炎免疫失衡中的意义?【方法】 建立卵清蛋白(OVA)诱导的变应性鼻炎小鼠模型;20只BALB/c 小鼠随机分为正常组和实验组?HE染色观察呼吸道黏膜炎症变化;ELISA法(酶联免疫吸附法)检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素?酌(IFN-γ)的水平;Western blot法检测T-bet?GATA-3蛋白在鼻黏膜组织的表达?【结果】变应性鼻炎小鼠鼻和支气管黏膜均存在组织重塑?与正常组相比,实验组鼻黏膜出现上皮脱落,杯状细胞增生,鳞状上皮组织转化,上皮坏死,固有层和黏膜下层腺体增生,血管扩张,组织水肿,并见特征性的嗜酸性粒细胞浸润?实验组血浆中IL-4和IFN-γ的水平分别是(16.5 ± 4.1)pg/mL和(6.5 ± 1.1)pg/mL,而对照组分别是(7.3 ± 1.7)pg/mL,和(11.4 ± 3.3)pg/mL;实验组血浆中IL-4的含量明显高于对照组,差异具有显著性(P < 0.05),而IFN-γ的量低于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05)?对照组鼻黏膜T-bet/GATA-3蛋白表达量的比值(0.62 ± 0.17), 明显高于实验组(0.12 ± 0.03;P<0.05)?【结论】 变应性鼻炎小鼠模型鼻黏膜存在组织重塑,可能与转录因子T-bet/GATA-3表达失衡导致下游Th1/Th2细胞免疫失衡和细胞因子IL-4/IFN-γ分泌失调有关?