斑马鱼在生态毒理学研究及环境监测中的应用

斑马鱼作为一种新型的模式动物,由于其易于饲养、体外受精、产卵量大、胚胎透明及体外发育等优点,已经广泛应用于生物研究的多个领域。近年来,斑马鱼及其胚胎也已经广泛应用于生态毒理学研究及环境监测领域;并且随着转基因斑马鱼技术的建立,斑马鱼及其胚胎将更好地应用于生态毒理学研究和环境监测。     

斑马鱼模型在纳米毒理学中的研究应用与进展

斑马鱼(Danio rerio)具有体型小、易于饲养、繁殖率高、繁殖周期短、体外受精、胚胎透明易于观察等诸多优势,是纳米毒理学研究当中较为理想的模式生物。本文综述了纳米材料对斑马鱼的毒性作用,包括:消化系统毒性、生殖系统毒性、神经系统毒性和胚胎毒性;其毒性机制包括:氧化应激、细胞凋亡、影响基因表达、影响细胞周期,并分析了纳米材料对斑马鱼毒性的主要影响因素,包括:化学组成、浓度或剂量、粒径、形状、给药方式以及材料制备方法。为进一步进行纳米毒理学研究以及斑马鱼模型在纳米毒理学中的应用提供了参考依据。     

大动物准清洁系统试验研究设施探讨与实践

国内屏障系统啮齿类大、小鼠动物饲养及动物实验设施通过二十余年的努力，从布局、工艺、管理流程等诸多方面日臻完善。然而大动物饲养和动物实验设施特别是广泛应用于非临床药理、毒理学的犬、猴等设施在open system和barrier system之间徘徊的局面。本文在中国国内首次提出了专门用于大动物饲养和实验的准清洁级系统的概念（Advanced Cleaning System）并用于客观具体的设施设计、施工和使用中。     

运用自然辩证法思想指导毒理学的学习与研究

毒理学是研究毒物毒性及其机制的一门学科,其对毒物毒性规律的认知、毒性剂量、毒性反应以及毒理学研究与创新都体现着自然辩证法思想,因此,自然辩证法对毒理学的学习和研究具有普遍的指导意义.     

斑马鱼在生殖毒性评价中的应用

斑马鱼是一种常见的热带淡水鱼,它繁殖力强、发育同步、胚胎透明、性成熟周期短、体型小,便于体外受精繁殖和易于饲养管理,成为生态毒理学研究的良好模式生物。本文就斑马鱼性腺发育、繁殖力、第二性征、卵黄蛋白原合成及子一代胚胎生长发育作一综述。     

污灌稻米喂养大白鼠致畸试验研究

石油成分非常复杂,多达近万种,其废水的组成报导有百余种。石油及其产品的致癌性,致畸性已有报导。石油工业废水灌溉农田在沈抚地区已有三十余年历史。中科院林土所对污灌水稻的生态进行许多调查研究,对其增产作用已肯定。但是,其毒性问题,人们很关心。为此,做了流行病学调查,以及慢性毒理学试验。本实验对饲养动物进行了形态病理观察,现将结果报告如下:     

卫生毒理学实验教学考核模式改革的实践与探讨

卫生毒理学作为一门实验学科,其实验教学在教学过程中的作用极其重要。本文通过对新疆医科大学2009级预防医学专业卫生毒理学实验教学考核模式的初步改革实践,探讨提高卫生毒理学的实验教学效果的方法和措施。     

斑马鱼实验动物化研究及应用

本文综述了斑马鱼实验动物化过程，对斑马鱼的生物学特性，包括形态、习性、细胞遗传学研究、分子遗传学研究及相关技术、遗传学和微生物学控制、饲养管理等进行了概述，并简要介绍了斑马鱼在发育生物学、遗传学、毒理学及人类疾病动物模型等方面的应用。     

毒理学实验教学改革的探索与体会

毒理学实验教学是预防医学类相关专业毒理学课程教学环节中的关键点。为了适应素质教育和人才培养的需要,有必要对毒理学实验教学模式进行改革,提高毒理学实验教学质量和效果。从教学内容、教学方式和教学手段以及考核办法等几个方面总结了毒理学实验教学改革的初步探索与心得体会。实践证实,毒理学实验教学改革有助于培养合格的、高素质、创新型预防医学专业人才。     

军队院校卫生毒理学教学融入军事特色的思考

军队院校卫生毒理学的教学须围绕为军服务主旨开展,以更好地服务官兵、服务基层、服务战争。文章围绕在军事行动中体会毒理学理论、在军事极端环境中应用毒理学方法、在卫勤管理中实践管理毒理学、在未来战争中思考毒理学新发展四方面,对如何将军事特色深入到军队院校卫生毒理学教学中展开了思考。     

水生实验动物的研究与开发应用——小型淡水鱼类对毒物的敏感性试验

本文报导了几种小型淡水鱼类对毒物的敏感性试验;试验结果,小型淡水鱼类对金属毒物和有机磷农药的敏感性较强,作为毒性实验动物的选育对象的可行性值得研究;金鱼(Carassiusauratus)对镉的毒性有明显的形态特征,作为环境毒理学和肿瘤学等特定研究目的的水生实验动物的选育品种,定向纯化培育,建立水生实验动物的繁育体系是很值得考虑的.     

Isolation of a small molecule with anti-MRSA activity from a mangrove symbiont Streptomyces sp. PVRK-1 and its biomedical studies in Zebrafish embryos

Objective

The aim of the present study was to isolate the anti-MRSA (Methicillin Resistant Staphylococcus aureus) molecule from the Mangrove symbiont Streptomyces and its biomedical studies in Zebrafish embryos.

Methods

MRSA was isolated from the pus samples of Colachal hospitals and confirmed by amplification of mecA gene. Anti-MRSA molecule producing strain was identified by 16s rRNA gene sequencing. Anti-MRSA compound production was optimized by Solid State Fermentation (SSF) and the purification of the active molecule was carried out by TLC and RP-HPLC. The inhibitory concentration and LC₅₀ were calculated using Statistical software SPSS. The Biomedical studies including the cardiac assay and organ toxicity assessment were carried out in Zebrafish.

Results

The bioactive anti-MRSA small molecule A₂ was purified by TLC with Rf value of 0.37 with 1.389 retention time at RP-HPLC. The Inhibitory Concentration of the purified molecule A₂ was 30 µg/mL but, the inhibitory concentration of the MRSA in the infected embryo was 32-34 µg/mL for TLC purified molecule A₂ with LC₅₀ mean value was 61.504 µg/mL. Zebrafish toxicity was assessed in 48-60 µg/mL by observing the physiological deformities and the heart beat rates (HBR) of embryos for anti MRSA molecule showed the mean of 41.33-41.67 HBR/15 seconds for 40 µg/mL and control was 42.33-42.67 for 15 seconds which significantly showed that the anti-MRSA molecule A₂ did not affected the HBR.

Conclusions

Anti-MRSA molecule from Streptomyces sp PVRK-1 was isolated and biomedical studies in Zebrafish model assessed that the molecule was non toxic at the minimal inhibitory concentration of MRSA.     

阿奇霉素对斑马鱼心脏毒性的初步研究

目的建立阿奇霉素诱导斑马鱼幼鱼心脏毒性的模型,为后续抗菌类药物心脏毒性的机理研究奠定基础。方法以受精后2 d发育正常的斑马鱼胚胎作为模型,以不同浓度的阿奇霉素处理斑马鱼胚胎3 d后,观察斑马鱼胚胎心脏形态并计算其心率和心搏量以评价斑马鱼胚胎心脏的功能。结果 0.3和1 mm浓度的阿奇霉素作用3 d后,可见斑马鱼胎心明显毒性。与正常对照组比较,模型组斑马鱼胎心肿大,心率减慢和心搏量减小。结论阿奇霉素对斑马鱼胎心有明显毒性作用,且与阿奇霉素的浓度正相关,该模型可以用于后续抗生素类药物引起的心脏毒性的机理研究。     

吉非替尼对斑马鱼胚胎发育及肿瘤耐药基因表达的影响

目的 研究吉非替尼对斑马鱼早期胚胎发育及abcb4肿瘤耐药基因表达的影响.方法 实验动物采用斑马鱼,实验分为吉非替尼组、阿霉素和吉非替尼的混合液组、空白对照组.将吉非替尼稀释成不同浓度梯度的药液,分别处理受精后0.5～1.5 h(0.5～1.5 hpf)的斑马鱼胚胎,观察胚胎和幼鱼的死亡率、孵化率及畸形率变化.统计各浓度不同时间点的胚胎死亡率,计算出IC50的数值;统计48 hpf和72 hpf的胚胎孵化率及120 hpf的畸形率;收集不同组别的斑马鱼胚胎,通过实时荧光定量PCR,检测斑马鱼胚胎中abcb4基因的表达量.结果 计算出吉非替尼在斑马鱼胚胎中的IC50为16.18 μmol/L.与对照组比较,高剂量吉非替尼(≥20 μmol/L)显著抑制胚胎的孵化,并有明显的胚胎致死效应和致畸效应;吉非替尼组的斑马鱼胚胎abcb4基因的mRNA水平变化不显著,而阿霉素和吉非替尼的混合液组的abcb4基因的mRNA水平有明显变化(P＜0.05).结论 吉非替尼对斑马鱼早期胚胎中abcb4肿瘤耐药基因的表达水平无明显影响(P＞0.05),但是吉非替尼能逆转易耐药药物阿霉素的耐药作用,提示使用斑马鱼可以构建肿瘤耐药模型.     

斑马鱼资源的开发保藏与国家斑马鱼资源中心

斑马鱼是一种新兴的脊椎模式动物.在过去的30年中,斑马鱼已被广泛应用于生命科学、健康科学、环境农业等诸多科研领域.为了满足不同的科研需要,研究人员开发和利用各种技术创建了大量的斑马鱼基因突变和转基因品系,这些品系已成为开展相关科学研究的宝贵资源.为了更好地保藏和利用这些资源,在全球范围内建设有多个规模不一的斑马鱼资源库.2012年,我国的国家斑马鱼资源中心(http://zfish.cn)在中国科学院水生生物研究所正式成立.本文将重点介绍全球斑马鱼资源的开发和保藏情况,以及我国国家斑马鱼资源中心的最新建设进展.     

益母草碱对阿霉素致斑马鱼心脏毒性保护作用的初步研究

目的观察不同浓度的盐酸益母草碱对阿霉素所致斑马鱼胚胎心脏毒性的保护作用。方法应用发育正常受精后48h的斑马鱼胚胎作为实验模型,用盐酸益母草碱＋阿霉素（浓度为0＋30mg／L,30mg／L＋30mg／L,60mg／L＋30mg／L,120mg／L＋30mg/L）处理上述胚胎,分别于受精后60h、72h和96h时观察胚胎心脏的形态及心率的变化。结果各给药组以及对照组在给药后均出现心率减慢、心脏区域出血的胚胎心脏中毒现象。但益母草碱联合用药组的心脏毒性作用较小,且随着盐酸益母草碱浓度的升高,阿霉素的心脏毒性作用明显减小。结论阿霉素对斑马鱼胚胎具有心脏毒性作用．而盐酸益母草碱对阿霉素所致心脏毒性具有保护作用。     

Topically acquired bacterial zoonoses from fish: a review

The main pathogens acquired topically from fish (through spine puncture or open wounds) are Aeromonas hydrophila, Edwardsiella tarda, Erysipelothrix rhusiopathiae, Mycobacterium marinum, Streptococcus iniae, Vibrio vulnificus and Vibrio damsela. S. iniae has recently emerged as a public health hazard associated with aquaculture, and M. marinum often infects home aquarium hobbyists. With the expansion of aquaculture and popularity of recreational fishing in Australia, medical practitioners can expect to see more infections of this nature. Diagnosis and treatment may be difficult, especially in view of emerging antibiotic resistance in fish pathogens.     

氯化两面针碱对斑马鱼胚胎心脏影响的初步研究

目的观察不同浓度的氯化两面针碱对斑马鱼心脏的影响。方法用发育正常的受精后48 h（48 hpf）的斑马鱼胚胎作为实验模型,用浓度为5.00 mg/L、3.15 mg/L、2.00 mg/L、1.58 mg/L、1.12 mg/L的氯化两面针碱处理上述胚胎,分别于受精后60 h和72 h时观察胚胎心脏的形态及心率的变化。结果各给药组在受精后60 h和72 h时均出现胚胎心脏中毒现象。5.00 mg/L、3.15 mg/L实验组中,胚胎主要表现为心脏跳动停止、心脏区域出血,2.00 mg/L、1.58 mg/L、1.12 mg/L实验组的胚胎则主要表现为心脏发育畸形。心率随着浓度的升高而明显下降,随着暴露时间的延长,心率下降不明显。结论氯化两面针碱对斑马鱼胚胎有心脏毒性。     

纳升超高效液相色谱-飞行时间质谱检测斑马鱼胚胎中小分子多肽的初步研究

目的 探讨纳升超高效液相色谱-飞行时间质谱(nano-UPLC-TOF-MS)检测斑马鱼胚胎中小分子多肽的方法.方法 收集受精后发育24 h的斑马鱼胚胎,去除外层胶膜,采用机械力破碎法去除斑马鱼早期胚胎中的卵黄,并用显微镜和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测去除效果,然后用小分子肽提取液获得肽液样品后,用nano-UPLC-TOF-MS检测小分子肽相对分子质量.结果 经处理的胚胎卵黄几乎完全被去除,nano-UPLC-TOF-MS结果显示在22～24.5 min处有一明显的样品峰,单质量/电荷比(m/z)显示,绝大部分肽段峰位于800～1400 m/z范围内.结论 Nano-OPLC-MS是检测小分子多肽的有效方法,早期斑马鱼胚胎中存在着小分子多肽,其相对分子质量集中在800～1400范围内.