全自动加样系统造成ELISA实验拖带现象分析

目的通过对血液标本使用全自动加样系统在酶联免疫吸附测定(ELISA)实验中出现的拖带现象进行分析,寻求有效的解决拖带现象的方法。方法用Freedom EVO Clinical和ML-STAR全自动加样系统加样,对ELISA实验出现拖带阳性的标本,采取手工加样用原试剂盒进行双孔复试,比较两种加样方法的检测结果。结果经手工加样ELISA双孔复检,结果均为阴性,证实为拖带阳性。结论拖带现象是由全自动加样系统加样针污染引起的,做好对仪器的维护保养可以减少拖带现象的发生,而最好、最根本的解决办法是使用一次性加样针。     

AT plus2加样针非一次性使用的可行性研究

全自动加样仪AT plus 2具有自动、快速、精确的优点,大大提高了血站血液检测工作的效率[1].但由于其采用加样针洗涤后重复加样的方式,实验中会出现高浓度阳性标本拖带污染[2].为减少拖带污染,笔者对加样针自动清洗次数与ELISA检测结果的关系进行了对比试验.     

全自动酶免分析仪加样中拖带阳性的解决方法探讨

目的：探讨全自动酶免分析仪加样中拖带阳性的解决办法。方法：收集常规筛查中的人体免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）抗体、梅毒螺旋体（treponema pallidum,TP）抗体、丙型肝炎病毒（hepatitis C virus,HCV）抗体和乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen,HBsAg）强阳性标本各1份;分别在使用去离子水和0.1% Tween-20弱碱性溶液作为系统冲洗液的情况下,用RMP200型全自动酶免分析仪做阳性拖带模拟试验;观察0.1% Tween-20弱碱性溶液作为系统冲洗液在消除加样针拖带阳性中的作用,以及其对酶免试验的影响。结果：在拖带模拟试验中,以去离子水作为系统冲洗液时,HIV抗体、TP抗体、HCV抗体和HBsAg强阳性标本都出现了阳性拖带现象,其中HIV抗体拖带阳性最为显著,有6孔被拖带阳性,HBsAg只出现1孔拖带阳性;而以0.1% Tween-20弱碱性溶液作为系统冲洗液时,HIV抗体、TP抗体、HCV抗体和HBsAg均无阳性拖带孔出现;并且在使用2种不同系统冲洗液情况下,相同检测项目之间的质控品和对照品的实验结果差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：0.1% Tween-20弱碱性溶液作为系统冲洗液能够避免全自动酶免分析仪加样中拖带阳性现象的发生,并且对酶免试验结果没有显著影响。     

ELISA在出入境人员梅毒检测中的应用分析

目的分析ELISA在出入境人员梅毒检测中的应用价值。方法对出入境人员1847份标本采用TRUST和ELISA同步盲法进行检测,TRUST或ELISA阳性者进行TPPA检测;对TRUST阴性,ELISA阳性受检者进行跟踪复检和流行病学调查。结果1847份标本中,TRUST检测28份阳性,ELISA检测57份阳性,TPPA复检ELISA检测57份阳性者均为阳性。对31份TRUST阴性,ELISA和TPPA阳性标本受检者1～2月后进行TRUST复查。全部仍为阴性。结论ELISA与TPPA检测结果具有很好的一致性,对出入境口岸梅毒监测具有很好的应用价值;推荐采用ELISA做初筛试验,阳性结果以TRUsT试验复核的出入境人员梅毒血清学检测程程序。     

全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象分析

目的探讨全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象的原因及对策。方法采用AT全自动加样系统加注稀释液及血清,当发现ELISA微板上从A排至H排连续出现2孔或2孔以上阳性结果时,分别用2种试剂进行复试。结果在4839份血液标本的检测过程中,由AT全自动加样系统引起的强阳性标本拖带现象共8份次。结论通过设置合适的加样参数、做好仪器的日常维护保养及标本处理工作,可避免强阳性标本拖带现象的发生。     

全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象分析

目的探讨全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象的原因及对策。方法采用AT全自动加样系统加注稀释液及血清,当发现ELISA微板上从A排至H排连续出现2孔或2孔以上阳性结果时,分别用2种试剂进行复试。结果在4839份血液标本的检测过程中,由AT全自动加样系统引起的强阳性标本拖带现象共8份次。结论通过设置合适的加样参数、做好仪器的日常维护保养及标本处理工作,可避免强阳性标本拖带现象的发生。     

全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象分析

目的探讨全自动加样系统出现强阳性标本拖带现象的原因及对策。方法采用AT全自动加样系统加注稀释液及血清，当发现ELISA微板上从A排至H排连续出现2孔或2孔以上阳性结果时，分别用2种试剂进行复试。结果在4839份血液标本的检测过程中，由AT全自动加样系统引起的强阳性标本拖带现象共8份次。结论通过设置合适的加样参数、做好仪器的日常维护保养及标本处理工作，可避免强阳性标本拖带现象的发生。     

ELISA一步法与TPPA法检测梅毒螺旋体抗体应用分析

目的 探讨酶联免疫吸附实验(ELISA)一步法与梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测梅毒螺旋体抗体的优劣.方法 对2007年1月至2009年3月的51 065份血清标本分别进行TPPA法和ELISA一步法检测,并对检测阳性不一致的标本采用稀释法进行ELISA检测.结果 TPPA法检测梅毒螺旋体抗体阳性1 152例(2.26%),ELISA一步法检测阳性1 117例(2.19%),差异无统计学意义(P>0.05),但ELISA一步法检测出现灰区标本35例经TPPA法复查和倍比稀释后用ELISA法检测结果均为阳性,确证阳性率为100%.结论 TPPA法检测梅毒螺旋体抗体能避免ELISA一步法引起的前带现象,并且对ELISA一步法检测梅毒螺旋体抗体时出现的灰区标本进行TPPA法复查,可提高梅毒螺旋体抗体检出率.     

酶联免疫法与化学发光法对丙肝抗体和梅毒螺旋体抗体检测结果的影响因素分析

目的探究分析酶联免疫法与化学发光法对丙肝抗体和梅毒螺旋体抗体检测结果的影响因素。方法随机抽选我院检验科的360例血液标本,分别使用酶联免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay, ELISA)与化学发光法(采用LiCA500仪器)对血液标本中的丙肝抗体和梅毒螺旋体抗体进行检验。结果采用酶联免疫法与化学发光对血液标本实施丙肝抗体与梅毒螺旋体抗体的阳性检测,最终采用化学发光法检测结果为阴性的标本,酶联免疫法依旧检测为阴性。但是化学发光法检测为阳性的标本,酶联免疫法的结果并不全为阳性,经其他办法对差异标本进行检测后结果与化学发光法结果一致。结论在检测丙肝抗体与梅毒螺旋体抗体时,使用LiC500进行化学发光法检测时准确性较高,结果不易受到干扰,建议推广。     

应用ROC曲线确定化学发光法检测梅毒特异性抗体的最佳临界值

目的应用受试者操作特性(ROC)曲线,确定化学发光法(CLIA)检测梅毒特异性抗体的最佳临界值。方法收集经CLIA检测的临床血清标本共计261份,全部标本使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行复检。以TPPA作为参考标准,计算CLIA和ELISA检测梅毒抗体的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值;应用ROC曲线确定CLIA检测梅毒抗体的最佳临界值。结果 CLIA和ELISA检测梅毒抗体的敏感性分别为100.0%和97.1%,特异性为86.3%和91.1%,阳性预测值为72.9%和80.0%,阴性预测值为100.0%和98.9%。ROC曲线分析表明,当CLIA的临界值设定为2.41时,其方法的敏感性和特异性分别为100.0%和96.0%,与TPPA的总符合率为98.0%。结论当CLIA检测梅毒特异性抗体的临界值设定为2.41时,能够有效提高该方法的特异性。