RT-PCR法在快速检测肠道病毒71型(EV71)核酸中应用

2008年4月至5月发生在安徽阜阳的手足口病流行其病原已经确定为肠道病毒71型（Enterovirus 71,EV71）。EV71属于小RNA病毒科（Picornaradae）肠道病毒属（Enterovirus）,为一种单正链RNA病毒,病毒核酸含有大约7411个核苷酸。病毒颗粒大致呈球形,无包膜和突起,直径24～30nm。EV71的流行多见于夏、秋季,多发生于10岁以下的儿童。大部分患者恢复良好,但是也有部分患者死于严重的并发症。     

肠道病毒71致神经系统损害及肺水肿的研究进展

肠道病毒71（Enterovirus type 71,EV71）属小RNA病毒科,1969年首先从美国加利福尼亚州1例死于脑炎的9月龄婴儿粪便中发现。其后,美国、澳大利亚、瑞典、日本、保加利亚、匈牙利、中国香港、马来西亚、新加坡等国家和地区均有EV71感染流行的报道。EV71感染的发病高峰在夏秋季,婴幼儿为易感     

2012年保定市手足口病病原学特征分析

目的通过对手足口病病例进行病原检测,研究保定市手足口病病原分布情况,为手足口病预防控制提供依据。方法采用荧光RT-PCR法对收集的手足口病病例咽拭子标本进行特异性核酸检测。结果保定市手足口病病原体有肠道病毒71型（Enterovirus 71,EV 71）、柯萨奇病毒A组16型（Coxakivirus A16,Co A16）及其他肠道病毒（other enteroviruses,EV）。发病以4岁以下儿童为主。全年均有病例分布,以5-8月为高峰。样品采集时间以3 d内为好,病毒检出率高。结论引起手足口病的病原以EV7 1病毒、Co A16病毒为主,手足口病防控应以4岁以下儿童为主,在5-8月加强监测和预防控制工作。     

三门峡市2009年手足口病标本核酸检测结果分析

手足口病（Hand—foot—mouthdisease,HFMD）是2008年列入法定报告的一种丙类传染病,由多种肠道病毒引起的常见传染病之一,多发生于5岁以下婴幼儿,可引起手、足、口腔等部位的疱疹。引发手足口病的肠道病毒有20多个型别,其中以肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16型（CoxA16）最为常见。自1974年美国首次报道从神经系统疾病患者标本中分离出EV71病毒以来,许多国家和地区相继都有EV71爆发的报道。国内于1981年在上海首次出现。     

肠道病毒71型疫苗候选株和疫苗标准的研究

肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）属小RNA病毒科肠道病毒属,主要引起手足口病（hand-foot-and-mouth disease,HFMD）和中枢神经系统疾病。1969年在美国加里福尼亚分离出首株EV71[1]。近年来EV71在亚太地区持续流行[2-9],特别是1998年在中国台湾地区大流行后,开始引起人们的重视。我国大陆地区2008—2010年报告的HFMD病例数、严重病例和死亡数呈逐年上升趋势,     

2009～2010年秦皇岛市手足口病样本检测结果

目的了解影响实验室手足口病毒检出的因素,分析秦皇岛市2009~2010年手足口病例肠道病毒核酸的检测情况。方法应用实时荧光PCR技术对可疑手足口病例送检的咽拭子、肛试子、疱疹液等样本中肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒A组16型（CoxA16）、肠道病毒通用型（EV）进行病原学检测。结果 307例可疑病例中肠道病毒检出率为69.38%,样本的不同来源和存在的不同状态都对结果的检出有影响;秦皇岛市手足口发病集中在5~7月份,男女性别比为2.04：1,以5岁以下儿童为主;EV71与其他病毒所致重症手足口之比为12.5：1差异有统计学意义（χ2=18.86,P〈0.05）。结论切实加强实验室肠道病毒核酸检测工作,从多方面提高病毒检出的敏感性和特异性;EV71型是引起手足口重症病例的主要毒株,实时荧光PCR法可以快速检测手足口病样本中的肠道病毒核酸,为临床诊断和流行病防控提供病原学依据。     

肠道病毒71型特异性单克隆抗体的制备及其在病毒鉴定中的应用

目的：建立肠道病毒71型（ EV71）特异性检测的免疫荧光方法用于病毒分离培养后的EV71鉴定,为EV71生物学特征研究和疫苗株的筛选奠定基础。方法：以EV71 VP1为免疫原制备单克隆抗体,用经测序鉴定的肠道病毒毒株建立EV71特异性免疫荧光方法;将不同地区收集的手足口病患儿的临床标本进行病毒分离,利用EV71特异性单抗进行分离培养后的病毒鉴定。结果：制备获得2株单抗,经鉴定其中1株3 E12为EV71特异性单抗;以此单抗建立的免疫荧光方法对EV71感染细胞呈阳性反应,而与柯萨基病毒A16和埃可病毒6等非EV71肠道病毒不反应。从104份手足口病临床标本中共分离到35株病毒,产生肠道病毒典型的细胞病变;用3E12特异性单抗免疫荧光鉴定分离病毒,其中29株为EV71,与RT-PCR验证结果完全一致。结论：成功制备获得EV71特异性单克隆抗体,以此单抗建立的EV71特异性免疫荧光方法敏感性高、特异性强,可用于分离培养EV71的鉴定。     

手足口病流行趋势及预防控制对策探讨

手足口病(hand-foot-mouth disease,HFMD)是由柯萨奇病毒A 16(Coxsackievirus A 16,CVA 16)、肠道病毒71(Enterovirus 71,EV 71)等肠道病毒血清型引起的全球性幼儿和儿童常见传染病[1].HFMD在许多国家和地区,特别是亚太地区发生过多次较大规模的暴发或流行,已引起世界各国的普遍关注[2,3].     

病毒性脑炎患者脑脊液肠道病毒和EV71检测与分析

目的 探讨肠道病毒和EV71所致脑炎的发病情况及荧光定量PCR诊断病毒性脑炎的意义.方法 收集银川市118例临床诊断病毒性脑炎、脑膜炎患者脑脊液和血清,用荧光定量PCR检测肠道病毒和EV71阳性率及病毒拷贝数,用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）定性检测血清EV71病毒IgM抗体.结果 荧光定量PCR检测肠道病毒阳性病例42例,检测阳性率为35.6％;EV71阳性病例22例,检测阳性率为18.6％,占EV阳性病例的52.3％;ELISA定性检测EV71病毒IgM抗体,阳性病例30例,检测阳性率25.4％,肠道病毒和EV71病毒性脑炎患者6岁以内幼儿明显多见于其他年龄组.结论 肠道病毒是本地区病毒性脑炎、脑膜炎患者最常见的病原体,EV71可能是本地区肠道病毒性脑炎中最多见的一种,肠道病毒和EV71感染所致脑炎都以6以内幼儿为主;荧光定量PCR对EV71检测特异性高于ELISA.