不同性别PyMT自发性乳腺癌小鼠成瘤特点和不同时间肺转移观察

[目的]研究不同性别自发性乳腺癌小鼠乳腺肿瘤病毒启动子(mouse mammary tumor virus, MMTV)控制下表达多瘤中间T抗原(polyoma middle T-antigen, Py MT)的转基因小鼠的致瘤特性,再以雌性小鼠为观察对象进一步研究血常规指标变化及肺转移情况等。[方法]准备同为8周龄的Py MT雌性小鼠和Py MT雄性小鼠,观察比较雌性与雄性小鼠肿瘤发病时间、生存时间与生存率;另取同为8周龄的雌性Py MT和雌性FVB小鼠,观察8周后取血进行血常规检测,并通过病理切片观察小鼠12周龄及16周龄时肺组织的病理变化。[结果]每周观测小鼠的形态学特征可发现雌鼠第8周可扪及肿瘤,而雄鼠则在第18周可扪及肿瘤;雌鼠最长生存时间是19周,雄鼠则为46周,即雌性小鼠肿瘤发病时间早于雄性小鼠,生存时间明显短于雄性小鼠。血常规指标检测显示,雌性Py MT小鼠白细胞及亚群(除单核外)数量明显高于FVB小鼠(P0.05,P0.001);雌性Py MT小鼠在12周龄开始出现肺转移,肺部大量炎症细胞浸润,16周时肺组织伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)染色发现明显的肺转移,出现弥漫性分布、大小不等、质实、染色深的癌巢,细胞间推挤或重叠,细胞大小形态不同。[结论] MMTV-PyMT自发性乳腺癌小鼠雌鼠发病比雄鼠早,生存时间短,具有实验周期短、便于观察肿瘤发生的优势,12周龄开始出现肺转移,16周龄肺转移明显,是适合用于筛选抑制肿瘤细胞浸润、转移等药物的乳腺癌动物模型。本实验还通过血常规结果、肺转移情况数据为实验动物性别的选择提供参考。     

低浓度臭氧对小鼠生殖生理的影响

目的观察低浓度臭氧对小鼠生殖生理的影响。方法试验组小鼠和对照组小鼠分别在15w紫外灯照射产生的低浓度臭氧环境下和正常无臭氧环境下连续饲养7周，阴道涂片镜检观察雌性小鼠的动情周期。7周后，观察雄性小鼠的精子畸形率、早期精细胞微核率；利用放免试剂盒测定雄性及雌性小鼠血清中性激素的水平；并取睾丸、卵巢制作组织切片，观察是否有组织病理学改变。结果试验组雌性小鼠体重与对照组雌性小鼠差异无统计学意义，试验组雄性小鼠体重比对照组雄性小鼠轻；试验组雌性小鼠的动情周期与对照组雌性小鼠差异无统计学意义；试验组小鼠的精子畸形率、早期精细胞微核率和血清性激素水平与对照组小鼠差异无统计学意义；试验组和对照组的睾丸、卵巢组织切片均未发现异常。结论本实验中紫外灯照射产生的低浓度臭氧对昆明小鼠的生殖生理基本没有影响。     

小鼠细小病毒对小鼠移植瘤生长的抑制作用

给6～8周龄的清洁级BALB／C小鼠腹腔注射细小病毒毒株（64个单位血凝素），1周后再给小鼠皮下接种H22瘤株，15d后观察肿瘤生长情况。结果，注射细小病毒组小鼠的肿瘤生长受到抑制，其抑制率在雌性与雄性小鼠分别为82．0％和64．2％。     

性别差异对实验性链脲佐菌素糖尿病大鼠造模的影响

腺病理组织观察可见雄性模型大鼠胰岛细胞的肥大增生及空泡变性均较雌性严重.罗格列酮作用4周后,能降低雌性模型大鼠的血糖水平(P<0.05),埘雄性模型大鼠血糖无效.结论 25 mg/kg STZ加高脂膳食的方法可诱导雌性Wistar大鼠建立2型糖尿病模型,但南于STZ对雌性与雄性Wistar大鼠胰岛造成的损伤程度有差异,雄性大鼠更敏感,因此雄性Wistar大鼠利用25 mg/kg STZ加膳食诱导方法小能建立2型糖尿病模型.     

中药黄芪对小白鼠游泳耐力的影响及其与性腺的关系

本文通过动物实验,给小鼠口服黄芪煎剂7、14、21天,可使雄性小鼠的游泳耐力分别增强17％、25％和56％,而对雌性小鼠则无明显作用。摘除双侧睾丸后,黄芪增强雄性小鼠游泳耐力的效应便不再出现。而摘除双侧卵巢后,黄芪可使雌性小鼠的游泳耐力明显增强。说明黄芪影响小鼠游泳耐力的作用与性腺有密切关系。     

清洁级BALB/c小鼠生物学指标的建立

目的:建立清洁级BALB/c小鼠的正常生理、血常规及生化等指标。方法:分别选用6周、12周、18周、30周的清洁级BALB/c小鼠雌雄各20只,检测动物的主要生物学指标(生长曲线、脏器系数、大小肠长度、血常规及生化指标)结果:雄性动物体重增长趋势比雌性动物快,随着年龄的增加脏器系数中大部分数值雌性偏高雄性。相同年龄的BALB/c小鼠血常规中LY、MO、GR雌性比雄性明显增加,且雌性雄性有明显差异(P<0.05)。在相同年龄中BALB/c小鼠的生化ALP、CHOL、HDL-CHOL雄性比雌性偏高,且有明显差异(P<0.05)。     

雌性小鼠颌上腺NGFmRNA的原位杂交检测

应用地高辛标记的人β神经生长因子ＤＮＡ探针原位要交组化技术，研究雌性ＩＣＲ小鼠颌下腺的神经生长因子基因表达。颌下腺经４％多聚甲醛固定，常规冰冻切片，并以同种雄性小鼠颌下腺作阳性对照。实验结果显示，雌性小鼠颌下腺的ＮＧＦｍＲＮＡ分布与雄性小鼠相同，主要存在于纹状管和颗粒曲管上皮细胞中，但杂交信号明显弱于雄性小鼠；     

孤养与束缚应激致脑缺血小鼠抑郁样行为的性别差异

目的研究孤养与束缚应激对小鼠脑缺血损伤后抑郁样行为的影响及性别差异。方法将2～3月龄C57BL/6j雌、雄小鼠随机分为正常对照组（Ctrl组）、脑缺血再灌注组（IR组）以及脑缺血再灌注加孤养与束缚组（IRS组）。通过线栓法阻塞小鼠右侧大脑中动脉,制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型;孤养小鼠每天给予2 h束缚,连续刺激4周。期间,每周记录小鼠的体重变化。4周后,通过检测小鼠的糖水偏爱率和行为学（旷场测试和强迫游泳实验）,比较小鼠的抑郁样行为;此外,检测小鼠外周血血清中的肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β以及皮质酮和促肾上腺皮质激素水平。结果与Ctrl组相比,刺激1周后,IRS组雌、雄小鼠体重均显著减轻（P<0.05）,雌性小鼠的体重至刺激4周后仍显著减轻。与Ctrl组和IR组相比,IRS组雌、雄小鼠在刺激4周后均出现糖水偏爱率的显著降低;在旷场试验中,仅雌性小鼠表现为在活动中心区域的距离减少、停留时间缩短、穿梭次数减少及运动速度增快,而雄性小鼠无显著变化;强迫游泳试验中,仅雌性小鼠的不动时间显著延长,而雄性小鼠变化不显著。与Ctrl组相比,IR组和IRS组雄性小鼠外周血清中炎症因子肿瘤坏死因子-α和白细胞介素-1β均显著升高,而雌性小鼠无显著变化。此外,与Ctrl组和IR组相比,IRS组雄性小鼠仅外周血清中皮质酮显著增高,而雌性小鼠皮质酮和促肾上腺皮质激素均显著增高。结论连续4周的孤养与束缚应激致脑缺血小鼠发生抑郁样行为,并且雌性小鼠更加易感;炎症和下丘脑-垂体-肾上腺轴的反应差异参与性别差异的调节。     

高脂饮食诱导的内脏肥胖小鼠模型存在性别差异

目的:比较不同性别BALB/c小鼠采用高脂饮食建立肥胖模型的差异。方法:32只4周龄无特定病原体级BALB/c小鼠（雌雄各半）随机分为雌性对照组、雌性高脂组、雄性对照组和雄性高脂组,每组8只。雌性对照组和雄性对照组采用普通饮食,雌性高脂组和雄性高脂组采用高脂饲料喂养,喂养12周后测量小鼠体重、内脏脂肪比、空腹血糖、葡萄糖耐量、血脂、代谢相关激素水平,并采用16S rRNA测序检测小鼠粪便菌群构成。结果:高脂饮食干预导致雄性小鼠体重和内脏脂肪比明显增加,病理表现为单个脂肪面积明显增大,肝脏脂肪滴堆积,总胆固醇、空腹血糖、口服糖耐量试验时间-血糖曲线下面积以及血清胰岛素水平明显上升（均P<0.05）,并出现明显胰岛素抵抗（P<0.01）。而雌性高脂组体重、内脏脂肪比、血清胰岛素和瘦素水平与雌性对照组差异均无统计学意义（均P>0.05）。高脂干预后小鼠肥胖相关肠道菌群相对丰度显著变化并存在性别差异,其中雄性高脂组肥胖相关菌属（如布劳特菌）相对丰度明显增加,菌群结构变化更明显。结论:高脂饮食喂养12周4周龄BALB/c雄性小鼠可稳定建立以内脏脂肪堆积、代谢功能紊乱和肠道菌群变...     

碱性成纤维细胞生长因子与大鼠胰岛共微囊提高囊内胰岛存活率

目的探讨微胶囊大鼠胰岛皮下移植治疗化学性糖尿病小鼠以及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与大鼠胰岛共微囊对提高囊内胰岛存活率的作用。方法选取皮下预血管化化学性糖尿病C57BL/6雄性小鼠模型20只,行大鼠胰岛微胶囊小鼠预血管区域皮下移植。随机均分为4组。A组,bFGF与大鼠胰岛共微囊移植;B组,微胶囊大鼠胰岛移植;C组,大鼠胰岛移植;D组,空囊移植。观察受体小鼠的血糖和体重变化,移植后8周将糖尿病小鼠处死,取出微胶囊,用双硫腙(DTZ)染色法判定和比较微胶囊内大鼠胰岛存活数。结果A、B组移植1周以后血糖均较移植时显著下降(P值均<0.01),C、D组移植后血糖与移植时的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。A组与B组各时间点小鼠体重的差异均无统计学意义(P值均>0.05);A、B组糖尿病小鼠体重均在移植后1周下降,移植后2周开始上升;C、D组移植后体重持续下降。移植后8周,A组胰岛存活数为(32.6±5.1)个,显著高于B组的(17.8±4.3)个(t=8.22,P<0.01)。结论小鼠皮下预血管化微胶囊大鼠胰岛移植可有效缓解化学性糖尿病小鼠高血糖状态,移植效果明显优于裸胰岛皮下移植,bFGF与大鼠胰岛共微囊可明显提高微胶囊内胰岛存活率。     

脂质体与完全费氏佐剂预防NOD鼠胰岛炎探讨

OBJECTIVE: To explore the effects of complete Freund's adjuvant (CFA), incomplete Freund's adjuvant(IFA), large multilamellar liposome (LML) and small cationic liposome (DOTAP) on insulitis and diabetes. METHODS: 1. 3-week-old non-obese diabetic(NOD) female mice were randomly divided into 3 groups: CFA group (injected subcutaneously in the hind footpad, n = 16), IFA group (injected intraperitoneally, n = 16) and PBS group (injected subcutaneously in the hind footpad, n = 16). Three mice from each group (9 in total) were killed at the age of 12 weeks for the analysis of pancreatic pathology, and the others were not killed until they were 30 weeks old for diabetes incidence. 2. 3-week-old NOD female mice were randomly divided into 3 groups and injected intraperitoneally with LML (n = 13), DOTAP (n = 13) and PBS (n = 13), respectively. The insulitis score and diabetes incidence were estimated in the same way. RESULTS: 1. CFA injected subcutaneously in the hind footpad could significantly reduce the insulitis score and decrease diabetes incidence in NOD mice. At the age of 30 weeks, the incidence of diabetes in the CFA group was lower than that in the PBS group (injected subcutaneously in the hind footpad) (9.2% vs 81.8%, P = 0.001). At the age of 12 weeks, the insulitis score in the CFA group was lower than that in the control group [(0.05 +/- 0.02) vs (0.54 +/- 0.11), P < 0.001]. 2. LML injected intraperitoneally could significantly reduce the insulitis score in NOD mice. At the age of 12 weeks, the insulitis score in the LML group was lower than that in the PBS control group (injected intraperitoneally) [(0.16 +/- 0.02) vs (0.58 +/- 0.06), P < 0.001]. At the age of 30 weeks, there were no significant differences in the diabetes incidence between the LML group and the PBS group (60% vs 90%). 3. The protective effect of CFA was better than that of LML in NOD mice. CONCLUSION: CFA injected subcutaneously in the hind footpad may prevent NOD mice from developing diabetes and reduce the insulitis severity. Although the protective effect of CFA is better than that of LML, LML can lessen the insulitis severity and may become a new preventive strategy in NOD mice.     

甲壳低聚糖对NOD鼠糖尿病的预防作用

目的 :探讨甲壳低聚糖对NOD鼠糖尿病的预防作用机制。方法 :将 5周龄未发病的NOD小鼠分为糖尿病预防组和对照组。预防组用 3 %甲壳低聚糖溶液作饮用水 ,对照组用冷开水作饮用水 ,连续 15周 ,定期测血糖 ,称体重 ,实验末计算糖尿病的发病率 ,HE染色观察胰岛炎。结果 :对照组 12周龄即出现高血糖 ,而预防组至实验结束仅有少数出现高血糖 ,两组相比具有显著差异性 (P <0 0 1)。NOD鼠预防组糖尿病发病率 (2 5% )低于对照组 (79% ) (P <0 0 5) ,同时减轻胰岛炎的严重程度 (P <0 0 5)。结论 :甲壳低聚糖对NOD鼠糖尿病的确有预防作用 ,其机制可能与甲壳低聚糖的非特异性免疫调节作用 ,及抗氧化等有关。     

脂质体与完全弗氏佐剂预防NOD鼠胰岛炎探讨

目的 :探讨完全弗氏佐剂 (CFA)、不完全弗氏佐剂 (IFA)、大复层脂质体 (LML)、小单层阳离子脂质体(DOTAP)对NOD鼠胰岛炎和糖尿病发病的影响。方法 :①将 3周龄的NOD雌鼠随机分为 3组 ,分别给予CFA后脚板注射 (n =16 ) ,IFA和PBS乳化后腹腔注射 (n =16 ) ,单独PBS后脚板注射 (n =16 )。观察 12周龄胰岛病理及 30周龄糖尿病发病情况。②将 3周龄的NOD雌鼠随机分为 3组 ,分别给予大复层脂质体 (LML) (n =13) ,小单层阳离子脂质体 (DOTAP) (n =13) ,单独PBS腹腔注射 (n =13) ,同上观察胰岛病理及糖尿病发病情况。结果 :①CFA后脚板注射能明显降低胰岛炎计分 ,减少糖尿病的发生。 30周龄时 ,CFA组的发病率明显低于PBS后脚板注射对照组 (分别为9 2 %和 81 8% ,P =0 .0 0 1)。 12周龄时 ,CFA组胰岛炎计分明显低于对照组 [分别为 (0 0 5± 0 0 2 )和 (0 5 4± 0 11) ,P<0 .0 0 1]。②LML腹腔注射能明显降低胰岛炎计分。 12周龄时 ,LML组胰岛炎计分明显低于PBS腹腔注射对照组 [分别为 (0 16± 0 0 2 )和 (0 5 8± 0 0 6 ) ,P <0 .0 0 1]。 30周龄时 ,LML组糖尿病发生率为 6 0 % ,对照组为 90 % ,两组间无统计学差异。③在预防胰岛炎的作用上 ,CFA优于LML。结论 :CFA后脚板注射可预防NOD鼠发生糖尿病并减     

NOD小鼠1型糖尿病的自然发病特性

1型糖尿病由于自身免疫的损害造成胰岛β细胞破坏,引起胰岛素绝对缺乏,呈现高血糖症状。目前仍无有效的根治方法。非肥胖型糖尿病小鼠(NOD)能自然发生1型糖尿病,是目前研究1型糖尿病的主要动物模型。该品系小鼠有独特H2g7单倍体(Kd、I Ag7、I Enull、Db),通常于4～5周龄开始出现胰岛炎,进行性破坏胰岛β细胞,于12周龄时出现明显糖尿病症状,至30周龄时雌性小鼠累计发病率可达到80%,而雄性小鼠则不到20%。     

Oral administration of insulin to female nonobese diabetic mice inhibited diabetes and induced Fas ligand expression on islets of Langerhans

Objective To detect oral administration of recombinant human insulin to nonobese diabetic (NOD) mice for preventing them from diabetes and insulitis and to detect the effects of oral administration of insulin on Fas and Fas ligand expression on islet of Langerhans. Methods Sixty-four female NOD mice were divided into two groups.One group (34) was orally administered recombination human insulin 1 mg in 500 μl PBS and the other (30) 500 μl PBS only at age of 5 weeks old, twice a week for the first week, then weekly until 30 weeks of age. Results Oral administration of insulin to female NOD mice can significantly suppress diabetes and insulitis.The insulitis was less severe in the group fed with insulin than that in the control group (score of insulitis: 1.25±0.45 vs 3.0±0.76 at 16 weeks of age, P&lt;0.01).We examined Fas ligand and Fas expression on islets of Langerhans in both groups of NOD mice by using immunohistochemical techniques.We find that Fas only expressed on islets when the mice suffered the diabetes, whereas Fas ligand expressed on islets of the mice fed with insulin at 16 and 20 week of ages.We did not find Fas ligand positive staining on the islet feeding with PBS. Conclusion We speculated that oral insulin may induce Fas ligand expression on the islets and plays a role in protecting the pancreatic β-cell from autoimmune destruction.These results show that oral insulin affected autoimmune diabetes and insulitis in NOD mice.The immune mechanism of oral tolerance is closely related to the change of Fas ligand and Fas system.     

完全弗氏佐剂抑制NOD鼠胰岛β细胞凋亡及其机制

目的:探讨完全弗氏佐剂( complete Freund’s adjuvant, CFA)对非肥胖糖尿病( nonobese dia-betic, NOD)鼠胰岛β细胞凋亡及凋亡相关基因Fas,FasL和Bcl-x表达的影响。方法:将4周龄NOD雌鼠随机分为CFA组(n=5)和生理盐水( NS)对照组(n=5 ) ,给CFA组鼠后脚板注射50μLCFA,对照者鼠后脚板注射等量NS。监测血糖,若血糖连续2 d≥11.1 mmol /L即诊断为糖尿病。当NOD鼠发生糖尿病或至30周龄时,处死动物,取胰腺组织制成薄切片,HE染色观察胰岛炎,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记( TUNEL)及ABC免疫组织化学双标记染色观察并计数凋亡的胰岛β细胞,ABC免疫组织化学法染色观察并记数Fas,FasL和Bcl-x表达阳性细胞。结果:至NOD鼠30周龄时,CFA处理组鼠无1只发生糖尿病,对照组鼠有3只发生糖尿病;CFA处理组的胰岛炎积分低于NS对照组(1.820±0.962 vs. 3.020±1.040,P<0.05 ) ;CFA处理组胰岛β细胞凋亡率、Fas阳性细胞率、FasL阳性细胞率均低于NS对照组[ (10.2±2.8) % vs. (15.9±6.5) %,(54.9±14.5)% vs.(75.7±12.9) %,(20.3±10.4) % vs. (27.9±12.0) %,P<0.05] ,Bcl-x阳性细胞率高于NS对照组[ (74.9±10.7) % vs. (66.0±18.3) %,P<0.05]。结论:CFA能够减轻NOD鼠胰岛β细胞凋亡,其机制与减少促凋亡基因Fas和FasL表达及增加抑制凋亡基因Bcl-x表达有关。     

1.25（OH）2D3对NOD小鼠心肌超微结构的影响

目的 观察NOD小鼠在1,25（OH）2D3治疗前后心肌超微结构的改变,以探讨1.25（OH）2D3对心脏的保护作用. 方法 NOD小鼠（19只）用环磷酰胺诱发建立糖尿病模型后,随机分为1.25（OH）2D3治疗组及糖尿病模型组,每组6只.观察用药前及用药4周后糖尿病小鼠血糖及心肌超微结构的变化. 结果 模型组小鼠心肌纤维稀疏,肌丝扭曲部分断裂,z线增宽,M线、H带模糊不清.线粒体肿胀变形,嵴稀疏,排列紊乱,基底膜增厚,间质胶原纤维增生.1.25（OH）2D3治疗组小鼠心肌细胞中,肌丝排列整齐,结构清晰,肌纤维无明显断裂,线粒体肿胀较未治疗组明显减轻,心肌内微血管基底膜较模型组薄. 结论 1.25（OH）2D3可减轻实验性Ⅰ型糖尿病小鼠心肌超微结构的病变,对心肌有一定的保护作用.     

完全弗氏佐剂诱导脾脏T淋巴细胞凋亡预防非肥胖性糖尿病鼠1型糖尿病

为探讨脾脏T淋巴细胞凋亡在完全弗氏佐剂（CFA）预防非肥胖性糖尿病（NOD）鼠糖尿病中的作用，42只NOD雌鼠随机分成CFA组（21只）和磷酸盐缓冲盐水（PBS）组（21只），3周龄时于鼠后脚板注射CFA50μl/只和PBS50μl／只。按不同的观察时间分6周、12周和30周3个观察组。采用TUNEL末端标记法和免疫组织化学方法观察脾脏T淋巴细胞凋亡情况。结果显示：CFA诱导脾脏成熟的CD4^ T淋巴细胞凋亡，但不能诱导成熟的CD8^ T淋巴细胞凋亡；CFA能预防NOD鼠糖尿病的发生。提示CFA可通过诱导脾脏T淋巴细胞凋亡，以减少外周的CD4^ T淋巴细胞，达到预防NOD鼠1型糖尿病。     

Gastric emptying in animal models of human diabetes: correlation to blood glucose level and gut neuroendocrine peptide content

Gastric emptying was measured in non-obese diabetic (NOD) and in obese diabetic mice. The feces were collected and the water content was determined. The neuroendocrine peptides known to regulate gastrointestinal motility, namely secretin, gastric inhibitory peptide (GIP), motilin, somatostatin, peptide YY (PYY), substance P, vasoactive intestinal polypeptide (VIP) and galanin, were measured in tissue extracts of different segments of the gut by radioimmunoassay. Whereas the gastric emptying of NOD mice was significantly slower than that of controls, that of the obese diabetic mice was unaltered. The gastric emptying of NOD mice, but not that of obese diabetic mice, correlated with the blood glucose level. The feces weight and water content in NOD mice was significantly higher than controls. The feces water content in obese diabetic mice was significantly lower than that of controls. The concentrations of antral somatostatin, VIP and galanin, and duodenal secretin as well as jejunal motilin in NOD mice were higher than those of controls. Duodenal GIP and colonic PYY concentration in NOD mice was lower than controls. Duodenal GIP and VIP, and colonic somatostatin and VIP levels were lower in obese diabetic mice than controls. Secretin and motilin levels correlated with gastric emptying in NOD mice. The high duodenal concentration of secretin might reflect high synthesis and release of this hormone, and may therefore be among the factors that caused slow gastric emptying in the NOD mice. The increase in concentration of motilin observed in NOD mice may be caused by impaired release of this hormone as a result of hyperglycemia. Whereas the high concentrations of antral VIP and galanin and the low level of colonic PYY in diabetic NOD mice may contribute to the development of diarrhea in NOD mice, the decreased levels of duodenal and colonic VIP and colonic somatostatin in obese diabetic mice may account for the constipation encountered in these animals.     

人谷氨酸脱羧酶65 DNA疫苗预防非肥胖糖尿病小鼠糖尿病的机制探讨

目的　探讨人谷氨酸脱羧酶 6 5 (GAD6 5 )DNA疫苗预防非肥胖糖尿病 (NOD)小鼠糖尿病的作用机制。方法　 (1) 6 2只 4周龄NOD雌鼠分为PBS(2 1只 )、PcDNA(2 0只 )、GAD6 5 (2 1只 ) 3组 ,由胫前肌分别注射PBS、质粒PcDNA3 1、人GAD6 5DNA疫苗 5 0 μg ,1周后重复 1次。观察 30周龄的累积糖尿病发病率。 (2 )各组取 12周龄未发病NOD鼠 (n =10 )胰腺HE染色观察胰岛炎 ;并用末端脱氧核糖核酸缺口标记法 (TUNEL)加SABC法检测胰岛 β细胞凋亡 ;ELISA法测定血清、脾细胞培养上清干扰素γ(IFN γ)和白细胞介素 4 (IL 4 )水平 ;RT PCR半定量检测脾脏IL 4、IFN γ和核因子NF ATc、NF ATpmRNA表达水平。结果　 (1) 30周龄时 ,PBS、PcDNA、GAD6 5组发病率分别为 95 2 %、80 0 %、6 1 9%。GAD6 5组发病率低于PBS组 (P =0 0 0 8)。 (2 ) 12周龄时GAD6 5组胰岛炎积分 (0 99± 0 71)和胰岛 β细胞凋亡率 (0 75 % )均低于PBS组 (2 16± 0 78,P =0 0 0 1;8 97% ,P=0 0 14 )和PcDNA组 (1 72± 0 5 9,P =0 0 2 7;2 6 5 % ,P =0 0 2 3)。GAD6 5组脾脏NF ATc、IL 4mRNA相对吸光度值及血清IL 4水平分别为 1 93± 0 34、0 70± 0 16、36 pg/ml± 8pg/ml,显著高于PBS组 (0 79± 0 15、0 4 9± 0 11、19pg/ml