罗格列酮改善胰岛素抵抗大鼠心肌脂联素及受体表达的研究

目的 探讨罗格列酮对胰岛素抵抗大鼠心肌脂联素(APN)及其受体表达的影响.方法 将30只雄性SD大鼠,随机分为3组:对照组10只,予普通饲料喂养8周;胰岛素抵抗组(IR组)10只,高果糖饮食喂养8周;罗格列酮组(RSG组)10只,高果糖饮食喂养8周+罗格列酮3 mg/(kg·d)灌胃4周.所有大鼠喂养第8周末采血测定空...     

胰敏胶囊阻止高脂膳食诱导大鼠胰岛素抵抗的发生

目的：建立高脂膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型，观察胰敏胶囊对模型大鼠发生胰岛素抵抗的阻止作用。方法：Wistar雄性大鼠分成空白组、模型组、治疗组、对照组，治疗组与对照组在以高脂膳食造模的同时，每日分别给予胰敏胶囊、罗格列酮，每周测血压及体重，6周后，以正常血糖-高血浆胰岛素钳夹技术，结合输注放射性葡萄糖测定股四头肌葡萄糖摄取率评定大鼠的胰岛素敏感性。并测定各组大鼠葡萄糖耐量、血清游离脂肪酸、甘油三酯、血浆胰岛素、胰岛素敏感性指数。结果：与模型组大鼠比较，治疗组体重明显下降，葡萄糖耐量正常，血清甘油三酯、游离脂肪酸、血浆胰岛素含量均显著下降，胰岛素敏感性指数、葡萄糖输注率、葡萄糖摄取率升高。治疗组与对照组相比无显著性差异。结论：胰敏胶囊具有阻止高脂膳食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型发生胰岛素抵抗的作用。     

不同饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠模型的比较

目的:应用不同饮食喂养大鼠,观察大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,同时观察大鼠游离脂肪酸(FFA)的变化。方法:分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法检测大鼠血清中游离脂肪酸,测量大鼠体重、附睾脂肪垫重量。结果:高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸明显高于非胰岛素抵抗大鼠,胰岛素抵抗组大鼠体重及附睾脂肪垫重量明显高于非胰岛素抵抗大鼠。结论:高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功地诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸有关。     

消膏转浊方对肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠脂质过氧化反应与胰岛素抵抗的影响

目的:观察消膏转浊方对高脂饲养的肥胖大鼠脂质过氧化反应以及胰岛素抵抗(IR)的影响。方法:将Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、消膏转浊组、罗格列酮组及饮食控制组。正常组以标准饲料喂养,其余组的大鼠饲以高脂饲料。8周后,正常组饮食同前;模型组继续高脂喂养;消膏转浊组及罗格列酮组改为普通饲料喂养,同时给予相应的药物干预;饮食控制组改为普通饲料喂养。干预12周后,检测大鼠葡萄糖输注率(GIR),肝匀浆中FFA、MDA、SOD的含量,检测肝细胞色素P4502E1的蛋白表达,以及肝脏CYP2E1、胰岛素受体(InsR)和胰岛素受体底物-2(IRS-2)的基因表达。结果:与模型组比较,消膏转浊组可以显著降低大鼠肝组织匀浆中的FFA、MDA含量(P<0.01),同时提高SOD活性(P<0.01);消膏转浊组与罗格列酮组均能够显著提高肥胖型非酒精性脂肪肝大鼠的GIR(P<0.01);消膏转浊组肝细胞中CYP2E1染色阳性的细胞面积和MOD值、CYP2E1 mRNA的表达均显著低于模型组(P<0.01);同时,消膏转浊组与罗格列酮组InsR mRNAI、RS-2 mRNA的表达均显著高于模型组(P<0.01)。结论:高脂饮食可以引起大鼠肝脏脂质过氧化反应以及胰岛素抵抗状态,消膏转浊方可减少肝脏脂质过氧化反应以保护肝脏;同时消膏转浊方通过增加肝脏组织InsR以及IRS-2的表达来改善胰岛素抵抗状态。     

以自发性大鼠模型评价胰岛素增敏剂药效时的初步探讨

目的 研究自发性Zucker fa/fa(ZF)大鼠评价胰岛素增敏剂药效时需要注意的问题,确定入组标准、检测指标、评价标准.方法 20只雄性ZF大鼠按照体质量均一原则分为模型对照组和罗格列酮组(每组10只),10只Zuckerfa/?大鼠设为正常对照组.罗格列酮组以胰岛素增敏剂罗格列酮作为阳性药物,6 mg/kg灌胃给药;模型对照组和正常对照组给予水.结果 罗格列酮能明显降低大鼠的血清胰岛素、甘油三酯及游离脂肪酸水平(P<0.05);高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果 表明,能明显提高罗格列酮组大鼠的葡萄糖输注率与胰岛素敏感指数(P<0.05).胰腺病理组织学检查表明罗格列酮能缓解大鼠胰岛细胞的增生肥大.结论 以ZF大鼠模型评价胰岛素增敏剂药效时,选用7～8周龄自发性ZF雄性大鼠,以空腹胰岛素水平高于4 ng/ml为纳人标准,以甘油三酯、游离脂肪酸及血清胰岛素水平与高胰岛素-正常血糖钳夹实验结果 为评价指标,由此方法 建立的动物模型可用于评价胰岛素增敏剂的药效作用.     

银杏叶提取物对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌蛋白激酶B表达的影响

目的 观察银杏叶提取物(EGB)对胰岛素抵抗(IR)大鼠骨骼肌蛋白激酶B(PKB)表达的影响,探讨EGB改善胰岛素敏感性的分子机制.方法 采用高脂喂养的方法 建立IR大鼠模型,并给予为期4周的不同剂量EGB腹腔注射干预,以罗格列酮作为阳性对照.本研究共涉及6个组,分别是正常对照组(NC组,基础饲料喂养,腹腔注射0.9%氯化钠注射液8 mg·kg-1·d-1)、模型对照组(MC组,IR大鼠,腹腔注射0.9%氯化钠注射液8 mg·kg-1·d-1)、银杏叶1组(EGB1组,IR大鼠,腹腔注射舒血宁注射液4 mg·kg-1·d-1)、银杏叶2组(EGB2组,IR大鼠,腹腔注射舒血宁注射液8 mg·kg-1·d-1)、银杏叶3组(EGB3组,IR大鼠,腹腔注射舒血宁注射液12 mg·kg-1·d-1)、罗格列酮组(RSG组,IR大鼠,马来酸罗格列酮0.9%氯化钠注射液混悬液3 mg·kg-1·d-1灌胃).干预后测定各组大鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)等指标的水平,用高胰岛素-正常葡萄糖钳夹实验测定葡萄糖输注率(GIR).用Western Blot法测定大鼠骨骼肌PKB水平,实时荧光定量RT-PCR测定大鼠骨骼肌PKB mRNA表达.结果 (1)实验第8周末,6组大鼠体质量间差异无统计学意义(P＞0.05).MC组大鼠血清TC、TG、FBG、FINS水平及GIR与NC组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).经药物干预,RSG组、EGB2组和EGB3组大鼠血清TC、TG、FBG、FINS水平及GIR与MC组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).(2)与NC组比较,MC组大鼠骨骼肌PKB表达量呈下降趋势,但差异无统计学意义(P=0.063).EGB2组、EGB3组大鼠骨骼肌PKB水平与MC组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).MC组大鼠骨骼肌PKB mRNA表达量与NC组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).RSG组、EGB2、EGB3组大鼠骨骼肌PKB mRNA表达量与MC组比较,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 EGB能够改善高脂饮食诱导的IR状态,其胰岛素增敏机制可能与其增加骨骼肌PKB的表达有关.     

胰岛素抵抗大鼠肌肉中IRS-1、P70S6K的表达

目的 应用不同饮食喂养大鼠,测定大鼠产生胰岛素抵抗(IR)的情况,观察大鼠骨骼肌IPS-1、P70S6K的表达及大鼠血清中游离脂肪酸(FFA)和超敏C反应蛋白(hsCRP)的变化.方法 4周龄Wistar雄性大鼠40只,随机分为4组,分别以普通饲料、高糖饲料、高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周后,行高胰岛素-正葡萄糖钳夹实验,对大鼠胰岛素抵抗程度进行评估,应用酶联免疫吸附方法 检测大鼠血清中游离脂肪酸及超敏C反应蛋白,分别用Western-Blot、Rt-PCR检测大鼠骨骼肌中的IRS-1、P70S6K.结果 高脂饲料、高糖高脂饲料组大鼠产生胰岛素抵抗,普通饲料、高糖饲料组未出现胰岛素抵抗,胰岛素抵抗组大鼠游离脂肪酸及超敏C反应蛋白明显高于非胰岛素抵抗大鼠(P<0.01),IRS-1在胰岛素抵抗组大鼠明显低于非胰岛素抵抗组大鼠、P70S6K在胰岛素抵抗组大鼠明显高于非胰岛素抵抗组大鼠体重.结论 高脂饲料、高糖高脂饲料喂养大鼠8周可成功的诱导大鼠产生胰岛素抵抗,胰岛素抵抗的产生可能与肥胖、高游离脂肪酸及炎症反应有关.IRS-1在胰岛素抵抗大鼠中的表达降低,P70S6K升高.     

高脂喂养诱导大鼠骨骼肌胰岛素抵抗的机制研究

目的 观察高脂饮食大鼠骨骼肌胰岛素敏感性的变化,并探讨其机制.方法 雄性Wistar大鼠随机分为2组:高脂组(n=10)和对照组(n=8),分别给予高脂饲料和基础饲料喂养.喂养24周后,检测血游离脂肪酸;应用高胰岛素-正糖钳夹技术评价大鼠的胰岛素敏感性;并应用逆转录聚合酶链反应方法检测骨骼肌中脂肪酸转运蛋白-1(fatty acid transport protein-1, FATP-1)mRNA的表达.结果 喂养24周后,高脂组大鼠游离脂肪酸水平明显上升,较对照组升高43.0%(P<0.01);骨骼肌中FATP-1 mRNA表达亦显著增强,是对照组的1.56倍(P<0.01);而葡萄糖输注率(glucose infusion rate, GIR)较对照组明显下降(P<0.01).结论 高脂喂养诱导大鼠骨骼肌胰岛素抵抗,其机制可能与游离脂肪酸的增高和骨骼肌中FATP-1表达的上调有关.     

千金文武汤对胰岛素抵抗模型大鼠瘦素mRNA表达水平的影响

[目的]观察千金文武汤对胰岛素抵抗模型大鼠瘦素表达水平的影响.[方法]用高脂饲料喂养建立胰岛素抵抗大鼠模型.给予千金文武汤干预治疗,以罗格列酮作为阳性对照组,采用高胰岛素-正常血糖钳夹实验检测大鼠葡萄糖输注率(GIR).取材附睾旁脂肪组织进行瘦素PCR,以观察千金文武汤对胰岛素抵抗大鼠模型的敏感性和脂代谢的影响.[结果]经钳夹鉴定胰岛素抵抗模型建立,千金文武汤组与罗格列酮组的GIR较模型对照组显著增高(P<0.05,P<0.01),瘦素PCR扩增后积分光密度表达、mRNA表达水平间差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).[结论]千金文武汤提高胰岛素抵抗大鼠模型的胰岛素敏感性,改善瘦素水平的高表达.与罗格列酮组相比较在脂代谢和瘦素调节上存在差异,与千金文武汤的作用靶点在调节脂代谢和脂肪因子有关联.     

解偶联蛋白2基因表达与高脂饲养大鼠氧化应激及胰岛素抵抗的关系

目的氧化应激是引起胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)的机制之一,而解偶联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)具有抗氧化应激作用,但UCP2与IR之间关系尚不清楚。文中探讨UCP2基因表达与氧化应激及IR之间的关系。方法 8周龄SD大鼠16只,随机分为对照组和高脂组,每组8只,饲养12周。分别于第4、8及12周内眦静脉取血测定血清丙二醛(malonaldehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)及空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,并计算胰岛素抵抗(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)指数。第12周处死大鼠,留取血液及肝、脂肪组织,检测血脂、血清脂联素(adiponectin,APN)及游离脂肪酸(free fatty acids,FFA),实时荧光定量PCR方法,比较2组大鼠肝及脂肪细胞中UCP2 mRNA表达水平。结果①第4周,2组大鼠血清MDA及SOD水平无显著差异,第8周高脂组大鼠血清MDA显著高于对照组,而SOD水平显著低于对照组(P<0.05),第12周时差异更显著。②第12周,高脂组大鼠的HOMA-IR显著高于对照组(P<0.05),而第4周及8周2组间HOMA-IR无显著差异。③实验结束时,高脂组大鼠的三酰甘油(triglycer-ide,TG)、FINS及FFA显著高于对照组,而APN显著低于对照组(P<0.05)。高脂组大鼠肝及脂肪细胞UCP2 mRNA表达分别比对照组增高77.4%和54.4%,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论氧化应激可能是高脂诱导大鼠IR的始动因素,而UCP2 mRNA表达增加可能是应对氧化应激的一种代偿机制,在IR发生过程中起到保护作用。     

甘精胰岛素与胰岛素泵的基础胰岛素剂量比较

目的：甘精胰岛素和胰岛素泵均能为糖尿病（DM）患者提供基础胰岛素，探讨这两种治疗方法之间的剂量关系，总结甘精胰岛素的临床应用经验。方法：DM患者应用胰岛素泵治疗2周，血糖控制理想后，再改为甘精胰岛素及其他降糖药，血糖平稳后，比较甘精胰岛素与胰岛素泵所用胰岛素剂量，分析其相关性。结果：甘精胰岛素剂量约为胰岛素泵总量的35％及基础量的55％，并与之呈直线正相关，相关系数（r）分别为0．77和0．74，差异具有显著性统计学意义（P〈0．001）。结论：甘精胰岛素的起始剂量约为胰岛素泵所用胰岛素总量的35％及基础量的50％，均与甘精胰岛素的起始剂量呈直线正相关。     

外源性胰岛素对于胰岛素一相分泌的影响

目的：探讨外源性胰岛素对离体大鼠胰岛第一时相胰岛素分泌的影响．方法：雄性SD大鼠胰腺采用V型胶原酶经胰管灌注消化分离得到胰岛，用100μU／mL外源性胰岛素分别孵育0，60，120和240min（n=8）后，给予葡萄糖刺激，分别测定0，3，5，10和30min胰岛素分泌量．结果：不同时间胰岛素预处理后，各组在葡萄糖刺激时均产生胰岛素第一时相分泌（P〈0．05），但随着胰岛素孵育时间的延长，胰岛素第一时相分泌峰值降低（P〈0．01）．结论：100μU／mL外源性胰岛素损害胰岛素第一时相分泌，且孵育时间越长，抑制程度越明显．     

外源性胰岛素对于胰岛素一相分泌的影响

目的:探讨外源性胰岛素对离体大鼠胰岛第一时相胰岛素分泌的影响.方法:雄性SD大鼠胰腺采用Ⅴ型胶原酶经胰管灌注消化分离得到胰岛,用100 μU/mL外源性胰岛素分别孵育0,60,120和240 min(n=8)后,给予葡萄糖刺激,分别测定0,3,5,10和30 min胰岛素分泌量.结果:不同时间胰岛素预处理后,各组在葡萄糖刺激时均产生胰岛素第一时相分泌(P＜0.05),但随着胰岛素孵育时间的延长,胰岛素第一时相分泌峰值降低(P＜0.01).结论:100 μU/mL外源性胰岛素损害胰岛素第一时相分泌,且孵育时间越长,抑制程度越明显.     

速效胰岛素类似物与人胰岛素在胰岛素泵中的应用研究

目的:探索速效胰岛素类似物-门冬胰岛素(诺和锐)与人胰岛素(优泌林R)治疗2型糖尿病的疗效特点、安全性.方法:选取2型糖尿病患者60例,随机分成A组和B组,每组30例患者,A组用诺和锐、B组用优泌林R作为泵用胰岛素进行CSⅡ强化治疗.结果:经过治疗,两组空腹血糖、餐后2h血糖均有显著降低,与治疗前比较差异有统计学意义(P＜0.05);A和B组血糖达标时间分别为(4.20土1.86)d和(6.28±1.89)d,门冬胰岛素组达标时间较短(P＜0.05);控制血糖达标时,胰岛素用量显著低于优泌林R组(P＜0.05);诺和锐的用量较优泌林R的用量少,低血糖发生率较优泌林R组低.结论:门冬胰岛素是一种有效的抗糖尿病药物.     

RP-HPLC法测定口服麦胚凝集素修饰脂质体中胰岛素

目的:建立RP-HPLC方法,测定麦胚凝集素修饰脂质体中胰岛素的含量和包封率。方法:利用逆相蒸发-超声法制备麦胚凝集素修饰胰岛素脂质体,反相高效液相色谱法测定脂质体中胰岛素含量和包封率。利用Phenomenex-C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.01％三氟乙酸(300:700)为流动相,测定波长为210nm,建立了HPLC测定胰岛素含量的方法。结果:HPLC测定方法线性范围5～100μg/ml,线性关系良好。普通胰岛素脂质体的包封率为(30.30±2.77)％(n=3),麦胚凝集素修饰脂质体包封率为(69.33±4.54〕％(n=3)。结论:建立的RP-HPLC方法便捷准确,重现性好,可用于测定麦胚凝集素修饰脂质体中胰岛素的含量和包封率。     

支气管哮喘患者胰岛素与胰岛素受体的研究

目的 了解支气管哮喘（简称哮喘）患者外周血胰岛素与外周血淋巴细胞胰岛素受体的情况。方法 哮喘患者40例，其中初诊轻中度非激素治疗组（简称未治疗组）20例，轻中度慢性持续期激素治疗组20例（简称治疗组）；健康对照20例。清晨空腹采血，测定外周血白细胞总数和分类计数；测定空腹血糖、胰岛素、胰岛素受体；进行肺功能测定。结果 未治疗组和治疗组哮喘患者外周血中嗜酸粒细胞计数显著高于对照组[（4．04±2．57）％和（4．24±2．34）％比（0．90±1．38）％，P〈0．05]。未治疗组哮喘患者胰岛素、胰岛素受体水平显著高于对照组[胰岛素：（13．00±5．20）mIU／L比（10．08±3．79）mIU／L；胰岛素受体：（2．59±3．11）％比（0．99±0．62）％；P均〈0．05]。结论 哮喘患者在炎症状态下胰岛素分泌增多，胰岛素受体表达增加。     

结合胰岛素受体的胰岛素位点研究

目的　用肽库筛选技术寻找与胰岛素受体结合的胰岛素位点。方法　用噬菌体随机环七肽库 ,与亲和于脂质体表面的鼠肝胰岛素受体亲和筛选 ,测定阳性噬菌体与胰岛素受体的亲和力 ,测定高亲和力克隆插入DNA序列 ,推断出融合于gⅢ蛋白末端环七肽的氨基酸残基序列。固相法选择性人工合成多肽配基YS ,测定多肽YS与胰岛素受体的亲和力。比较高亲和力短肽与胰岛素的结构特征 ,寻找胰岛素肽链的类似结构 ,推断与胰岛素受体结合的胰岛素位点。结果　经过三轮亲和筛选 ,选择 12个阳性克隆测序 ,三种短肽YS(CYIRSLRLC)、RL(CRPLLRDRC)、MN(CNFLYGILC)出现频率高 ,都含有较多Leu和Arg。合成肽YS与胰岛素受体有较高亲和力 ,Kd值为 4 3 1× 10 8L/M。结论　研究提示 ,胰岛素B链B11(Leu)、B15 (Leu)是与胰岛素受体的直接结合位点。     

胰岛素及胰岛素类似物的研究进展

糖尿病（Diabetes Mellitus，DM）是由于体内胰岛素绝对或相对缺乏或靶组织对胰岛素不敏感而引起的慢性高血糖为特征的代谢性疾病，常引起心脑血管、肾、眼、神经等脏器并发症，严重影响了患者生活质量，据WHO最新数据预测，到2010年全世界将会有2．4亿DM患者。胰岛素（INS）是一多功能的蛋白质激素，除了对糖，脂肪和蛋白质的代谢起着重要的调节作用外，     

速效胰岛素类似物与人胰岛素在2型糖尿病胰岛素泵中应用的比较

目的:人胰岛素作为泵用胰岛素已有较多的经验,而速效胰岛素类似物应用尚不广泛,文中旨在比较这2种剂型在泵输注中的有效性、安全性和应用特点. 方法:共345例2型糖尿病患者,随机以门冬胰岛素和优泌林R作为泵用胰岛素进行CSII强化治疗(门冬胰岛素组173例,优泌林R组172例),监测1d 9次末梢血糖(3餐前后,睡前,0AM和3AM),并观察不同时间段胰岛素用量. 结果:2组患者血糖达标时间分别为(4.40±2.16)d和(5.68±2.29)d,门冬胰岛素组达标时间较短(P<0.05),达标时2组每日胰岛素用量类似;门冬胰岛素组白天段基础率较低,但中餐前大剂量较高;泵治疗后2组各时间点血糖均明显降低,但门冬胰岛素组对空腹和早、晚餐后血糖控制更好,低血糖的发生明显较低(P<0.05). 结论:在CSII强化治疗中,门冬胰岛素可更快、更有效降低血糖,且低血糖风险更低;优泌林R组基础率占日总量的比例较低,主要是白天段基础率.