盐酸阿比朵尔抗腺病毒7型的实验研究

目的:明确抗病毒新药盐酸阿比朵尔体外抗腺病毒7型(ADV-7)的作用方式。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活性、病毒滴定3种方法从药物抗病毒生物合成、药物直接杀伤病毒以及药物抗病毒吸附3方面检测盐酸阿比朵尔的作用方式。结果:盐酸阿比朵尔对ADV-7无直接杀伤作用,也不能阻止ADV-7的吸附和穿入,各用药组均出现典型的CPE,但盐酸阿比朵尔能明显抑制ADV-7的生物合成作用,对细胞的半数毒性浓度(CC50)为85.37 mg/L,对ADV-7的半数有效浓度(IC50)为15.39 mg/L,治疗指数(TI)为5.55,且随着药物浓度的增加,病毒所致的CPE效应逐渐减弱,培养液中的病毒滴度也逐渐降低,而病毒抑制率则明显升高。结论:盐酸阿比朵尔在体外通过抑制病毒生物合成而发挥抗ADV-7的作用,其具体作用机制有待进一步研究。     

荔枝核黄酮类化合物的体外抗腺病毒作用

目的:探讨荔枝核提取物成分黄酮类化合物(FLC)体外抑制腺病毒(AdV)增殖的作用。方法:采用细胞病变效应(CPE)、四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)等方法检测不同浓度的FLC分别作用于AdV复制周期的3个阶段的抗病毒作用。结果:FLC可在病毒感染后通过抗病毒生物合成方式抑制AdV增殖,其半数细胞毒性浓度(TC50)和半数有效抑制浓度(IC50)分别为116.83mg/L,15.46mg/L,且FLC在1.25-40mg/L浓度范围内随药物浓度增加,其抗病毒作用越明显,病毒抑制率最高达84.31%,治疗指数为7.56。但研究未发现FLC具有抗病毒吸附和直接杀伤病毒的作用。结论:FLC体外可通过抗病毒生物合成的方式明显抑制AdV在人喉癌细胞(HEp-2)中的增殖。FLC有望成为一种新的有效抗腺病毒药物。     

空心莲子草微乳体外抗RSV作用的实验研究

目的 用空心莲子草微乳进行细胞内抗呼吸道合胞病毒(RSV)的研究,以扩大该药新的抗病毒谱.方法 采用细胞病变效应法(CPE)、逆转录-PCR,观察检测空心莲子草微乳对Hep-2细胞的细胞毒性作用和抗RSV作用.结果 除320mg/ml组外,各药物浓度组处理的细胞均未见细胞的毒性反应.药物对RSV增殖的抑制作用随着药物浓度升高,细胞病变数减少,其半数有效浓度(IC50)为160 ug/ml.虽然各药物浓度组中均可检出RSV-RNA,但在药物对RSV抑制作用组,病毒滴度则随着药物浓度的增加而减少.结论 空心莲子草微乳对细胞的毒性作用低.该药虽不能直接杀灭RSV使细胞免受病毒的攻击,但对进入细胞内的病毒有抑制作用.     

荔枝核提取物体外抗病毒活性及其机制研究

目的:研究荔枝核提取物(LSE)的体外抗病毒活性,并初步研究其抗病毒的作用机制.方法:采用细胞病变效应(CPE)减少法和MTY法检测LSE对柯萨奇B3病毒(Cox B3)、呼吸道合胞病毒(RSV)以及单纯疱疹病毒1型和2型(HSV-1和HSV-2)的体外抗病毒活性,并通过观察直接杀病毒作用、对宿主细胞的保护作用、抑制病毒吸附作用以及在病毒感染后不同时间加入实验,对LSE抑制HSV-1的作用机制进行探讨.结果:LSE有一定的细胞毒性,它不能抑制Cox B3在宿主细胞内的增殖,但对RSV、HSV-1和HSV-2表现出明显的浓度依赖性抗病毒活性,其IC<,50>值分别为32.3,27.9和20.4μg/mL.该提取物预培养Vero细胞后不能保护细胞免受HSV-1感染,但它对HSV-1有直接的灭活作用.LSE可影响HSV-1对Vero细胞的吸附,当浓度为31.3μg/mL时对病毒吸附的抑制率为51%.ISE对HSV-1在细胞内的增殖表现出很强的抑制活性.结论:LSE具有较强的体外抗RSV和HSV活性,它对HSV的抑制作用可能通过多种方式和途径实现.     

热毒宁抗呼吸道合胞病毒(RSV,Long株)作用体外实验研究

目的:研究中草药热毒宁注射液对呼吸道合胞病毒(RSV,Long株)的抑制作用.方法:以病毒唑为阳性对照药,采用细胞培养技术,观察不同药物浓度及不同给药方式下RSV攻击后各组Hep-2细胞的病变效应(CPE),在此基础上采用MTT比色法,测定各组细胞的病毒抑制率.以CPE法计算药物的半数中毒浓度TC50,分别以CPE法及MTT法计算药物的半数有效浓度EC50及治疗指数TI,比较不同药物浓度及不同给药方式下热毒宁对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用效果.结果:热毒宁注射液半数中毒浓度TC50为3.972g/L.预防给药方式、细胞外直接灭活及治疗给药方式均有抗RSV作用,其抗RSV的半数有效浓度(EC50)分别为0.428、1.160、1.189 g/L,治疗指数TI分别为9.28、3.42和 3.34,热毒宁对RSV的抑制作用存在着明显的量效反应关系.结论:热毒宁对RSV有直接灭活作用,对RSV侵入Hep-2细胞有阻断作用,对RSV在Hep-2细胞内增殖有抑制作用,相同浓度下,以预防作用更显著.     

热毒宁注射液抗CBV3及ECHO11的体外实验研究

目的 探讨热毒宁注射液体外抗肠道病毒(EV)的效果.方法 采用细胞培养技术观察不同浓度热毒宁、炎琥宁、利巴韦林及不同给药方式下EV攻击后各组的细胞病变效应(CPE),并采用MTT法测定及蚀斑抑制实验,计算药物的TC50、TI及蚀斑抑制率.判断3种药物的抗病毒活性并进行前两者病毒吸附前后的药效比较.结果 ①热毒宁、炎琥宁、利巴韦林的TC50分别为52.0、2.0及2.0 mg/mL.热毒宁在1.3 mg/mL时即有抑制CBV3和ECH011的活性,且与药物浓度成正相关;炎琥宁、利巴韦林分别在0.4～1.2 mg/mL及1.0～1.5 mg/mL之间有抑制CBV3和ECHO11的活性.②26.0 mg/mL热毒宁对CBV3及ECHO11蚀斑抑制率分别为79.8％及88.6％.0.8 mg/mL炎琥宁为67.0％及76.6％.1.5 mg/mL利巴韦林为44.2％及41.9％.③热毒宁在病毒吸附前用药蚀斑抑制率高于吸附后用药(P<0.05),炎琥宁的差异则不显著(P>0.05).结论 3种药物均有体外抗CBV3及ECHO11的作用,但热毒宁的病毒抑制活性优于炎琥宁和利巴韦林,且毒性最小.热毒宁在病毒吸附前用药抗病毒活性优于病毒吸附后,有一定预防作用.     

车前草对呼吸道合胞病毒体外抑制作用的研究

目的：研究车前草醇提液体外对呼吸道合胞病毒（ RSV）的作用。方法采用细胞培养技术,以利巴韦林为对照,通过观察细胞病变效应（CPE）,测定细胞半数中毒浓度（TC50）、药物半数抑制浓度（IC50）和抗病毒指数（ TI）,评判车前草抗RSV作用。结果车前草体外有抗RSV作用,浓度在0．0625～8．0 g／L呈量效关系。车前草的TC50＝4．57 g／L,IC50＝0．285 g／L,TI＝16．04。车前草与利巴韦林抗RSV作用差异无统计学意义（ P＞0．05）,但比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大。结论车前草在 Hep－2细胞中对RSV有明显的抑制作用,既能抑制病毒的吸附和增殖,又能直接杀死病毒。     

999感冒灵颗粒抗呼吸道合胞病毒的初步研究

目的 探究999感冒灵颗粒在体外抗呼吸道病毒的作用.方法 采用细胞病变抑制法(CPE)及CCK-8法,观察在999感冒灵颗粒作用下,感染呼吸道合胞病毒( RSV)的HEp-2细胞的CPE变化情况以及吸光值,从而比较不同给药方式(直接灭活、抑制吸附、抑制增殖和阻断作用)及不同给药浓度下对 RSV的抑制作用.测定细胞的半数中毒浓度(TC50)、药物半数抑制浓度(IC50)以及治疗指数(TI).结果 细胞的TC50为25 mg/ml;直接灭活和抑制增殖均对RSV有明显作用( P ＜0.01 );采用直接灭活方式时,其 IC50为7.43 mg/ml,TI为3.36;采用抑制病毒增殖时,其IC50为4.42 mg/ml,TI为5.66. CCK-8 法结果显示,在阻断以及抑制吸附两种给药方式下,病毒抑制率与病毒对照组之间差异无统计学意义.结论 999 感冒灵颗粒在直接灭活以及抑制病毒增殖两种给药方式下对RSV有一定的抑制作用.     

穿心莲提取物体外抗呼吸道合胞病毒作用的研究

目的：了解穿心莲提取物对呼吸道合胞病毒(RSV)的体外抑制作用。方法：通过光镜观察不同药物浓度下：RSV对Hep-2的致病作用(CPE)，四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测穿心莲提取物对RSV的抑制和对：RSV感染HeF2细胞的保护作用。结果：穿心莲提取物对RSV无直接灭活作用，亦不能阻止RSV的吸附，各药物浓度均出现典型的CPE；穿心莲提取物有抑制RSV生物合成的作用，其半数抑制浓度(IC50)是1．52μg，／ml，治疗指数为36，且随着药物浓度的增加，CPE特征明显逐渐减弱，病毒滴度逐渐降低，而病毒抑制率则明显增高。结论：穿心莲提取物在体外可能是通过抑制生物合成来发挥抗RSV作用。     

荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒的作用

目的: 探讨荔枝核黄酮类化合物体外抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用. 方法: 采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照,观察比较荔枝核黄酮类化合物对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用. 结果: 荔枝核黄酮类化合物半数中毒浓度(TC50)为152.9 mg/L,其抗RSV的半数有效浓度(IC50)为58.6 mg/L,治疗指数(TI)为2.6,体外抗RSV作用与病毒唑相当,且对RSV抑制作用存在明显的量效关系. 结论: 荔枝核黄酮类化合物在Hep-2细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用.     

龙胆水提液体外抑制呼吸道合胞病毒作用研究

目的了解龙胆水提液体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用.方法采用细胞病变抑制实验观察龙胆水提液在HeLa细胞中对呼吸道合胞病毒的抑制作用.结果龙胆水提液的半数中毒浓度(TC50)为15.25mg/ml;抑制RSV的半数有效浓度(EC50)为1.07mg/ml,治疗指数(TI)为14.25;且对RSV的抑制作用存在明显的量效反应关系(P<0.01).结论龙胆水提液在HeLa细胞中对呼吸道合胞病毒有明显的抑制作用.     

猪脾细胞干扰素在细胞中对疱疹病毒的抑制作用

目的:体外评价猪脾细胞干扰素抗疱疹病毒的活性,为疱疹病毒感染寻找新的治疗手段。方法:主要通过观察细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率和病毒抑制率来评价猪脾细胞干扰素体外对单纯疱疹病毒1型(HSV-1)和2型(HSV-2)的抑制作用。结果:猪脾细胞干扰素对HeLa细胞的半数毒性浓度(TC50)为535.3 IU/ml,对HSV-1和HSV-2的半数有效浓度(IC50)分别为24.6×103IU/L和25.9×103IU/L,治疗指数(TI)为21.8和20.7;其抗病毒效果与人白细胞干扰素及喷昔洛韦一致。结论:猪脾细胞干扰素具有很好的体外抗疱疹病毒作用。     

荔枝核黄酮体外抗单纯疱疹病毒的作用

目的:探讨荔枝核黄酮类提取物(FLC)体外抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的作用。方法:以阿昔洛韦为阳性药物对照,以不同剂量的荔枝核黄酮类提取物分别作用于HSV-1病毒复制周期的各个环节分成3个实验组,以病毒半数感染量(TCID50)、细胞病变效应(CPE)、MTT染色细胞存活率(MTT法)作为评价指标,判断的FLC抗病毒效果。结果:FLC对HEp-2细胞的半数细胞毒浓度(TC50)为239.25 mg/L,FLC对HSV-1病毒有直接杀伤作用和抗HSV-1生物合成作用,其直接杀伤HSV-1的半数有效浓度(IC50)为32.76 mg/L,治疗指数(TI)为7.30,抗HSV-1生物合成作用的半数有效浓度(IC50)为12.72 mg/L,治疗指数(TI)为18.81。结论:荔枝核黄酮类化合物在HEp-2细胞中对单纯疱疹病毒1型有明显抑制作用。     

复方羌芪水提液体外抗柯萨奇病毒B3作用的研究

目的：测定复方羌芪水提液的体外抗ＣＶＢ３作用，并对其抗病毒机理进行初步的探讨。方法：用含有不同浓度复方羌芪水提液的维护液培养ＣＶＢ３感染的Ｖｅｒｏ细胞，４８ｈ后用ＭＴＴ法测定细胞活性；培养上清液滴定ＴＣＩＤ５０。结果：复方氏水提液能抑制ＣＶＢ３对Ｖｅｒｏ细胞的致病变作用（ＣＰＥ），使细胞夏活率升高，培养上清病毒滴度降低；且随药物浓度及药物与病毒作用时间的延长抑制作用增强。结论：复方羌芪水提液的抗病     

硝酸甘油抗B组柯萨奇病毒的作用特点和机制

目的 研究硝酸甘油（GTN）抗柯萨奇B组3型病毒（CVB3）的作用特点和机制。方法 比较先经GTN预处理及与GTN同时加入的两种处理方法相同滴度的病毒所引起的CPE抑制率的差异；分别测定并比较多次给予GTN及不同时间点给予GTN对CVB3感染的HeLa细胞组间的细胞病变效应抑制效果；测定GTN在HeLa细胞中不同时间点代谢产生的N0浓度，并做N0浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果的相关性分析。结果 预加GTN组与同时加GTN组经等量病毒攻击所引起的CPE无显著性差异（P〉0．05）；多次给药的组间CPE抑制率无显著性差异（P〉0．05），但不同时间点给药的组间CPE抑制率具有显著差异（P〈0．05），NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果呈正相关（r=0．97，P〈0．01）。结论 GTN是通过其代谢产物NO来发挥抗CVB3作用的。     

MTT法在抗病毒药物筛选中的应用

目的 :采用MTT法评价清热消炎复方制剂体外抗柯萨奇病毒 (CVB3 )、呼吸道合胞病毒 (RSV)效果。方法 :待正常细胞长成单层 ,用病毒感染 ,培养一定时间后 ,根据不同病毒感染细胞出现细胞病变 (CPE)时间的不同 ,加入一定量的MTT液 ,然后测定OD570 值 ,计算病毒抑制率。结果 :MTT法较光镜CPE法更为客观 ,能以OD值变化反映药物对病毒的抑制程度 ,从而获得实验结果 ,且便于统计学处理。结论 :MTT法是一种能广泛应用于抗病毒药物筛选和评价的方法     

Antiviral and interferon-inducing effect of fang-gan mixture

The present study was carried out by using the plaque formation test, microdosage cytopathic effect (CPE) method, and mice nasal-cavity-attacking method to observe the antiviral and interferon-inducing effect of Fang-Gan mixture (FGM). The results showed that FGM has direct respiratory syncytia virus (RSV) inactivation effect, and protection effect after mice infected by RSV. FGM could also decrease mice death rate (P less than 0.01) in the experimentation of using parainfluenza virus to attack them, and work in coordination with interferon induced by Newcastle disease virus. After 8, 16, 24, 32 hours of injecting FGM into mice abdominal cavity, the authors used CPE method to determine interferon titer of L929 cells, and found that the highest interferon titer was 98.23 mu/m at the 24th hour. The interferon induced by FGM was in keeping with the nature of Type I interferon. The results suggested that FGM might have strong antiviral effect which is achieved by inducing interferon.