益髓生血颗粒治疗β-地中海贫血临床研究

目的研究益髓生血颗粒治疗B-地中海贫血临床效果及安全性。方法采用随机、单盲、安慰剂平行对照进行30对患者临床观察;服安慰剂后再给益髓生血颗粒治疗30例,患者自身对照的比较研究;并进行中医证候量化评分的动态观察,疗程均为3个月,观察治疗前后临床中医症状、Hb、RBC、Ret、HbF水平变化,肝肾功能（GPT、BUN、Cr）及不良反应。结果平行对照研究治疗组患者自疗程第1个月起至3个月结束,各项血液学参数均有提高,与疗前比差异显著（P〈0．01）;中医临床症状改善与血液参数提高相一致,与疗前比（P〈0．01）;自身对照比较研究显示：患者服安慰剂后改服益髓生血颗粒治疗3个月,血液指标Hb、RBC与服安慰剂组比较均有非常明显差异（P〈0．001）。中医临床症状改善与血液参数提高相一致,两个阶段p-地贫患者疗效比较有非常显著性差异（P〈0．001）。结论益髓生血颗粒治疗p-地中海贫血疗效显著,未见毒副作用。研究为中医药辨证治疗B-地中海贫血提供了实践依据。     

大黄素对K562细胞长链非编码RNA表达谱的影响

目的 研究大黄素作用K562细胞后长链非编码RNA（lncRNA）表达谱的变化,筛选并验证差异lncRNA。方法 利用lncRNA芯片技术检测大黄素作用K562细胞后长链非编码RNA（lncRNA）表达谱,通过对原始数据进行处理,筛选出差异表达lncRNA并进行分析,挑选差异较大的4个lncRNA进行荧光定量PCR验证。结果 与DMSO对照组作用K562细胞后lncRNA表达谱相比,大黄素作用K562细胞后变化4倍以上lncRNA共11条。经过荧光定量PCR检测,大黄素作用K562细胞后CDR1AS和PROX1-AS1表达上调与芯片结果一致。结论 大黄素作用K562细胞后CDR1AS和PROX1-AS1等lncRNA表达的上调,为进一步深入研究大黄素抑制K562细胞增殖和促进K562细胞红细分化的分子机制打下基础。     

长链非编码RNA MBNL1-AS1的表达对急性髓系白血病患者预后的影响

目的:探讨长链非编码RNA（lncRNA）MBNL1-AS1的表达对急性髓系白血病（AML）预后的影响。方法:纳入癌症基因组图谱数据库（TCGA）中2001年11月至2010年3月筛选出的125例AML患者,其中70例患者仅接受化疗,其余55例除化疗外还接受了异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）。以lncRNA ...     

小鼠脊髓损伤中的长链非编码RNA表达谱

目的:研究脊髓损伤中的差异性长链非编码RNA（long non-coding RNA,LncRNA）表达谱。方法:应用MASCIS脊髓撞机仪制造小鼠脊髓损伤模型,按照损伤后取脊髓时间再分成1 d、3 d、7 d和21 d组及正常对照组,分别提取总RNA,进行芯片分子杂交,构建脊髓损伤后差异性LncRNA表达谱,挑选神经组织特异性LncRNA通过荧光定量PCR实验验证芯片结果可靠性,对差异性表达LncRNA所参与的信号通路进行分析。结果:脊髓损伤后LncRNA出现差异性表达,损伤后7 d出现了差异性表达最大值,荧光定量PCR实验验证芯片结果可靠,差异性LncRNA涉及较多信号通路。结论:LncRNA在脊髓损伤中病理过程中发生了差异性表达。     

胃癌患者长链非编码 RNA 的差异表达

目的：研究胃癌患者癌组织长链非编码RNA（lncRNA）的差异表达。方法提取8例胃癌患者癌组织与癌旁对照样本中的总RNA,应用lncRNA表达谱芯片检测技术对两者之间差异表达的lncRNA进行分析。在差异表达倍数≥10的lncRNA中选择4个lncRNA（uc010lhn、uc．341、AK096257及BC048127）,利用荧光定量RT－PCR技术在细胞水平对微阵列检测结果进行验证。结果胃癌患者癌组织与癌旁对照样本间差异表达的lncRNA 共2621个,其中1215个表达上调,1406个表达下调,差异表达倍数≥10的lncRNA 22个。荧光定量RT－PCR验证结果显示,与正常胃上皮细胞系GES－1相比,4种lncRNA（uc010lhn、uc．341、AK096257及BC048127）在胃癌细胞系中的表达具有显著差异,与芯片检测结果一致。结论多种lncRNA在胃癌患者肿瘤组织中呈异常表达,其中uc010lhn及uc．341等在胃癌发生、发展过程中可能起一定的作用。     

妊娠期糖尿病患者外周血长链非编码RNA表达谱的差异性分析

目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者外周血中长链非编码RNA(lncRNAs)的差异表达谱及其功能。方法 分别收集2020年7月至2021年12月在宣汉县人民医院妇产科入院治疗的妊娠期糖尿病患者(GDM组)、门诊健康体检孕妇(对照组)外周血标本各3例。使用高通量测序技术筛选获得差异表达的lncRNA,并通过GO富集分析和KEGG Pathway富集分析查明差异表达的lncRNAs靶向调控的m RNA转录本的生物信息学功能。结果 与对照组比较,GDM组共筛选出差异表达的lncRNAs 333个,mRNA 2 036个,其中上调的lncRNAs 169个,m RNA645个;下调的lncRNAs 164个,m RNA 1 391个;GO生物学功能富集分析结果显示：差异表达的lncRNAs靶向调控的mRNA转录本主要富集在转录因子AP-1复合物、蛋白质复合物分解的调控、免疫系统调节、防御反应、细胞解剖实体、大分子代谢过程的调控、氮化合物代谢过程的调控、胞浆、代谢过程调节等;KEGG信号通路富集分析结果显示：差异表达的lncRNAs靶向调控的m RNA转录本参与的信号通路主要包括B细胞受体信号...     

胶质母细胞瘤长链非编码RNA表达谱分析

目的:分析胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)表达谱,阐明GBM中lncRNAs的表达特点,为探寻新的GBM分子标志物及治疗靶点提供研究方向.方法:对6例正常脑组织及6例GBM肿瘤组织的lncRNAs进行高通量转录组测序,从中筛选出G...     

胃癌转移相关长链非编码RNA差异表达谱的研究

目的 筛选与胃癌转移相关的长链非编码RNA(lncRNA),寻找可预测及逆转胃癌转移相关的候选基因.方法 利用高通量lncRNA芯片技术分别检测3例未发生远处转移胃癌组织和3例发生远处转移胃癌组织中lncRNA及mRNA表达谱的差异,并对差异表达基因进行基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析.结果...     

系统性红斑狼疮患者长链非编码RNA差异性表达研究

目的利用长链非编码RNA表达谱芯片技术筛选系统性红斑狼疮(SLE)患者的差异表达长链非编码RNA并对其进行分析,以进一步阐明系统性红斑狼疮发病的分子机制。方法分采用利用长链非编码RNA表达谱芯片检测技术,筛查系统性红斑狼疮及健康对照组单个核细胞中的差异表达长链非编码RNA,并通过Rreal-time PCR对部分差异表达基因进行验证。结果 uc003ngn、uc010loq、uc003wbg、uc003wax、HM-lincRNA1145、uc010jsn、uc003wax、HMlincRNA1145等lncRNA在SLE患者外周血单个核细胞中显著上调,AK022005、uc010cik、uc010gdp、uc010nwn、uc010imt、HMlincRNA678等lncRNA在SLE患者外周血单个核细胞中显著下调。结论多个长链非编码RNA在SLE患者外周血单个核细胞中异常表达,提示它们可能在SLE的发生发展中起着重要的调控作用。     

长链非编码RNA LINC01140对急性髓系白血病U937细胞增殖及周期的影响

目的 探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA) LINC01140对U937细胞增殖及周期的影响.方法 收集陆军军医大学第一附属医院血液科2016年7-12月20例急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML) 患者骨髓标本和2017年5-6月在血液科进行骨髓检查提示为正常的10例骨髓标本,采用qRT-PCR检测AML患者骨髓及白血病细胞中LINC01140的表达情况.通过构建LncRNA LINC01140-shRNA慢病毒干扰载体转染U937细胞(对照组为shR-NC,实验组为shR-1、 shR-2),采用qRT-PCR检测LINC01140的表达.细胞计数法、细胞克隆成球实验分别检测干扰LINC01140表达对U937细胞增殖和克隆成球能力的影响.流式细胞术、蛋白免疫印迹分别检测U937细胞周期和周期相关蛋白的变化.结果 ①LncRNA LINC01140在白血病患者和细胞中表达显著升高(P＜0. 01) .②下调LINC01140表达,U937细胞增殖减慢,细胞克隆成球数量减少,表明细胞增殖能力显著降低(P＜0. 01) .③流式细胞术检测结果显示干扰LINC01140表达可导致U937细胞G1期阻滞,其中shR-1和shR-2的G1期细胞的百分比分别为(62. 89 ± 1. 66) ％、(59. 03 ± 1. 00) ％,相对于对照组的(46. 25 ± 1. 06) ％,差异有统计学意义(P＜0. 01) .Western blot检测结果显示干扰LINC01140表达可下调U937细胞中G1期相关蛋白Cyclin E1的表达,并可升高G1期相关蛋白p21和p27的表达.结论LncRNA LINC01140在AML患者中高表达,在U937细胞中敲降LINC01140可导致细胞周期G1期阻滞,从而显著抑制细胞增殖.     

长链非编码RNA 对基因表达的调控

哺乳动物基因组中的大部分DNA序列在动物生长的不同阶段被转录成长链非编码RNA(long noncoding RNA,lncRNA)。它们对基因表达的调控作用已成为生命科学研究的热点。目前已发现lncRNA有多种基因调控方式： 在细胞核中顺式或反式地调控基因转录,作为蛋白诱饵进行间接调控;在细胞质中作用于mRNA影响其稳定性及翻译 过程,作为竞争性内源RNA参与microRNA调控,与转录因子结合影响其功能发挥等。LncRNAs在转录水平及转录后 水平对基因表达的调控作用对于机体的发育过程和疾病的发生发展都有重大意义。     

中药益髓生血颗粒对β地中海贫血患者骨髓α血红蛋白稳定蛋白及红系转录因子GATA-1基因表达的影响

目的:研究中药益髓生血颗粒对β地中海贫血患者α血红蛋白稳定蛋白(alpha-hemoglobin stabili-zing protein,AHSP)及红系转录因子GATA-1表达的影响,探讨中药治疗β地中海贫血的临床疗效及分子机制。方法:2004年9月~2005年2月收治中间型β地中海贫血患者12例,采用益髓生血颗粒治疗3个月。比较治疗前后患者血红蛋白、胎儿血红蛋白、红细胞、网织红细胞等血液学参数的变化;提取其中8例患者用药前后骨髓有核细胞总RNA,采用实时PCR技术检测AHSP mRNA和转录因子GATA-1 mRNA的表达。结果:治疗后患者临床症状明显改善,其血红蛋白、胎儿血红蛋白、红细胞和网织红细胞等血液学参数较治疗前明显升高,差异有统计学意义。其中8例患者骨髓有核细胞AHSP和GATA-1 mRNA的表达量与治疗前比较有明显升高,差异有统计学意义。结论:中药益髓生血颗粒治疗β地中海贫血的可能机制之一为通过调节β地中海贫血患者体内骨髓有核细胞转录因子GATA-1 mRNA的表达,使GATA-1与其他转录因子协同作用,上调AHSP mRNA的表达,使AHSP合成增加以结合地中海贫血患者体内游离的相对过剩的α珠蛋白,阻止其在活性细胞中的沉积,遏制其对红细胞的毒害作用,从而减少溶血的发生。     

非酒精性脂肪肝病中长链非编码 RNA的表达谱

目的：分析非酒精性脂肪肝病(non-alcoholic fatt y liver disease,NAFLD)中长链非编码RNA(lncRNA)的表达谱 特征。方法：采用lncRNA-mRNA基因芯片检测单纯性胆囊结石伴或不伴NAFLD患者的肝组织样本,获得lncRNA差异 性表达谱。进一步使用生物信息学技术对差异表达的基因予以分析。结果：与正常样本相比,NAFLD肝样本内共有 1 735个lncRNAs和1 485个mRNAs异常表达,其中535个lncRNAs和760个mRNAs上调,1 200个lncRNAs和725个mRNAs下 调。结论：与正常肝组织相比,NAFLD组织中lncRNA表达谱明显异常,这些lncRNAs可能在NAFLD的发生和发展中 发挥重要作用。     

益髓生血颗粒治疗β-地贫与调控珠蛋白mRNA表达分子机制研究

1．高发区临床实践,探索出了中药治疗β-地贫新路子 （1）首次在β-地贫高发的广西南宁周边地区及百色地区采用随机、单盲、安慰剂平行对照30例患者临床研究;服安慰剂后给益髓生血颗粒治疗30例患者自身对照的比较研究;进行中医证候量化评分与血液指标变化相关性的动态观察等;根据张之南主编《血液病诊断及疗效标准》（1991年版）及第四界国际血红蛋白基因开关会议提出的标准进行评价。中医辨证参照《中西医结合临床血液病学》标准（1988年）并按CRF表进行症状量化评分;进行临床症状、中医证候、血液参数（Hb、RBC、Ret、HbF）动态观察;治疗前后肝、脾B超和肝肾功能（GPT、BUN、Cr）及不良反应观察。结果表明：益髓生血颗粒治疗后患者整体效应明显提高,中医临床证候量化评分的明显改善与血液学指标提高相一致。两组疗效比较及服安慰剂后改服益髓生血颗粒治疗两个阶段疗效比较,均有显著差异（P〈0．01）;均无毒副作用及不良反应。     

成骨不全14种长链非编码RNA差异表达分析

目的：研究14种长链非编码RNA（Long non-coding RNA, lncRNA）在成骨不全骨组织中的表达。方法采用先天性骻关节脱位患者骨组织作为对照,应用RT-qPCR分析成骨不全骨组织中14种lncRNA(ATB、EBIC、HEIH、hLACR1、HOTAIR、PVT1、LET、Loc285194、SRHC、LSINCTS 、Nbla10727、Nbla12061、PRNCR1与UC.388)的表达,使用REST-2009软件进行数据统计分析。结果与对照组相比,14种lncRNA中仅PRNCR1表达下调并具有显著性差异;ATB、EBIC、HOTAIR、PVT1、LET、Loc285194、SRHC等7种lncRNA表达差异均小于2倍,LSINCTS表达下调,HEIH、hLACR1、Nbla10727、Nbla12061与UC.388等5种lncRNA表达上调,但均无统计学意义。结论 PRNCR1在成骨不全骨组织中低表达,其在成骨不全疾病的功能尚有待于进一步研究。     

长链非编码RNA HOTAIR mRNA在卵巢癌中的表达

目的 探讨长链非编码RNA HOX转录反义RNA(HOTAIR)在卵巢癌组织与正常卵巢组织中的表达差异.方法 对44例卵巢癌组织及14例正常卵巢组织样本采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测长链非编码RNA HOTAIR mRNA的表达.结果 卵巢癌组织中HOTAIR mRNA表达高于正常卵巢组织[(1.26±0.27) vs.(0.14±0.09)],差异有统计学意义(P＜0.05),病理类型为低度分化及未分化的卵巢癌组织中HOTAIR mRNA表达高于中-低、中-高及高度分化组织[(1.65±0.41) vs.(0.39±0.14)],差异有统计学意义(P＜0.05).结论 卵巢癌组织中HOTAIR的表达增高,且癌组织分化越低,HOTAIR表达越高.提示HOTAIR有可能作为发现卵巢癌,并判断其恶性程度的一个分子标志.