一氧化碳中毒大鼠NSE、S-100β变化的实验研究

目的探讨急性一氧化碳（CO）中毒后大鼠脑组织和血清中神经元特异性烯醇酶（NSE）和S-100β含量变化。方法将20只健康雄性SD大鼠适应性饲养1周后,随机分为对照组和C0染毒组,每组10只。染毒组按60ml／kg体重腹腔注射一氧化碳,每周一次,连续注射4周,对照组注射等量空气。染毒后检测大鼠脑组织和血清中NSE、S-100β的含量。结果C0染毒后大鼠前皮质、海马、小脑组织和血清中NSE、S-100β的含量均高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论NSE、S-100β可能参与了CO中毒导致的脑损伤。     

一氧化碳中毒大鼠一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性变化的实验研究

目的探讨急性一氧化碳（CO）中毒后大鼠脑组织和血清中一氧化氮（N0）含量、一氧化氮合酶（NOS）活性变化。方法将20只健康雄性SD大鼠适应性饲养1周后,随机分为对照组和CO染毒组,每组10只。染毒组按60ml／kg体重腹腔注射一氧化碳,每周一次,连续注射四周,对照组注射等量空气。染毒后检测大鼠脑组织和血清中NO含量、NOS的活性。结果CO染毒后大鼠前皮质、小脑组织和血清中NO含量、NOS活性均比对照组高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论NO、NOS可能参与了CO中毒导致的脑损伤。     

大鼠急性一氧化碳中毒后迟发性脑病模型的建立

目的:建立大鼠急性一氧化碳(CO)中毒致迟发性脑病模型,以探讨其发病机制. 方法:质量240～280 g雄性SD大鼠,于动物实验高压氧舱内行急性CO暴露,以Morris水迷宫中搜索目标的逃避潜伏期(escape latency)来评价大鼠的认知记忆能力,并于染毒后3,7,10,20 d取脑组织,常规制备石蜡病理切片,行HE染色观察急性CO中毒后大鼠脑皮质及海马神经元的病理性改变. 结果:大鼠在2000×10-6体积分数CO浓度和3000×10-6体积分数CO浓度下分别暴露40 min和20 min后全部昏迷,Morris水迷宫测试发现CO暴露组大鼠逃避潜伏期显著落后于空气对照组(F=4.74,P=0.047),病理学检查发现CO暴露组大鼠的皮质及海马有明显的神经元变性坏死. 结论:本实验建立的模型基本模拟了CO中毒后迟发性脑病患者中枢神经系统损伤的行为学特征改变,且有相应的病理学检测结果作为其佐证.     

溴氰菊酯对大鼠脑血红素氧化酶-1的影响

目的：研究溴氰菊酯（DM）对大鼠脑皮质及海马血红素氧化酶-1（HO-1）mRNA及蛋白表达的影响。方法：健康SD雄性大鼠36只,随机分为对照组（腹腔注射色拉油）、低剂量DM组（腹腔注射1.25mg/kg DM）、高剂量DM组（腹腔注射12.5mg/kg DM）,连续染毒5d,末次染毒24h后以原位杂交法测定皮质及海马HO-1 mRNA的表达,以免疫组化法测定HO-1蛋白表达。结果：与正常对照组相比,高剂量DM组HO-1 mRNA表达阳性细胞数明显增多（P〈0.05）;而HO-1蛋白表达阳性细胞数则在低剂量DM组、高剂量DM组大鼠均明显增高（P〈0.05）,并随着染毒剂量的增加表达明显增强（P〈0.05）。结论：溴氰菊酯可诱导大鼠脑皮质及海马HO-1表达增加,发挥一定保护作用。     

SP600125对急性一氧化碳中毒大鼠的脑保护作用

目的探讨JNK特异性抑制剂-SP600125对急性一氧化碳中毒大鼠的脑保护作用。方法 48只雄性SD大鼠随机分成空白对照组（BC组）、急性一氧化碳中毒组（CO组）和SP600125处理组（SP组）,每组16只。采用静态吸入法复制急性一氧化碳中毒大鼠模型,选取染毒后14天和28天为时相点,应用Morris水迷宫试验检测大鼠平均逃避潜伏期等学习记忆能力的变化情况。结果定位航行试验：实验大鼠14天时的平均逃避潜伏期BC组〈SP组〈CO组（F=196.37,P〈0.01）,28天时BC组〈SP组〈CO组（F=165.24,P〈0.01）。空间探索试验：14天时,首次穿越平台时间BC组（3511.97±336.88）ms〈SP组（5223.84±475.06）ms〈CO组（7929.25±1060.62）ms（F=81.31,P〈0.01）,穿越平台次数BC组〉SP组〉CO组（F=14.50,P〈0.01）;28天时,首次穿越平台时间BC组（3704.94±427.18）ms〈SP组（5782.44±311.48）ms〈CO组（8851.97±542.65）ms（F=280.36,P〈0.01）,穿越平台次数BC组〉SP组〉CO组（F=11.71,P〈0.01）。结论急性一氧化碳中毒对大鼠的学习记忆能力有明显损害,SP 600125能部分减轻这种损害作用,提示SP600125对急性一氧化碳中毒大鼠有一定的脑保护作用。     

流式细胞仪检测急性一氧化碳中毒后大鼠脑细胞凋亡

目的探讨一氧化碳中毒致脑损伤的机制,为一氧化碳中毒后迟发脑损伤的防治提供新的思路。方法体重150～250g的雄性SD大鼠吸入体积分数为2×10－3～3×10－3的一氧化碳气60min,测定染毒后即刻和处死前碳氧血红蛋白水平,分离大、小脑,分别以网搓法制成单细胞悬液,应用碘化丙啶对DNA染色,流式细胞仪检测并绘制中毒后不同时间大、小脑内细胞DNA分布图,测定A0峰所占百分比,表示细胞凋亡程度。结果染毒后即刻SD大鼠大脑细胞凋亡程度无明显增加,染毒后3d凋亡细胞百分比增加(P<0.01),染毒后7d达高峰(P<0.01),染毒后21d降至正常水平。SD大鼠小脑内细胞凋亡程度各组结果间无统计学差异。结论急性一氧化碳中毒可诱发大脑内细胞凋亡的发生,细胞凋亡可能是急性一氧化碳中毒致脑损伤的病理机制之一。     

高压氧对急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl-2蛋白表达的影响

目的 :研究高压氧 (HBO)治疗对急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl 2蛋白表达和迟发性损伤的影响 .方法 :4 5只雄性SD大鼠随机分成 3个组 :正常对照组、CO中毒组、HBO治疗组 (0 .2 5MPaHBO) .各组大鼠分别行常规HE染色、免疫组化染色和TUNEL染色 ,观察CO染毒后 1 ,3,5和 7d大鼠海马神经元损伤和Bcl 2蛋白表达变化的特点 .结果 :CO中毒组大鼠海马发生迟发性神经元凋亡 ,Bcl 2蛋白表达无明显变化 ;HBO治疗组凋亡神经元明显减少 ,Bcl 2蛋白表达增多 ,尤以染毒后 3和 5d明显 (P <0 .0 5 ) .结论 :HBO治疗可以促进急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl 2蛋白表达 ,抑制神经元凋亡 ,具有保护神经元的作用     

L-NAME对急性一氧化碳中毒大鼠血脑屏障通透性的影响

目的:研究一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸甲酯(Nω- nitro- L-arginine methyl ester, L-NAME)对急性一氧化碳(carbon monoxide, CO)中毒大鼠血脑屏障(blood-brain barrier, BBB)通透性的影响,探讨NO介导CO中毒后BBB损伤的作用. 方法:建立实验性CO中毒大鼠模型. 将健康雌性SD大鼠40只随机分成4组(对照组,CO中毒组,染毒前15 min给L-NAME组和染毒后30 min给L-NAME组),每组10只. 用分光光度计法检测各组大鼠脑组织内伊文思蓝(Evans blue, EB)的含量,进行比较. 结果:CO中毒后24 h,大鼠大脑BBB通透性增加,脑组织内EB含量(27.6±1.2) μg/g与对照组(6.1±1.9) μg/g比较明显增高(P<0.01);给予L-NAME治疗的两组大鼠大脑BBB损伤减轻,脑组织内EB含量分别为(14.8±2.3) μg/g和(16.0±2.2) μg/g ,较CO组(27.6±1.2) μg/g明显降低(P<0.01). 结论:急性CO中毒可导致大鼠大脑BBB通透性增高,中毒早期应用NOS抑制剂L-NAME能够明显减轻大鼠大脑BBB损伤,提示NO参与了该损伤过程.     

醒脑静对急性重度CO中毒大鼠神经元Bcl-2基因表达的影响

目的研究醒脑静注射液（xingnaoj inginjection,XNJI）对急性重度CO中毒大鼠海马神经元Bcl-2基因表达和迟发性损伤的影响。方法45只雄性SD大鼠随机分成3组：正常对照组、CO中毒组、XNJI治疗组。各组大鼠在治疗完毕后取脑组织分别行常规HE染色、免疫组化染色和TUNEL染色,观察CO染毒后1、3、5和7d大鼠海马神经元损伤和Bcl-2基因表达变化的特点。结果CO中毒组大鼠海马发生迟发性神经元凋亡,Bcl-2表达无明显变化;XNJI治疗组凋亡神经元明显减少,Bcl-2蛋白表达增多,尤以染毒后3d和5d明显（P〈0．05）。结论XNJI可以促进急性CO中毒大鼠海马神经元Bcl-2表达,抑制神经元凋亡,具有保护神经元的作用。     

依达拉奉对一氧化碳中毒迟发性脑病小鼠脑细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的：观察自由基清除剂依达拉奉对CO中毒迟发性脑病（ DNS）小鼠细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法雄性昆明小鼠72只,18～22 g,随机分为对照组、中毒组、生理盐水组和依达拉奉组,一氧化碳腹腔注射建立一氧化碳中毒迟发性脑病的模型。染毒后5～21 d生理盐水组腹腔注射生理盐水,依达拉奉组腹腔注射依达拉奉,治疗结束后处死动物每组用免疫组化检测脑组织神经细胞的Bcl-2、Bax蛋白表达。应用流式细胞仪法检测脑凋亡细胞。结果与中毒组（38.5±0.58）及生理盐水组（36.5±0.46）比较,依达拉奉组（24.5±0.48）神经细胞凋亡显著减少（P＜0.05）;凋亡调控基因Bax/Bcl-2值明显降低（P＜0.05）。结论依达拉奉注射液对CO中毒迟发性脑病的脑保护作用机制可能与干预脑细胞凋亡相关基因表达并减少神经细胞凋亡有关。     

ADC值的变化对急性CO中毒迟发性脑病的预测价值

目的利用MR扩散加权成像监测CO中毒家兔模型急性期脑组织ADC值的变化并与病理对照，探讨MR扩散加权成像对CO中毒急性期诊断的价值并尝试寻找一种能预测CO中毒迟发性脑病的指标。方法通过静吸法建立家兔CO中毒模型15只，成功13只。行磁共振功能成像（本文主要探讨MR扩散加权成像）动态观察家兔中毒后1h、第3天、第5天、第7天的脑部损伤情况，动态测量兔脑皮层的ADC值，并结合病理结果分别与中毒前ADC值相对照。与此同时，连续观察染毒家兔临床表现60d，并根据临床表现不同分为两组，即出现迟发性脑病组和未出现迟发性脑病组。结果所有染毒成功家兔在染毒后1h兔脑皮层均出现ADC值不同程度下降，平均ADC值与染毒前对照差别有显著性（P〈0．05），部分出现了异常信号；未出现迟发性脑病的家兔组各时间点脑皮层ADC值与染毒前对照差异均无显著性意义（P〉0．05）；出现迟发性脑病的家兔组染毒后1h脑皮层ADC值与染毒前对照差异有显著性（P〈O．05）。病理表现与影像学表现一致。结论ADC值对评价急性CO中毒的程度具有重要价值，并且可以初步预测CO中毒迟发性脑病发生的可能性。     

急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠海马神经细胞凋亡及Erk1/2,Bad蛋白的表达

目的：研究急性一氧化碳（CO）中毒迟发性脑病（DEACMP）模型大鼠海马神经细胞凋亡及细胞外信号调节蛋白激酶1/2（Erk1/2）、Bcl-2/Bcl-xl相关凋亡蛋白（Bad）的表达,探讨DEACMP可能的发病机制.方法：体质量240～280g雄性SD大鼠48只,随机均衡分为对照组、染毒后1,3,7,14,21d组.分次腹腔注射CO纯品气体制备DEACMP模型,观察大鼠染毒后表现,并动态监测大鼠尾血碳氧血红蛋白（COHB）浓度.取各组大鼠海马组织制备石蜡病理切片,分别采用苏木精-伊红（HE）染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧尿苷酸缺口末端标记（TUNEL）法、免疫组织化学法观察海马神经元形态学变化、凋亡细胞数量,及Erk1/2,Bad蛋白的表达.结果：染毒后大鼠昏迷时间较长,COHB长时间（〉16h）维持在高水平（〉50%）; 染毒后7～14d海马神经细胞出现明显变性坏死; 凋亡细胞数在第7～14d达到高峰（P〈0.05）; Erk1/2于染毒后1～21d表达水平随时间延长逐渐减低（P〈0.05）; Bad表达于染毒后1d升高,3d达峰值后逐渐降低,但至21d时表达仍高于正常对照组（P〈0.05）.结论：CO中毒后Erk1/2表达下调、Bad早期表达上调后又回落,提示Erk1/2、Bad蛋白介导了海马区神经元的凋亡,参与了DEACMP的发生.     

一氧化碳对大鼠心肌LDH及其同工酶谱影响的研究

对ＣＯ急性染毒大鼠７５０ｐｐｍ（８５８．９ｍｇ／ｍ~３）、１５００ｐｐｍ（１７１７．８ｍｇ／ｍ~３）心肌ＬＤＨ活性及其同工酶谱进行研究。结果表明，接触高剂量ＣＯ可使心肌ＬＤＨ活性增高（与对照组相比，Ｐ＜０．０５），同工酶谱分析显示ＬＤＨ＿２降低、ＬＤＨ＿５增高（与对照组相比，Ｐ均＜０．０５），同工酶谱朝增加Ｍ亚基方向迁移。提示ＣＯ改变心肌能量代谢途径，增强无氧糖酵解以代偿ＣＯ所致的心肌缺氧。     

一氧化碳中毒所致迟发性脑病大鼠模型的建立

目的　建立一氧化碳 (CO)中毒迟发性脑病大鼠模型。方法　将 40只Wistar大鼠随机分为 4组 ,每组 10只。分别将大鼠放入内置式 +室中毒箱的中毒室内 ,A、B、C 3组分别通入体积分数为 10 0× 10 -4 、15 0× 10 -4 、16 5× 10 -4 的CO混合气体 ,D组通入空气 ,前 5h气体流量为 80 0L/h ,中间 4h为 10 0 0L/h ,最后 3h为 12 0 0L/h ,共通气 12h。中毒前后进行迷宫试验。中毒后 3～ 2 8d内出现昏迷或迷宫实验正确入臂数少于 3次者定为迟发性脑病大鼠。采用TUNEL法、流式细胞仪和透射电镜技术检测大脑皮质、海马部位细胞凋亡情况。结果　B、C 2组均有 4只大鼠出现迟发性脑病行为改变 ,A、D 2组则无改变。迟发性脑病大鼠凋亡细胞数TUNEL法检测 ,B组为 45 0 %～ 6 5 0 % ,C组为 5 5 0 %～ 80 0 % ,凋亡细胞主要为神经元 ;流式细胞仪检测 ,B组为 5 0 5 %± 4 2 % ,C组为 5 5 9%±7 8% ;电镜检测有典型凋亡改变的神经元 ,B组为 5 0 %～ 15 0 % ,C组为 10 0 %～ 2 0 0 %。A组凋亡细胞数均少于 5 0 % ,D组均少于 1 6 %。结论　以CO体积分数 15 0× 10 -4 ～ 16 5× 10 -4 、中毒时间12h建立的CO中毒迟发性脑病大鼠模型是成功的 ,其组织病理学改变为大脑皮质和海马的大量神经元凋亡。     

正丁酸钠对急性CO中毒家兔血液循环的影响

目的: 观察正丁酸钠对急性CO中毒后家兔血液循环的影响,探讨其脑保护的可能作用机制。方法: 取24只普通级健康家兔,随机分为正常对照组、急性CO中毒组(模型组)和急性CO中毒正丁酸钠预处理组(干预组),每组8只。家兔腹腔注入高纯CO气体制备急性CO中毒模型。干预组在家兔造模前10 min经耳缘静脉注射500 mg/kg正丁酸钠。造模后第7天检测血液流变学及血小板聚集率指标。结果: 模型组血液流变学及血小板聚集率各指标较对照组差异均有统计学意义(P <0.01),干预组血液流变学和血小板聚集率各指标均较模型组下降(P < 0.05~P < 0.01),而干预组较对照组差异无统计学意义(P > 0.05)。结论: 正丁酸钠可明显改善急性CO中毒引起的血液循环障碍,其作用机制极可能是通过抑制核因子-κB信号转导途径发挥抗炎效应,阻断炎症-凝血网络,从而改善血液循环而发挥脑保护作用。     

一氧化碳中毒和高压氧治疗前后大鼠脑一氧化氮和一氧化氮合酶活性的变化

目的：观察急性一氧化碳（ＣＯ）中毒大鼠脑组织中一氧化氮（ＮＯ）、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）活性的变化及高压氧（ＨＢＯ）对其的影响。方法：建立实验性大鼠ＣＯ中毒模型,采用改良的Ｇｒｉｅｓｓ法、分光光度法分别测定一氧化碳中毒及高压氧或常压氧治疗后大脑和小脑中ＮＯ、ＮＯＳ活性。结果：ＣＯ中毒后小脑ＮＯ明显增加,ＮＯＳ活性受抑制。ＨＢＯ治疗使ＮＯ、ＮＯＳ均恢复到正常水平。ＣＯ中毒后大脑ＮＯ降低,ＮＯＳ活性受抑制。ＨＢＯ治疗使ＮＯ增高,ＮＯＳ活性恢复正常。结论：急性ＣＯ中毒使大脑及小脑ＮＯ、ＮＯＳ活性均发生改变,这种改变可能参与ＣＯ造成的脑损伤。ＨＢＯ治疗有益于对脑ＮＯ、ＮＯＳ变化的调节作用。     

一氧化碳中毒在急性肺损伤中对肺通气灌流的影响

本研究旨在了解迭加CO中毒对吸入性肺损伤时肺气体交换的影响。10只麻醉犬经气管内注入盐酸导致吸入性损伤。5只犬作对照,另5只吸入CO混合气造成CO中毒,监测肺通气,灌流改变。酸吸入引起肺分流及低V/Q区肺血流增加;迭加CO中毒加剧了通气、灌流失衡,肺血流从低V/Q区转向分流区,使低氧血症更趋恶化。