三峡库区肺吸虫病与血吸虫感染ELISA检测的交叉反应研究

目的探索三峡库区肺吸虫病与血吸虫病免疫反应的交叉反应率。方法在酶联免疫吸附试验(ELISA)标准条件下进行严格质量控制后,采用ELISA方法分别用肺吸虫成虫抗原检测血吸虫病人阳性血清,用血吸虫虫卵抗原检测肺吸虫病人阳性血清,观察二者间的交叉反应率。结果在质控条件下ELISA的检测结果显示,80例三峡库区肺吸虫患者血清经血吸虫虫卵ELISA检测阳性19例,交叉反应率为23.75%。30例血吸虫患者血清经肺吸虫成虫抗原检测阳性11例,交叉反应率为36.67%。二者间差异无统计学意义(χ2=1.835,P>0.05)。结论三峡库区肺吸虫病与血吸虫病ELISA检测有较高的交叉反应率,需建立肺吸虫和血吸虫病的特异性免疫学检测方法,减少交叉反应。对三峡库区上下游的血吸虫病流行区传入库区的血吸虫病作出特异诊断、早期预防,以达到控制血吸虫病在库区流行、扩散的目的。     

单盲法快速-ELISA诊断血吸虫病的效果观察

以单盲法及目测判读与检测OD值对比观察快速ELISA诊断血吸虫病的效果。单盲法检测56例日本血吸虫病人及33名健康者血清，敏感性94，6％，特异性97．0％；与其它寄生虫病（肺吸虫病）的交叉反应率为6．2％。以目测法判断与测定OD值作对比，检测58例血吸虫病人及35名健康者血清，阳性检出率分别为94．8％和96，5％，特异性分别是100％和97．1％；经χ2检验，P＞0．05两法判断结果无显著性差异；与肺吸虫病和肝吸虫病均未见交叉反应。本实验进一个证明：快速－ELISA试验具有较好的诊断价值，适于现场推广应用。如以测定OD值判断结果，则使该法更具客观标准。     

免疫印渍试验在斯氏肺吸虫病血清学诊断中的意义

应用免疫印渍试验（Immunoblottingtest）分析斯氏肺吸虫成虫、幼虫和囊蚴期的虫体可溶性抗原．结果显示感染斯氏肺吸虫的人和动物血清可识别22、24和26KD抗原蛋白带．依据病人血清对上述抗原组仿的识别，用免疫印渍试验诊断24例斯氏肺吸虫病人，皆为阳性，而对照组显阴性．与Dot－ELISA比较试验的敏感性和特异性，两试验的阳性检出事无显著性差异（P＞0．05）．Dot-ELISA的交叉反应率为18．75％（6／32），而免疫印渍试验无交叉反应．表明斯氏肺吸虫的22、24和26KD蛋白带为特异性诊断抗原，免疫印渍试验为斯氏肺吸虫病的高度敏感和特异的血清学诊断方法．     

卫氏肺吸虫重组抗原的制备及初步应用研究

目的：纯化重组细菌Pw-1／pRSET B／BL21的表达产物肺吸虫重组抗原，复性后以ELISA法检测肺吸虫病患者、其他寄生虫病患者和正常人血清，评价其敏感性、特异性和应用前景。方法：通过分步洗涤及透析对细菌重组蛋白进行初步纯化．进一步做快速液相层析纯化，比较前后两法的纯化效果。初步纯化产物经氧化／还原型谷胱苷肽复性后即为重组蛋白抗原(以下简称重组抗原)。用该重组抗原，以ELISA法检测肺吸虫、血吸虫、肝吸虫、囊虫和包虫病患者以及正常人血清中相应抗体，并与卫氏肺吸虫粗抗原做比较。结果：经分步洗涤及透析纯化后的重组抗原纯度已较高，快速液相层析进一步纯化效果不明显。以初步纯化后经复性的重组抗原进行ELISA法检测肺吸虫病患者血清，敏感性为91．07％，与其他寄生虫病患者和正常人血清均无交叉反应；粗抗原检测肺吸虫病患者血清敏感性虽为100％，但与其他寄生虫病患者和正常人血清交叉反应率分别为：血吸虫病11．43％，肝吸虫病4．84％，囊虫病3．22％，包虫病5．88％，正常人为2．5％。结论：研究制备的重组抗原应用于肺吸虫病的免疫诊断特异性较高。     

金标免疫渗滤法（DIGFA）快速检测血吸虫循环抗原的研究

目的建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法在已建立的检测血吸虫抗体的DIGPA基础上，以抗血吸虫重组蛋白SVLBP多抗为捕捉抗体，金标抗SEA多抗为覆盖抗体，建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心DIGFA。结果用该法检测了急性血吸虫病病人血清30人份和慢性血吸虫病病人血清38人份，其阳性检出率分别为100％和52．6％；120人份流行区健康人血清全为阴性；100人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为100％，与10例华支睾吸虫病病人血清无交叉反应；15例肺吸虫病病人血清有1例阳性，交叉反应率为6．7％；与双夹心ELISA的符合率为97.4％，经x^2检验表明两法检测效果无显著性差异。结论用DIGFA检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性，并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备，有广阔的应用前景。     

玻片法环幼沉淀试验、间接血凝试验、免疫酶染色试验诊断旋毛虫病的研究

用玻片法环幼沉淀试验，间接血凝试验和免疫酶染色试验检测感染旋毛虫实验动物豚鼠血清特异性抗体，阳性率分别为９６．７％，１００％和９７．１％。同时检测阴性豚鼠、血吸虫病兔、肺吸虫病大白鼠和蛔虫病人与阳性豚鼠血清对比观察，除阳性鼠血清和１例肺吸虫病大白鼠血清ＩＨ－Ａ出现阳性反应外，其它对照血清三项试验均为阴性反应，表明其特异性强。     

金标渗滤法测定囊虫特异性抗体试剂盒的研制

目的 研制简易、快速、准确的囊虫病诊断试剂盒，并对其诊断价值进行考核评价。方法 以猪囊尾蚴的囊液粗提液为检测用抗原，以胶体金标记的金黄色葡萄球菌蛋白A（SPA）为探针，采用自行设计的渗滤装置制备金标渗滤法（DIGFA）检测试剂盒。检测不同病人血清中囊虫特异性IgG抗体，并以囊虫IgG抗体ELISA检测试剂盒考核其敏感性和特异性。结果 用金标试剂盒检测58人份囊虫病患者血清和100人份健康者血清，其敏感性为98.3％（57/58）；特异性为100％（100/100）。用该试剂盒检测25人份包虫病患者血清，6份呈弱阳性，交叉反应率为24％；检测30人份血吸虫病人血清，10人份肺吸虫病人血清，10人份肠道线虫病人血清，均无交叉反应。与ELISA试剂盒检测结果比较，符合率为98．7％，无显著性差异（χ^2=0．0545，P〉0．05）。结论 金标渗滤法快速检测囊虫特异性抗体试剂盒敏感性高、特异性强，可与ELISA法相媲美，且操作更为简便、快速，结果判读容易，特别适合临床检测和现场查病。     

单盲法快速—ELISA诊断血吸虫病的效果观察

以单盲尖及目测判读与检测ＯＤ值对比观察快速ＥＬＩＳＡ诊断血吸虫的效果。单盲法检测５６例日本血吸虫病人及３３名健康者血清，敏感性９４．６％，特异性９７．０％；与其它寄生虫病的交叉反应率为６．２％。以目测法判断与测定ＯＤ值作对比，检测５８例血吸虫病人及３５名健康者血清，阳性检出率分别为９４．８％和９６．５％，特异性分别是１００％和９７．１％，经χ＾检验，Ｐ〉０．０５，两法判断结果无显著怀差异，与肺吸虫     

重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白用于检测特异抗体的研究

目的 评价重组华支睾吸虫26kDaGST蛋白(rCs26GST)在华支睾吸虫病血清学诊断上的价值。方法使用rCs26GST抗原，以酶联免疫吸附法(ELISA)和免疫增强化学发光法(immuno-enhanced chemilmninescence，immuno-ECL)检测华支睾吸虫病者、其它寄生虫感染者及健康人血清特异性IgG和IgE抗体，分析rCs26GST抗原用于检测的敏感性和特异性。结果使用rCs26GST抗原，ELISA法检测了30份华支睾吸虫感染者血清、肺吸虫病人血清15份、日本血吸虫病人血清20份、无寄生虫感染的健康人血清40份，华支睾吸虫感染者血清IgG的阳性检出率为73．3％(22／30)，健康人、肺吸虫病和日本血吸虫病人的阴性率分别为92．5％(37／40)、80．0％(12／15)、85．0％(17／20)。hnmuno-ECL法检测华支睾吸虫感染者血清rCs26GST-特异性IgE的阳性检出率为867％(26／30)，肺吸虫病为26．7％(4／15)，日本血吸虫病人和阴性对照组的血清未测出，此法的特异度是95．5%。结论 rCs26GST蛋白用于血清特异性IgG和IgE抗体的检测具有较高的敏感性和特异性，可用于华支睾吸虫病的血清学诊断，组合成“鸡尾酒”式的复合诊断抗原之一。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断肺吸虫病的初步研究

本文报道了以肺吸虫成虫冷浸液为抗原,用ELISA检测30例肺吸虫病人、51例正常人和34例日本血吸虫病人血清,结果证明ELISA具有高度的敏感性和特异性,适用于肺吸虫病的诊断。     

改良单克隆抗体Dot—ELISA检测血吸虫循环抗原

用抗趋阴极循环抗原单克隆抗体建立的Dot-ELISA检测血吸虫循环抗原显示有高度的敏感性和特异性,极少交叉反应。68份急性血吸虫病患者血清的阳性检出率为98.5%,216份慢性血吸虫病血清的阳性检出率为83.3%。225份正常人血清仅1份阳性。48例血吸虫病治愈者的阴转率为97.9%。实验性血吸虫病家兔治疗后8周,16只治愈的家兔中12只阴转。     

Dot—ELISA快速诊断日本血吸虫病的实验研究

目的：建立快速简便实用的血吸虫病诊断方法。方法：利用Dot-ELISA检测急性日本血吸虫病患者血清特异性IgG抗体。结果：Dot-ELISA和常规ILISA检测117例急性血吸虫病患者血清抗体的阳性率分别为94.0%和97.4%,高于粪便检测的阳性率（92.3%),两法检测结果的符合率达96.6%。108例粪检阳性患者,Dot-ELISA和常规ELISA的阳性率分别为94.4%和97.2%,两法检测结果的符合率为97.2%。25例肝吸虫病和50例正常人可出现不同程度的交叉反应。结论：两法在诊断的敏感性和特异性方面相似,检测结果无显著性差异,而Dot-ELISA操作简便,诊断快速,具有一定的实用诊断价值。     

斑点免疫金银染色试验与斑点ELISA诊断血吸虫病的比较

以日本血吸虫成虫抗原，应用斑点免疫金银染色法（Ｄｏｔ－ＩＧＳＳ）和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ诊断日本血吸虫病，５５例粪检阳性病人血清抗体检出率均为１００．０％，５０例正常人血清阴性符合率均为９８．０％，与５０例肝吸虫病人的交叉反应分别为２．０％和４．０％，两法未见显著性差异（Ｘ１１＝０．３４４Ｐ＞０．０５）。但进一步研究显示金标法的混合阳性血清最终滴度较酶法高４～５倍；使用抗原节省；２０份阳性血清抗体检出阳性终点也较酶法高２～４个滴度。     

应用单克隆抗体检测华支睾吸虫病人的循环抗原

本文应用抗华支睾吸虫成虫抗原的单克隆抗体建立了Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，以检测华支睾吸虫病人血清中的循环抗原。被检的６１例中５１例（８３％）呈阳性反应，而肺吸虫、血吸虫、旋毛虫、猪囊虫病人以及健康人均为阴性。     

应用猪囊尾蚴囊液、头节和囊壁抗原斑点ELISA诊断脑囊虫病的比较研究

应用猪囊尾蚴囊液、头节和囊壁抗原斑点ELISA检测脑囊虫病患者血清.当血清稀释度为1:20～1:320时,囊液、头节和囊壁抗原对脑囊虫病患者血清的检出阳性率分别为95:7%～82.9%,95.7%～71.4%和97.1%～30%。3种抗原与正常人、肺吸虫病人、华支睾吸虫病人及脑血管病人血清均无假阳性反应或交叉反应。与细胞粒棘球蚴病人血清的交叉反应率分别是22.5%～47.5%,10%～42.5%和10%～17.5%,以囊壁抗原的交叉反应为最低。     

圆斑酶联免疫吸附试验诊断囊虫病——诊断结果的薄层扫描定量分析

以囊尾蚴囊液抗原做圆斑酶联免疫吸附试验,对几组血清进行检测,５４例囊虫病患者中５０例呈阳性反应,阳性率９２．５９％（阳性终点滴度１∶５０～１∶６４００）,４５例健康人中１例呈假阳性反应,假阳性率为２．２２％（终点滴度１∶５０～１∶１００）。在血清１∶２００稀释时阳性率为８３．３３％,无假阳性反应。除包虫病患者血清与囊液抗原有较高交叉反应外（１２／２０）,其它疾病与囊液抗原均无交叉反应。应用薄层扫描技术,以峰面积比值（Ｐ／Ｎ值）为指标,对结果进行定量分析并取得良好结果,解决了该方法不能定量分析的不足。     

班氏丝虫宿主循环抗原的检测

应用兔抗牛丝虫抗体ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法和Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法检测安徽流行区人体班氏丝虫循环抗原。微丝蚴血症者血清总阳性率９６％（２４／２５），尿液总阳性率为６０％（１５／２５），４份乳汁阳性率均为１００％。１５份尿液阳性和４份乳汁阳性者与血清阳性结果的符合率分别为１００％（１５／１５）和７５％（３／４）。检测江苏非流行区正常人血清、尿液、乳汁共４３份，全部阴性。１１份肠道线虫感染者尿液全为阴性，血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。１０份肺吸虫感染者血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ阴性。结果表明，班氏丝虫循环抗原不仅存在于血清而且存在于尿液和乳汁中。     

斑点-ELISA与平板-ELISA诊断脑囊虫病的敏感性比较观察

应用斑点-ELISA和平板-ELISA对52例脑囊虫病患者的血清进行抗体检测。结果显示,两种免疫方法诊断脑囊虫病的敏感性近似(阳性率分别为92.3%与90.4%);与40例正常人血清均无假阳性反应。但斑点-ELISA具有节省抗原,操作简便,不需特殊仪器设备等优点,适用于临床诊断及流行病学调查。     

人旋毛虫病血清与诊断抗原的检测方法的比较研究

以旋毛虫肌肉期幼虫的分泌排泄抗原（ES）和纯化ES中46～58KD抗原（P－ES）为诊断抗原，用Dot－ELISA同时检测34份旋毛虫病人血清，阳性检出率分别为91．18％和94．12％（P＞0．05）．而100份正常人血清均为阴性；检测其它4种蠕虫病人血清62份，交叉反应率分别为29．3％和0％，P－ES的特异性明显优于ES（P＜0．05）。另外，以P-ES为珍断抗原，比较Dot-ELISA和间接ELISA用于诊断旋毛虫病人的检测效果，实验表明：Dot-ELISA不仅有间接ELISA相似的敏感性和特异性，而且简便、快速、经济，更适合于推广应用。     

斑点-ELISA与平板-ELISA诊断脑囊虫病的敏感性比较观察

应用斑点-ELISA 和平板-ELISA 对52例脑囊虫病患者的血清进行抗体检测。结果显示,两种免疫方法诊断脑囊虫病的敏感性近似(阳性率分别为92.3%与90.4%);与40例正常人血清均无假阳性反应。但斑点-ELISA 具有节省抗原,操作简便,不需特殊仪器设备等优点,适用于临床诊断及流行病学调查。