蜂毒素对人肝癌细胞裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的 探讨蜂毒素对人肝癌细胞移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的影响.方法 建立人肝癌BEL-7402细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察瘤内注射蜂毒素对肝癌细胞移植瘤在裸鼠体内生长的影响.应用HE染色观察肿瘤组织形态学变化,采用免疫组织化学法检测肝癌组织微血管密度(MVD),酶联免疫吸附法检测裸鼠血清白细胞介素-8(IL-8)的水平,Western blotting法检测裸鼠肝癌组织中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况.结果 荷瘤裸鼠瘤内注射蜂毒素剂量为40、60、80μg/kg时的抑瘤率分别为44.64%、62.86%、73.73%,药物处理组肿瘤体积明显小于模型组(P<0.01).光镜下见蜂毒素各组肿瘤组织出现片状坏死,肿瘤间质内可见肿瘤血管,并有血管破坏现象.蜂毒素可明显降低裸鼠肝癌组织微血管密度,药物处理组IL-8和VEGF的表达显著低于模型组(P<0.01).结论 蜂毒素能够明显抑制人肝癌细胞裸鼠移植瘤的生长,其作用机制可能与下调IL-8和VEGF的表达,抑制肿瘤血管生成有关.     

灵芝孢子粉对四氯化碳致大鼠肝硬化的干预作用

目的：观察灵芝孢子粉对肝硬化大鼠脏器指数及肝组织形态的影响。方法：80只健康SD大鼠被随机均分为4组．即空白对照组、模型组、灵芝孢子粉低剂量组、灵芝孢子粉高剂量组。除空白对照组不做处理外,其他各组采用四氯化碳菜籽油溶液复制模型,模型复制同时灌胃给予灵芝孢子粉混悬液,连续8周后测量肝脾湿质量,取肝左叶制备切片用于苏木精-伊红染色。结果：①与空白对照组比较,模型组体质量显著降低（P〈0．05）,肝湿质量、肝指数、脾指数显著增加（P〈0．05）;与模型组比较,灵芝孢子粉低、高剂量组肝指数显著降低（P〈0．05）。②与模型组比较,灵芝孢子粉低、高剂量组肝脏汇管区有少量纤维组织增生,但未见假小叶结构。结论：灵芝孢子粉可以抑制四氯化碳对大鼠肝纤维化的作用。     

癌痛消颗粒调节大鼠移植性肝癌VEGF和MVD表达的实验研究

目的：用大鼠walker-256移植性肝癌模型研究癌痛消颗粒对肿瘤血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）的影响，以探讨该药癌痛消颗粒抗肝癌作用的机制。方法：将40只大鼠移植性肝癌模型随机分为4组，即癌痛消颗粒高剂量组（A组）、癌痛消颗粒低剂量组（B组）、5-Fu组（c组）、生理盐水组（D组），于造模后第8天对癌痛消治疗组及生理盐水组灌胃给药，5-Fu组腹腔注射给药，连续用药14天后停药24h，处死大鼠，取出瘤块，用免疫组化法检测瘤块中vEGF和MVD的表达情况。另设正常饲养组（E组）大鼠10只，不进行造模及给药，供实验结束时作空白对照用。结果：造模各组（A、B、C、D组）VEGF及MVD的表达水平均明显高于正常组（E组）（P〈0．01）；两者的表达均以D组最高；和D组比较，A、B、C组均可明显降低VEGF及MvD的表达（P〈0．01），A组比B组作用更为明显（P〈0．05）.结论：癌痛消颗粒可下调大鼠移植性肝癌VEGF和MVD的表达，以高剂量组作用更为明显。     

血管内皮生长因子siRNA对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的观察VEGF siRNA对人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用，探讨VEGF作为膀胱癌基因治疗靶点的有效性。方法已稳定转染pGC-siVEGF的T24接种至裸鼠皮下，建立荷瘤裸鼠膀胱癌模型。利用免疫组织化学方法（SABC）检测肿瘤细胞VEGF和肿瘤间质CD34的水平，根据CD34表达情况评价肿瘤微血管密度（MVD），末端脱氧核苷酸转移酶标记法（TUNEL）测定肿瘤细胞凋亡指数。结果实验组与对照组相比较：成瘤率低，肿瘤生长速度缓慢（P〈0．01）；VEGF水平下降（P〈0．01）；肿瘤微血管密度减少（P〈0．01）；凋亡指数升高（P〈0．01）。组间比较差异均具有显著性。结论以VEGF为靶点的小干扰RNA有抑制VEGF表达、遏制膀胱癌T24细胞在体内生长的作用，VEGF有可能成为临床膀胱癌基因治疗的有效靶点，为膀胱癌的抗血管生成疗法提供理论基础。     

超声辐射微泡对小鼠皮下H22肝癌移植瘤血管生成及VEGF表达的影响

目的 探讨超声辐射微泡对小鼠皮下H22肝癌移植瘤的抑瘤作用及其机制。方法 建立小鼠H22肝癌细胞皮下移植瘤模型,分组进行局部单纯超声治疗、超声微泡治疗。观察肿瘤生长情况，对治疗后肿瘤组织进行病理学检查，用CD34染色标记血管内皮细胞．以微血管密度作为定量检测指标。用免疫组织化学S-P法检测血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达。结果超声微泡组与对照组比较，瘤体积缩小（P〈0．05），VEGF蛋白表达减低（P〈0．05）。VEGF表达与MVD间呈正相关（r=0．9947，P〈0．01）。结论超声辐射微泡可显著抑制H22肝癌移植瘤的生长和发展，其机制可能为降低肿瘤VEGF合成与分泌，破坏与减少肿瘤血管再生。     

HepaSphere微球联合Avasting栓塞治疗VX2兔肝癌的实验研究

目的 探讨HepaSphere微球联合Avasting肝动脉栓塞治疗兔移植性肝癌的疗效.方法 建立40只兔VX2肝癌模型,随机分为四组,每组10只,A组：肝动脉灌注生理盐水;B组：肝动脉灌注Avasting;C组：肝动脉HepaSphere栓塞;D组：肝动脉HepaSphere＋Avasting栓塞.两周后复查CT确定种植成功并计算瘤体大小,免疫组化方法检测肝肿瘤血管内皮生长因子（VEGF）的表达和肿瘤微血管密度（MVD）.所得数据使用SPSS12.0统计软件进行处理,各组间比较采用q检验、x2检验.结果 肿瘤生长抑制D组明显优于其他组（P＜0.05）; VEGF的表达及MVD计数D组显著低于其他组（P＜0.05）.结论 HepaSphere微球联合Aasting行兔肝动脉栓塞能抑制移植型肝癌的生长及肝内转移,并对肿瘤组织的微血管和VEGF的表达具有显著的抑制作用.     

联合低剂量化疗对小鼠Lewis肺癌抗血管生成和抗肿瘤作用的研究

目的观察低剂量环磷酰胺（CTX）、紫杉醇（PTX）联合化疗的抗血管生成作用、抑瘤作用及毒副反应。方法建立小鼠Lewis肺癌模型，将40只C57BL／6小鼠随机分为四组：生理盐水对照组、CTX单药组（170mg／kg，q6d）、PTX单药组（10mg／kg，q7d）、CTX＋PTX联合治疗组。分别测定小鼠肿瘤体积、平均瘤重、抑瘤率，免疫组化法检测微血管密度（MVD），免疫组化图像分析法半定量检测血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果低剂量CTX＋PTX联合治疗组的肿瘤体积、平均瘤重低于各单药治疗组（P〈0．005），抑瘤率高于各单药治疗组（P〈0．005）；联合治疗组肿瘤组织MVD数和VEGF表达均低于各单药治疗组（P〈0．005）。紫杉醇单药治疗组毒副反应最小，其他各治疗组毒副反应无差异，可耐受。结论低剂量CTX、PTX两药联合治疗比单药治疗具有更强的抑制血管生成及抑制肿瘤生长作用，毒副作用可被耐受。     

蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3裸鼠抑瘤作用及对VEGF表达的影响

目的研究蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对BXPC-3裸鼠抑瘤作用及对肿瘤新生血管内皮因子（VEGF）表达的影响,并进一步探讨其作用机制。方法建立BXPC-3裸鼠的动物模型,检测蝙蝠葛酚性碱对转移瘤的抑瘤率,采用免疫组织化学方法检测各组BXPC3小鼠肿瘤组织VEGF的表达水平。结果蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3胰腺癌裸鼠瘤组织具有一定的抑制作用,与模型对照组比较具有统计学意义（P〈0．01）。PAMD各剂量均能明显降低BXPC-3胰腺癌裸鼠瘤组织VEGF的表达水平。结论蝙蝠葛酚性碱对BXPC-3裸鼠胰腺癌具有明显的抑制作用。其机制可能是通过改善裸鼠免疫功能,抑制肿瘤新生血管形成来实现的。     

大黄素抑制胰腺癌裸鼠原位移植瘤新生血管形成的机制研究

目的探讨大黄素对胰腺癌SW1990细胞裸鼠原位移植瘤新生血管的影响及其作用机制。方法建立胰腺癌SW1990细胞裸鼠原位移植瘤动物模型,分为对照组（N组）、大黄素低剂量组（20mg/kg,E20组）、大黄素中剂量组（40mg/kg,E40组）以及大黄素高剂量组（80mg/kg,E80组）。各组均采取腹腔注射给药,每周3次,共2周,观察药物对移植瘤生长的影响。采用免疫组化染色法检测肿瘤组织CD31的表达和微血管密度（MVD）。采用RT-qPCR法和Westernblot法检测肿瘤血管生成素1（Ang-1）、血管生成素2（Ang-2）、酪氨酸激酶受体2（Tie-2）及血管内皮生产因子（VEGF）的表达。结果末次用药后1周,大黄素组MVD较对照组降低（P＜0.05）,且MVD与大黄素用药浓度呈负相关（P＜0.05）;大黄素组Ang-1、Ang-2、Tie-2及VEGF的表达较对照组减少（P＜0.05）。结论大黄素对胰腺癌SW1990细胞裸鼠原位移植瘤的新生血管有抑制作用,其机制可能是大黄素改变新生血管相关的Ang-1、Ang-2、Tie-2及VEGF的表达。     

TP、VEGF在原发性肝细胞癌中的表达及与肝癌血管生成的相关性研究

目的检测原发性肝细胞癌（HCC）肝组织中胸苷磷酸化酶（TP）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达水平,井对肝癌组织中TP和VEGF的表达与肝癌血管生成进行相关性分析。方法应用免疫组织化学方法检测72例肝癌组织及19例正常肝组织中的TP、VEGF表达及微血管密度（MVD）均值,并分析其与HCC病理学分级和临床分期的相关性。结果肝癌组织TP、VEGF阳性表达率及MVD均值明显高于正常肝组织（P〈0．05）,且TP、VEGF的表达与肝癌病理分级、肿瘤包膜是否完整、肿瘤大小、有无门静脉癌栓明显相关（P〈0．05）;但与性别、年龄、AFP、是否肝硬化、child肝功能分级无关（P〉0．05）。结论TP、VEGF的表达与肝癌血管生成呈正相关,TP、VEGF在肝癌血管生成中具有协同作用。     

HIF-1α反义寡核苷酸治疗人胃癌裸鼠移植瘤的实验研究

目的 研究缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸对人胃癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用.方法 用人胃癌细胞株SCG-7901建立胃癌裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为反义寡核苷酸(ASOND)组、正义寡核苷酸(SOND)组和对照组,瘤体内分别注射阳离子脂质体包裹的HIF-1α ASOND、HIF-1α SOND和空白阳离子脂质体.观察各组动物的肿瘤生长曲线,测瘤重计算抑瘤率,光学显微镜下观察肿瘤细胞形态学变化,免疫组化方法 检测各组肿瘤组织HIF-1α、血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的表达.结果 ASOND组裸鼠的肿瘤生长受到明显抑制,ASOND组瘤重与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05);ASOND组、SOND组抑瘤率分别为47.94%、16.88%,差异有统计学意义(P＜0.01);ASOND组肿瘤组织中HIF-1α、VEGF和MVD的表达低于SOND组和对照组(P＜0.01).结论 肿瘤原位注射HIF-1α反义寡核苷酸治疗胃癌裸鼠皮下移植瘤能降低HIF-1α的表达,继而减少VEGF的生成和新生血管的形成,抑制肿瘤的生长.     

奥曲肽抑制人肝癌BEL-7402细胞生长的实验研究

目的　探讨生长抑素类似物奥曲肽 (OCT)在体内对人肝癌BEL - 74 0 2细胞生长的影响。方法　建立人肝癌细胞株BEL - 74 0 2裸鼠移植瘤模型 ,实验组皮下注射奥曲肽 10 0 μg·kg- 1 ·d- 1 ,对照组给予生理盐水 2 0μl d ,给药 2 8天后处死裸鼠。取瘤 ,测量瘤重、瘤体积后 ,检测移植瘤组织中血管内皮细胞生长因子 (VEGF)、微血管密度 (MVD)的表达。结果　奥曲肽组瘤重、瘤体积与生理盐水组间有显著性差异 (P <0 .0 5 )。奥曲肽组VEGF的表达明显低于生理盐水组 (P <0 .0 5 ) ,而MVD在奥曲肽组的表达虽然低于生理盐水组 ,但统计学差异无显著性 (P =0 .0 5 5 )。结论　生长抑素类似物奥曲肽能够抑制裸鼠人肝癌移植瘤的生长 ,并能抑制瘤组织中VEGF的表达 ,同期移植瘤组织中微血管密度呈下降趋势。     

内皮抑素对卵黄囊瘤裸鼠模型血管生长的影响

目的通过动物实验验证血管生长在卵黄囊瘤裸鼠模型中的作用,以及内皮抑素对模型血管生长的影响。方法建立卵黄囊瘤裸鼠模型,分别采用1.5mg/(kg.d)及0.75mg/(kg.d)两个浓度重组人血管内皮抑制素局部注射干预,并皮下及瘤内注射生理盐水25ml/(kg.d)注射对照,共14天,每组10只。药物干预结束后,明胶-氧化铅悬浊液灌注法行肿瘤血管造影,观察肿瘤血管差异。免疫组化方法检测移植瘤AFP、VEGF、CD34。结果 (1)小儿恶性畸胎瘤裸鼠模型复制成功,AFP在移植瘤细胞胞质中有表达,肿瘤性质稳定。(2)肿瘤体积自第6天测量治疗组肿瘤生长速度明显低于对照组(P<0.05);第12天测量结果提示高剂量组与低剂量组肿瘤体积出现显著差异(P<0.01)。(3)免疫组化:VEGF表达范围及强度,治疗组均小于对照组(P<0.05),高剂量组小于低剂量组(P<0.05),两对照组之间无明显差异(P>0.05);MVD:治疗组均小于对照组(P<0.01),高剂量组小于低剂量组(P<0.01),两对照组之间无明显差异(P>0.05)。(4)肿瘤血管造影:血管分布密度内皮抑素高剂量治疗组<低剂量组<实验对照组。结论内皮抑制素通过抑制VEGF的作用,减少血管发生,从而对卵黄囊瘤裸鼠模型移植瘤的生长有抑制作用。     

熊果酸体内抗肺癌作用机制探讨

目的：探讨熊果酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用及其机制。方法:采用人肺腺癌A549细胞株进行裸鼠移植瘤实验。通过移植瘤生长曲线、终末瘤重计算抑制率观察熊果酸对人肺癌裸鼠移植瘤的抑制作用，采用免疫组化法检测VEGF蛋白表达、微血管密度，TUNEL检测凋亡指数，探讨其作用机制。结果:实验组用药后移植瘤生长缓慢，实验结束时，实验组瘤重及瘤体积明显低于对照组（P＜0.05），抑瘤率为51.35％。实验组移植瘤组织微血管密度及VEGF蛋白表达明显低于对照组（P均＜0.01），实验组癌细胞凋亡指数高于对照组(P＜0.01)。结论:熊果酸对裸鼠肺腺癌移植瘤生长有抑制作用，其机制可能与降低移植瘤促血管生成因子VEGF的表达、抑制新生血管的形成和促进肿瘤细胞凋亡有关。     

环氧合酶-2抑制剂抑制胃癌转移的实验研究

目的研究环氧合酶-2抑制剂SC236对胃癌转移的影响，并初步探讨其作用机制。方法用人胃癌细胞株SGC7901建立裸鼠人胃癌原位移植瘤模型，随机分为实验组和对照组，分别经尾静脉注射SC236和生理盐水，观察各组生存期和肿瘤转移情况，并通过免疫组化方法检测移植瘤MVD、VEGF及MMP-2蛋白的表达。结果与对照组相比，SC236可明显延长荷瘤鼠生存期，抑制胃癌转移，降低移植瘤MVD，减低移植瘤VEGF及MMP2蛋白的表达。结论SC236能有效抑制胃癌的转移。其机制可能与其抑制肿瘤的血管生成、减低MMP-2的表达有关。     

双氢青蒿素对前列腺癌裸鼠种植瘤生长及VEGF表达的影响

目的：研究双氢青蒿素（DHA）对前列腺癌PC-3细胞裸鼠种植瘤的抑制作用及对VEGF表达的影响,并探讨其作用机制.方法：采用人前列腺癌PC-3细胞建立裸鼠种植瘤模型,20只模型鼠随机分为对照组;二甲基亚砜（DMSO）溶剂组（DMSO1mL/kg）;DHA实验1组（DHA100μmol/kg）;DHA实验2组（DHA200μmol/kg）.经13d干预后,计算抑瘤率.采用光镜及电镜观察肿瘤组织形态学变化;采用免疫组织化学法检测VEGF的表达水平;采用体视学分析肿瘤微血管密度（MVD）.结果：DHA实验1,2组抑瘤率分别为63.186%,69.221%.光镜及电镜下观察可见DHA实验1组和实验2组肿瘤组织内凋亡细胞明显增多,出现典型的凋亡小体.免疫组化结果显示VEGF表达DHA实验1组和实验2组均低于对照组及DMSO溶剂组（P〈0.05）,但2个DHA实验组组间相比较差异无统计学意义;DMSO溶剂组与对照组组间相比较差异也无统计学意义.2个DHA实验组MVD均低于对照组（P〈0.05）,但2个DHA实验组之间相比较差异无统计学意义;DMSO溶剂组与对照组组间相比较差异也无统计学意义.结论：DHA具有较强的抗肿瘤作用,其机制与下调凋亡相关基因VEGF有关.     

吲哚美辛抑制结肠癌移植瘤生长和微血管形成的实验研究

OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of nonsteroidal anti-inflammatory drug indomethacin on tumor growth and microvessel angiogenesis of human colon cancer xenografts in nude mice. METHODS: Human colorectal cancer HCT116 cells were inoculated subcutaneously into BALB/c-nu/nu mice. After daily treatment with oral indomethacin for 4 weeks (3 mg.kg-1.d-1), the mice were sacrificed by cervical dislocation, and immunohistochemical staining was employed to determine microvessel density (MVD) and expression of vascular endothelial growth factors (VEGF) in the tumor tissues. RESULTS: Growth of HCT116 tumor was significantly suppressed by indomethacin. The tumor volume (mm3) was 458.89+/-32.07 in the treated group versus 828.21+/-31.59 in the control group (P<0.05). The MVDs of the treated and control groups were 19.50+/-5.32 and 37.40+/-4.93 respectively (P<0.001), and VEGF expressions were 1.19+/-0.17 and 1.90+/-0.48 (P<0.01), respectively. MVD and VEGF expression in the treated tumor tissue declined noticeably as compared with the controls. There was a positive correlation between the decrease of VEGF expression and that of MVD (rs=0.714, P<0.05). No obvious toxicity was observed in nude mice. CONCLUSION: Indomethacin can inhibit the growth of transplanted human colorectal HCT116 tumor in association with a significant reduction in angiogenesis, which may be achieved through inhibition of VEGF.     

紫杉醇对裸鼠人肝癌血管生成和肿瘤生长、转移的作用

目的:通过建立高转移潜能人肝癌裸鼠肝原位移植模型,观察紫杉醇对人肝细胞癌(HCC)血管生成和肿瘤生长、转移的干预作用。方法:24只人肝癌裸鼠模型随机分成两组,实验组和对照组,每组12只。自模型建立次日始两组分别给予13mg·kg-1·d-1剂量紫杉醇和等体积生理盐水腹腔注射,给药第30d处死裸小鼠,观察肿瘤生长、转移情况,分别用免疫组化和RTPCR的方法检测癌组织CD34和VEGFmRNA的表达水平,记录微血管密度(MVD)。结果:紫杉醇组肿瘤重量、体积、肺转移灶计数、MVD和VEGF均低于对照组(P<0.05)。结论:紫杉醇对HCC生长有抑制作用,抑制肝细胞癌的血管生成并降低肺转移。     

基于Hedgehog-Gli1信号通路探讨中药复方肠复康胶囊干预结肠癌血管生成的分子机制

目的:观察中药复方肠复康胶囊对人结肠癌Lo Vo细胞裸鼠模型血管生成、肿瘤转移的抑制作用,并探讨其对Hedgehog-Gli1信号通路的干预及对VEGF表达的影响。方法:采用裸小鼠结肠癌原位种植转移模型,将荷瘤鼠50只随机分为5组,每组10只,种植后第1周开始,分别给予生理盐水(模型组)、5-FU(5-FU组)、肠复康胶囊低剂量及高剂量(肠复康胶囊低剂量组、肠复康胶囊高剂量组)、5-FU与肠复康胶囊联合应用(肠复康胶囊+5-FU组),每天1次,共用4周。种植后第5周末处死动物,测量原位肿瘤瘤体质量、抑瘤率,应用免疫组化检测各组结肠癌组织中肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD),应用Western blot法检测Gli1、VEGF蛋白表达。结果:与模型组比较,5-FU组、肠复康胶囊低剂量组、肠复康胶囊高剂量组、肠复康胶囊+5-FU组抑瘤率分别为34.96%、27.97%、52.44%、58.74%,平均瘤体质量分别为(0.93±0.27)g、(1.03±0.29)g、(0.68±0.28)g、(0.59±0.22)g,差异均有统计学意义(P0.05);肠复康胶囊低剂量组、肠复康胶囊高剂量组、肠复康胶囊+5-FU组小鼠MVD分别为(5.33±2.1)、(2.3±1.5)、(0.66±0.5),明显低于模型组与5-FU组,差异均有统计学意义(P0.05)。模型组区域淋巴结转移率达100.00%,腹膜转移率达91.66%,肝转移率75.00%,肺转移率为58.33%。而肠复康胶囊高剂量组及肠复康胶囊+5-FU组各脏器转移率均较模型组明显降低,差异均有统计学意义(P0.05)。Western blot检测显示,5-FU组及肠复康胶囊高剂量组Gli1蛋白表达分别(0.660±0.155)、(0.632±0.147),VEGF蛋白表达分别为(1.011±0.481)、(0.981±0.509),与模型组相比,Gli1和VEGF蛋白的表达水平均明显下降,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:肠复康胶囊对结肠癌肿瘤新生血管生成具有抑制作用,其机制与其抑制Hedgehog-Gli1信号通路激活,下调VEGF表达而发挥抗肿瘤血管形成作用有关。