HBV-M与HBV-DNA关系的研究

目的：研究乙肝5项免疫标志物(HBV-M)与乙肝核酸(HBV-DNA)之间的关系，从而评价检测HBV-DNA载量的临床应用价值。方法：血清HBV-DNA采用美国PE公司生产5700荧光定量PCR仪进行定量检测。5项免疫标志物采用ELISA法。结果表面抗原(HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗体(抗-HBc)阳性者，HBV-DNA阳性率为99．5％、e抗体、抗-HBc阳性者，HBV—DNA阳性率为56％；单项HBsAg阳性者，HBV-DNA阳性率为50．1％；HBsAg和抗-HBc阳性者，HBV—DNA阳性率为48．3％；5项免疫标志物皆阴性、含有3个抗体或2个抗体以及注射乙肝疫苗后单项抗-HBs阳性者，HBV—DNA阳性率为0。结论:HBV—DNA载量与抗原存在呈正相关性，而与抗体含量呈负相关性；慢性乙型肝炎患者机体无法清除乙肝病毒，HBV复制是激发机体免疫损害的关键环节，因此抗病毒治疗对减少或阻断肝病的发作和病情进展是十分必要的；HBV—DNA检测对乙肝早期诊断、传染性识别、病毒复制水平判断以及抗病毒治疗效果考核等均有重要的临床意义。     

乙型肝炎病毒多聚人血清白蛋白受体检测血清稀释度探讨

<正> 近年来对乙型肝炎病毒(HBV)基因的研究进入了一个新的水平,特别是HBV·DNA前S_2基因区所调控的基因产物前S_2多肽,即多聚人血清白蛋白受体(PHSA—R)所在部位的研究。发现Dane颗粒及细胞表面都有多聚人血清白蛋白(PHSA)的受体,而且这种受体在完整的HBV颗粒上比空壳的HBsAg上表达多得多,可以作为病毒复制和传染的指标。为此,在用ELISA法检测PHSA—R时,需要选用一个合适的血清稀释度,以便更好地反映HBV的复制。     

人聚合白蛋白受体对小儿ASC的检测意义

本文对50例小儿ASC(无症状HBsAg携带者)及小儿HB(乙肝)进行PHSA—R(人聚合白蛋白受体)及其它HBV感染标志检测。结果表明小儿ASC在流行病学及临床方面的危害性超过小儿HB并且PHSA—R的检测更能准确的反应HBV的传染性与其他HBV标志呈明显正相关。     

乙肝患者血清聚白蛋白受体测定及临床意义

用血凝法测定乙肝患者血清聚合白蛋白(PHSA)受体.139例乙肝患者PHSA受体阳性101例,阳性率光72.8%.平均几何滴度(GMT)1:22.5,明显高于正常对照组(P<0.01).24例甲乙混合型肝炎PHSA受体阳性率为70.8%,GMT 1:23.2,与乙肝组无明显差异(P>0.05).62例甲肝PHSA受体阳性率17.7%,GMT1:5.08,与乙肝组有显著差异(P<0.01).63例HBeAg阳性血清PHSA受体阳性率为84.1%,GMT 1:38.4,而41例抗HBe阳性血清PHSA受体阳性率仅为21.9%,GMT 1:5.38.两组有显著差异(P<0.01).PHSA受体阳性率HBsAg滴度密切相关,且随年龄分布有显著差异,是HBV传染性的敏感指标.     

聚合酶链反应检测肝病患者HBV—DNA的临床意义

八十年代以来,实验诊断HBV感染,主要采用放射免疫法(RIA)或酶联免疫吸附法(ELISA),检测血清中HBsAg、抗—HBs、HBeAg、抗—HBe和抗—HBc(下称两对半)。对HBeAg阴性病例还可检测人血清多聚白蛋白受体(PHSA—R)和聚合酶(DNA—P)。但其检测极限与血清最低感染水平相差1000倍,仍会出现假阴性。近年来采用聚合     

聚合人血清白蛋白受体在乙肝病毒感染中临床意义的研究

对191例各类HBV感染者检测了PHSA受体、HBVDNA、e系统以及其它HBV的血清学标志,其中28例做了肝穿活检,25例进行了1～10个月的追踪观察。结果表明:PHSA受体与HBVDNA密切相关,随着PHSA受体滴度的升高,HBVDNA的水平也相应增高。PHSA受体主要存在于HBeAg阳性血清中,但18例抗一HBe阳性者亦为PHSA受体阳性,并且7例为HBVDNA阳性。PHSA受体的平均几何滴度以慢性肝病为高(ASC、CPH和CAH),急肝较低(AVH)。9例PHSA受体阳性的急肝病人,其中4例在发病时,其PHSA受体滴度<2~(10),6个月后,肝功能恢复正常,PHSA受体转阴。而5例发病时PHSA受体滴度≥2~(10)的病人,除1例外,均转为CPH,并且PHSA受体未见转阴。     

酶免疫法测定HBsAg多聚人血清白蛋白受体方法学的研究

多聚人血清白蛋白(PHSA)受体与乙型肝炎病毒(HBV)密切相关,测定肝炎患者血清中 PHSA 受体能间接反映 HBV 在体内复制情况。关于检测方法,除最早使用间接血凝法(PHA)外,还有免疫荧光法(IF),放     

沈阳地区部分献血员血清HBV—DNA检测及其意义

采用异羟基洋地黄毒苷配基标记HBV—DNA(Dig—HBVDNA)探针斑点杂交法检测了沈阳地区306例(男161,女145)献血员血清中HBV—DNA,并用ELISA法检测了HBeAg和抗—HBc。结果表明,血清HBV—DNA阳性者2例,阳性率为0.65％,与标准膜片色列比较估计HBV—DNA含量为1pg。血清HBeAg全部阴性,抗—HBc阳性者4例(其中1例HBV—DNA亦呈阳性)。说明经目前所采用方法筛检的献血员仍存在HBV感染者,有传播乙型肝炎的潜在危险性。     

分泌抗人聚白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及其应用

作者成功地获得了持续稳定分泌抗人聚白蛋白(PHSA)的单克隆抗体(McAb)细胞株。用~(125)I标记该McAb,采用敏感性高的RIA法对HBsAg阳性和阴性血清中老化的白蛋白分子进行了探测。结果发现PHSA主要存在于HBsAg阳性血清中。此工作为乙型肝炎病毒(HBV)与循环中PHSA结合的可能性提供了实验依据。     

酶联免疫吸附法与聚合酶链反应法在乙型肝炎病毒检测中的应用比较与临床意义

目的综合分析并解释酶联免疫吸附法(ELISA)和聚合酶链反应法(PCR)在检测乙型肝炎病毒(HBV)时结果的一致性与矛盾性。方法分别对经ELISA法检查HBsAg阳性和阴性的的两组进行荧光PCR法HBV-DNA的检测。结果HBsAg阳性组中HBsAg、HBeAg、抗-HBc三项阳性者，HBV-DNA阳性率100％；HBsAg抗-HBe，抗-HBc三项阳性者，HBV-DNA阳性率45．5％；HBsAg、抗-HBc两项阳性者HBV-DNA阳性率50％；HBsAg阴性组中HBV—DNA阳性率8％。结论两种方法互为补充，在做判断时应综合分析。     

乙肝病毒e抗原系统与HBV DNA的相关性研究

目的：探讨乙肝病毒e抗原系统与HBVDNA的相关性。方法：应用PCR方法检测HBVDNA,ELISA法检测乙肝病毒e抗原系统。结果：HBeAg（＋）的乙肝病人HBVDNA阳性率89．19％,抗HBe（＋）的乙肝病人HBVDNA阳性率60％,HBeAg及抗HBe均阴性的乙肝病人HBVDNA阳性率43．75％,HBeAg（＋）的各型乙肝HBVDNA阳性率无明显差别（P＞0．05）,抗HBe（＋）的各型乙肝以慢性中重度乙型肝炎患者HBVDNA检出率最高（75％）。结论：HBVDNA阳性率与乙肝感染类型无关,而与e抗原系统存在状态有关,HBeAg和抗HBe均阴性的患者中也有43．75％的病人有DNA复制。     

抗—Lsp与HBV感染关系的研究

本文采用ELISA和RIA方法对195例各类肝炎检测抗-Lsp、PHSA-R、HBsAg/IgM复合物和HBeAg/抗-HBe.结果发现,抗-Lsp阳性率以CAH最高(P<0.005);HBsAg阳性组与HBsAg阴性组总抗-Lsp阳性率无显著差异(P>0.1);抗-Lsp、PHSA-R、HBsAg/IgM和HBeAg同时阳性率均以CAH最高,抗-Lsp与PHSA-R和HBsAg/IgM有密切关系.结果提示:自身免疫与HBV复制在免疫肝损伤中发挥了重要作用.     

乙型肝炎患者HBV-DNA与HBV-M及HBV-DNA前C/C区变异的对比研究

目的:探讨乙型肝炎患者的乙型肝炎病毒血清学标志(HBVM)与HBVDNA及HBVDNA前C/C区变异检测结果的相关性与临床意义。方法:对359例乙型肝炎患者血清的HBVM和HBVDNA及HBVDNA前C区1896/1814位变异检测结果进行比较;HBVM用ELISA定性分析法检测;HBVDNA用PCR荧光定量法检测;HBVDNA前C/C区用基因芯片显色法检测。结果:急性乙型肝炎、慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化HBVDNA检出率分别为81.8%、62.4%、44.7%,三组进行组间比较,差异均有显著性(P<0.01);HBsAg与HBeAg均阳性组HBVDNA检出率显著高于HBsAg与抗HBe均阳性组(P<0.01);HBsAg与抗HBe均阳性组的变异率高达50.7%,显著高于HBsAg与HBeAg均阳性组(P<0.01)。结论:HBVDNA是评价HBV活动最理想的标志;HBVDNA前C/C区变异在我国乙型肝炎患者中普遍存在,对抗HBe阳性患者的临床意义更大;抗HBe的出现不能作为HBV复制停止的指标;HBVDNA量的变化可作为临床评价病毒复制和抗病毒疗效的参考指标。     

HBVe抗原抗体系统与丁型肝炎病毒感染的关系研究

探讨ＨＢＶｅ抗原抗体系统与丁型肝炎病毒感染的关系。方法将６６７例乙肼表面抗原阳性患者分成ｅ抗原阳性、抗－ＨＢｅ阳性和两者均阴性等三级进行丁型肝炎病毒标志物的检测和分析。结果６６７例乙肝患者ＨＤＶ感染４３例（６．４％）,其中ＨＢｅＡｇ阳性组为５．３％（１１／２０６）。抗－ＨＢｅ阳性组为１０．９％（２６／２３７）,ｅ抗原抗体 性组ＨＤＶ为２．３％（６／２２５）。抗ＨＢｅ性组ＨＤＶ感染明显升高（Ｐ〈０．     

PHSA-R对乙型病毒性肝炎诊断的意义

测定184例各型HBV感染者血清多聚白蛋白受体(PHSA-R)及前-S_2抗原(Pre-S_2)。59例做1～6个月动态观察;并对PHSA-R与肝功能及乙型肝炎病毒标志(HBVM)之间的关系做了统计分析。结果表明:PHSA-R测定与Pre-S_2测定具有一致性。PHSA-R在HBeAg(+)组显著升高;PHSA-R(+),HBeAg(-)者有74%检出HBV-DNA;PHSA-R与ALT,AST/ALT。TB及PT间均无关系。结果提示PHSA-R可作为Pre-S_2的间接指标。PHSA-R比HBeAg更能反映病毒复制,与肝组织炎症活动无关。     

A HYBRID CELL LINE PRODUCING ANTI-PRES2MONOCLONAL ANTIBODY FOR DETECTION OFPRES2 ANTIGEN

After onel successful fusion of murine spleencells, immunized with hepatitis B virus (HBV) particles bearing polymerized human scrum ablumin ro-ceptors (PHSA-R) with myeloma cells (SP2/0), a sta-ble hybrid cell line secreting monoclonal antibody(McAb) was established. The McAb, specific forPreS2 antigen of HBV, can inhibit PHSA-R activityon HBV, and may probably be antibody againstPHSA-R of PreS2. With this McAb, we developed areversed passive hemagglutination assay (RPHA) andELISA for detection of PreS2 antigen. The hemagglutination titers of monoclonal anti-PreS2 sensitizedsheep red blood cells were closely related with thoseof PHSA cells. The average hemaggutination titerof PreS2 antigen was higher in HBeAg positive serathan that in HBeAg negative sera, though PreS2antigen could be sometimes detected in HBeAg nega-tive and even in anti-HBe positive sera. In HBeAgpositive sera, titers of PreS2 antigen were correlatedwith those of HBsAg, but not paralleled with those ofHBeAg. It is suggested that PreS2 and HBeAg couldnot be substituted for each other. The significance ofPreS2 in relation to HBV DNA replication and itsdiagnostic value still need further study.     

荧光定量PCR检测HBV DNA及其与Pre-S1和HBeAg关系探讨

目的探讨慢性乙肝患者HBVDNA与血清标志物前S1抗原(Pre-S1)和HBeAg的相互关系。方法采用荧光定量聚合酶链反应技术(FluorescencequantitativePCR,FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对931份HBV-M不同阳性模式及35份HBV-M全阴模式血清进行HBVDNA及其标志物检测。结果在931例不同阳性模式乙肝患者中,HBeAg阳性总检出率为20.7%,Pre-S1抗原阳性总检出率为30.2%,HBVDNA阳性总检出率为45.3%。在422例HBVDNA(+)乙肝患者中,Pre-S1抗原阳性检出率为57.3%,HBeAg阳性检出率为44.1%。在281例Pre-S1(+)乙肝患者中,HBVDNA阳性符合率达86.1%,在Pre-S1(-)组HBVDNA阳性率仅为27.7%。结论HBVDNA检测是反映HBV复制最直接的分子生物学指标;Pre-S1抗原和HBeAg是反映HBV复制的血清学指标,Pre-S1抗原甚至比HBeAg更灵敏地反映HBV复制。     

α－IFN、Ribavirin联合抗HBV对血清复制指标影响的研究

采用α－干扰素（α－ＩＦＮ）、病毒唑联合治疗慢性ＨＢＶ感染病人６３例，以α－ＩＦＮ治疗慢性乙肝病人５８例，对比观察联合用药对病人血清ＨＢｅＡｇ、Ｐｒｅ－Ｓ２、ＰＨＳＡ－Ｒ及ＤＮＡ－Ｐ复制指标的抑制效应．３个月疗程结束后，抑制效应两组分别为ＨＢｅＡｇ４９．２％和３４．５％；Ｐｒｅ－Ｓ２５２．７％和３８．８％；ＰＨＳＡ－Ｒ４４．２％和３７．７％；ＤＮＡ－Ｐ５７．９％和４１．９％；高复制型５２．６％和４０％，除ＰＨＳＡＲ外，两组比较差异有显著性，联合用药组优于α－ＩＦＮ组。     

TTV与HBV混合感染的研究

目的：探讨输血传播病毒（TTV）与HBV混合感染对HBV复制的影响。方法：应用微板核酸杂交-ELISA法检测175例HBV患者血清中的TTV-DNA，ELISA法进行乙型肝炎相关病毒标志物检测。结果：175例HBV患者中TTV-DNA阳性30例（17．1％），其中无症状携带者、慢性肝炎、活动性肝硬化、原发性肝癌患者中的TTV-DNA检出率分别为3／21（14．3％）、13／76（17．1％）、8／50（16．0％）、6／28（21．4％），各组间差异无统计学意义。在慢性肝炎、活动性肝硬化、原发性肝癌患者中，TTV-DNA阳性组与阴性组各项肝功能指标改变相似。HBV和TTV混合感染组中HBeAg和抗-HBcIgM阳性率低于单纯HBV感染组（P〈0．01和P〈0．05），而血清抗-HBe阳性率则高于单纯HBV感染组（P〈0．01）。结论：TTV的混合感染似乎并不影响HBV所致的肝脏病变程度，对HBV的复制可能有一定的抑制作用。     

HBV-M与HBV-DNA的定量关系探讨

目的:探讨时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)检测乙型肝炎患者血清免疫标志物(HBV-M)与实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)定量检测乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)含量之间的关系。方法:采用FQ-PCR技术检测239例患者血清中HBV-DNA含量,同时用TRFIA检测乙型肝炎病毒五项标志物及含量,并对各项检测结果进行统计学分析,同时以HBV-DNA拷贝数的对数为横坐标,HBV-M含量的对数为纵坐标,求线性回归及相关系数(r)。结果:239例乙肝患者血清中,HBV-DNA的阳性率与HBV-M不同组合之间有差异,HBsAg+/HBeAg+/HBcAb+组HBV-DNA的阳性检出率明显高于其它组,达96.33%(105/109),HBsAg+/HBeAb+/HBcAb+组为43.90%(54/123),HBsAg+/HBcAb+组为42.86%(3/7)。并且随HBsAg、HBeAg含量增高,HBV-DNA含量也增高,存在一定的相关性(r=0.364,r=0.536)。抗-HBs,抗-HBe及抗-HBc与HBV-DNA之间,无明显相关性。结论:HBeAg阳性是病毒复制的重要指标;抗-HBe的出现不能作为HBV复制停止的指标;HBsAg、HBeAg浓度与HBV-DNA之间有良好的相关性,HBsAg和HBeAg浓度变化可以作为临床评价乙肝病毒复制程度和抗病毒疗效的参考指标;联合采用TRFIA检测HBV-M与FQ-PCR定量检测HBV-DNA能更早的诊断HBV感染,了解病毒的复制情况和观察疗效及判断预后。