不同龋敏感者变异链球菌临床分离株的致龋特性

目的探讨不同龋敏感者变异链球菌临床分离株的生物膜形成和产酸能力。方法牙菌斑组织取自60例学龄前儿童,根据乳牙龋失补牙面(dmfs)指数分为无龋组(dmfs=0)和高龋组(dmfs>8)(n=30)。运用死菌/活菌荧光染色技术结合激光共聚焦扫描显微镜观察分析,计算菌斑组织中变异链球菌分离株的生物膜厚度和细菌密度;酸度计测定培养48 h后的pH值;比较不同龋敏感组变异链球菌的生物膜形成和产酸能力。结果高龋组变异链球菌临床分离株的生物膜厚度和细菌分布密度显著高于无龋组(P<0.05)。初始pH值>5.5时,高龋组和无龋组pH值改变无显著性差异;pH=5.0时,高龋组pH值改变明显大于无龋组(P<0.05)。结论高龋组变异链球菌临床分离株的高致龋力与其较强的生物膜形成能力和产酸能力密切相关。     

不同龋敏感者变异链球菌临床分离株的致龋特性

目的 探讨不同龋敏感者变异链球菌临床分离株的生物膜形成和产酸能力.方法 牙菌斑组织取自60例学龄前儿童,根据乳牙龋失补牙面(dmfs)指数分为无龋组(dmfs=0)和高龋组(dmfs＞8)(n=30).运用死菌/活菌荧光染色技术结合激光共聚焦扫描显微镜观察分析,计算菌斑组织中变异链球菌分离株的生物膜厚度和细菌密度;酸度计测定培养48 h后的pH值;比较不同龋敏感组变异链球菌的生物膜形成和产酸能力.结果 高龋组变异链球菌临床分离株的生物膜厚度和细菌分布密度显著高于无龋组(P＜0.05).初始pH值＞5.5时,高龋组和无龋组pH值改变无显著性差异;pH=5.0时,高龋组pH值改变明显大于无龋组(P＜0.05).结论 高龋组变异链球菌临床分离株的高致龋力与其较强的生物膜形成能力和产酸能力密切相关.     

不同龋敏感者变形链球菌临床分离株产酸能力的研究

目的　探讨来自不同龋敏感者变形链球菌 (血清型 C)临床分离株产酸能力的差异。方法　配制相同浓度的各变形链球菌临床分离株菌悬液 ,分别在不同 p H下 (p H5 .0～ 7.0 )含 5 %葡萄糖的 TPY液体培养基中培养相同时间后 ,采用酸度计测定培养物终末 p H值 ,比较细菌的产酸能力 (△ p H)。结果　同一个体所带不同基因型变形链球菌菌株产酸能力有差异 ;高龋组个体定植的产酸能力强的菌株所占比例显著高于无龋组 (P<0 .0 5 )。结论高龋组变形链球菌 (血清型 C)临床株的高致龋力与其携带有产酸能力强的菌株密切相关     

变形链球菌临床分离株乳酸脱氢酶遗传多态性研究

目的 探讨变链菌临床株（血清型C）乳酸脱氢酶基因多态性与细菌致龋力及酶活性的关系。方法 高龋组变链菌34株,无龋组变链菌36株;其中24株乳酸脱氢酶高活性,21株低活性。以细菌组DNA为模板扩增结构基因ldh,对目的基因进行限制性片段长度多态性分析（RFLP）,并行测序分析。结果 MseⅠ酶切ldh—RFLP表现A、B两种基因型,而HphⅠ、MnlⅠ、DdeⅠ、NlaⅡ和AluⅠ消化扩增产物未发现多态。确切概率法单侧检验发现B基因型菌株在无龋组的检出高于高龋组（P〈0．05）,双侧检验两种基因型在不同酶活性组的分布不同（P〈0．05）,低活性组B基因型菌株的比例高于高活性组。测序证实特异碱基突变引起酶切位点改变而产生多基因型。结论 变链菌临床分离株乳酸脱氢酶基因较为保守,但仍存在碱基变异。研究提示乳酸脱氢酶基因多态性与酶活性差异相关,并可能在一定程度上与龋的低敏感性相关。     

不同龋敏感人群牙菌斑中变形链球菌群的分布

目的:比较不同龋敏感人群牙菌斑中变形链球菌群的检出情况.方法:以60例20～40岁的成人为研究对象,其中高龋患者[龋、失及补牙数(DMFT)≥6]及无龋者(DMFT=0)各30例.用无菌牙签刮取受试者牙面菌斑,经轻唾-杆菌肽琼脂培养基选择培养,进行革兰染色及细菌生化反应鉴定.结果:高龋组变形链球菌群阳性检出率(93.3%,28/30)高于无龋组(50.0%,15/30)(x2=13.871,P<0.001).结论:变形链球菌群细菌尤其是变形链球菌与龋病的发生有直接关系.     

甜茶皂甙对变形链球菌抑龋性的研究

目的研究甜茶皂甙对变形链球菌致龋性的抑制作用。方法将0.1 ml变形链球菌悬液加入不同浓度的甜茶皂甙溶液的实验组,和无甜茶皂甙的基础液对照组,将玻棒分别插入各支试管培养48 h,将玻棒上黏附的菌细胞洗脱下来,测OD值。结果甜茶皂甙的浓度≥0.625 g/100 ml时,变形链球菌对玻璃棒的黏附低于无甜茶皂甙的对照组。结论甜茶皂甙对变形链球菌黏附抑制作用。     

表面活性剂对变形链球菌致龋基因表达和粘附定植的影响

目的 :研究非离子表面活性剂对变形链球菌 (S .mutans)致龋基因表达和粘附定植能力的影响。方法 :在培养基中加入非离子表面活性剂 ,分别接种在各致龋基因中融合了编码氯霉素乙酰基转移酶(CAT)的基因片段的S .mutans系列工程菌株 ,通过检测CAT活性 ,观察非离子表面活性剂对S .mutans致龋基因表达的调控作用 ;通过测定S .mutans牢固粘附于玻璃试管的数量 ,观察非离子表面活性剂对S .mutans合成细胞外葡聚糖及形成菌斑能力的影响。结果 :土温 80、土温 4 0可不同程度地增强gtfB、gtfC和gtfD基因的表达 ,聚十八烷乙酯、聚十六烷乙酯可抑制gtfB基因的表达 ,而pac基因的表达则不受非离子表面活性剂的影响。土温 80可促进S .mutans牢固粘附于试管壁 ,聚十八烷乙酯则抑制其粘附。结论 :非离子表面活性剂可在转录水平调节某些致龋基因的表达以及影响其形成菌斑和定植的能力。     

123株肺炎链球菌的分离鉴定及分子分型

目的对临床诊断为大叶性肺炎、气管炎、中耳炎、胸膜炎、心内膜炎和败血症等病人进行血液等标本的采集、细菌培养和分型鉴定,为补充河北省肺炎链球菌菌型资料和疫苗的正确选择提供科学依据。方法对分离的123株肺炎链球菌进行分子鉴定和分子分型研究,普通PCR对肺炎链球菌进行种属鉴定,多重PCR方法对菌株进行菌型分析。结果经PCR检测,123株菌的cps A基因扩增均为阳性,阳性标本经多重PCR分型检测,19F和6A/6B型所占比例最大,分别为39. 02%和11. 38%,且型别类型多达20种。结论 123株肺炎链球菌19F和6A/6B型所占比例最大,且菌型丰富,为全省制定肺炎链球菌疫苗使用策略提供了科学依据。     

糖源对变形链球菌产酸致龋的影响研究

目的 观察不同糖源对变形链球菌(变链)生长产酸的影响.方法 课题组前期分离自不同龋易感者的变链临床株28株,接种于含葡萄糖或蔗糖的TPY培养基中,厌氧培养24h.pH计检测培养前后培养基的pH值,其差值代表变链产酸能力.t检验比较菌株在含不同糖源培养基中生长产酸差异.结果 变链在含葡萄糖和蔗糖的培养基中生长产酸能力差异无统计学意义(P>0.05),无龋组菌株在蔗糖培养基中产酸能力显著大于在葡萄糖培养基中(P<0.05).结论 蔗糖对低致龋性变链菌株产酸有影响.     

复方中药漱口剂对变形链球菌致龋的实验研究

目的探索复方中药的防龋效果,为研制新型中药漱口剂奠定基础.方法用平皿扩散法和试管稀释法观察3种不同中药复方漱口剂对c型变形链球菌(以下简称变链菌)的生长、产酸和粘附的影响.从中筛选出作用最强的方剂,并进一步观察其对变链菌葡糖基转移酶(GTF)活性的影响.结果以厚朴、黄芩等为主的漱口剂在平皿扩散法中对变链菌的抑菌圈直径最大(最小杀菌浓度为4mg/ml),pH(6.8±0.25)下降最小,与其它两组方漱口剂差别有显著性意义(均P＜0.01).该方对CTF活性有明显的抑制作用,其作用强度与漱口剂浓度呈正相关.结论以清热解毒、芳香化湿为主的复方中药漱口剂有望在龋病防治方面发挥良好作用.     

蔗糖浓度对重症婴幼儿龋菌斑中变型链球菌致龋性的影响

【目的】 探讨不同蔗糖浓度对重症婴幼儿龋(S-ECC)菌斑中变形链球菌致龋性的影响。 【方法】 采集67名3 ~ 5岁S-ECC及无龋儿童牙面菌斑,获取纯化的变链菌株,接种至蔗糖浓度分别为1%、5%、10%及20%的PYG液体培养基,采用精密pH计测变链菌产酸能力;分光光度仪测定OD600值,评价其生长情况;蒽酮法测定水不溶性葡聚糖(WIG)的量;比浊法测定变链菌的黏附比值,对比分析变形链球菌不同临床菌株的致龋性。 【结果】 随蔗糖浓度升高,S-ECC及无龋组变形链球菌临床分离菌株产酸、合成胞外多糖及粘附能力均呈增长趋势,并且表现为蔗糖浓度依赖性。S-ECC组变链菌株&#8710;pH值、OD600值、合成WIG量及黏附比例均显著高于无龋组。S-ECC组中,变链菌株的产酸能力随蔗糖浓度增高而增强,当蔗糖浓度达5%时,变链菌株产酸降至釉质脱矿临界pH 5.5附近;变链菌株生长情况(OD600值)显示,当蔗糖浓度大于5%时,变链菌生长情况良好,S-ECC组表现得最为明显,当蔗糖浓度大于10%,变链菌株生长速率有所降低,无龋组10%浓度蔗糖作用下OD600值甚至高于20%浓度组;变链菌株合成WIG的量随蔗糖浓度增高而增加,当蔗糖浓度大于10%,WIG合成增长变缓;随着蔗糖浓度增高,变链菌黏附比值增加,蔗糖浓度大于5%时,增长趋势变缓慢。【结论】 S-ECC菌斑中变型链球菌致龋性与蔗糖浓度有关,随蔗糖浓度升高变链菌株的致龋能力增强,5%及以上浓度蔗糖具有较强的致龋性,应予以足够重视。     

国产水溶性蜂胶对主要致龋链球菌及其耐氟菌株致龋性的影响

目的了解国产水溶性蜂胶对变形链球菌(S.mutansATCC 25175,S.m)、远缘链球菌(S.sobrinus6715,S.s)及其耐氟菌株的生长抑制作用,以及对葡糖基转移酶(glucosyltransferase,GTF)的影响,探讨一种新的防龋途径。方法采用最小抑菌浓度(MIC)递增法对S.m、S.s进行氟化钠体外诱导耐氟菌株(S.m-FR、S.s-FR),采用液体稀释法观察水溶性蜂胶对S.m、S.m-FR、S.s、S.s-FR生长的影响;用酶化学分析方法检测蜂胶对GTF酶活性的影响。结果水溶性蜂胶对S.m、S.m-FR、S.s、S.s-FRMIC分别为0.39、0.78、0.20、0.39 g/L;最小杀菌浓度(MBC)分别为0.78、1.56、1.56、1.56 g/L;随着蜂胶浓度增高,葡糖基转移酶活性逐渐降低,6.25、3.13、1.56 g/L与0.78、0.39 g/L 2个浓度之间差异具有统计学意义(P<0.05),各浓度组与阳性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论国产水溶性蜂胶能有效抑制变形链球菌、远缘链球菌及耐氟菌株的生长,对GTF具有较强的抑制作用。     

九节茶对变形链球菌体外致龋力的实验研究

目的观察九节茶提取物对变形链球菌体外致龋力的影响.方法将不同浓度九节茶提取物加入培养基中进行变形链球菌培养,观察药物不同浓度在培养基中抑菌圈直径、菌细胞数和pH值变化情况以及葡糖基转移酶活性.结果九节茶可抑制细菌生长、抑制葡糖基转移酶活性等.结论提示九节茶可影响变形链球菌的致龋作用,可能是一种理想的防龋药物.     

九节茶对变形链球菌体外致龋力的实验研究

目的：观察九节茶提取物对变形链球菌体外致龋力的影响。方法：将不同浓度九节茶提取物加入培养基中进行变形链球菌培养,观察药物不同浓度在培养基中抑菌圈直径、菌细胞数和pH值变化情况以及葡糖基转移酶活性。结果：九节茶可抑制细菌生长、抑制葡糖基转移酶活性等。结论：提示九节茶可影响变形链球菌的致龋作用,可能是一种理想的防龋药物。     

金银花对不同血清型变形链球菌的抑菌试验研究

用中药金奶花提取液对不同血清型变形链球菌进行抑菌试验。结果显示ＭＩＣ在２５ｍｇ／ｍｌ以下者占所试菌株的８７．５％，在５０ｍｇ／ｍｌ以下占９５．８％，ＭＢＣ一般明显高于ＭＩＣ。因此，该研究证明，金银花提取液主要是抑菌作用。     

绿茶提取物EGCG抑制致龋菌变形链球菌生长、产酸的实验研究

目的 初步探讨绿茶提取物表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对变形链球菌生长、产酸的抑制作用,为龋病的防治提供一定的依据。方法 采用抑菌环实验观察EGCG对变形链球菌生长的影响,检测其对变形链球菌产酸能力的影响。结果 EGCG对变形链球菌生长、产酸有显著的抑制作用,最低抑菌浓度为6.25 mg/L,且随着药物浓度的增加,抑菌圈直径越大,pH值变化越小。结论 EGCG是一种潜在的天然抗菌、防龋药物。     

变形链球菌和远缘链球菌对牙釉质表面显微硬度的影响

目的 探讨变形链球菌和远缘链球菌对牙釉质致龋脱矿性的影响。方法 测量在TSB培养液中变形链球菌和远缘链球菌对离体牙牙釉质表面显微硬度的影响。结果 变形链球菌和远缘链球菌均可使牙釉质表面显微硬度下降,下降率分别为35％和45％,且远缘链球菌组随时间下降高于变形链球菌。结论 远缘链球菌对牙釉质的致龋脱矿性高于变形链球菌,且变链菌在pH低环境中的致龋脱矿性受到抑制。     

不同龋敏感儿童口腔变异链球菌临床分离株与 HtrA 关系的研究

目的探讨不同龋敏感儿童口腔变异链球菌HtrA mRNA和蛋白质的表达情况与乳牙龋坏程度和HtrA的关系。方法以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株,复苏,增菌,分离纯化核酸,采用逆转录PCR(RT-PCR)法,提取变异链球菌临床分离株总RNA,凝胶电泳检测RNA完整性,合成cDNA,PCR扩增,将扩增产物凝胶成像系统下观察记录结果,将目的基因HtrA及内参的电泳图像利用凝胶定量分析软件Gel-Pro analyzer 4.0进行灰度扫描,分析计算基因相对表达值;采用蛋白质印迹(Western blot)法,验证变异链球菌临床分离株总蛋白,结果用Bio-Rad凝胶摄像分析系统扫描入计算机中,凝胶定量分析软件Quantity One 4.4.0分析其灰度值,计算蛋白的相对表达水平。结果高龋、中龋及无龋儿童口腔变异链球菌临床分离株HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达均存在差异,从高到低为高龋组、中龋组、无龋组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不同龋敏感儿童口腔变异链球菌临床分离菌株HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达均存在差异,龋敏感性越高,HtrA mRNA的表达和HtrA蛋白的表达越高。     

金银花对不同血清型变形链球菌的抑菌试验研究

用中药金银花提取液对不同血清型变形链球菌进行抑菌试验。结果显示ＭＩＣ在２５ｍｇ／ｍｌ以下者占所试菌株的８７．５％，在５０ｍｇ／ｍｌ以下占９５．８％。ＭＢＣ一般明显高于ＭＩＣ。因此，该研究证明，金银花提取液主要是抑菌作用。     

变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗对唾液变形链球菌和牙菌斑的影响

目的　了解变形链球菌表面蛋白和葡糖基转移酶基因疫苗单独及联合免疫对定菌鼠唾液变链菌和牙面菌斑的影响。方法　 2 8d龄 Wistar大鼠 3 6只 ,随机分为 pc DNA3 - pac组、pc DNA3 - gtf B组、pc DNA3 - pac联合pc DNA 3 - gtf B组、变形链球菌灭活全菌组、pc DNA3空载体组和 PBS液组 ,进行三次双侧颌下腺腺周注射免疫 ,建立定菌鼠模型 ,作诱龋实验 3个月。唾液变链菌计数和菌斑计分。结果　唾液变链菌菌落计数和牙面菌斑计分在 pc D-NA3与 PBS组最高 ,其次为单基因疫苗免疫组 ,联合基因疫苗和灭活全菌细胞免疫组最低 ,各组间有显著性差异 ( P<0 .0 5 )。结论　 pc DNA3 - gtf B和 pc DNA3 - pac具有明显的免疫抑菌作用 ,联合基因疫苗免疫优于单基因疫苗